Fundamentos de la citometría de flujo
Paula Amat MartínezLaboratorio Hematología Hospital Clínico de Valencia
-Fundamentos de citometría de flujo
-Componentes del equipo
-Parámetros de estudio
-Aplicaciones clínicas de la citometría de flujo en el laboratorio de Hematología
-Ejemplos
Indice
Neoplasias de células plasmáticasProliferación de un clon de células B que sintetizan y segregan una sola inmunoglobulina homogénea o sus fragmentos
Las principales neoplasias de células plasmáticas que se estudian por CMF son:MGUS/MielomaPlasmocitoma solitarioAmiloidosis Primaria (AL) Macroglobulinemia de Waldenström/LPL (MW)
Fundamentos de la citometría de flujo.
Fundamentos de la citometría de flujo. OBJETIVOS PRINCIPALES DE LA CITOMETRÍA DE FLUJO•Identificar y enumerar subpoblaciones celulares únicas y definidas.
•Seleccionar y separar físicamente subpoblaciones de células deseadas (por deflección electrostática ; esta tecnología de separación se llama "electronic cell sorting")
•Medir capacidad funcional de subpoblaciones celulares definidas
COMO SE DETECTAN ESTAS CARACTERÍSTICAS • El citómetro de flujo detecta como las células interactúan con un láser
Fundamentos de la citometría de flujo.
SISTEMA FLUÍDICOSISTEMA ÓPTICOSISTEMA ELECTRÓNICO
Componentes del equipo
Beckton Dickinson-Bioscie
Sistema fluídico
Beckton Dickinson-Bioscie
Sistema óptico
Sistema óptico
Beckton Dickinson-Bioscie
Sistema ópticoAnticuerpos monoclonales y fluorocromos
Beckton Dickinson-Bioscie
Sistema ópticoAnticuerpos monoclonales y fluorocromos
Beckton Dickinson-Bioscie
Sistema ópticoAnticuerpos monoclonales y fluorocromos
Asociación Mejicana de Patología Clínica, A.C
Sistema ópticoAnticuerpos monoclonales y fluorocromos
Asociación Mejicana de Patología Clínica, A.C
Sistema electrónico
Beckton Dickinson-Bioscie
Sistema electrónico
Beckton Dickinson-Bioscie
• El tamaño celular relativo ( Forward Scatter o FSC)• La complejidad interna o granularidad relativa (Side Scatter o
SSC)• Intensidades relativas de emisión de fluorescencia
( FL1, FL2, FL3 ,FL4)
Parámetros de estudio
-Diagnóstico-Identificación-Cuantificación
-Pronóstico-Marcadores fenotípicos pronósticos
-Monitorización del tratamiento
Aplicaciones clínicas de la citometría de flujo
% CD34+ 1.1 + 0.6 (0.3-2.6)
% CD34+ or CD117+ 2.2 + 1.4 (0.6-6)
% NRC 4.7 + 2.1 (2-9)
% Neutrophils 67 + 6.1 (57-80)
% Monocytic cells 4.3 + 1.4 (2-6.5)
% Eosinophils 2.5 + 1.3 (0.8-5)
% Basophils 0.4 + 0.7 (<0.1-2.4)
% Mast cells 0.02 + 0.01 (<0.03)
% Plasma cells 0.2 + 0.2 (0.01-0.5)
% B-lymphocytes 2.9 + 1.5 (1.6-6.3)
% B-cell precursors 0.9 + 0.8 (0.1-3.9)
% T-cells 9.2 + 4.5 (2.6-18)
% NK-cells 2.8 + 1.4 (0.7-5)
Distribución de las poblaciones en la médula ósea
Distribución de las poblaciones en la sangre periférica
Maduración linfoide
Maduración neutrófilo
Maduración monocito
Trabajo en equipo
- CORRECTO USO Y MANTENIMIENTO DEL APARATO- LAVADO- CALIBRACIÓN Y COMPENSACIÓN
- ENTRENAMIENTO DEL PERSONAL - PROCESAMIENTO- MARCAJE DE LAS MUESTRAS- FORMACIÓN
- ANÁLISIS- CONTROLES DE CALIDAD