Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía1
InmunodeficienciaInmunodeficienciaCombinada Combinada
Severa Severa (SCID)(SCID)
..
en caballosen caballos
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía2
Introducción(Recuerdo inmunológico)
IntroducciónIntroducción(Recuerdo inmunológico)(Recuerdo inmunológico)
INTRODUCCIÓN
(Recuerdo inmunológico)
ESTRUCTURA DE LAS INMUNOGLOBULINASESTRUCTURA DE LAS INMUNOGLOBULINAS
• Cadenas:• Ligera• Pesada
• 110 Aminoácidos (Cadena ligera)• Dominio animoterminal Muy variable• Dominio carboxiterminal Bastante constante
•Regiones (Cadena pesada): • Variable• Constante• Bisagra
• Tipos de enlaces
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía3
INTRODUCCIÓN
(Recuerdo inmunológico)
GENES DE LAS INMUNOGLOBULINASGENES DE LAS INMUNOGLOBULINAS
• Cadena Ligera• Regiones V, J y C
• Cadena Pesada • Regiones V, D, J Dominio variable• Región C Dominio constante
• Hipermutación somática
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía4
DNA - PK
RECOMBINACIÓN RECOMBINACIÓN V(D)JV(D)J
Subunidad catalítica
• RAG 1 y 2 (RecombinationActivating Gene)
Rotura de la doble cadena de DNA entre los fragmentos génicos a recombinar
• DNA-PK (DNA dependentProtein Kinasa)
Enlace de fragmentos del DNA codificante y circularización de los segmentos de DNA cortados
Reparación del DNA
INTRODUCCIÓN
(Recuerdo inmunológico)
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía5
Aspectos GeneralesAspectos GeneralesAspectos Generales
ASPECTOS
GENERALES
• Síndrome raro que provoca deficiencia en número y funciónde linfocitos T y B, y, en muchas ocasiones, también células NK
• Incapacidad para generar una respuesta inmune
• Mortalidad 100%
• Especies afectadas• Caballos (Árabes)• Perros (Jack Russel Terriers)• Ratones• Humanos
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía6
SCID EN CABALLOSSCID EN CABALLOS
• Primera inmunodeficiencia con características de SCID observada , en caballos árabes, en 1960, en Australia• Descrito como síndrome en 1973• Origen de la mutación desconocido
• Animales afectados no producen anticuerpos tras la infeccióno inmunización• No viven más de 5 meses, suelen morir por:
• Adenovirus equino• Pneumociystis carinii• Cryptosporidium parvum• Otras bacterias
• 8% de portadores aproximadamente• Suelen ser más propensos a desarrollar tumores
ASPECTOS
GENERALES
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía7
Mutación en una base Codón Stop prematuro PROTEÍNA MUTANTE INESTABLE
Autosómica recesiva• Ratones
Codón stop en nucleótido 10828 terminación temprana en aminoácido 517 ALELO FUNCIONALMENTE NULO
Autosómica recesiva• Perros
Delección de 5 bp en codón 9480 cambio marco de lectura delección aminoácido 967PROTEÍNA MUTANTE INESTABLE
Autosómica recesiva• Caballos
MUTACIÓN (en gen de la DNA-PK)TIPO HERENCIAESPECIE
Carencia de linfocitos T y BNormal de células NK
11Autosómica recesiva
25• Deficiencia de recombinasa activadora de genes (RAG)
Bajo de linfocitos T y BBajo de células NK
20Autosómica recesica
15• Deficiencia de Adenosina Deaminasa (ADA)
Carencia de linfocitos TMal funcionamiento de linfocito B
5Autosómica recesiva
5• Deficiencia de la cadena αdel recpetor IL-7
Similar al anterior19Autosómica recesiva
10• Deficiencia en KinasaJanus 3 (Jak 3)
Bajo de linfocitos TBajo de células NKDisminución función linfocitos B . (recuento normal)
XRecesiva ligada al
cromosoma X
45• Deficiencia en la cadena γcomún de los receptores de linfocitos T para factores de crecimiento
RECUENTOSRECUENTOSCRCRHERENCIAHERENCIA%%DEFECTO EN HUMANOSDEFECTO EN HUMANOS
BASE GENÉTICA
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía8
Base GenéticaBase GenéticaBase Genética
Fallo a nivel de la recombinación V(D)J• RAG no hay descritos fallos a este nivel• DNA-PK fallo a nivel de la DNA-PKcs
(delección de 5 bp)
Fallo en precursores de linfocitos
Incapaces de diferenciarse en maduros(incapaces para completar la señal de transducción
por fallos en sus receptores para IL)
Severa linfopenia y hipogammaglobulinemia
BASE GENÉTICA
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía9
MUTACIÓNMUTACIÓN: delección de 5 bp en el gen que codifica para la DNA-PKcs, en el cromosoma 9
Cambio en el marco de lectura del codón 3155 de transcripción
Delección del aminoácido 967 en C-terminal
Proteína inactiva
Bloqueo de la recombinación V(D)J
Bloqueo de la diferenciación de linfocitos T y BINMUNODEFICIENCIA SEVERA
BASE GENÉTICA
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía10
Otra consecuencia que se ha observado en los caballos heterocigotos para esta mutación, es que, al intervenir laDNA-PK en los procesos de reparación del DNA, estos animales son más propensos a padecer tumores
Los tumores que se presentan con mayor frecuencia son los sarcomas
Ejemplo de fibroblastos sometidos a radiaciones ionizantes. Diferencias entre una animal normal y un animal con SCID
Indican fallos en la reparación del DNA (y, por tanto, explican la propensión a padecer tumores)
BASE GENÉTICA
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía11
DiagnósticoDiagnósticoDiagnóstico
DIAGNÓSTICO
• Antecedentes familiares
• Recuentos de células sanguíneas de la serie blancaBajos (y bajos niveles de Ig)
• Pruebas de funcionalidad de los linfocitos (para diferenciarde otras causas de linfopenia
• Histopatología: hipoplasia severa de timo y tejidos linfoides periféricos
• Diagnóstico “in utero” (más común en medicina humana) poramniocentésis (células fetales) o análisis de las célulasde la placenta
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía12
DIAGNÓSTICO CLÍNICO: DIAGNÓSTICO CLÍNICO:
• Signos clínicos (1º-2º mes de vida):• Normal al nacimiento• Fiebre• Taquicardia – taquipnea• Retraso del crecimiento• Letargia• Secreción nasal bilateral, tos y disnea
(Infección respiratoria)• Diarrea crónica• Alopecia y dermatitis• Gran cantidad de infecciones, de diversa consideración,
entre las más graves destacan:• Neumonías• Meningitis• Infecciones septicémicas• Hepatitis
• Infecciones por hongos en boca y periné• Mala respuesta a los tratamientos frente a infecciones
DIAGNÓSTICO
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía13
MÉTODOS DIAGNÓSTICOS CON MÉTODOS DIAGNÓSTICOS CON BASE MOLECULAR BASE MOLECULAR P.C.RP.C.R..
• Solo se realiza en laboratorios muy especializados
• Sirve para amplificar la región alterada.• Los primers que se utilizan son:
• Revelado por electroforesis en un gel PAGE al 6%, con unvoltaje constante de 110 V durante 40 minutos
• Visualizado con luz ultravioleta
Reverse primer normal 3’ - AGAGTTTAAGGGAATTCTCTG - 5’Gen normal … AATTTATCATCTCAAATTCCCTTAAGAGACTTCTAA…
Gen SCID … AATTTATCA ( ----- ) AATTCCCTTAAGAGACTTCTAA…Reverse primer SCID 3’ – TAGT TTAAGGGAATTCTCTGAA – 5’
Foward primer 5’- TGTTGCAAAAGGAGACAGAAT – 3’Gen normal … TTCCTGTTGCAAAAGGAGACAGAATTTTTT….Gen SCID … TTCCTGTTGCAAAAGGAGACAGAATTTTTT…
DIAGNÓSTICO
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía14
Pool con los 3 primers:
PCR alelo específico (primers por separado):
Prueba normal
Prueba SCID
DIAGNÓSTICO
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía15
TratamientoTratamientoTratamiento
TRATAMIENTO
CONSEJO GENÉTICO A CRIADORES Y PROPIETARIOS:CONSEJO GENÉTICO A CRIADORES Y PROPIETARIOS:
Detección de portadores por PCR y excluirlos de los programas de reproducción, o, en caso de tener que utilizarlos, asegurarnos de no cruzarlos con otros heterocigotos
Aún así, es mejor no utilizarlos ya que, además de seguir transmitiendo la enfermedad a la siguiente generación, los portadores tienen más probabilidades de padecer ciertos tipos de tumores.
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía16
• Tratamiento específico:
• Transplantes de médula ósea
• Inyecciones que ayuden a mejorar el sistema inmunológico del paciente reemplazo de inmunoglobulina intravenosa (IVIG)
• Terapia génica
• Tratamiento inespecífico:
•Tratamiento rápido y adecuado de todas las infecciones
• Recomendaciones:• Aislar al niño con SCID de niños• Vigilar la nutrición• Prevenir infecciones por Pneumocystis carinii mediante trimethoprima-sulfamethoxazole• No vacunar con vacunas vivas• Transfusiones de sangre irradiadas y negativas a Citomegalovirus
TRATAMIENTO
TRATAMIENTO EN MEDICINA HUMANATRATAMIENTO EN MEDICINA HUMANA
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía17
BibliografíaBibliografíaBibliografía
BIBLIOGRAFÍA
Chapter V: Severe Combinated Inmunodeficiency
“DNA-PKcs mutations in dogs and horses: allele frequency and association with neoplasia”
Qi Ding, Lori Bramble, Vilma Yuzbasiyan-gurkan, Thomas Bell,Katheryn Meek Gene (2001)
“Molecular Pathology of Severe Combined Immunodeficiency in mice,horse and dogs” – Animal models
L.E. Perryman Veterinary Pathology (2004)
“Genetic Monitoring for severe immunodeficiency carriers in horse in Slovenia”
Jana Zavratanik, Matjaž Mesarič, Gregor MajdičSlov Vet Res (2005)
“Frequency of the SCID gene among Arabian horses in the USA”D. Bernoco, E. BaileyAnimal genetics (1998)
Introducción (recuerdo inmunológico)
Aspectos
generales
Base genética
Diagnóstico
Tratamiento
Bibliografía18
“Equine severe combined immunodeficiency: a defect in V(D)J recombination and DNA-dependent protein kinase activity”
Rhonda Wiler, Ray Leber, Bethany B. Moore, Linda F. VanDyk, Lance E. Perryman & Katheryn Meek
Proc. Natl. Acad. Sci. (1995)
www.poloargentino.com/nota_16_aguilar.html
www.healthsystem.virginia.edu/UVAHealth/peds_allergy_sp/scid.cfm
www.veterinariargentina.com/res/resumenes186.htm#Inmunodeficiencia%20combinada %20severa%20del%20potrillo%20%E1rabe%20(SCID)
www.sanidadanimal.info/cursos/inmuno2/ca041.htm
“Conceptos y técnicas hematológicas para técnicos veterinarios”Gregg L. Voigt (2003)
“Inmunología clínica veterinaria”Richard E. W. Halliwell y Neil T. Gorman (1992)
“Inmunología veterinaria”Ian R. Tizard (2002)
BIBLIOGRAFÍA