www.uib.cat
CURSO DE BIOSEGURIDAD
Dr. Antoni Bennàsar FiguerasComitè de BioseguretatDepartament de Biologia
TEMA:Agentes biológicos: virus, bacterias, hongos y parásitos. Muestras de origen humano, animal o ambiental potencialmente contaminadas con agentes biológicos. Microorganismos modificados genéticamente.
Marco legal Español
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Des del Comitè de Bioseguretat confiam que aquest curs us sigui d’utilitat.
17:30 – 18:00 MMG
ü
• 16:10 - 17:15
Dr. Antoni BennasarGrup de Recerca en Microbiologia
Marco legal EspañolLey 31/1995 Prevención de Riesgos Laborales
RD 39/1997 Reglamento de los Servicios de Prevención
RD 664/1997, sobre la protección de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos durante el trabajo
n Orden de 25 de marzo de 1998 por la que se adapta en función del progreso
técnico el RD 664/1997
Orden ESS/1451/2013, por la que se establecen disposiciones para la
prevención de lesiones causadas por instrumentos cortantes y punzantes
en el sector sanitario y hospitalario
Ley 15/1997, Ley 9/2003 Régimen jurídico de la utilización confinada,
liberación voluntaria y comercialización de OMG, a fin de prevenir los
riesgos para la salud humana y el medio ambiente
n RD 178/2004, desarrollo y ejecución de la Ley 9/2003
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Protección de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos durante el trabajoü Disposiciones mínimas aplicables a las actividades en las que los
trabajadores estén o puedan estar expuestos a agentes biológicos debido a la naturaleza de su trabajo.
ü “Guía técnica para la evaluación y prevención de los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos” en su 2ª Edición (1ª Impresión: noviembre 2014);
“El elemento básico de la bioseguridad es el cumplimiento estricto de unas prácticas de trabajo y técnicas microbiológicas adecuadas. Las personas que trabajan con agentes infecciosos o materiales potencialmente infectados han de conocer los posibles riesgos y han de
estar capacitados en las prácticas y técnicas requeridas para manipular dichos materiales de forma segura”.
5www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
RD 664/1997 Agentes biológicos en el trabajo
Situaciones y actividades que NO IMPLICAN la intención deliberada de manipular agentes biológicos; pero con respecto a las cuales existe incertidumbre acerca de la presencia o utilización en el trabajo de agentes biológicos que puedan causar una enfermedad en el hombre.ANEXO I
• Instalaciones depuradoras de aguas residuales
• Unidades de eliminación de residuos (incluídasplantas de compostaje)
• Actividades en las que existe contacto con animales y/o sus productos
• Centros de producción de alimentos• Trabajos agrarios
• Asistencia sanitaria, comprendidos servicios de aislamiento y anatomía patológica
• Laboratorios clínicos, veterinarios, de diagnóstico e investigación, con exclusión de los laboratorios de diagnóstico microbiológico.
RD 664/1997 Agentes biológicos en el trabajo
6www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Situaciones de utilización deliberada que implican el cultivoy/o concentración de los agentes biológicos:• Investigación y/o trabajar con
animales/plantas infectados.• Procesos Industriales
Biotecnológicos:ü Alimentaciónü Farmacéutica
• Diagnóstico microbiológico
RD 664/1997 Definiciones
Artículo 2Los agentes biológicos se definen como «microorganismos, con inclusión de los genéticamente modificados, cultivos celulares y endoparásitos humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad».Microorganismo toda entidad microbiológica celular o no, capaz de reproducirse o de transferir material genético para lograrlo.
7www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
¿Qué es un microorganismo?…también llamado microbio• Griego científico,
ü μικρόβιος [microbios];o μικρός [micrós], ‘pequeño’, o βίος [bíos], ‘vida’; ser vivo diminuto.
”Es un ser vivo, o un sistema biológico, que solo puede
visualizarse con el microscopio”
8www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
MicroorganismosSe consideran 4 tipos básicos:
Bacterias,Hongos,Virus,Parásitos (protozoos, helmintos, etc.).
9www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Incremento del tamaño
Incremento del grado de complejidad
Descenso del número por unidad de muestra ambiental
Número y Diversidad en Microbiología
Virus Bacteria Hongos Algas Protozoos y Helmintos
Acelular Procariotas Eucariotas
Algunos causan enfermedades (patógenos), la mayoría de microbios NO.1 gramo de suelo = 10 millones bacteriasHay más bacterias en nuestra nariz que personas en el mundoLas formas más antiguas vivas sobre el planeta tierra son las bacteriasØ más de 3,8 billones de años
Las bacterias constituyen la mayor parte de la biomasa de la tierra, pero sólo 1% han sido cultivadasØ La mayoría reciclan nutrientes
Sólo unas pocas son siempre perjudiciales,
La mayoría son beneficiosas o
neutras
Algunas bacterias pueden serbeneficiosas, neutras o dañinas;
dependiendo del ambiente,
Bacterias
Un inventario planetario de los microbios
Los Microorganismos están en todas partes
Un inmenso IMPERIO INVISIBLE de actividades que ayudaron a crear la biosfera y que continúan dando soporte a la vida sobre la tierra
El microbiomahumano
La Microbiota Normal
De hecho, ¡Nosotros somos parte de él!
El Enemigo Invisible
Toxicidad• Endotoxinas
• Exotoxinas
• Micotoxinas
Microorganismos - Efectos
Virus
Bacterias
Hongos
Parásitos
Infección
Alergias• Esporas
15www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Aflatoxinas• Aspergillus flavus.
Ocratoxina• Aspergillus ochraceus, Penicilium viridicum.
T-2• Fusarium ssp.
Satratoxina• Stachybotrys chartarum,Trichoderma viridi.
Microorganismos - Micotoxinas
16www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
• Sistema vascular– Incremento de la fragilidad vascular,
hemorragia tisularo Aflatoxinao Satratoxina
• Sistema digestivo– Diarrea, vómitos, hemorragia intestinal, fibrosis
y necrosis hepáticao Aflatoxina
– Efectos cáusticos en membranas mucosaso T-2
– Anorexiao Vomitoxina
• Sistema urinario– Toxicidad renal
o Ocratoxina
Microorganismos - Micotoxinas• Sistema reproductor
– Infertilidad, cambios en el ciclo reproductoro T-2
• Sistema respiratorio– Alteración respiratoria, hemorragia pulmonar
o Tricotecenos• Sistema nervioso
– Temblores, descoordinación, depresión, dolor de cabeza
o Tricotecenos• Sistema cutáneo
– Erupción, quemazón, fotosensibilidado Tricotecenos
• Sistema inmunitario– Cambios, supresión
o Muchas micotoxinas
17www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Requisitos de espacio y organización
El trabajo con microorganismosMás allá de dónde se lleven a cabo las pruebas microbiológicas, se les debe asignar un espacio físico.
18www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Requisitos de espacio y organizaciónEl espacio del laboratorio: complejidad y tipo de microorganismos
19www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
1) Balanza2) Cabina de flujo laminar o cabina de
seguridad biológica3) Microscopio4) Estufa de cultivo5) Nevera con congelador
6) Congelador para mantenimiento de cepas de referencia a -80º Celsius.
7) Estufa de esterilización8) Autoclave de descontaminación9) Autoclave de esterilización10) Estufa de secado
Sala de lavado
Droguero Oficina
2Sala de preparación de muestras
Sala de preparación de material
3 4
5 7
10.2
1
9
Sala de siembra
Area de acceso restringido
8
6
10Sala de
productos y reactivos
20www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
RD 664/1997 – Clasificación según riesgo
Se distinguen 4 grupos de riesgo: Virulencia y la dosis infectiva del microorganismo,Disponibilidad de tratamiento,Modo de transmisión en el laboratorio,Riesgo de difusión en la comunidad,Viabilidad del microorganismo en el entorno.
21www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
RD 664/1997 – Clasificación según riesgoAgente biológico del grupo 1
• Aquel que resulta poco probable que cause una enfermedad en el ser humano.Agente biológico del grupo 2
• Aquel que puede causar una enfermedad en los humanos y puede suponer un peligro para los trabajadores, no obstante es poco probable que se propague a la colectividad y generalmente existen profilaxis o tratamientos eficaces.
Agente biológico del grupo 3• Aquel que puede causar infecciones graves en el ser humano y presenta un
serio peligro para los trabajadores, con riesgo variable de propagarse a la comunidad y generalmente se dispone de tratamiento o profilaxis eficaz.
Agente biológico del grupo 4• Aquel que causa una enfermedad grave en el ser humano, supone un serio
peligro para los trabajadores, pueden propagarse a la comunidad con mucha facilidad y generalmente no existe una profilaxis o un tratamiento eficaz.
22www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
RD 664/1997 – Clasificación según riesgoAgente biológico del grupo 1• Este grupo incluye microorganismos que no son patógenos para las
personas sanas.• Se trata de microorganismos ambientales, asociados a vegetales o
formando parte de la flora normal de los animales,ü Escherichia coli K12, ü Bacillus subtilis, ü Staphylococcus epidermidis,
• Microorganismos que se utilizan en la industria alimentaria,ü Saccharomyces cerevisiae.
• Este tipo de microorganismos es el recomendado para que los estudiantes de un curso de introducción a la microbiología realicen sus prácticas.
23www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
RD 664/1997 – Clasificación según riesgo
24www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Agente biológico del grupo 2• Por lo tanto, se trata de un grupo cuyos agentes son capaces de causar infecciones de carácter moderado o
grave, • Se transmiten fundamentalmente por contacto o por ingestión, • Entre ellos se encuentran Staphylococcus aureus, Salmonella entérica, Neisseria gonorrhoeae, etc…
Agente biológico del grupo 3• En este grupo hay que incluir:
ü Bacterias: Mycobacterium tuberculosis, Yersinia pestis, brucelas, ü Virus: Hepatitis B y C o el de la inmunodeficiencia humana.
Agente biológico del grupo 4• En este grupo se incluyen virus como:
ü Ebola, ü Lassa, ü Marburg,ü Viruela (cepas de archivo).
RD 664/1997 – Clasificación según riesgo
Anexo II
25www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
• La Seguridad Biológica se fundamenta en tres elementos:1. Las técnicas de laboratorio,2. El equipo de seguridad (o barreras primarias)3. El diseño de la instalación (o barreras
secundarias)
Prevención del riesgo biológico (RD 664/97)
26
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Técnicas de laboratorio• El elemento más importante para contener los riesgos biológicos es el
seguimiento estricto de las prácticas y técnicas estándar microbiológicas.§ Las técnicas de laboratorio son los procedimientos de trabajo recomendados.§ Hay que tener en cuenta que un procedimiento ordenado de trabajo es
indispensable para la seguridad.• Como parte de estas prácticas está el desarrollo o adopción por parte de cada
laboratorio de un manual de operaciones (o Manual de Seguridad Biológica) en el que se identifiquen los riesgos que pueda sufrir el personal y que especifique los procedimientos que puedan minimizar esos riesgos.
Prevención del riesgo biológico (RD 664/97)
27
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
• El término "contención" se emplea para describir los métodos que hacen seguro el manejo de materiales infecciosos en el laboratorio.
• El propósito de la contención es reducir al mínimo la exposicióndel personal de los laboratorios, otras personas y el entorno a agentes potencialmente peligrosos.
Bioseguridad - Contención
28
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Barreras Primarias• Pretenden la protección del personal y del ambiente del laboratorio
§ Prácticas estándar y específicas§ Equipamiento de seguridad
Barreras secundarias• Pretenden la protección del medioambiente
§ Diseño y construcción de la instalación§ Instalaciones del laboratorio
Bioseguridad - Contención
29
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
• Equipos de protección individual (EPI): prendas de protección personal (guantes, mascarillas, batas, calzado...).
• Dispositivos o aparatos que garantizan la seguridad (por ejemplo, las cabinas de seguridad biológica).
• Separación zonas con acceso al público,• Disponibilidad de sistemas de
descontaminación (autoclaves),• Filtrar aire de salida al exterior,• Flujo de aire direccional, etc.
Ropa de protección EPI
30
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Guantes EPI
31
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Guantes EPI
32
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Protección respiratoria EPI
33
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Protección respiratoria EPI
34
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Protección respiratoria EPI
35
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Gafas y pantallas faciales EPI
36
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Dispositivos de pipeteo
37
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Microincineradores y Asas de Siembra Desechables
38
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
39
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Laboratorio básico – Normas generales
Prácticas estándar y específicas
Laboratorio básico – Normas generales
þ Nunca se pipeteará con la boca, empleándose los dispositivos de tipo mecánico.þ Deben utilizarse guantes adecuados en todos los trabajos que entrañen algún contacto con sangre, material
infeccioso o animales infectados.þ Hay que utilizar batas o uniformes de trabajo para evitar la contaminación de los vestidos de calle.
• No se utilizará la ropa de laboratorio fuera de éste (cafetería, biblioteca, etc.).• La bata se llevará abrochada• Llevar siempre ropa adecuada y calzado cerrado.
þ Siempre que haya peligro de salpicaduras se utilizarán gafas de seguridad, pantallas faciales u otros dispositivos de protección.
þ A fin de evitar los cortes accidentales, se preferirá el uso de material plástico al de cristal.þ En la zona del laboratorio no se permitirá comer, guardar alimentos, beber, fumar ni usar cosméticos.
• Tampoco almacenar alimentos y/o bebidas en el laboratorio.þ El uso de agujas hipodérmicas y de jeringas debe evitarse.
• Cuando ello no sea posible, las agujas se recogerán en recipientes adecuados que eviten los pinchazos accidentales.
40
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Laboratorio básico – Normas generales
þ Nunca se pipeteará con la boca, empleándose los dispositivos de tipo mecánico.þ Deben utilizarse guantes adecuados en todos los trabajos que entrañen algún contacto con sangre, material
infeccioso o animales infectados.þ Hay que utilizar batas o uniformes de trabajo para evitar la contaminación de los vestidos de calle.
• No se utilizará la ropa de laboratorio fuera de éste (cafetería, biblioteca, etc.).• La bata se llevará abrochada• Llevar siempre ropa adecuada y calzado cerrado.
þ Siempre que haya peligro de salpicaduras se utilizarán gafas de seguridad, pantallas faciales u otros dispositivos de protección.
þ A fin de evitar los cortes accidentales, se preferirá el uso de material plástico al de cristal.þ En la zona del laboratorio no se permitirá comer, guardar alimentos, beber, fumar ni usar cosméticos.
• Tampoco almacenar alimentos y/o bebidas en el laboratorio.þ El uso de agujas hipodérmicas y de jeringas debe evitarse.
• Cuando ello no sea posible, las agujas se recogerán en recipientes adecuados que eviten los pinchazos accidentales.
41
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
þ Acceso restringido al laboratorio: el acceso al laboratorio debe ser controlado.
þ Las superficies de trabajo se descontaminarán por lo menos una vez al día y siempre que haya un derrame.
• Una nota debe especificar el modo de empleo de los desinfectantes, la naturaleza del desinfectante a utilizar y su concentración.
þ Todos los desechos biológicos, ya sean líquidos o sólidos, tienen que ser descontaminados antes de su eliminación y se seguirán las normas existentes sobre la gestión de residuos contenidos en las reglamentaciones referentes a residuos sanitarios.
þ El material contaminado, que deba ser descontaminado en un lugar exterior al laboratorio, se colocará en un contenedor especial, y se cerrará antes de sacarlo del laboratorio.
þ Deberá existir un programa de lucha contra insectos y roedores que se pondrá en práctica.
þ Todo el personal se debe lavar las manos después de haber manipulado material o animales infecciosos, así como al abandonar el laboratorio.
Laboratorio básico – Normas generales
42
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
þHigiene personal estricta• Lavar las manos (antes de salir y siempre que haya contacto con productos
químicos o materiales biológicos).• Cabellos recogidos,• No llevar anillos, pulseras, etc.
Laboratorio básico – Normas generales
43
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Prevención infecciones: higiene de manos
Las manos como mecanismo de transmisión• La CDC y la OMS consideran que una higiene de
las manos inadecuada o no realizada es uno de los factores más importantes que contribuyen en el desarrollo de infecciones; especialmente de Las infecciones asociadas a la asistencia sanitaria.
44
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Productos y técnicas para la higiene de manos• Fricción con productos de base alcohólica• Lavado de manos con jabón neutro o antiséptico
Prevención infecciones: higiene de manos
45
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Fricción de manos con productos de base alcohólica• Es la técnica de primera elección cuando las manos no
están visiblemente sucias.• Los productos de base alcohólica se aplican a través de
fricción.• No se necesita agua ni toallas.• Se friccionará toda la mano hasta que se seque el
producto (aprox. 30 segundos).• Elimina más y más rápidamente los microorganismos que
el agua y el jabón.• Requiere menos tiempo.• Estropea menos la piel de las manos.• Puede estar en cualquier punto del laboratorio.Lavado de manos con agua y jabón• Se llevará a cabo esta técnica si las manos están
visiblemente sucias.• Es preciso frotar las manos un mínimo de 20 segundos.• Se evitará el agua muy caliente.• Se utilizarán siempre toallas de papel para secar.• Se cerrará el grifo con ellas.• Nunca se deben utilizar toallas multiusos.
Prevención infecciones: higiene de manos
Cabinas de Seguridad Biológica (CSB)
Tres tipos básicos:• Classe I: no protegen la muestra o la persona.• Classe II: protegen el operario y la muestra. • Classe III: máxima protección (inhalación y
contacto).
Cabinas de Seguridad Biológica CSB
48
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Cabinas de Seguridad Biológica CSB
• Clase I
49
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Cabinas de Seguridad Biológica CSB
• Clase II Tipo A
50
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Cabinas de Seguridad Biológica CSB
• Clase II Tipo B
51
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Cabinas de Seguridad Biológica
Clase III• Clase III
52
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Cabina de bioseguridad clase II-A
• Antes de iniciar el trabajo, ubicar el material necesario en el interior de la cabina y colocarlo en los laterales de la cabina.
• Ordenar los distintos elementos en su secuencia lógica con el fin de evitar cruces y/o movimientos de brazos innecesarios.• No bloquear las rejillas frontal y posterior de la cabina.
• Colocar los equipos que puedan generar aerosoles (mezcladores, centrífugas) en la parte posterior de la superficie de trabajo.
• Evitar el uso de mecheros Bunsen o similares en las CSB.
• Utilizar materiales de trabajo que no desprendan partículas (evitar el uso de papel, trapos o tapones de algodón).
• Disponer, en el interior de la cabina, de recipientes impermeables y aptos para la recogida de materiales desechables y para su esterilización.
• Descontaminar la superficie de los materiales que haya que introducir con alcohol al 70%.
• El trabajo puede realizarse sobre paños empapados de desinfectante.
Materiales y equipo
Cabinas de Seguridad Biológica CSB
Procedimientos de trabajo• Es aconsejable realizar movimientos lentos de brazos y manos
en el interior de la cabina.• Debe mantenerse la integridad del flujo de aire al meter y sacar
los brazos.§ Este movimiento debe hacerse lo mínimo imprescindible, con
lentitud, manteniendo los brazos perpendiculares a la abertura frontal y esperando 1 minuto aproximadamente antes de empezar a trabajar.
• Es recomendable trabajar entre 5 y 10 cm sobre la mesa de trabajo y por detrás de la zona de partición de humos (8 cm).• Para la protección de los filtros HEPA, es aconsejable evitar
golpes, perforaciones, proyecciones o salpicaduras.
55
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Cabinas de Seguridad Biológica CSB
Procedimientos de trabajo…• Es recomendable que las CSB estén en funcionamiento al menos 5
minutos antes de empezar el trabajo y después de finalizarlo.• Tras la introducción de material, es conveniente esperar entre 2 y 3
minutos, antes de iniciar o proseguir el trabajo.• Es aconsejable no colocar objetos entre el filtro HEPA y la zona de
trabajo que puedan interrumpir el flujo laminar.• Es conveniente mantener la actividad del local donde se encuentra la
cabina al mínimo (desplazamiento de personas, corrientes de aire, puertas, etc.).
56
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Seguridad Biológica: Limpieza y desinfecciónUna vez instalada la CSB es recomendable realizar:• Una limpieza a fondo para eliminar el polvo acumulado durante el transporte (aspirar
superficies, ventilador, cuadro eléctrico, rejillas de los filtros, etc.).• Una limpieza de las superficies de trabajo y paredes con un líquido desinfectante
(alcohol al 70%).• Una desinfección gaseosa de las partes herméticas e inaccesibles.
57
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
La limpieza y desinfección se realizará:• Antes de cualquier trabajo de mantenimiento de la cabina (cambio de filtros).• Antes de efectuar un ensayo de control mecánico o biológico de la cabina.• Antes de empezar a trabajar en la cabina.• Siempre que se cambie de programa de trabajo.• Tras un derrame de líquido en la mesa de trabajo.
Niveles de Contención - Bioseguridad
Según el riesgo relativo que entrañan los microorganismos infectantes que se manipulan en el laboratorio, la construcción, el diseño y también los medios de contención, los laboratorios se clasifican en cuatro niveles de contención o seguridad biológica:• Laboratorio básico.• Laboratorio básico con cabina de seguridad biológica u otros dispositivos
apropiados de protección personal o contención física.• Laboratorio de contención.• Laboratorio de contención máxima.
58
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Niveles de Contención - Bioseguridad
Nivel 1• Es el nivel de seguridad requerido para los agentes biológicos del grupo 1
• No se necesita ningún equipo especial de contención.
• Es el utilizado habitualmente en los laboratorios de prácticas de universidades o centros docentes donde se emplean cepas no patógenas
59
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Niveles de Contención - Bioseguridad
Nivel 2
60
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Es el obligado para agentes del grupo 2 como algunos que, perteneciendo a la propia flora habitual del hombre, son capaces de originar patología infecciosa humana de gravedad moderada o limitada.
• Deben ser manipulados por personal especializado§ Técnicos de laboratorio,
§ Especialistas en Microbiología
• Son los que con más frecuencia se estudian en el Laboratorio de Microbiología Clínica:
§ Estafilococos,
§ Salmonella, etc.
Niveles de Contención - Bioseguridad
Nivel 2
61
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Es el obligado para agentes del grupo 2 como algunos que, perteneciendo a la propia flora habitual del hombre, son capaces de originar patología infecciosa humana de gravedad moderada o limitada.
• Sin requisitos especiales de ventilación• Acceso restringido aconsejable• Procedimientos de desinfección especificados• Control de vectores• Superficies impermeables, resistente a ácidos, disolventes y
desinfectantes• Almacenamiento de seguridad para agentes biológicos• Cabinas de Seguridad Biológica
Niveles de Contención - Bioseguridad
Nivel 3
62
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Manipulación de agentes biológicos del grupo 3, microorganismos que cursan con patología grave, de difícil y largo tratamiento, que pueden curar con secuelas y ocasionalmente producir la muerte.
• El mayor y más frecuente peligro que entrañan éstos es la infección adquirida a través de aerosoles y por fluidos biológicos.§ Por ello, las principales medidas a tomar en este caso son la correcta manipulación y la utilización
de cabinas de seguridad.
• Ejemplos más típicos de este tipo de microorganismos son:§ M. tuberculosis,
§ Brucella,
§ Coxiella burneti.
Niveles de Contención - Bioseguridad
Nivel 3
63
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
• El procesamiento de microorganismos sólo puede ser realizado por personal cualificado (acceso restringido) y en una zona con la infraestructura apropiada para dicho Nivel.
• Lugar de trabajo separado del resto,• Aire acondicionado independiente, sin recirculación de aire, filtros HEPA salida de aire,
• Local con gradiente de presión negativa respecto a la atmosférica,• Laboratorio con equipo propio,• Lugar de trabajo precintable para su desinfección,
• Superficies impermeables, resistente a ácidos, disolventes y desinfectantes (mesas y suelo),
• Almacenamiento de seguridad para agentes biológicos,• Cabinas de seguridad biológica (propagación aérea).
Niveles de Contención - Bioseguridad
Nivel 4
64
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
• Nivel requerido cuando se procesa con certeza o se sospecha de un agente especialmente patógeno e infecto-contagioso, exótico o no, que produce alta mortalidad y para el que no existe tratamiento y/o es poco fiable.
• Microorganismos de dosis infectiva baja y alta contagiosidad.
• Este nivel también puede utilizarse para trabajar con animales de experimentación infectados por microorganismos del grupo 4.
• Además, deben incluirse en este nivel de contención los microorganismos propios del grupo 3 que adquieran propiedades patógenas que los eleven al grupo 4.
• Un ejemplo, Mycobacterium bovis multirresistente que puede causar fallecimiento por fracaso terapéutico.
Nivel de contención Laboratorios
El procesamiento inicial de los especímenes clínicos y las pruebas serológicas pueden realizarse de forma segura en un nivel..,ü Nivel recomendado para trabajar con patógenos que se
transmiten por vía sanguínea como el virus de la hepatitis B y el VIH, a lo que habría que añadir las precauciones universales que deben ser tomadas con todas las muestras de sangre y otros materiales potencialmente infecciosos.
Casos excepcionales, por ejemplo: sospecha de fiebres hemorrágicas.
?2
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Exposición a agentes infecciosos
Gravedad de efecto
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Las vías de entrada al organismo
Cada microorganismo tiene su vía de entrada...
Mucosa Respiratoria
Dérmica
Digestiva
Parenteral
• Hepatitis A
• Hepatitis B
• Tuberculosis,• Gripe
Intradérmica
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Respiratoria, por inhalación de aerosoles que transporten agentes biológicos; a partir de la inhalación de las gotitas de Flügge, y/o partículas de Wells, que pueden quedar suspendidas en el ambiente y son vehículo de gérmenes.
Dérmica, tanto por contacto directo con el foco como por contacto indirecto con objetos contaminados, incluyéndose en esta vía la penetración del agente a través de zonas mucosas del organismo, como son ojos, boca, etc.§ Depositado el agente infeccioso sobre la piel tiene
la capacidad de atravesarla en situaciones en las que la barreara dérmica está alterada, tales como heridas, fisuras, etc.
§ En las zonas mucosas la capacidad absortiva es muy amplia: son zonas muy vascularizadas.
Digestiva, fundamentalmente debida a contactos mano-boca sin la adopción previa de medidas higiénicas.
Parenteral (intradérmica), supone la penetración del agente en capas profundas de la piel a través de cortes o pinchazos con instrumentos contaminados, o por picaduras, arañazos o mordiscos de animales.
Fluidos biológicos y puertas de entrada
Fluidos biológicosimplicados en la
transmisión
Fluidos contaminados
con sangreSuero SANGRE Plasma Cultivos de
virus
Potencialmente infecciosos
LCR Sinovial Pleural Peritoneal Pericárdico Amniótico
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
El semen y las secreciones vaginales y uterinas se han relacionado con la transmisión sexual, pero no con la transmisión laboral.No se han vinculado con la transmisión ocupacional:
Secreciones nasales, Esputos, Sudor, Lágrimas, Orina, Saliva, Heces, Vómitos,Leche materna,
Fluidos biológicos y puertas de entrada
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Toda muestra de SANGRE y/o
líquido orgánico es potencialmente
infecciosa
Atención especial a procedimientos
invasivos
Eliminación de residuos
biocontaminados
Protección barrera EPI’s
Higiene personal Vacunación
(VHB)
Precauciones estándar
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Técnicas de laboratorio específicasTodas las técnicas que puedan producir aerosoles tales como la centrifugación, la trituración, las mezclas, las agitaciones enérgicas, las disrupciones sónicas, la apertura de envases de materiales infecciosos cuya presión interna pueda diferir de la presión ambiente, etc., se realizarán en cabinas de seguridad biológica.También se evitarán manipulaciones tales como la inserción de asas o agujas calientes en un cultivo, y se utilizarán asas desechables; se evitará también la inyección violenta de fluidos a partir de pipetas o jeringas ya que todas estas técnicas pueden generar aerosoles.Las puertas del laboratorio se mantendrán cerradas durante las manipulaciones.El personal se lavará las manos después de haber manipulado el material biológico, los animales y antes de dejar el laboratorio. Será obligatorio llevar guantes apropiados durante todas las técnicas que comporten un riesgo de contacto accidental directo con el material biológico infeccioso.se utilizarán agujas y jeringas de un solo uso, no se deberá reencapsular las agujas y se eliminarán directamente en recipientes rígidos, aptos para la esterilización o para la incineración
Bioseguridad Nivel 2 (BSL2)
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Técnicas de laboratorio específicasPara la centrifugación de grandes concentraciones y volúmenes de agentes infecciosos, se utilizará una centrífuga herméticamente cerrada (sistema "aerosol free") y tubos de seguridad.El llenado, el cierre y la apertura de los tubos debe efectuarse en Cabinas de Seguridad Biológica.
Bioseguridad Nivel 2 (BSL2)
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Técnicas de laboratorio específicasFiltración fluidos biológicos y líquidos contaminados
Bioseguridad Nivel 2 (BSL2)
FiltroHEPA
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Técnicas de laboratorio específicasLa señalización internacional de riesgo biológico se colocará en las puertas de acceso al laboratorio.También deben señalizarse los congeladores y refrigeradoresutilizados para guardar microorganismos del tipo de riesgo 2.
Bioseguridad Nivel 2 (BSL2)
Señal de peligro biológico (Directiva 679/90)
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Bioseguridad Nivel 2 (BSL2)
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD
Resumen de los niveles de bioseguirdad y barerras primarias y secundarias
BSL Agentes PrácticasEquipos de Seguridad (Barreras Primarias)
Instalaciones (Barreras Secundarias)
1 No se ha comprobado que produzcan enfermedad en adultos sanos
Prácticas microbiológicas estándar No se exige ninguna Se exigen mesas abiertas con pileta(s) en el laboratorio
2 Asociado con la enfermedad humana, riesgo igual a dañopercutáneo, ingestión, exposición de lamembrana mucosa
Práctica BSL-1 más: · Acceso restringido · Señales de advertencia de riesgo biológico · Precauciones para "objetos punzantes" · Manual de bioseguridad debe definir la descontaminación de los desechos o las políticas de control médico
CSB Clase I o II, u otros dispositivos de contención física para todas las manipulaciones de muestras o agentes que generen salpicaduras o aerosoles de materiales infecciosos. Delantal de laboratorio, guantes, protección del rostro cuando sea necesario
BSL-1 más autoclave
3 Agentes autóctonos o exóticos con potencial de transmisión por aerosol,enfermedad que puede derivar en consecuencias graves o letales
Práctica BSL-2 más: · Acceso controlado · Descontaminación de todos los desechos · Descontaminación de la ropa de laboratorio antes del lavado. · Muestras de suero base a todos los funcionarios del laboratorio y se almacenan
CSB Clase II, u otros dispositivos de contención física para todas las manipulaciones abiertas con las muestras o agentes. Delantal de laboratorio, guantes, Protección respiratoria necesaria
BSL-2 más: · Separación física de los corredores de acceso · Acceso de cierre automático con doble puerta · No se recircula el aire de escape · Flujo de aire negativo dentro del laboratorio
4 Agentes peligrosos/exóticos que presentan un alto riesgo de enfermedad, que pone en riesgo la vida, infecciones de laboratorio de transmisión por aerosol o agentes relacionados con riesgos de transmisión desconocidos y por los cuales no existe tratamiento ni vacunación
Prácticas BSL-3 más: · Cambio de ropa antes de ingresar · Ducha al salir · Descontaminación de todos los materiales a la salida de las instalaciones
Todos los procedimientos deben de realizarse en CSB III o de Clase I o II en combinación con un equipo de cuerpo entero con presión positiva y suministro de aire
BSL-3 más: · Edificio separado o zona aislada · Sistema de alimentación y escape, vacío y descontaminación exclusivos.
Anexo IV (RD 664/97) Niveles de contenciónMedidas de contención 2 3 41. El lugar de trabajo se encontrará separado de toda actividad que se desarrolle en el mismo edificio
No Aconsejable Sí
2. El aire introducido y extraído del lugar de trabajo se filtrará mediante la utilización de filtros de alta eficacia para partículas en el aire (HEPA) o de forma similar
No Sí, para la salida de aire Sí, para la entrada y salida de aire
3. Solamente se permitirá el acceso al personal designado Aconsejable Sí Sí, con esclusa de aire
4. El lugar de trabajo deberá poder precintarse para permitir su desinfección No Aconsejable Sí
5. Procedimientos de desinfección específicos Sí Sí Sí
6. El lugar de trabajo se mantendrá con una presión negativa respecto a la presión atmosférica
No Aconsejable Sí
7. Control eficiente de vectores, por ejemplo, roedores e insectos Aconsejable Sí Sí
8. Superficies impermeables al agua y de fácil limpieza Sí, para banco de pruebas y mesa de
trabajo
Sí, para banco de pruebas, mesa de trabajo y suelo
Sí, para banco de pruebas, mesa de trabajo, suelo, paredes y techos
9. Superficies resistentes a ácidos, álcalis, disolventes y desinfectantes Aconsejable Sí Sí
10. Almacenamiento de seguridad para agentes biológicos Sí Sí Sí, almacenamiento seguro
11. Se instalará una ventanilla de observación o un dispositivo alternativo en las zonas de manera que se pueda ver a sus ocupantes
Aconsejable Aconsejable Sí
12. Laboratorio con equipo propio No Aconsejable Sí
13. El material infectado, animales incluidos, deberá manejarse en una cabina de seguridad biológica o en un aislador u otra contención apropiada
Cuando proceda Si, cuando la infección se propague por el aire
Sí
14. Incinerador para destrucción de animales muertos Aconsejable Sí, disponible Sí, en el mismo lugar
• http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/index.htm
• http://www.who.int
Bioseguridad - Contención
79
www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD