7/24/2019 metodos de observacion en microbiologia
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Alex Gabriel Tapia Torres
MTODOS DE OBSERVACINEN MICROBIOLOGA
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INTRODUCCIN
Las cllas bac!eria"as "o se pe#e"obser$ar a si%ple $is!a& si"o !a" solo laco"sece"cia #e s creci%ie"!o '
#i$isi("& es #ecir& " cl!i$o #ebac!erias)
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MICROSCOPIO PTICO ACTUAL
A) Lente ocular
B) Lente objetivo
C) Platina
D) Condensador
E) Pinzas para sujetar el
objeto
F) Espejo
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ESQUEMA DEL MICROSCOPIO
*" !bo cil+"#rico alo,a
el sistema pticooclar-ob,e!i$o)*"a platina per%i!eobser$ar laspreparacio"es& .e so"il%i"a#as por "espejo cncavo.eco"ce"!ra la l/ sobre elob,e!o a es!#iar)
http://www.csic.es/hispano/patrimo/micro1/micro1.htmhttp://www.csic.es/hispano/patrimo/micro1/micro3.htmhttp://www.biologia.arizona.edu/http://www.biologia.arizona.edu/http://www.csic.es/hispano/patrimo/micro1/micro3.htmhttp://www.csic.es/hispano/patrimo/micro1/micro1.htm7/24/2019 metodos de observacion en microbiologia
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TUBO O CAN Y CREMALLERA
Tbo
Cre%allera
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BRAZO Y TORNILLOS MACROMTRICO YMICROMTRICO
Tor"illo %acro%!rico
Tor"illo %icro%!rico
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TAMBOR O REVLVER PORTAOBJETIVOS
Ta%bor
Ob,e!i$os
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PLATINA Y PIE
0la!i"a
Base o pie
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LENTES OCULARES
A%e"!o
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LENTES: OBJETIVOS Es!1" coloca#os e"
el re$(l$er Tie"e" " sis!e%a
#e a%or!i2aci(" *" a"illo colorea#o
i"#ica losa%e"!os
So" #e 3& 45& 65&35& 75& ' 4558i"%ersi("9a%e"!os
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Cdigo de
color deinmersin Medio de inmersin
NegroAceite
Naranja Glicerol
Blanco Agua
Rojo Especial o multiuso
Cdigo decolor deaumento
Aumento
Negro 1x, 2.x
Marrn 2x, 2.x
Rojo !x, x
Amarillo 1"x
#erde 1$x, 2"x
A%ul tur&uesa2x, '2x
A%ul celeste !"x, "x
A%ul co(alto $"x, $'x
Blanco, crema 1""x, 2"x, 2""x
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DIAFRAGMA Y CONDENSADOR Co"#e"sa#or:
co"ce"!ra la l/ #e lal1%para e" " p"!o#e la preparaci("
Dia;ra2%a o iris8es!1 #e"!ro #elco"#e"sa#or9:si secierra %e,ora el
co"!ras!e)
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4) Obser$aci(" e" ;rescoSo" pre;eribles e" las si!acio"es si2ie"!es:
La %or;olo2+a #e las bac!erias se al!era ca"#o se #eseca" '!i
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4) Obser$aci(" e" ;rescopreparacin en fresco simplepreparacin en ota pendiente
6) Obser$aci(" co" !i"cio"es
Ti"ci(" si%ple: " solo colora"!e)Ti"ci(" #i;ere"cial: %1s #e " colora"!eTi"ci(" especialTi"ci(" "e2a!i$a: colorea el %e#io .e ro#eaa la bac!eria per%a"ecie"#o s!a si" !e
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0or!a ob,e!o
Mes!ra
! Coloca" #na $ota%e a$#a en #n po"ta
&!' Toma" la m#est"acon el asa %e siem("a o#n $ote"o
0roce#i%ie"!o para " prepara#o e";resco
8?e"!re por!a ' cbre?9
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OBSERVACIN MICROSCPICA
! O(se"vacin en )"esco Bacte"ias* +eptospi"as,
t"eponemas -M! campo osc#"o.
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OBSERVACIN MICROSCPICA
! O(se"vacin en )"esco * Pa"/sitos * T"o)o0oitos, la"vas!
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OBSERVACIN MICROSCPICA
! O(se"vacin en )"esco 1on$os* +eva%#"as
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0roce#i%ie"!o para " prepara#o e";resco
e" 2o!a pe"#ie"!e
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CO+ORANTE* DE2INICIN
Son comp#estos o"$/nicos 3#etienen al$#na a4ni%a% espec54capo" al$6n componente!
+os colo"antes son comp#estos3#5micos #tili0a%os pa"a a#menta"el cont"aste
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CO+ORANTES* TIPOS
a. Sales colo"antes* %1s co%@"%e"!e sa#os (/sicos: Co"sis!e" e" " ca!i(" colorea#o"i#o a "
a"i(" i"coloro) Ti
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CO+ORANTES* TIPOS
(. Colo"antes liposol#(les Se co%bi"a" co" los co%po"e"!es
lip+#icos #e la clla& sa#os parare$elar la locali/aci(" #e los #ep(si!os#e 2rasa) E,) Ne2ro S#1")
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COLORACIONES : TI0OS
Vitales So" a.ellas .e se prac!ica" sobre cllas .e
es!1" $i$as& %e#ia"!e la i"!ro#cci(" #e "
colora"!e e" la circlaci(" #e " or2a"is%o $i$o) E,e%: el $er#e a"o ' el a/l #e %e!ile"o)
S#p"avitales so" a.ellas .e se reali/a" sobre cllas o !e,i#os
$i$os& pero .e es!1" aisla#os #el or2a"is%o #el.e proce#e")
No vitales se reali/a" sobre cllas %er!as)
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T8CNICAS PARA REA+I9AR UNAPREPARACIN CO+OREADA
a9 ro!is o pel+cla 8ex!e"si("9
b9 La =,aci("
c9 Coloraci(")
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)incin de c*lulas para la o(ser+acin
microscpica
Extensin de una ina capa
de c*lulas so(re el porta
-ecado al aire
ijacin por lameado del porta
Adicin del colorante
la+ado / secado
-e coloca una gota de aceite
de inmersin so(re el porta /
se o(ser+a con el o(jeti+o de
1""0
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T8CNICAS PARA REA+I9AR UNAPREPARACIN CO+OREADA(. +a 4jacin*+os mic"oo"$anismos 3#e%en a%:e"i%os al po"tao(jeto - coa$#la
las s#stancias p"oteicas.
TIPOS CON CALOR 8O MTODO DE FOC9 IACIN H*MICA: alcool %e!+lico& ;or%ali"a al J 8$-$9& licor #e oK%a"
8par!es i2ales #e e!a"ol absol!o ' !er9
Metanol
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T8CNICAS PARA REA+I9AR UNAPREPARACIN CO+OREADA
c. Colo"acin! SIMP+E * Positiva
o ne$ativa
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Ti"ci(" si%ple #e a/l #e %e!ile"o)
2"otis7 4jacin
Tincin
!' Pone" #na $ota %e
a$#a en #n po"ta
&!' Toma" la m#est"a con
el asa %e siem("a
;!'E
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!' Coloca" #na $ota %eNi$"osina en #n po"ta
&!' Toma" m#est"a %el
mic"oo"$anismo con elasa, ?amea" el t#(o 7tapa"
;!' Me0cla" con laNi$"osina 7e
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T8CNICAS PARA REA+I9AR UNAPREPARACIN CO+OREADA
c. Colo"acin! Di)e"encial o
comp#esta
se !ili/a" para #is!i"2ir e"!re !ipos #e%icroor2a"is%os
E!apas:
! tincin p"ima"ia&! Tincin %e cont"aste o sec#n%a"ia Ejemplo!* CO+ORACION @RAM,
CO+ORACION DE 9IE1+' NEE+SEN,
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TERMINOS
Los mo"%ientes& a".e "o so"colora"!es& i"!e"si=ca" la !i"ci("por.e a%e"!a" la a="i#a# #e la
clla por el colora"!e) Ta%bi" sepe#e" !ili/ar para pro#cir "e"2rosa%ie"!o #e cier!as es!rc!ras
cellares ex!er"as& co%o los a2elos&.e #ebi#o a s #el2a#e/ "o po#r+a"ser $isali/a#os #e o!ra ;or%a)
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CO+ORACIN DE 9IE1+' NEE+SEN
;"#a%e"!o #e es!a !c"ica #i;ere"cial se basa e" lapropie#a# #e la pare# cellar .e co"!ie"e" 1ci#os2rasos 81ci#os %ic(licos9 855 1!o%os #e carbo"o9
Resis!e la #ecoloraci(" co" alcool ' " 1ci#o ;er!e
ca"#o VARIANTES Calie"!e : Mycobacterium E" ;r+o 8o #e Fi"'o"9 : Cr'p!ospori#i%& C'clospora
E
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Miercoles
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2"otis 7 4jacin
!'Pone" #na $ota %ea$#a en #n po"ta
&!' Toma" la m#est"a %e#n c#ltivo %eMycobacterium
;!'E
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Ti"ci(" #e esporas)
2"otis7 4jacin
!'Pone" #na $ota%e a$#a en #npo"ta
&!'Toma" la m#est"a%e #n c#ltivo %eBacillus
;!'E=!'+ava" con a$#a,%eja" seca" 7
o(se"va" almic"oscopio
Tincin
Bacte"ias
Espo"as
Miercoles
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LA TINCIN DE LAGELOS DELEISON 4)Se =,a .+%ica%e"!e la sspe"si(" bac!eria"a&
%e#ia"!e ;or%ol& ' se ace la ex!e"si(" e" "por!aob,e!os)
6)Se #e,a secar al aire& si" cale"!a%ie"!o al2"o)
)Se cbre la preparaci(" co" "a %e/cla #e 1ci#o!1"ico ' el colora"!e rosa"ili"a& #e preparaci("ex!e%por1"ea) El 1ci#o !1"ico e"2resa los a2elos ' larosa"ili"a los !i
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2i$#"a ;!Ti"cio"es espec+=cas) 8a9 La !i"ci(" #e ir!/Co"Pli" se !ili/apara obser$ar e"#osporas) Bacilius cereus 8b9 La !i"ci(" #e Lei;so" re$ela.e es!e %icroor2a"is%o posee a2elos& lo cal co"!rib'e a si#e"!i=caci(" co%o Spirillum volutans..8c9 La !i"ci(" "e2a!i$a co" !i"!aci"a per%i!e obser$ar .e es!a bac!eria posee c1psla& lo .e ;acili!a si#e"!i!icaci(" co%o Klebsiella pneumoniae& a2e"!e casal #e la "e%o"+a)
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ONGOS AQ*L DE LACTOENOL T) MENTAGRO0TES