7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
1/46
UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANAUnidad Xochimilco
Divisin de Ciencias iol!icas " de la Sal#d
T$onco Com%n Divisional
Md#lo& P$ocesos Cel#la$es '#ndamen(ales
Anlisis de las muestras recolectas de Rectora
Po$&Alicia Ma$i)el C#$iel Ro*oDel+ina ,a$c-a e(an.oL#ce$o Edi(h ,on./le. C$#.,$isel Loe.a Coa(.o.onMelina T$e*o La$a
Docen(e&D$0 1o$!e An(onio Am2.3#i(a Lande$os
,$#4o& 56A
Recoleccin de la m#es($a
El 4$o4si(o de es(a inves(i!acin es evidencia$ la 4$esencia de En(e$o)ac(e$ias enel a!#a de los )e)ede$os de las dis(in(as #nidades de la UAM 7Unive$sidad
A#(noma Me($o4oli(ana8
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
2/46
Ca)e $esal(a$ 3#e en la Rec(o$-a de la UAM no ha" )e)ede$os como en la UAM 9X sin em)a$!o c#en(an con dosi+icado$es de a!#a: de los c#ales +#e$onseleccionados ; al a.a$ 4a$a la (oma de m#es($a0
En cada #no de los dosi+icado$es seleccionados se a4lic la (2cnica de medio
cho$$o 4a$a la (oma de m#es($a en #n +$asco es(2$il ma$cado 4a$a iden(i+ica$ eldosi+icado$ seleccionado " dicho +$asco se man(#vo en #n medio $e+$i!e$an(ehas(a el momen(o 3#e se #s en el la)o$a(o$io: la4so 3#e no +#e ma"o$ a 5 ho$a0
Dis4ensado$es seleccionados&
58 Dosi+icado$ de Coo$dinacin !ene$al de adminis($acin " $elacionesla)o$ales 76do 4iso8
68 Dosi+icado$ de Teso$e$-a ad*#n(a de con($ol 4a($imonial 7
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
3/46
=8 Dosi+icado$ de Di$eccin de Tecnolo!-as de la in+o$macin 75e$ 4iso8
;8 Dosi+icado$ de la case(a de vi!ilancia en la en($ada 4$inci4al 74lan(a )a*a8
T$a)a*o en la)o$a(o$io
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
4/46
PRIMERA SESIN& Sem)$ado en A!a$ MacCon>e"
An(es de comen.a$ a ($a)a*a$ +#e im4o$(an(e $eali.a$ la es(e$ili.acin de /$ea de
($a)a*o 4a$a evi(a$ c#al3#ie$ (i4o de con(aminacin0
Pa$a el c#l(ivo de la m#es($a es(as +#e$on ($a(adas de dos mane$as&
58 Dil#cin de la m#es($a 5&5?: 3#e consis(e en (oma$ 5ml de la m#es($a "dil#i$la en @ml de Sol#cin Salina Iso(nica es(2$il 7SSI8
68 M#es($a di$ec(a: sin nin!%n (i4o de dil#cin
En am)os casos el c#l(ivo se $eali. de la misma mane$a&
Con a"#da de #n el asa )ac(e$iol!ica es(2$il se (om #na 4e3#eBa
can(idad de la m#es($a de a!#a " se 4$ocede a es($ia$ el inoc#o en la ca*ade Pe($i so)$e el a!a$ si!#iendo #n 4a($n de c#a($o c#ad$an(es " #na es($-aa)ie$(a0
Cada a!a$ se sell con #n 4eda.o de mas>in! " se e(i3#e( con los da(ossolici(ados es4eci+icando el n%me$o de m#es($a " si e$a dil#ida o 4#$a0
Las ca*as de a!a$ MacCon>e" se lleva$on a la es(#+a 4a$a de*a$las inc#)a$a
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
5/46
Des4#2s de 3#e las m#es($a inc#)a$on d#$an(e 6= ho$as se 4$ocedi a laseleccin de colonias desa$$olladas de a!a$ MacCon>e"0 En el caso de lasm#es($as de Rec(o$-a de los 5? c#l(ivos (o(ales solo 6 4$esen(a$on desa$$ollo decolonias )ac(e$ianas: am)as co$$es4ondie$on a la m#es($a n%me$o ; 7Dosi+icado$
de la case(a de vi!ilancia en la en($ada 4$inci4al8 o)se$vando ma"o$ desa$$ollo enel c#l(ivo 4#$o a com4a$acin con el c#l(ivo dil#ido0
Las colonias o)se$vadas 4$esen(a$on las si!#ien(es ca$ac(e$-s(icas&
COLONIA 5M#es($a P#$a
COLONIA 6M#es($a 5&5?
MOR'OLO,IA COLONIAL
'o$ma Ci$c#la$ Ci$c#la$
Colo$ Ama$illo F Do$ado Ama$illo F do$ado
Elevacin Um)ilicada con $#!osidad Um)ilicada con $#!osidad
o$de Inde+inido Inde+inido
Consis(encia Viscosa Viscosa
TamaBo ,$ande " 4#n(i+o$me ,$ande " 4#n(i+o$me
O4acidad A#sen(e A#sen(e
S#4e$+icie I$$e!#la$ I$$e!#la$
De las dos m#es($as seBaladas se 4$ocedi a $eali.a$ la $esiem)$a de las coloniasdesa$$olladas en a!a$ MacCon>e" 4a$a o)(ene$ c#l(ivo 4#$o de )ac(e$ias0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
6/46
O)se$vacin mic$osc4ica de los c#l(ivos seleccionados 4o$ Tincin de ,$am0
Si!#iendo la me(odolo!-a de la 4$/c(ica se 4$e4a$ el +$o(is " la (incin 4a$a lao)se$vacin mic$osc4ica de las colonias c#l(ivadas " as- de(e$mina$ si lasen(e$o)ac(e$ias 4$esen(es e$an de ca$/c(e$ ,$amGo ,$am
Al o)se$va$ las (inciones al mic$osco4io se de(e$min 3#e las en(e$o)ac(e$ias4$esen(es en dicha m#es($a e$an de ca$/c(e$ ,$amGde)ido a 3#e 4$esen(a)an#na colo$acin a.#l viole(a0
Tam)i2n se o)se$v la 4$esencia de #n hon!o en se!#ndo 4lano
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
7/46
TERCERA SESIN& P$#e)as )io3#-micas 4a$a En(e$o)ac(e$ias0
Pruebas de identificacin bioqumica de los cultivos puros seleccionados
P$#e)a Ca(alasa&
En.ima 3#e descom4one el 4e$Hido de hid$o!eno en oH-!eno " a!#a oHi!enada0Las )ac(e$ias 3#e con Ca(alasa 4osi(iva li)e$an oHi!eno 3#e se mani+ies(a con lali)e$acin de 4e3#eBas )#$)#*as0
P$#e)a OHidasa&
Todas las en(e$o)ac(e$ias dan #na $eaccin ne!a(iva0 Pseudomona" Neisseria
son 4osi(ivas0Las )ac(e$ias oHidasa 4osi(ivas 4$od#cen #n colo$ ne!$o o a.#l in(enso en 5?se!0La $eaccin se conside$a ne!a(iva si oc#$$e en($e los 5? " ? se!#ndos4os(e$io$es0 Si el desa$$ollo de colo$ se da des4#es de ? se!#ndos la 4$#e)a seconside$a Ne!a(iva0
Res#l(ados o)(enidos en las m#es($as de $ec(o$-a&
COLONIA 5M#es($a P#$a
COLONIA 6M#es($a 5&5?
PRUEAS IOJUIMICAS
CATALASA G G
OXIDASA
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
8/46
-
P$#e)a Ca(alasa en
m#es($a 4#$a
P$#e)a Ca(alasa enm#es($a dil#ida 5&5?
P$#e)a OHidasa en
m#es($a 4#$a
P$#e)a OHidasa enm#es($a dil#ida 5&5?
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
9/46
Siembra en medios para pruebas bioqumicas:
58 P$#e)a Vo!es 9 P$os>a#e$ F Ro*o de me(iloCon el asa )ac(e$iol!ica (oma$ #n inoc#lo li!e$o del c#l(ivo 4#$o de)ac(e$ias " s#s4ende$lo en #n (#)o con caldo VPRM
68 Ci($a(o de SimmonsCon el asa )ac(e$iol!ica (oma$ #n inoc#lo li!e$o del c#l(ivo 4#$o "si2m)$alo en +o$ma de #na es($-a a)ie$(a so)$e el /$ea inclinada del medio0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
10/46
In(e$4$e(acin de las 4$#e)as de iden(i+icacin )io3#-mica
58 Vo!esP$os>a#e$ F Ro*o de me(ilo P$#e)a 4osi(iva& Colo$ $o*o en el medio 74$esenciad e ace(o-na8
P$#e)a ne!a(iva& Colo$ ama$illo co)$i.o en el medioEl (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva
68 Ro*o de Me(ilo P$#e)a 4osi(iva& Colo$ $o*o en el medio P$#e)a $e(a$dada& Colo$ ana$an*ado P$#e)a ne!a(iva& Colo$ ama$illo en el medio
El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
11/46
P$#e)a 4osi(iva& Colo$ $osa +#e$(e en el caldo #$ea P$#e)a ne!a(iva& Colo$ ama$illo o sin cam)io en el caldo #$ea
El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva
8 A!a$ Kie$$o T$i4le A.%ca$ 7TSI8 Pico de +la#(a $o*oFP$o+#ndidad ama$illo& Medio AlcalinoFcido 7AlcFA80
,l#cosa +e$men(ada lac(osa o saca$osa no +e$men(ada0 Pico de +la#(a ama$illoFP$o+#ndidad ama$illo& Medio cidoFcido 7AFA80
,l#cosa: lac(osa "Fo saca$osa +e$men(ada0 Pico de +la#(a $o*oFP$o+#ndidad $o*o& Medio AlcalinoFAlcalino 7AlcFAlc80
Reaccin ne!a(iva: no ha" +e$men(acin de nin!#no de los ca$)ohid$a(os0
COLONIA 5M#es($a P#$a
COLONIA 6M#es($a 5&5?
PRUEAS IOJUIMICAS
Vo!es P$os>ae#$ Ne!a(iva Ne!a(iva
Ro*o de Me(ilo Ne!a(iva Ne!a(iva
Ci($a(o de Simmons
Posi(ivaP$esen(a c$ecimien(o conli!e$o cam)io de
colo$acin hacia #n (onoa.#l ve$doso
Posi(ivaP$esen(a li!e$oc$ecimien(o con cam)io
de colo$acin hacia #n(ono a.#l in(ensoIndol Ne!a(iva Ne!a(iva
cido S#l+h-d$ico 7K6S8 Ne!a(iva Ne!a(iva
Movilidad Posi(iva Posi(iva
U$easa Posi(iva Posi(iva
TSI 7hie$$o ($i4le a.%ca$8
Posi(ivaPico de +la#(a $o*o "P$o+#ndidad ama$illo0
Medio AlcalinoFcido7AlcFA80
Posi(ivaPico de +la#(a $o*o "P$o+#ndidad ama$illo0
Medio AlcalinoFcido7AlcFA80
TSI ,AS
K6S RM VP IND CIT URE MOV
TRIBUTO I:Escherichiae
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
12/46
GNERO :Escherichia
E.coli
GNERO: ShigellaGrupos: !"!# AlcFA - - - -F G
S.Sonnei AlcFA - - - -TRIBU II:Ed$arsiellae
GNERO:Ed$arsiella
E.%arda AlcFA - GTRIBU III:Salmonelleae
GENERO:Salmonelleae
AlcFA - - G G
TRIBU IVitrobactereae
GENERO:#itrobacter
#.freundii
#.&oseri AlcFA - - G G F- GTRIBU V:'lebsielleae
GENERO:'lebsiella'.pneumoniae
&.a()toca
GENERO:EnterobacterE.aerogenes
E.cloacae
GENERO:*afnia*. lves AlcFA - -F G - GGENERO:PantoeaP.agglomerans AlcFA -F G - -F G -F G G F- GGENERO:SerratiaS. marcescens AlcFA - -F G - G GTRIBU VI:Proteeae
GENERO:ProteusP. vulgaris AlcFA - GG GP.mirabilis AlcFA - G F- GG GGENERO:+organella
+.morganii AlcFA - - GG GGENERO:
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
13/46
Providencia
P.rettgeri AlcFA - - - G GG GP.stuartii AlcFA - - - G G F-P.alcalifaciens AlcFA - - G GTRIBU VII:
,ersinieaeGENERO:,ersinieae
,. enterocolitica AlcFA - - - G F-
Las /$eas som)$eadas indican las Reacciones clave G F- del ;? al @? de las ce4as ositivas -F G del ;? al @? de las ce4as Ne!ativas
Anlisis de resultados
Clasi+icacin deEn(e$o)ac(e$ias
N#me$o deReaccionesPosi(ivas
Reacciones Posi(ivas
TRIBUTO I:GNERO: ShigellaGrupos: !"!# ; TSI AlcFA
" GA# K6S VP
IND
S.Sonnei ; TSI AlcFA" GA#
K6S VP
IND
TRIBU II:Ed$arsiellaeGNERO:Ed$arsiellaE.%arda < TSI AlcFA VP MOVTRIBU III:SalmonelleaeGENERO:Salmonelleae
; TSI AlcFA VP
IND CIT
URE MOV
TRIBU IV& #itrobactereaeGENERO:#itrobacter#.&oseri TSI AlcFA
K6S VP CIT
URE MOV
TRIBU V:'lebsielleae
GENERO:*afnia*. lves ; TSI AlcFA
K6S RM IND
MOV
GENERO:PantoeaP.agglomerans TSI AlcFA
,AS K6S
RM IND CIT
MOV
GENERO:Serratia
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
14/46
S. marcescens TSI AlcFA K6S
RM IND
CIT MOV
TRIBU VI:ProteeaeGENERO:ProteusP. vulgaris = TSI AlcFA
VP
" URE MOV
P.mirabilis ; TSI AlcFA IND
CIT" URE
MOV
GENERO:+organella+.morganii ; TSI AlcFA
K6S VP" URE
MOV
GENERO: ProvidenciaP.rettgeri TSI AlcFA
,AS K6S
VP CIT" URE
MOV
P.stuartii TSI AlcFA ,AS
K6S VP
CIT MOV
P.alcalifaciens ; TSI AlcFA K6S
VP CIT
MOV
TRIBU VII: ,ersinieaeGENERO: ,ersinieae,. enterocolitica ; TSI AlcFA
,AS K6S VP
URE
TSI AlcFA& A!a$ hie$$o ($i4le a.%ca$: AlcalinoFcido K6S& S#l+#$o de Kid$o!eno RM& Ro*o de Me(ilo VP& Vo!es 9 P$os>a#e$ IND& Indol CIT& Ci($a(o de Simmons URE& U$easa 7Caldo #$ea8 MOV& Movilidad N7ne!$i(as " s#)$a"ado8& Reacciones Clave
Des4#2s de $eali.a$ las 4$#e)as necesa$ias se 4#do de(e$mina$ la 4$esencia deEn(e$o)ac(e$ias en las m#es($as del a!#a $ecolec(adas en #no de losdis4ensado$es de la Rec(o$-a de la UAM 3#e es(/ locali.ado en la case(a devi!ilancia de la en($ada 4$inci4al " en )ase a la iden(i+icacin )io3#-mica las4osi)les )ac(e$ias 4$esen(es en dicha m#es($a 4od$-an se$&
- Shi!ella: ,$#4os A: : C
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
15/46
- Shi!ella: S0 Sonnei- Eda$siella: E0 Ta$da- Salmonelleae- Ci($o)ac(e$: C0 Qose$i- Ka+nia: K0 Alves
- Pan(oea: P0 A!!lome$ans- Se$$a(ia: S0 Ma$cescens- P$o(e#s: P0 V#l!a$is- P$o(e#s: P0 Mi$ia)ilis- Mo$!anello: M0 Mo$!anii- P$ovidencia: P0 Re((!e$i- P$ovidencia: P0 S(#a$(ii- P$ovidencia: P0 Alcali+aciens
Es im4o$(an(e $esal(a$ 3#e le o)*e(ivo de es(a inves(i!acin es solo evidencia$ la4$esencia de las En(e$o)ac(e$ias: "a 3#e si se desea es4eci+ica$ c#/l es el
o$!anismo 4$esen(e en dichas m#es($as se (end$-a 3#e 4$ocede$ a $eali.a$ las4$#e)as es4ec-+icas co$$es4ondien(es0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
16/46
UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA
Unidad Xochimilco
Divisin de Ciencias iol!icas " de la Sal#d
T$onco Com%n Divisional
Md#lo& P$ocesos Cel#la$es '#ndamen(ales
RA$TI$A %E &ABORATORIO'
ELAORADO POR&
lva$e. Rom/n Thania Sa$ahi
A$/o. V/s3#e. Al)e$(o
Co$$ales And$ade Tania ,a)$iela
Nava$$e(e ,on./le. Diana Ale*and$a
Vale$io O$d#Ba So+-a Li.e(h
Docen(e&
D$0 1o$!e An(onio Am2.3#i(a Lande$os
,$#4o& 56A
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
17/46
Resultados
Pa$a es(as sesiones se ($a)a* %nicamen(e con las m#es($as de a!#a de los
)e)ede$os de la UAMXochimilco: "a 3#e los )e)ede$os de la UAMI.(a4ala4a seencon($a)an sin se$vicio0
rimera #esi(n
P$e4a$acin de las m#es($as " c#l(ivo en #n medio selec(ivo
I0 P$e4a$acin de la .ona es(2$il 4a$a ($a)a*o mic$o)iol!icoII0 C#l(ivo de la m#es($a de a!#a en el medio MacCon>e"III0 Mane*o de ma(e$ial con(aminado
En la 4$ime$a sesin se $eali. los c#l(ivos de las m#es($as de a!#a de los
)e)ede$os de la UAMX: " se $eali. la dil#cin 5&5? en a!#a en los (#)os de
ensa"o0
Se hi.o la siem)$a " dil#ciones en medio MacCon>e" 4o$ es($-a c$#.ada: las
m#es($as se sem)$a$on 4o$ d#4licado " se de* inc#)a$ a e"II0 Resiem)$a de las colonias desa$$olladas de a!a$ en MacCon>e" 4a$a
o)(ene$ c#l(ivo 4#$o de )ac(e$iasIII0 O)se$vacin mic$osc4ica de los c#l(ivos seleccionados
En es(a sesin no h#)o desa$$ollo de colonias en 6= ho$as: de los medio de c#l(ivo
MacCon>e" de las m#es($as de a!#a de los )e)ede$os de la UAMX0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
18/46
Reali.amos la iden(i+icacin de colonias en medios de c#l(ivo del a!#a de los
)e)ede$os de Rec(o$-a0
Se $eali. la o)se$vacin mac$osc4ica de la mo$+olo!-a de las colonias
seleccionadas del a!a$ MacCon>e"
Se
$eali. de i!#al modo la $esiem)$a de las colonias seleccionadas desa$$ollado$as
del a!a$ MacCon>e" "
se hi.o la o)se$vacin
mic$osc4ica con la Tincin
de ,$am0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
19/46
En es(e c#ad$o se m#es($a 3#e es($#c(#$a (iBe cada #no de los colo$an(es
#(ili.ados0
Colo$an(e Es($#c(#$a 3#e (iBeL#!ol Almidn: !lic!eno: cilios: +la!elos0Ve$de $/4ido Ci(o4lasma: n%cleo0,iemsa ,$/n#los ci(o4lasm/(icos: n%cleo0
Ace(oca$m-n C$omosomas en c2l#las mi((icasA.#l alciano TeBido de es($#c(#$as con 4$o4o$cin
de ca$)ohid$a(os0Ama$illo de Me(anilo Micelios " levad#$as0
Ta)la *' Resultados
Ca$ac(e$-s(icas de las )ac(e$ias o)se$vadas
COLONIA 5
Rec(o$-a
COLONIA 6
Rec(o$-a dil#ido+or,olo!a $olonial
'ORMA I$$e!#la$ I$$e!#la$ COLOR Ma$$n Ro*a
ELEVACIN Plana PlanaORDE E$osionado Con(in#oCONSISTENCIA M#cosa M#cosaTAMAO Mediana MedianaOPACIDAD O4aco O4acoSUPER'ICIE Lisa Lisa
+or,olo!a +icrosc(icaTinci(n de Gram Ne!a(ivas Ne!a(ivas
rue)as Bio.umicasCATALASA Posi(ivo Posi(ivaOXIDASA Posi(ivo Ne!a(iva
UREA Ne!a(iva Ne!a(iva,LUCOSA Ne!a(iva Ne!a(ivaLACTOSA Ne!a(iva Ne!a(ivaSACAROSA Ne!a(iva Ne!a(ivaMOVILIDAD Ne!a(iva Ne!a(iva
Ac0 SUL'KIDRICO Ne!a(iva Ne!a(ivaINDOL Ne!a(iva Ne!a(ivaRO1O DE METILO Ne!a(iva Ne!a(iva
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
20/46
VO,ES PROSQAUER Ne!a(iva Ne!a(ivaCITRATO DE SIMMONS Posi(iva Ne!a(iva
Tercera #esi(n
P$#e)as )io3#-micas 4a$a en(e$o)ac(e$ias0
I0 P$#e)as de iden(i+icacin )io3#-mica de los c#l(ivos 4#$os
seleccionados0II0 O)se$vacin mic$osc4ica de los c#l(ivos 4#$os seleccionados0
En la (e$ce$a sesin se $eali.a$on las 4$#e)as 4a$a la iden(i+icacin de las
en(e$o)ac(e$ias de los c#l(ivos en los (#)os de ensa"o0
Reali.amos di+e$en(es 4$#e)as con dis(in(as (2cnicas 4a$a 4ode$ o)se$va$
4os(e$io$men(e los $es#l(ados: las c#ales +#e$on&
a8 P$#e)a de ca(alasa&
Colocamos so)$e el 4o$(ao)*e(o con el asa )ac(e$iol!ica #na 4e3#eBa4o$cin del c#l(ivo 4#$o de las )ac(e$ias del medio Mac Con>e" " des4#2s
a!$e!amos #na !o(i(a de a!#a oHi!enada so)$e la m#es($a: las m#es($as
$es#l(a$on 4osi(ivas: li)e$a$on oH-!eno0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
21/46
)8 P$#e)a de oHidasa&Con el asa )ac(e$iol!ica colocamos
#na 4o$cin del c#l(ivo 4#$o " lo
eH(endimos so)$e el 4a4el +il($o0 Le
a!$e!amos 6 !o(as de $eac(ivo0 Las )ac(e$ias $es#l(a$on 4osi(ivas 4a$a la
m#es($a de $ec(o$-a " se hi.o lo mismo con las m#es($as de $ec(o$-a dil#ida
75&5?8 " s#s $es#l(ados +#e$on ne!a(ivos0
c8 P$#e)a Vo!es P$os>a#e$ F Ro*o de
me(ilo&Con el asa )ac(e$iol!ica (omamos
#n inoc#lo denso del c#l(ivo " los#s4endimos en el (#)o de caldo0 Las dos
m#es($as $es#l(a$on ne!a(ivas0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
22/46
d8 Ci($a(o de Simmons&Con el asa )ac(e$iol!ica (omamos #n
inoc#lo li!e$o del c#l(ivo " lo sem)$amos en
+o$ma de es($-a a)ie$(a0 Se sem)$a$on dos
m#es($as #na de $ec(o$-a dil#ida 75&5?8 " la o($a +#e de $ec(o$-a no dil#ida0La m#es($a de $ec(o$-a dil#ida $es#l(o ne!a(iva " La m#es($a de $ec(o$-a no
dil#ida $es#l(o 4osi(iva0
e8 IndolCon el asa )ac(e$iol!ica
colec(amos #n inoc#lo denso del
c#l(ivo " lo sem)$amos 4o$
4icad#$as en el medio SIM a < mm del+ondo del (#)o0 Las dos m#es($as $es#l(a$os ne!a(ivas0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
23/46
+8 Caldo #$eaCon el asa )ac(e$iol!ica colocamos
#n inoc#lo 4oco denso del c#l(ivo " los
sem)$amos den el caldo #$ea0 Las dosm#es($as $es#l(a$on ne!a(ivas0
!8 A!a$ hie$$o ($i4le a.%ca$ Con el asa )ac(e$iol!ica colec(amos
#n inoc#lo 4oco denso del c#l(ivo " lo
sem)$amos 4o$ 4icad#$a en el +ondo " en
+o$ma de es($-a 4o$ la s#4e$+icie0 Las dos
m#es($as $es#l(a$on ne!a(ivas0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
24/46
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
25/46
UNIVER#I%A% AUT/NO+A +ETROO&ITANAUnidad 0oc1imilco
Divisin de Ciencias iol!icas " de la Sal#d
T$onco Com%n Divisional
Md#lo& P$ocesos Cel#la$es '#ndamen(ales
REORTE %E &ABORATORIO
Po$&
C$#. Ke$n/nde. $enda
Dimas ,#.m/n C$is(ian
Ke$n/nde. Acos(a 1#an Ca$los
1e$nimo Ke$n/nde. Ed#a$do
Ven(#$a Ma3#eda Diana
Docen(e&D$0 1o$!e An(onio Am2.3#i(a Lande$os
,$#4o& 56A
INTRO%U$$I/N
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
26/46
La mic$o)iolo!-a se oc#4a !ene$almen(e de o$!anismos (an 4e3#eBos 3#e no4#eden se$ vis(os a sim4le vis(a 4o$ el o*o h#mano0 De)ido a la na(#$ale.a de es(adisci4lina: el mic$osco4io (iene #na im4o$(ancia c$#cial la ma"o$ 4a$(e de losconocimien(os so)$e los mic$oo$!anismos se han desc#)ie$(o con mic$osco4io050
La ma"o$-a de mic$oo$!anismos 4a(!enos 4$esen(an ca$ac(e$-s(icas +-sico
3#-micas: es(as ca$ac(e$-s(icas son im4o$(an(es 4a$a la de(eccin de es(osmic$oo$!anismos0 Los m2(odos em4leados en el la)o$a(o$io son los si!#ien(es 504$e4a$acin de las m#es($as " c#l(ivo en #n medio selec(ivo: 60 Aislamien(o "o)se$vacin de las ca$ac(e$-s(icas mac$osc4icas " mic$osc4icas de lasen(e$o)ac(e$ias:
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
27/46
A#n3#e los mic$oo$!anismos vivos se 4#eden eHamina$ di$ec(amen(e con #nmic$osco4io 4(ico: a men#do ha" 3#e +i*a$los " (eBi$los 4a$a a#men(a$ la$esol#cin " acen(#a$ las ca$ac(e$-s(icas mo$+ol!icas 4a$a s# es(#dio en el +#(#$o0
iacin
Las c2l#las (eBidas 3#e se o)se$van en el mic$osco4io de)en 4a$ece$se lo m/s4osi)le a las c2l#las vivas0 La +i*acin es #n 4$oceso 4o$ el c#al se conse$van "+i*an en s# 4osicin las es($#c(#$as in(e$nas " eH(e$nas de las c2l#las de losmic$oo$!anismos0
#olorantes ) tincin simple:
Los n#me$osos (i4os de colo$an(es em4leados 4a$a (eBi$ mic$oo$!anismos 4oseendos ca$ac(e$-s(icas en com%n& 50 Todos 4oseen !$#4os c$om+o)os 7!$#4os condo)les enlaces con*#!ados 3#e dan el colo$ al colo$an(e8: 60 P#eden #ni$se a lasc2l#las median(e enlaces inicos: covalen(es o hid$+o)os0 Po$ e*em4lo: #ncolo$an(e ca$!ado 4osi(ivamen(e se #ne a es($#c(#$as ca$!adas ne!a(ivamen(e de
la c2l#la0 Los colo$an(es ioni.a)les se 4#eden dividi$ en dos clases !ene$ales(omando como )ase la na(#$ale.a de s# !$#4o ca$!ado0
Colo$an(e )/sico& A.#l de me(ileno: +#csina )/sica: c$is(al viole(a: sa+$anina: ve$demala3#i(a0
Colo$an(e /cido& Eosina: $osa de )en!ala " +#csina /cida0
%incin diferencial.
Los m2(odos de (incin di+e$encial clasi+ican a las )ac(e$ias en !$#4os di+e$en(esse!%n s#s 4$o4iedades de (incin0 La (incin de ,$am: desa$$ollada 4o$ el m2dicoDan2s Ch$is(ian ,$am: en 5=: es el m2(odo de (incin m/s am4liamen(e
#(ili.ado en )ac(e$iolo!-a0 Se ($a(a de #n m2(odo de (incin di+e$encial 4o$3#edivide a las )ac(e$ias en dos clases0
,$am ne!a(ivas ,$am 4osi(ivas
gar +ac#on&e)
EHis(en n#me$osos medios de c#l(ivo con c#alidades " #sos dis(in(os: en es(a4$/c(ica: 4o$ las $a.ones eH4#es(as a con(in#acin: se #sa$/ el A!a$ MacCon>e":el c#al es #n medio de c#l(ivo selec(ivo 4a$a el aislamien(o: $ec#4e$acin "
di+e$enciacin de En(e$o)ac(e$iaceae0 Po$ s# con(enido de sales )ilia$es " c$is(alviole(a $es#l(a inhi)i(o$ia de )ac(e$ias ,$am4osi(ivo " de al!#nas )ac(e$ias ,$amne!a(ivas eHi!en(es 4#es (ales sales son sec$e(adas al in(es(ino 4a$a la di!es(inde l-4idos: siendo as- #n medio 4$o4icio 4a$a en(e$o)ac(e$ias0 Con(iene: adem/s:lac(osa como %nica +#en(e de ca$)ono +e$men(ado$es +#e$(es de lac(osa: comoEsche$ichia: Qlei)siella " En(e$o)ac(e$: 4$od#cen colonias $o*as +e$men(ado$eslen(os: como Ci($o)ac(e$: P$ovidencia: Se$$a(ia " Ka+nia: 4#eden a4a$ece$ sin colo$
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
28/46
des4#2s de 6=h o $osa 4/lido en 6==h P$o(e#s: Eda$siella: Salmonela "Shi!ella: 4$od#cen colonias ($ans4a$en(es: al no +e$men(a$ lac(osa0e" 4a$a o)(ene$ c#l(ivo
4#$o de )ac(e$ias0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
30/46
4; 1oras desu
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
31/46
Prueba Oxidasa:rocedimiento'
*' Pone$ #n ($o.o de 4a4el de +il($o so)$e #n 4o$(ao)*e(os060 De4osi(a$ #na 4o$cin del c#l(ivo " eH(ende$lo so)$e el 4a4el +il($o
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
32/46
ORDE INDE'INIDO LANCO DEL,ADO
CONSISTENCIA VISCOSA VISCOSA
TAMAO ,RANDE ,RANDE
OPACIDAD OPACO SUPER'ICIE IRRE,ULAR IRRE,ULAR
MOR'OLO,A MICROSCPICA
TINCIN ,RAM NE,ATIVA NE,ATIVA
PRUEAS IOJUIMICAS
CATALASA Posi(iva Posi(iva
OXIDASA Posi(iva Ne!a(iva
UREA Posi(iva Posi(iva
TSI 7hie$$o ($i4le a.%ca$8
Posi(ivaPico de +la#(a $o*o "
P$o+#ndidad ama$illo0Medio AlcalinoFcido
7AlcFA80
Posi(ivaPico de +la#(a $o*o "
P$o+#ndidad ama$illo0Medio AlcalinoFcido
7AlcFA80MOVILIDAD Posi(iva Posi(iva
Ac0 SUL'KIDRICO Ne!a(iva Ne!a(iva
INDOL Posi(iva Posi(iva
RO1O DE METILO Ne!a(iva Ne!a(iva
VO,ES PROSQAEUR Ne!a(iva Ne!a(iva
CITRATO DE SIMMONS Posi(ivaP$esen(a c$ecimien(o con
li!e$o cam)io decolo$acin hacia #n (ono
a.#l ve$doso
Posi(ivaP$esen(a li!e$o
c$ecimien(o con cam)iode colo$acin hacia #n
(ono a.#l in(enso
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
33/46
COLONIA endo(Hico es #na mani+es(acin4o(encialmen(e le(al de la in+eccin 4a$ en(e$o)ac(e$ia0
Me(odolo!-a " Res#l(ados0
La me(odolo!-a desc$i(a cons(a de c#a($o sesiones&
50 P$e4a$acin de las m#es($as " c#l(ivo en #n medio selec(ivo60 Aislamien(o " o)se$vacin de las ca$ac(e$-s(icas mac$osc4icas "
mic$osc4icas de las en(e$o)ac(e$ias
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
41/46
An(es de comen.a$ a ($a)a*a$ +#e im4o$(an(e $eali.a$ la es(e$ili.acin de /$ea de
($a)a*o 4a$a evi(a$ c#al3#ie$ (i4o de con(aminacin0Pa$a el c#l(ivo de la m#es($a es(as +#e$on ($a(adas de dos mane$as&
50 Dil#cin de la m#es($a 5&5?: 3#e consis(e en (oma$ 5ml de la m#es($a "
dil#i$la en @ml de Sol#cin Salina Iso(nica es(2$il 7SSI860 M#es($a di$ec(a: sin nin!%n (i4o de dil#cin
En am)os casos el c#l(ivo se $eali. de la misma mane$a& Con a"#da de #n el asa
)ac(e$iol!ica es(2$il se (om #na 4e3#eBa can(idad de la m#es($a de a!#a " se
4$ocede a es($ia$ el inoc#lo en la ca*a de Pe($i so)$e el a!a$ si!#iendo #n 4a($n
de c#a($o c#ad$an(es " #na es($-a a)ie$(a0
Cada a!a$ se sell con #n 4eda.o de mas>in! " se e(i3#e( con los da(os
$e3#e$idos es4eci+icando el n%me$o de m#es($a " si e$a dil#ida o no dil#ida0 Lasca*as de a!a$ MacCon>e" se lleva$on a inc#)a$ d#$an(e 6= ho$as0
SE,UNDA SESION&
Des4#2s de 3#e las m#es($a inc#)a$on d#$an(e 6= ho$as se 4$ocedi a la
seleccin de colonias desa$$olladas de a!a$ MacCon>e"0 En el caso de las
m#es($as o)(enidas de& cha$co de a!#a s#cia: c#)e(a con a!#a de ll#via: a!#a de
la llave " a!#a es(ancada del $io Le$ma se encon($ #n c$ecimien(o o desa$$ollo de
#na colonia )ac(e$iana o)se$vando ma"o$ desa$$ollo en el c#l(ivo no dil#ido acom4a$acin con el c#l(ivo dil#ido0 Se 4$ocedi a $eali.a$ la $esiem)$a de las
colonias desa$$olladas en a!a$ MacCon>e" 4a$a o)(ene$ c#l(ivo 4#$o de )ac(e$ias0
Pos(e$io$men(e se $eali. la o)se$vacin mic$osc4ica de los c#l(ivos
seleccionados 4o$ Tincin de ,$am0 Si!#iendo la me(odolo!-a de la 4$/c(ica se
4$e4a$ el +$o(is " la (incin 4a$a la o)se$vacin mic$osc4ica de las colonias
c#l(ivadas " as- de(e$mina$ si las en(e$o)ac(e$ias 4$esen(es e$an de ca$/c(e$
,$amGo ,$am
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
42/46
Al o)se$va$ las (inciones al mic$osco4io se de(e$min 3#e las en(e$o)ac(e$ias
4$esen(es en dicha m#es($a e$an de ca$/c(e$ ,$amGde)ido a 3#e 4$esen(a)an
#na colo$acin a.#l viole(a0
TERCERA SESION&
P$#e)a Ca(alasa&
En.ima 3#e descom4one el 4e$Hido de hid$o!eno en oH-!eno " a!#a oHi!enada0
Las )ac(e$ias 3#e con Ca(alasa 4osi(iva li)e$an oHi!eno 3#e se mani+ies(a con la
li)e$acin de 4e3#eBas )#$)#*as0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
43/46
P$#e)a OHidasa&
Todas las en(e$o)ac(e$ias dan #na $eaccin ne!a(iva0 Pseudomona " Neisseria
son 4osi(ivas0
Las )ac(e$ias oHidasa 4osi(ivas 4$od#cen #n colo$ ne!$o o a.#l in(enso en 5?se!0
La $eaccin se conside$a 4osi(iva si oc#$$e en($e los 5? " ? se!#ndos 4os(e$io$es0
Si el desa$$ollo de colo$ se da des4#2s de ? se!#ndos la 4$#e)a se conside$a
Ne!a(iva0
P$#e)a M#es($a 5 M#es($a 6 M#es($a < M#es($a =
Ca(alasa G G G GOHidasa G G G G
Siem)$a en medios 4a$a 4$#e)as )io3#-micas&
50 P$#e)a Vo!es 9 P$os>a#e$ F Ro*o de me(iloCon el asa )ac(e$iol!ica (oma$ #n inoc#lo li!e$o del c#l(ivo 4#$o de )ac(e$ias "
s#s4ende$lo en #n (#)o con caldo VPRM
60 Ci($a(o de SimmonsCon el asa )ac(e$iol!ica (oma$ #n inoc#lo li!e$o del c#l(ivo 4#$o " si2m)$alo en
+o$ma de #na es($-a a)ie$(a so)$e el /$ea inclinada del medio0
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
44/46
=0 Caldo U$eaCon el asa )ac(e$iol!ica (oma$ #n inoc#lo 4oco denso del c#l(ivo 4#$o de
)ac(e$ias " si2m)$alo en el caldo #$ea0
;0 A!a$ Kie$$o T$i4le A.%ca$ 7TSI8Con el asa )ac(e$iol!ica se (oma #n inoc#lo 4oco denso del c#l(ivo 4#$o de
)ac(e$ias " si2m)$alo 4o$ 4icad#$a en el +ondo " en +o$ma de #na es($-a en la
s#4e$+icie
Se $eali.a$on los mismos 4asos en c#a($o ocasiones: #na con cada m#es($a
di+e$en(e0 Todos los (#)os se de*a$on inc#)a$ d#$an(e 6= ho$as
CUARTA SESIN&
In(e$4$e(acin de las 4$#e)as de iden(i+icacin )io3#-mica
@8 Vo!esP$os>a#e$ F Ro*o de me(ilo P$#e)a 4osi(iva& Colo$ $o*o en el medio 74$esenciad e ace(o-na8 P$#e)a ne!a(iva& Colo$ ama$illo co)$i.o en el medio
El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva
5?8Ro*o de Me(ilo P$#e)a 4osi(iva& Colo$ $o*o en el medio P$#e)a $e(a$dada& Colo$ ana$an*ado P$#e)a ne!a(iva& Colo$ ama$illo en el medio
El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva
558 Ci($a(o de Simmons
P$#e)a 4osi(iva& C$ecimien(o con colo$ a.#l in(enso en la .ona inclinada del4ico de +la#(a
P$#e)a ne!a(iva& No se o)se$va c$ecimien(o ni cam)io de colo$
El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva
568Indol P$#e)a 4osi(iva& Colo$ ne!$o en la 4icad#$a o en (odo el (#)o
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
45/46
P$#e)a ne!a(iva& A#sencia de colo$ ne!$o en (odo el (#)o
El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva
5
7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A
46/46
ve$doso (ono a.#lin(enso
(ono a.#lin(enso
(ono a.#lin(enso
Indol Ne!a(iva Ne!a(iva Ne!a(iva Posi(iva
cido S#l+h-d$ico7K6S8
Posi(iva Ne!a(iva Ne!a(iva Posi(iva
Movilidad Posi(iva Ne!a(iva Ne!a(iva Ne!a(ivaU$easa Posi(iva Ne!a(iva Ne!a(iva Posi(iva
TSI 7hie$$o ($i4lea.%ca$8
Ne!a(ivaPico de
+la#(a $o*o "P$o+#ndidad
ama$illo0Medio
AlcalinoFcido 7AlcFA80
Posi(ivaPico de
+la#(a $o*o "P$o+#ndidad
ama$illo0Medio
AlcalinoFcido 7AlcFA80
Ne!a(ivaPico de
+la#(a $o*o "P$o+#ndidad
ama$illo0Medio
AlcalinoFcido 7AlcFA80
Posi(ivaPico de
+la#(a $o*o "P$o+#ndidad
ama$illo0Medio
AlcalinoFcido 7AlcFA80
Recommended