PREINFORME DE PRAacuteCTICAS DE LABORATORIOBIOQUIMICA METABOLICA
PresentadoYesid Gerardo Corredor Amaya
PRESENTADO AJAIRO GRANADOS MORENOMARIA GABRIELA ROMERO
TUTOR
TEMA Ndeg1 ACTIVIDAD UREAacuteSICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLOacuteGICO
INTRODUCCIOacuteN
La ureasa se encuentra presente en varios tejidos pertenecientes a los vegetales por lo tanto es faacutecil su determinacioacuten de urea existente en diferentes materias primas vegetales por el meacutetodo la ureasa es raacutepida y sencilla razones por las que su uso se ha generalizado Los resultados se expresan en unidades de pH pudiendo variar desde 00 hasta un maacuteximo de 20 a 25 unidades grano crudo
de Kjeldhal o por titulacioacuten del amonio liberado titulando hidroacutexido de aluminio que es producido por la hidrolisis utilizando el meacutetodo estequiometrico ya que se producen producen 2 moles de NH4OH por cada mol de urea desdoblada
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS 21Materiales y equipos requeridos
Materiales EquiposTubos de ensayo con gradilla
Balanza analiacutetica
Erlenmeyer de125mL
Agitadores magneacuteticos
Pipetas de 5 y 10mL Cronometromatraz aforado de 100mL Caacutemara fotograacuteficaBantildeo termostatadoBeaker de400mLBureta de 25mLSoporte universalPinzas para buretaProbeta
22 Reactivo requeridos
Reactivo Foacutermula Conc
Ureasa 01
Urea CO(NH2)2 025M
Cloruro de mercurio HgCl2 1
Aacutecido clorhiacutedrico HCl 01N
Buffer fosfato pH 70
Indicador de Tashiro
2 3 Procedimiento
231 En campo en la toma de muestra se quiere saber cuaacutel es la calidad de la materia prima con la que estamos trabajando o cuando se quiere analizar el contenido de urea que contienen los alimentos la sangre orina o tejidos vegetales se realizar toma de muestra de forraje o de suelo calculando el peso en gramos
232 En el laboratorio
Peso muestras Wm Extraccioacuten con NaCl 1 Centrifugacioacuten Filtracioacuten medida sobrenadante Vs Titulacioacuten con HCl Registro de mL gastados VHCl Tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
Indicadores
Muestras analzadasForraje Concen
tradoSuelo Origen
Wm (g)
Vf (mL)
V HCl (mL)
Agregar 10 g de muestra
En tubo centrifuga
Agregar 1o ml de Na Cl al 1
Agitar Centrifugar a 3500 rpn
Medir descartar
Filtrar mediren probeta
Pasar a tubo de ensayo Rotular
Obtener extracto
4 RESULTADOS ESPERADOSAl aparecer un color rosado-violaacuteceo en la muestra que contiene el color blanco indica que los equivalentes-gramo del hidroacutexido de amonio fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del aacutecido clorhiacutedricoRealizar el procedimiento con los demaacutes tubos y registrar el HCl que fue empleado para cada tubo
5 GLOSARIO
TITULACIOacuteN es un meacutetodo de anaacutelisis quiacutemico cuantitativo en el laboratorio que se utiliza para determinar la concentracioacuten desconocida de un reactivo conocido
Sustrato El teacutermino sustrato se refiere al material que utilizamos para llenar el recipiente de cultivo y que en cierto modo es el sustituto de la tierra
ureasa es una enzima que cataliza la hidroacutelisis de urea a dioacutexido de carbono y amoniacuteaco
Centrifugacioacuten Es un meacutetodo por el cual se pueden separar soacutelidos de liacutequidos de diferente densidad por medio de una fuerza giratoria
REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiAnC3A1lisis_volumC3A9trico
httpseswikipediaorgwikiCentrifugaciC3B3n
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
wwwjuntadeandaluciaesaverroes06apuntes_formulacionpdf
wwwhorturbacomcastellanocultivarficha_manejophpID=19
TEMA Ndeg2 CARBONO ORGAacuteNICO MATERIA ORGAacuteNICA Y CAPACIDAD AMORTIGUADORA (szlig) DE SUELOS
INTRODUCCIOacuteN
las reacciones enzimaacuteticas las cuales pueden ser con sustancias acidas o bases con las cuales debemos tener mucho cuidado ya que las especies vegetales y animales deben tener un pH adecuado de tal manera que se podraacute obtener un oacuteptimo rendimiento y desarrollo de los organismos en el caso de las plantas si el cultivo establecido no cuenta con un pH optimo seraacute muy difiacutecil lograr que las plantas asimilen los nutrientes causando que las reacciones catalizadas por enzimas no tengan una velocidad constante y se dificulte el proceso de sobrevivencia en la planta
Para lograr un perfecto balance se requiere una buena capacidad amortiguadora o potencial quiacutemico que tienen los sistemas edaacuteficos para regular y controlar su pH cuando son sometidos a procesos de acidificacioacuten o alcalinizacioacuten
MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
1 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
MaterialEquipo CaracteriacutesticasPotencioacutemetroPipetas graduadas 10 mLEquipo de titulacioacuten Pyrex medianosBureta graduada 25mLErlenmeyer De 125mLBeaker 250 mlSoporte universal Metaacutelico con pinza para
buretaMuestras Concentrado orina sangre y
forrajeEspaacutetula metaacutelicaAgitador De vidrioProbeta graduada 100mlBalanza digital
22 Reactivos requeridos
Dicromato de potasio
H2SO4
concentradoK2Cr2O7 1N
Difenilamina
SUELO
MATERIA ORGANICA
HUMOS HUMINAS ACIDO
ORANICO
MICROORGANISMOS
REACCIONES BIOQUIMICA
S ENZIMATICAS
RESULTADO DE PROCESOS
BIOQUIIMICOS
HUMNEDAD
BALANCE ELECRROLITICO
Sulfato de hierro FeSO4 1NHidroacutexido de sodio
NaOH 01N
Aacutecido Clorhidrico
HCl 01N
Fenolftaleiacutena C20H14O4 oacuteC6H4COOC(C6H4--HOH)2
Agua destiladaSolucioacuten buffer fosfato
HPO4H3PO4
23 Procedimiento
231 En el campo Realizar toma de muestra
232 En el laboratorio Para Carbono Orgaacutenico (CO) aplicar el Meacutetodo de titulacioacuten volumeacutetrica Para Carbono Orgaacutenico (CO) Meacutetodo Espectrofotomeacutetrico para La Capacidad amortiguadora el Meacutetodo Potenciomeacutetrico
2 DIAGRAMA DE FLUJO
3 TABLA DE DATOSCarbono orgaacutenico meacutetodos volumeacutetricos y para capacidad amortiguadora de muestras bioloacutegicas espectrofotomeacutetrico
Muestras Valores EvaluadosWm (g) Vm (ml) pH 1 pH 2
ConcentradoHarinaForraje
Datos potenciomeacutetricos para capacidad amortiguadora de Suelos
MuestrasSuelo 1
Peso (Wm)
Vol (mL)
pH1 pH2
Suelo 2Agua destilada
Solucioacuten Buffer
ADICIONAR +- 20 GRAMOS DE
SUELO Y 40 ML DE AGUA
DESTILADA
AGITAR EN AGITADOR
MAGNEacuteTICO POR 5MIN
ESPERAR 60 SEGUNDOS Y
OBSERVAR EL PH CON EL ELECTRODO DEL POTECIOMETRO
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR DE NUEVO
POR UN MINUTO Y MEDIR EL PH2
TERCER Y CUARTO BEAKERS ADICIONAR
20ML DE AGUA DESTILADA Y 20 ML DE SOLUCIOacuteN BUFFER PH
70
ESPERAR 60 SEGUNDOS TOMAR
EL PH
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR
MEDIR PH
REGISTRAR TODOS LOS
VALORES
Variable(indicador) evaluada(o)
Teacutecnica analiacutetica utilizada
pH Meacutetodo potenciomeacutetricoCapacidad Amortiguadora Meacutetodo titulacioacuten
volumeacutetrica
TABLA 3 Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas
Muestras β (mEq HCl
ΔpH)
β(mEqNaOHΔpH)
P (β) HCl
P (β) NaOH
ConcentradoHarinaForraje
3 RESULTADOS ESPERADOS
Al Colocar el Erlenmeyer oacute beaker que contiene la solucioacuten diluida de suelo debajo de la bureta y Titular lentamente adicionando el sulfato sobre la solucioacuten hasta debe aparecer y permanecer un color verde esmeralda brillanteCarbono orgaacutenicoMateria OrgaacutenicaNitroacutegeno total
4 GLOSARIO
ESPECTROFOTOacuteMETRO es un instrumento usado en el anaacutelisis quiacutemico que sirve para medir en funcioacuten de la longitud de onda la relacioacuten entre valores de una misma magnitud fotomeacutetrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracioacuten o reacciones quiacutemicas que se miden en una muestra
CAPACIDAD AMORTIGUADORA La capacidad amortiguadora de un tampoacuten es la cantidad de aacutecido o de base que se puede agregar antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable y estaacute determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par aacutecidobase conjugado
MEacuteTODO POTENCIOMEacuteTRICO Sirve para medir el Ph de una solucioacuten
5 REFERNCIAS
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotC3B3metro
httpdocenciaudeaeducocenQuimicaAnaliticaIIpot1html
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA Ndeg3 DETERMINACIOacuteN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE) EN FORRAJES POR EL MEacuteTODO DE NELSON-SOMOGYI
INTRODUCCIOacuteN
por el meacutetodo de fenol-aacutecido sulfuacuterico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos liacutequidos extractos liacutequidos materiales de celulosa entre otros esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio ya que los azucares simples oligosacaacuteridos polisacaacuteridos y sus derivados dan una coloracioacuten al entrar en contacto con fenol aacutecido sulfuacuterico
Las plantas vegetales estaacuten compuestos por carbohidratos estructurales y no estructurales los no estructurales se almacenan en oacuterganos vegetativos como raiacuteces rizomas estolones coronas y parte inferiores del tallo Los principales CNET en los tejidos de especies forrajeras son monosacaacuteridos como glucosa y fructosa disacaacuteridos como sucrosa y maltosa y polisacaacuteridos como almidones y fructosanos
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
Materiales y equipos
Materiales EquiposVidrieriacutea Tubos de ensayo
Gradillapinzas para bureta
Filtradopara carbohidratos no estructurales
erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal
Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Fenol C6H5OH 5
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N
Hidroacutexido de sodio NaOH O6N
Agua destilada H2O 20 mL
Glucosa C6H12O6 1
Procedimiento
En el campo Realizar toma de muestras
En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos
Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro
Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales
Lectura espectrofometrica
Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)
Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE
Indicadores Descripcioacuten Valor
wm Peso de la muestra
V FVolumen del filtrado
A st Absorbancia del estaacutendar
Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE
5 RESULTADOS ESPERADOS
La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles
6 GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos
ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas
El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR
AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL
06N
AGITAR DURANTE 3 MINUTOS
LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN
AL BANtildeO TERMOSTATADO
CALENTAR A 90degCDURANTE 20
MIN
DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR
SOBRE PAPEL FILTRO
MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO
ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N
AGITAR POR 15 SEGUNDOS
TAPAR Y ROTULAR
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
wwwprofesorenlineaCl
- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA Ndeg1 ACTIVIDAD UREAacuteSICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLOacuteGICO
INTRODUCCIOacuteN
La ureasa se encuentra presente en varios tejidos pertenecientes a los vegetales por lo tanto es faacutecil su determinacioacuten de urea existente en diferentes materias primas vegetales por el meacutetodo la ureasa es raacutepida y sencilla razones por las que su uso se ha generalizado Los resultados se expresan en unidades de pH pudiendo variar desde 00 hasta un maacuteximo de 20 a 25 unidades grano crudo
de Kjeldhal o por titulacioacuten del amonio liberado titulando hidroacutexido de aluminio que es producido por la hidrolisis utilizando el meacutetodo estequiometrico ya que se producen producen 2 moles de NH4OH por cada mol de urea desdoblada
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS 21Materiales y equipos requeridos
Materiales EquiposTubos de ensayo con gradilla
Balanza analiacutetica
Erlenmeyer de125mL
Agitadores magneacuteticos
Pipetas de 5 y 10mL Cronometromatraz aforado de 100mL Caacutemara fotograacuteficaBantildeo termostatadoBeaker de400mLBureta de 25mLSoporte universalPinzas para buretaProbeta
22 Reactivo requeridos
Reactivo Foacutermula Conc
Ureasa 01
Urea CO(NH2)2 025M
Cloruro de mercurio HgCl2 1
Aacutecido clorhiacutedrico HCl 01N
Buffer fosfato pH 70
Indicador de Tashiro
2 3 Procedimiento
231 En campo en la toma de muestra se quiere saber cuaacutel es la calidad de la materia prima con la que estamos trabajando o cuando se quiere analizar el contenido de urea que contienen los alimentos la sangre orina o tejidos vegetales se realizar toma de muestra de forraje o de suelo calculando el peso en gramos
232 En el laboratorio
Peso muestras Wm Extraccioacuten con NaCl 1 Centrifugacioacuten Filtracioacuten medida sobrenadante Vs Titulacioacuten con HCl Registro de mL gastados VHCl Tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
Indicadores
Muestras analzadasForraje Concen
tradoSuelo Origen
Wm (g)
Vf (mL)
V HCl (mL)
Agregar 10 g de muestra
En tubo centrifuga
Agregar 1o ml de Na Cl al 1
Agitar Centrifugar a 3500 rpn
Medir descartar
Filtrar mediren probeta
Pasar a tubo de ensayo Rotular
Obtener extracto
4 RESULTADOS ESPERADOSAl aparecer un color rosado-violaacuteceo en la muestra que contiene el color blanco indica que los equivalentes-gramo del hidroacutexido de amonio fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del aacutecido clorhiacutedricoRealizar el procedimiento con los demaacutes tubos y registrar el HCl que fue empleado para cada tubo
5 GLOSARIO
TITULACIOacuteN es un meacutetodo de anaacutelisis quiacutemico cuantitativo en el laboratorio que se utiliza para determinar la concentracioacuten desconocida de un reactivo conocido
Sustrato El teacutermino sustrato se refiere al material que utilizamos para llenar el recipiente de cultivo y que en cierto modo es el sustituto de la tierra
ureasa es una enzima que cataliza la hidroacutelisis de urea a dioacutexido de carbono y amoniacuteaco
Centrifugacioacuten Es un meacutetodo por el cual se pueden separar soacutelidos de liacutequidos de diferente densidad por medio de una fuerza giratoria
REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiAnC3A1lisis_volumC3A9trico
httpseswikipediaorgwikiCentrifugaciC3B3n
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
wwwjuntadeandaluciaesaverroes06apuntes_formulacionpdf
wwwhorturbacomcastellanocultivarficha_manejophpID=19
TEMA Ndeg2 CARBONO ORGAacuteNICO MATERIA ORGAacuteNICA Y CAPACIDAD AMORTIGUADORA (szlig) DE SUELOS
INTRODUCCIOacuteN
las reacciones enzimaacuteticas las cuales pueden ser con sustancias acidas o bases con las cuales debemos tener mucho cuidado ya que las especies vegetales y animales deben tener un pH adecuado de tal manera que se podraacute obtener un oacuteptimo rendimiento y desarrollo de los organismos en el caso de las plantas si el cultivo establecido no cuenta con un pH optimo seraacute muy difiacutecil lograr que las plantas asimilen los nutrientes causando que las reacciones catalizadas por enzimas no tengan una velocidad constante y se dificulte el proceso de sobrevivencia en la planta
Para lograr un perfecto balance se requiere una buena capacidad amortiguadora o potencial quiacutemico que tienen los sistemas edaacuteficos para regular y controlar su pH cuando son sometidos a procesos de acidificacioacuten o alcalinizacioacuten
MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
1 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
MaterialEquipo CaracteriacutesticasPotencioacutemetroPipetas graduadas 10 mLEquipo de titulacioacuten Pyrex medianosBureta graduada 25mLErlenmeyer De 125mLBeaker 250 mlSoporte universal Metaacutelico con pinza para
buretaMuestras Concentrado orina sangre y
forrajeEspaacutetula metaacutelicaAgitador De vidrioProbeta graduada 100mlBalanza digital
22 Reactivos requeridos
Dicromato de potasio
H2SO4
concentradoK2Cr2O7 1N
Difenilamina
SUELO
MATERIA ORGANICA
HUMOS HUMINAS ACIDO
ORANICO
MICROORGANISMOS
REACCIONES BIOQUIMICA
S ENZIMATICAS
RESULTADO DE PROCESOS
BIOQUIIMICOS
HUMNEDAD
BALANCE ELECRROLITICO
Sulfato de hierro FeSO4 1NHidroacutexido de sodio
NaOH 01N
Aacutecido Clorhidrico
HCl 01N
Fenolftaleiacutena C20H14O4 oacuteC6H4COOC(C6H4--HOH)2
Agua destiladaSolucioacuten buffer fosfato
HPO4H3PO4
23 Procedimiento
231 En el campo Realizar toma de muestra
232 En el laboratorio Para Carbono Orgaacutenico (CO) aplicar el Meacutetodo de titulacioacuten volumeacutetrica Para Carbono Orgaacutenico (CO) Meacutetodo Espectrofotomeacutetrico para La Capacidad amortiguadora el Meacutetodo Potenciomeacutetrico
2 DIAGRAMA DE FLUJO
3 TABLA DE DATOSCarbono orgaacutenico meacutetodos volumeacutetricos y para capacidad amortiguadora de muestras bioloacutegicas espectrofotomeacutetrico
Muestras Valores EvaluadosWm (g) Vm (ml) pH 1 pH 2
ConcentradoHarinaForraje
Datos potenciomeacutetricos para capacidad amortiguadora de Suelos
MuestrasSuelo 1
Peso (Wm)
Vol (mL)
pH1 pH2
Suelo 2Agua destilada
Solucioacuten Buffer
ADICIONAR +- 20 GRAMOS DE
SUELO Y 40 ML DE AGUA
DESTILADA
AGITAR EN AGITADOR
MAGNEacuteTICO POR 5MIN
ESPERAR 60 SEGUNDOS Y
OBSERVAR EL PH CON EL ELECTRODO DEL POTECIOMETRO
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR DE NUEVO
POR UN MINUTO Y MEDIR EL PH2
TERCER Y CUARTO BEAKERS ADICIONAR
20ML DE AGUA DESTILADA Y 20 ML DE SOLUCIOacuteN BUFFER PH
70
ESPERAR 60 SEGUNDOS TOMAR
EL PH
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR
MEDIR PH
REGISTRAR TODOS LOS
VALORES
Variable(indicador) evaluada(o)
Teacutecnica analiacutetica utilizada
pH Meacutetodo potenciomeacutetricoCapacidad Amortiguadora Meacutetodo titulacioacuten
volumeacutetrica
TABLA 3 Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas
Muestras β (mEq HCl
ΔpH)
β(mEqNaOHΔpH)
P (β) HCl
P (β) NaOH
ConcentradoHarinaForraje
3 RESULTADOS ESPERADOS
Al Colocar el Erlenmeyer oacute beaker que contiene la solucioacuten diluida de suelo debajo de la bureta y Titular lentamente adicionando el sulfato sobre la solucioacuten hasta debe aparecer y permanecer un color verde esmeralda brillanteCarbono orgaacutenicoMateria OrgaacutenicaNitroacutegeno total
4 GLOSARIO
ESPECTROFOTOacuteMETRO es un instrumento usado en el anaacutelisis quiacutemico que sirve para medir en funcioacuten de la longitud de onda la relacioacuten entre valores de una misma magnitud fotomeacutetrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracioacuten o reacciones quiacutemicas que se miden en una muestra
CAPACIDAD AMORTIGUADORA La capacidad amortiguadora de un tampoacuten es la cantidad de aacutecido o de base que se puede agregar antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable y estaacute determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par aacutecidobase conjugado
MEacuteTODO POTENCIOMEacuteTRICO Sirve para medir el Ph de una solucioacuten
5 REFERNCIAS
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotC3B3metro
httpdocenciaudeaeducocenQuimicaAnaliticaIIpot1html
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA Ndeg3 DETERMINACIOacuteN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE) EN FORRAJES POR EL MEacuteTODO DE NELSON-SOMOGYI
INTRODUCCIOacuteN
por el meacutetodo de fenol-aacutecido sulfuacuterico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos liacutequidos extractos liacutequidos materiales de celulosa entre otros esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio ya que los azucares simples oligosacaacuteridos polisacaacuteridos y sus derivados dan una coloracioacuten al entrar en contacto con fenol aacutecido sulfuacuterico
Las plantas vegetales estaacuten compuestos por carbohidratos estructurales y no estructurales los no estructurales se almacenan en oacuterganos vegetativos como raiacuteces rizomas estolones coronas y parte inferiores del tallo Los principales CNET en los tejidos de especies forrajeras son monosacaacuteridos como glucosa y fructosa disacaacuteridos como sucrosa y maltosa y polisacaacuteridos como almidones y fructosanos
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
Materiales y equipos
Materiales EquiposVidrieriacutea Tubos de ensayo
Gradillapinzas para bureta
Filtradopara carbohidratos no estructurales
erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal
Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Fenol C6H5OH 5
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N
Hidroacutexido de sodio NaOH O6N
Agua destilada H2O 20 mL
Glucosa C6H12O6 1
Procedimiento
En el campo Realizar toma de muestras
En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos
Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro
Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales
Lectura espectrofometrica
Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)
Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE
Indicadores Descripcioacuten Valor
wm Peso de la muestra
V FVolumen del filtrado
A st Absorbancia del estaacutendar
Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE
5 RESULTADOS ESPERADOS
La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles
6 GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos
ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas
El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR
AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL
06N
AGITAR DURANTE 3 MINUTOS
LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN
AL BANtildeO TERMOSTATADO
CALENTAR A 90degCDURANTE 20
MIN
DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR
SOBRE PAPEL FILTRO
MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO
ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N
AGITAR POR 15 SEGUNDOS
TAPAR Y ROTULAR
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
wwwprofesorenlineaCl
- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
22 Reactivo requeridos
Reactivo Foacutermula Conc
Ureasa 01
Urea CO(NH2)2 025M
Cloruro de mercurio HgCl2 1
Aacutecido clorhiacutedrico HCl 01N
Buffer fosfato pH 70
Indicador de Tashiro
2 3 Procedimiento
231 En campo en la toma de muestra se quiere saber cuaacutel es la calidad de la materia prima con la que estamos trabajando o cuando se quiere analizar el contenido de urea que contienen los alimentos la sangre orina o tejidos vegetales se realizar toma de muestra de forraje o de suelo calculando el peso en gramos
232 En el laboratorio
Peso muestras Wm Extraccioacuten con NaCl 1 Centrifugacioacuten Filtracioacuten medida sobrenadante Vs Titulacioacuten con HCl Registro de mL gastados VHCl Tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
Indicadores
Muestras analzadasForraje Concen
tradoSuelo Origen
Wm (g)
Vf (mL)
V HCl (mL)
Agregar 10 g de muestra
En tubo centrifuga
Agregar 1o ml de Na Cl al 1
Agitar Centrifugar a 3500 rpn
Medir descartar
Filtrar mediren probeta
Pasar a tubo de ensayo Rotular
Obtener extracto
4 RESULTADOS ESPERADOSAl aparecer un color rosado-violaacuteceo en la muestra que contiene el color blanco indica que los equivalentes-gramo del hidroacutexido de amonio fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del aacutecido clorhiacutedricoRealizar el procedimiento con los demaacutes tubos y registrar el HCl que fue empleado para cada tubo
5 GLOSARIO
TITULACIOacuteN es un meacutetodo de anaacutelisis quiacutemico cuantitativo en el laboratorio que se utiliza para determinar la concentracioacuten desconocida de un reactivo conocido
Sustrato El teacutermino sustrato se refiere al material que utilizamos para llenar el recipiente de cultivo y que en cierto modo es el sustituto de la tierra
ureasa es una enzima que cataliza la hidroacutelisis de urea a dioacutexido de carbono y amoniacuteaco
Centrifugacioacuten Es un meacutetodo por el cual se pueden separar soacutelidos de liacutequidos de diferente densidad por medio de una fuerza giratoria
REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiAnC3A1lisis_volumC3A9trico
httpseswikipediaorgwikiCentrifugaciC3B3n
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
wwwjuntadeandaluciaesaverroes06apuntes_formulacionpdf
wwwhorturbacomcastellanocultivarficha_manejophpID=19
TEMA Ndeg2 CARBONO ORGAacuteNICO MATERIA ORGAacuteNICA Y CAPACIDAD AMORTIGUADORA (szlig) DE SUELOS
INTRODUCCIOacuteN
las reacciones enzimaacuteticas las cuales pueden ser con sustancias acidas o bases con las cuales debemos tener mucho cuidado ya que las especies vegetales y animales deben tener un pH adecuado de tal manera que se podraacute obtener un oacuteptimo rendimiento y desarrollo de los organismos en el caso de las plantas si el cultivo establecido no cuenta con un pH optimo seraacute muy difiacutecil lograr que las plantas asimilen los nutrientes causando que las reacciones catalizadas por enzimas no tengan una velocidad constante y se dificulte el proceso de sobrevivencia en la planta
Para lograr un perfecto balance se requiere una buena capacidad amortiguadora o potencial quiacutemico que tienen los sistemas edaacuteficos para regular y controlar su pH cuando son sometidos a procesos de acidificacioacuten o alcalinizacioacuten
MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
1 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
MaterialEquipo CaracteriacutesticasPotencioacutemetroPipetas graduadas 10 mLEquipo de titulacioacuten Pyrex medianosBureta graduada 25mLErlenmeyer De 125mLBeaker 250 mlSoporte universal Metaacutelico con pinza para
buretaMuestras Concentrado orina sangre y
forrajeEspaacutetula metaacutelicaAgitador De vidrioProbeta graduada 100mlBalanza digital
22 Reactivos requeridos
Dicromato de potasio
H2SO4
concentradoK2Cr2O7 1N
Difenilamina
SUELO
MATERIA ORGANICA
HUMOS HUMINAS ACIDO
ORANICO
MICROORGANISMOS
REACCIONES BIOQUIMICA
S ENZIMATICAS
RESULTADO DE PROCESOS
BIOQUIIMICOS
HUMNEDAD
BALANCE ELECRROLITICO
Sulfato de hierro FeSO4 1NHidroacutexido de sodio
NaOH 01N
Aacutecido Clorhidrico
HCl 01N
Fenolftaleiacutena C20H14O4 oacuteC6H4COOC(C6H4--HOH)2
Agua destiladaSolucioacuten buffer fosfato
HPO4H3PO4
23 Procedimiento
231 En el campo Realizar toma de muestra
232 En el laboratorio Para Carbono Orgaacutenico (CO) aplicar el Meacutetodo de titulacioacuten volumeacutetrica Para Carbono Orgaacutenico (CO) Meacutetodo Espectrofotomeacutetrico para La Capacidad amortiguadora el Meacutetodo Potenciomeacutetrico
2 DIAGRAMA DE FLUJO
3 TABLA DE DATOSCarbono orgaacutenico meacutetodos volumeacutetricos y para capacidad amortiguadora de muestras bioloacutegicas espectrofotomeacutetrico
Muestras Valores EvaluadosWm (g) Vm (ml) pH 1 pH 2
ConcentradoHarinaForraje
Datos potenciomeacutetricos para capacidad amortiguadora de Suelos
MuestrasSuelo 1
Peso (Wm)
Vol (mL)
pH1 pH2
Suelo 2Agua destilada
Solucioacuten Buffer
ADICIONAR +- 20 GRAMOS DE
SUELO Y 40 ML DE AGUA
DESTILADA
AGITAR EN AGITADOR
MAGNEacuteTICO POR 5MIN
ESPERAR 60 SEGUNDOS Y
OBSERVAR EL PH CON EL ELECTRODO DEL POTECIOMETRO
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR DE NUEVO
POR UN MINUTO Y MEDIR EL PH2
TERCER Y CUARTO BEAKERS ADICIONAR
20ML DE AGUA DESTILADA Y 20 ML DE SOLUCIOacuteN BUFFER PH
70
ESPERAR 60 SEGUNDOS TOMAR
EL PH
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR
MEDIR PH
REGISTRAR TODOS LOS
VALORES
Variable(indicador) evaluada(o)
Teacutecnica analiacutetica utilizada
pH Meacutetodo potenciomeacutetricoCapacidad Amortiguadora Meacutetodo titulacioacuten
volumeacutetrica
TABLA 3 Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas
Muestras β (mEq HCl
ΔpH)
β(mEqNaOHΔpH)
P (β) HCl
P (β) NaOH
ConcentradoHarinaForraje
3 RESULTADOS ESPERADOS
Al Colocar el Erlenmeyer oacute beaker que contiene la solucioacuten diluida de suelo debajo de la bureta y Titular lentamente adicionando el sulfato sobre la solucioacuten hasta debe aparecer y permanecer un color verde esmeralda brillanteCarbono orgaacutenicoMateria OrgaacutenicaNitroacutegeno total
4 GLOSARIO
ESPECTROFOTOacuteMETRO es un instrumento usado en el anaacutelisis quiacutemico que sirve para medir en funcioacuten de la longitud de onda la relacioacuten entre valores de una misma magnitud fotomeacutetrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracioacuten o reacciones quiacutemicas que se miden en una muestra
CAPACIDAD AMORTIGUADORA La capacidad amortiguadora de un tampoacuten es la cantidad de aacutecido o de base que se puede agregar antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable y estaacute determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par aacutecidobase conjugado
MEacuteTODO POTENCIOMEacuteTRICO Sirve para medir el Ph de una solucioacuten
5 REFERNCIAS
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotC3B3metro
httpdocenciaudeaeducocenQuimicaAnaliticaIIpot1html
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA Ndeg3 DETERMINACIOacuteN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE) EN FORRAJES POR EL MEacuteTODO DE NELSON-SOMOGYI
INTRODUCCIOacuteN
por el meacutetodo de fenol-aacutecido sulfuacuterico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos liacutequidos extractos liacutequidos materiales de celulosa entre otros esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio ya que los azucares simples oligosacaacuteridos polisacaacuteridos y sus derivados dan una coloracioacuten al entrar en contacto con fenol aacutecido sulfuacuterico
Las plantas vegetales estaacuten compuestos por carbohidratos estructurales y no estructurales los no estructurales se almacenan en oacuterganos vegetativos como raiacuteces rizomas estolones coronas y parte inferiores del tallo Los principales CNET en los tejidos de especies forrajeras son monosacaacuteridos como glucosa y fructosa disacaacuteridos como sucrosa y maltosa y polisacaacuteridos como almidones y fructosanos
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
Materiales y equipos
Materiales EquiposVidrieriacutea Tubos de ensayo
Gradillapinzas para bureta
Filtradopara carbohidratos no estructurales
erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal
Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Fenol C6H5OH 5
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N
Hidroacutexido de sodio NaOH O6N
Agua destilada H2O 20 mL
Glucosa C6H12O6 1
Procedimiento
En el campo Realizar toma de muestras
En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos
Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro
Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales
Lectura espectrofometrica
Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)
Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE
Indicadores Descripcioacuten Valor
wm Peso de la muestra
V FVolumen del filtrado
A st Absorbancia del estaacutendar
Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE
5 RESULTADOS ESPERADOS
La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles
6 GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos
ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas
El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR
AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL
06N
AGITAR DURANTE 3 MINUTOS
LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN
AL BANtildeO TERMOSTATADO
CALENTAR A 90degCDURANTE 20
MIN
DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR
SOBRE PAPEL FILTRO
MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO
ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N
AGITAR POR 15 SEGUNDOS
TAPAR Y ROTULAR
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
wwwprofesorenlineaCl
- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
4 RESULTADOS ESPERADOSAl aparecer un color rosado-violaacuteceo en la muestra que contiene el color blanco indica que los equivalentes-gramo del hidroacutexido de amonio fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del aacutecido clorhiacutedricoRealizar el procedimiento con los demaacutes tubos y registrar el HCl que fue empleado para cada tubo
5 GLOSARIO
TITULACIOacuteN es un meacutetodo de anaacutelisis quiacutemico cuantitativo en el laboratorio que se utiliza para determinar la concentracioacuten desconocida de un reactivo conocido
Sustrato El teacutermino sustrato se refiere al material que utilizamos para llenar el recipiente de cultivo y que en cierto modo es el sustituto de la tierra
ureasa es una enzima que cataliza la hidroacutelisis de urea a dioacutexido de carbono y amoniacuteaco
Centrifugacioacuten Es un meacutetodo por el cual se pueden separar soacutelidos de liacutequidos de diferente densidad por medio de una fuerza giratoria
REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiAnC3A1lisis_volumC3A9trico
httpseswikipediaorgwikiCentrifugaciC3B3n
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
wwwjuntadeandaluciaesaverroes06apuntes_formulacionpdf
wwwhorturbacomcastellanocultivarficha_manejophpID=19
TEMA Ndeg2 CARBONO ORGAacuteNICO MATERIA ORGAacuteNICA Y CAPACIDAD AMORTIGUADORA (szlig) DE SUELOS
INTRODUCCIOacuteN
las reacciones enzimaacuteticas las cuales pueden ser con sustancias acidas o bases con las cuales debemos tener mucho cuidado ya que las especies vegetales y animales deben tener un pH adecuado de tal manera que se podraacute obtener un oacuteptimo rendimiento y desarrollo de los organismos en el caso de las plantas si el cultivo establecido no cuenta con un pH optimo seraacute muy difiacutecil lograr que las plantas asimilen los nutrientes causando que las reacciones catalizadas por enzimas no tengan una velocidad constante y se dificulte el proceso de sobrevivencia en la planta
Para lograr un perfecto balance se requiere una buena capacidad amortiguadora o potencial quiacutemico que tienen los sistemas edaacuteficos para regular y controlar su pH cuando son sometidos a procesos de acidificacioacuten o alcalinizacioacuten
MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
1 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
MaterialEquipo CaracteriacutesticasPotencioacutemetroPipetas graduadas 10 mLEquipo de titulacioacuten Pyrex medianosBureta graduada 25mLErlenmeyer De 125mLBeaker 250 mlSoporte universal Metaacutelico con pinza para
buretaMuestras Concentrado orina sangre y
forrajeEspaacutetula metaacutelicaAgitador De vidrioProbeta graduada 100mlBalanza digital
22 Reactivos requeridos
Dicromato de potasio
H2SO4
concentradoK2Cr2O7 1N
Difenilamina
SUELO
MATERIA ORGANICA
HUMOS HUMINAS ACIDO
ORANICO
MICROORGANISMOS
REACCIONES BIOQUIMICA
S ENZIMATICAS
RESULTADO DE PROCESOS
BIOQUIIMICOS
HUMNEDAD
BALANCE ELECRROLITICO
Sulfato de hierro FeSO4 1NHidroacutexido de sodio
NaOH 01N
Aacutecido Clorhidrico
HCl 01N
Fenolftaleiacutena C20H14O4 oacuteC6H4COOC(C6H4--HOH)2
Agua destiladaSolucioacuten buffer fosfato
HPO4H3PO4
23 Procedimiento
231 En el campo Realizar toma de muestra
232 En el laboratorio Para Carbono Orgaacutenico (CO) aplicar el Meacutetodo de titulacioacuten volumeacutetrica Para Carbono Orgaacutenico (CO) Meacutetodo Espectrofotomeacutetrico para La Capacidad amortiguadora el Meacutetodo Potenciomeacutetrico
2 DIAGRAMA DE FLUJO
3 TABLA DE DATOSCarbono orgaacutenico meacutetodos volumeacutetricos y para capacidad amortiguadora de muestras bioloacutegicas espectrofotomeacutetrico
Muestras Valores EvaluadosWm (g) Vm (ml) pH 1 pH 2
ConcentradoHarinaForraje
Datos potenciomeacutetricos para capacidad amortiguadora de Suelos
MuestrasSuelo 1
Peso (Wm)
Vol (mL)
pH1 pH2
Suelo 2Agua destilada
Solucioacuten Buffer
ADICIONAR +- 20 GRAMOS DE
SUELO Y 40 ML DE AGUA
DESTILADA
AGITAR EN AGITADOR
MAGNEacuteTICO POR 5MIN
ESPERAR 60 SEGUNDOS Y
OBSERVAR EL PH CON EL ELECTRODO DEL POTECIOMETRO
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR DE NUEVO
POR UN MINUTO Y MEDIR EL PH2
TERCER Y CUARTO BEAKERS ADICIONAR
20ML DE AGUA DESTILADA Y 20 ML DE SOLUCIOacuteN BUFFER PH
70
ESPERAR 60 SEGUNDOS TOMAR
EL PH
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR
MEDIR PH
REGISTRAR TODOS LOS
VALORES
Variable(indicador) evaluada(o)
Teacutecnica analiacutetica utilizada
pH Meacutetodo potenciomeacutetricoCapacidad Amortiguadora Meacutetodo titulacioacuten
volumeacutetrica
TABLA 3 Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas
Muestras β (mEq HCl
ΔpH)
β(mEqNaOHΔpH)
P (β) HCl
P (β) NaOH
ConcentradoHarinaForraje
3 RESULTADOS ESPERADOS
Al Colocar el Erlenmeyer oacute beaker que contiene la solucioacuten diluida de suelo debajo de la bureta y Titular lentamente adicionando el sulfato sobre la solucioacuten hasta debe aparecer y permanecer un color verde esmeralda brillanteCarbono orgaacutenicoMateria OrgaacutenicaNitroacutegeno total
4 GLOSARIO
ESPECTROFOTOacuteMETRO es un instrumento usado en el anaacutelisis quiacutemico que sirve para medir en funcioacuten de la longitud de onda la relacioacuten entre valores de una misma magnitud fotomeacutetrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracioacuten o reacciones quiacutemicas que se miden en una muestra
CAPACIDAD AMORTIGUADORA La capacidad amortiguadora de un tampoacuten es la cantidad de aacutecido o de base que se puede agregar antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable y estaacute determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par aacutecidobase conjugado
MEacuteTODO POTENCIOMEacuteTRICO Sirve para medir el Ph de una solucioacuten
5 REFERNCIAS
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotC3B3metro
httpdocenciaudeaeducocenQuimicaAnaliticaIIpot1html
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA Ndeg3 DETERMINACIOacuteN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE) EN FORRAJES POR EL MEacuteTODO DE NELSON-SOMOGYI
INTRODUCCIOacuteN
por el meacutetodo de fenol-aacutecido sulfuacuterico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos liacutequidos extractos liacutequidos materiales de celulosa entre otros esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio ya que los azucares simples oligosacaacuteridos polisacaacuteridos y sus derivados dan una coloracioacuten al entrar en contacto con fenol aacutecido sulfuacuterico
Las plantas vegetales estaacuten compuestos por carbohidratos estructurales y no estructurales los no estructurales se almacenan en oacuterganos vegetativos como raiacuteces rizomas estolones coronas y parte inferiores del tallo Los principales CNET en los tejidos de especies forrajeras son monosacaacuteridos como glucosa y fructosa disacaacuteridos como sucrosa y maltosa y polisacaacuteridos como almidones y fructosanos
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
Materiales y equipos
Materiales EquiposVidrieriacutea Tubos de ensayo
Gradillapinzas para bureta
Filtradopara carbohidratos no estructurales
erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal
Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Fenol C6H5OH 5
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N
Hidroacutexido de sodio NaOH O6N
Agua destilada H2O 20 mL
Glucosa C6H12O6 1
Procedimiento
En el campo Realizar toma de muestras
En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos
Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro
Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales
Lectura espectrofometrica
Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)
Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE
Indicadores Descripcioacuten Valor
wm Peso de la muestra
V FVolumen del filtrado
A st Absorbancia del estaacutendar
Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE
5 RESULTADOS ESPERADOS
La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles
6 GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos
ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas
El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR
AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL
06N
AGITAR DURANTE 3 MINUTOS
LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN
AL BANtildeO TERMOSTATADO
CALENTAR A 90degCDURANTE 20
MIN
DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR
SOBRE PAPEL FILTRO
MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO
ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N
AGITAR POR 15 SEGUNDOS
TAPAR Y ROTULAR
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
wwwprofesorenlineaCl
- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA Ndeg2 CARBONO ORGAacuteNICO MATERIA ORGAacuteNICA Y CAPACIDAD AMORTIGUADORA (szlig) DE SUELOS
INTRODUCCIOacuteN
las reacciones enzimaacuteticas las cuales pueden ser con sustancias acidas o bases con las cuales debemos tener mucho cuidado ya que las especies vegetales y animales deben tener un pH adecuado de tal manera que se podraacute obtener un oacuteptimo rendimiento y desarrollo de los organismos en el caso de las plantas si el cultivo establecido no cuenta con un pH optimo seraacute muy difiacutecil lograr que las plantas asimilen los nutrientes causando que las reacciones catalizadas por enzimas no tengan una velocidad constante y se dificulte el proceso de sobrevivencia en la planta
Para lograr un perfecto balance se requiere una buena capacidad amortiguadora o potencial quiacutemico que tienen los sistemas edaacuteficos para regular y controlar su pH cuando son sometidos a procesos de acidificacioacuten o alcalinizacioacuten
MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
1 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
MaterialEquipo CaracteriacutesticasPotencioacutemetroPipetas graduadas 10 mLEquipo de titulacioacuten Pyrex medianosBureta graduada 25mLErlenmeyer De 125mLBeaker 250 mlSoporte universal Metaacutelico con pinza para
buretaMuestras Concentrado orina sangre y
forrajeEspaacutetula metaacutelicaAgitador De vidrioProbeta graduada 100mlBalanza digital
22 Reactivos requeridos
Dicromato de potasio
H2SO4
concentradoK2Cr2O7 1N
Difenilamina
SUELO
MATERIA ORGANICA
HUMOS HUMINAS ACIDO
ORANICO
MICROORGANISMOS
REACCIONES BIOQUIMICA
S ENZIMATICAS
RESULTADO DE PROCESOS
BIOQUIIMICOS
HUMNEDAD
BALANCE ELECRROLITICO
Sulfato de hierro FeSO4 1NHidroacutexido de sodio
NaOH 01N
Aacutecido Clorhidrico
HCl 01N
Fenolftaleiacutena C20H14O4 oacuteC6H4COOC(C6H4--HOH)2
Agua destiladaSolucioacuten buffer fosfato
HPO4H3PO4
23 Procedimiento
231 En el campo Realizar toma de muestra
232 En el laboratorio Para Carbono Orgaacutenico (CO) aplicar el Meacutetodo de titulacioacuten volumeacutetrica Para Carbono Orgaacutenico (CO) Meacutetodo Espectrofotomeacutetrico para La Capacidad amortiguadora el Meacutetodo Potenciomeacutetrico
2 DIAGRAMA DE FLUJO
3 TABLA DE DATOSCarbono orgaacutenico meacutetodos volumeacutetricos y para capacidad amortiguadora de muestras bioloacutegicas espectrofotomeacutetrico
Muestras Valores EvaluadosWm (g) Vm (ml) pH 1 pH 2
ConcentradoHarinaForraje
Datos potenciomeacutetricos para capacidad amortiguadora de Suelos
MuestrasSuelo 1
Peso (Wm)
Vol (mL)
pH1 pH2
Suelo 2Agua destilada
Solucioacuten Buffer
ADICIONAR +- 20 GRAMOS DE
SUELO Y 40 ML DE AGUA
DESTILADA
AGITAR EN AGITADOR
MAGNEacuteTICO POR 5MIN
ESPERAR 60 SEGUNDOS Y
OBSERVAR EL PH CON EL ELECTRODO DEL POTECIOMETRO
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR DE NUEVO
POR UN MINUTO Y MEDIR EL PH2
TERCER Y CUARTO BEAKERS ADICIONAR
20ML DE AGUA DESTILADA Y 20 ML DE SOLUCIOacuteN BUFFER PH
70
ESPERAR 60 SEGUNDOS TOMAR
EL PH
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR
MEDIR PH
REGISTRAR TODOS LOS
VALORES
Variable(indicador) evaluada(o)
Teacutecnica analiacutetica utilizada
pH Meacutetodo potenciomeacutetricoCapacidad Amortiguadora Meacutetodo titulacioacuten
volumeacutetrica
TABLA 3 Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas
Muestras β (mEq HCl
ΔpH)
β(mEqNaOHΔpH)
P (β) HCl
P (β) NaOH
ConcentradoHarinaForraje
3 RESULTADOS ESPERADOS
Al Colocar el Erlenmeyer oacute beaker que contiene la solucioacuten diluida de suelo debajo de la bureta y Titular lentamente adicionando el sulfato sobre la solucioacuten hasta debe aparecer y permanecer un color verde esmeralda brillanteCarbono orgaacutenicoMateria OrgaacutenicaNitroacutegeno total
4 GLOSARIO
ESPECTROFOTOacuteMETRO es un instrumento usado en el anaacutelisis quiacutemico que sirve para medir en funcioacuten de la longitud de onda la relacioacuten entre valores de una misma magnitud fotomeacutetrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracioacuten o reacciones quiacutemicas que se miden en una muestra
CAPACIDAD AMORTIGUADORA La capacidad amortiguadora de un tampoacuten es la cantidad de aacutecido o de base que se puede agregar antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable y estaacute determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par aacutecidobase conjugado
MEacuteTODO POTENCIOMEacuteTRICO Sirve para medir el Ph de una solucioacuten
5 REFERNCIAS
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotC3B3metro
httpdocenciaudeaeducocenQuimicaAnaliticaIIpot1html
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA Ndeg3 DETERMINACIOacuteN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE) EN FORRAJES POR EL MEacuteTODO DE NELSON-SOMOGYI
INTRODUCCIOacuteN
por el meacutetodo de fenol-aacutecido sulfuacuterico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos liacutequidos extractos liacutequidos materiales de celulosa entre otros esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio ya que los azucares simples oligosacaacuteridos polisacaacuteridos y sus derivados dan una coloracioacuten al entrar en contacto con fenol aacutecido sulfuacuterico
Las plantas vegetales estaacuten compuestos por carbohidratos estructurales y no estructurales los no estructurales se almacenan en oacuterganos vegetativos como raiacuteces rizomas estolones coronas y parte inferiores del tallo Los principales CNET en los tejidos de especies forrajeras son monosacaacuteridos como glucosa y fructosa disacaacuteridos como sucrosa y maltosa y polisacaacuteridos como almidones y fructosanos
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
Materiales y equipos
Materiales EquiposVidrieriacutea Tubos de ensayo
Gradillapinzas para bureta
Filtradopara carbohidratos no estructurales
erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal
Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Fenol C6H5OH 5
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N
Hidroacutexido de sodio NaOH O6N
Agua destilada H2O 20 mL
Glucosa C6H12O6 1
Procedimiento
En el campo Realizar toma de muestras
En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos
Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro
Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales
Lectura espectrofometrica
Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)
Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE
Indicadores Descripcioacuten Valor
wm Peso de la muestra
V FVolumen del filtrado
A st Absorbancia del estaacutendar
Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE
5 RESULTADOS ESPERADOS
La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles
6 GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos
ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas
El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR
AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL
06N
AGITAR DURANTE 3 MINUTOS
LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN
AL BANtildeO TERMOSTATADO
CALENTAR A 90degCDURANTE 20
MIN
DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR
SOBRE PAPEL FILTRO
MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO
ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N
AGITAR POR 15 SEGUNDOS
TAPAR Y ROTULAR
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
wwwprofesorenlineaCl
- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
Sulfato de hierro FeSO4 1NHidroacutexido de sodio
NaOH 01N
Aacutecido Clorhidrico
HCl 01N
Fenolftaleiacutena C20H14O4 oacuteC6H4COOC(C6H4--HOH)2
Agua destiladaSolucioacuten buffer fosfato
HPO4H3PO4
23 Procedimiento
231 En el campo Realizar toma de muestra
232 En el laboratorio Para Carbono Orgaacutenico (CO) aplicar el Meacutetodo de titulacioacuten volumeacutetrica Para Carbono Orgaacutenico (CO) Meacutetodo Espectrofotomeacutetrico para La Capacidad amortiguadora el Meacutetodo Potenciomeacutetrico
2 DIAGRAMA DE FLUJO
3 TABLA DE DATOSCarbono orgaacutenico meacutetodos volumeacutetricos y para capacidad amortiguadora de muestras bioloacutegicas espectrofotomeacutetrico
Muestras Valores EvaluadosWm (g) Vm (ml) pH 1 pH 2
ConcentradoHarinaForraje
Datos potenciomeacutetricos para capacidad amortiguadora de Suelos
MuestrasSuelo 1
Peso (Wm)
Vol (mL)
pH1 pH2
Suelo 2Agua destilada
Solucioacuten Buffer
ADICIONAR +- 20 GRAMOS DE
SUELO Y 40 ML DE AGUA
DESTILADA
AGITAR EN AGITADOR
MAGNEacuteTICO POR 5MIN
ESPERAR 60 SEGUNDOS Y
OBSERVAR EL PH CON EL ELECTRODO DEL POTECIOMETRO
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR DE NUEVO
POR UN MINUTO Y MEDIR EL PH2
TERCER Y CUARTO BEAKERS ADICIONAR
20ML DE AGUA DESTILADA Y 20 ML DE SOLUCIOacuteN BUFFER PH
70
ESPERAR 60 SEGUNDOS TOMAR
EL PH
AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR
MEDIR PH
REGISTRAR TODOS LOS
VALORES
Variable(indicador) evaluada(o)
Teacutecnica analiacutetica utilizada
pH Meacutetodo potenciomeacutetricoCapacidad Amortiguadora Meacutetodo titulacioacuten
volumeacutetrica
TABLA 3 Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas
Muestras β (mEq HCl
ΔpH)
β(mEqNaOHΔpH)
P (β) HCl
P (β) NaOH
ConcentradoHarinaForraje
3 RESULTADOS ESPERADOS
Al Colocar el Erlenmeyer oacute beaker que contiene la solucioacuten diluida de suelo debajo de la bureta y Titular lentamente adicionando el sulfato sobre la solucioacuten hasta debe aparecer y permanecer un color verde esmeralda brillanteCarbono orgaacutenicoMateria OrgaacutenicaNitroacutegeno total
4 GLOSARIO
ESPECTROFOTOacuteMETRO es un instrumento usado en el anaacutelisis quiacutemico que sirve para medir en funcioacuten de la longitud de onda la relacioacuten entre valores de una misma magnitud fotomeacutetrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracioacuten o reacciones quiacutemicas que se miden en una muestra
CAPACIDAD AMORTIGUADORA La capacidad amortiguadora de un tampoacuten es la cantidad de aacutecido o de base que se puede agregar antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable y estaacute determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par aacutecidobase conjugado
MEacuteTODO POTENCIOMEacuteTRICO Sirve para medir el Ph de una solucioacuten
5 REFERNCIAS
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotC3B3metro
httpdocenciaudeaeducocenQuimicaAnaliticaIIpot1html
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA Ndeg3 DETERMINACIOacuteN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE) EN FORRAJES POR EL MEacuteTODO DE NELSON-SOMOGYI
INTRODUCCIOacuteN
por el meacutetodo de fenol-aacutecido sulfuacuterico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos liacutequidos extractos liacutequidos materiales de celulosa entre otros esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio ya que los azucares simples oligosacaacuteridos polisacaacuteridos y sus derivados dan una coloracioacuten al entrar en contacto con fenol aacutecido sulfuacuterico
Las plantas vegetales estaacuten compuestos por carbohidratos estructurales y no estructurales los no estructurales se almacenan en oacuterganos vegetativos como raiacuteces rizomas estolones coronas y parte inferiores del tallo Los principales CNET en los tejidos de especies forrajeras son monosacaacuteridos como glucosa y fructosa disacaacuteridos como sucrosa y maltosa y polisacaacuteridos como almidones y fructosanos
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
Materiales y equipos
Materiales EquiposVidrieriacutea Tubos de ensayo
Gradillapinzas para bureta
Filtradopara carbohidratos no estructurales
erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal
Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Fenol C6H5OH 5
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N
Hidroacutexido de sodio NaOH O6N
Agua destilada H2O 20 mL
Glucosa C6H12O6 1
Procedimiento
En el campo Realizar toma de muestras
En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos
Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro
Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales
Lectura espectrofometrica
Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)
Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE
Indicadores Descripcioacuten Valor
wm Peso de la muestra
V FVolumen del filtrado
A st Absorbancia del estaacutendar
Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE
5 RESULTADOS ESPERADOS
La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles
6 GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos
ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas
El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR
AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL
06N
AGITAR DURANTE 3 MINUTOS
LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN
AL BANtildeO TERMOSTATADO
CALENTAR A 90degCDURANTE 20
MIN
DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR
SOBRE PAPEL FILTRO
MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO
ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N
AGITAR POR 15 SEGUNDOS
TAPAR Y ROTULAR
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
wwwprofesorenlineaCl
- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TABLA 3 Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas
Muestras β (mEq HCl
ΔpH)
β(mEqNaOHΔpH)
P (β) HCl
P (β) NaOH
ConcentradoHarinaForraje
3 RESULTADOS ESPERADOS
Al Colocar el Erlenmeyer oacute beaker que contiene la solucioacuten diluida de suelo debajo de la bureta y Titular lentamente adicionando el sulfato sobre la solucioacuten hasta debe aparecer y permanecer un color verde esmeralda brillanteCarbono orgaacutenicoMateria OrgaacutenicaNitroacutegeno total
4 GLOSARIO
ESPECTROFOTOacuteMETRO es un instrumento usado en el anaacutelisis quiacutemico que sirve para medir en funcioacuten de la longitud de onda la relacioacuten entre valores de una misma magnitud fotomeacutetrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracioacuten o reacciones quiacutemicas que se miden en una muestra
CAPACIDAD AMORTIGUADORA La capacidad amortiguadora de un tampoacuten es la cantidad de aacutecido o de base que se puede agregar antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable y estaacute determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par aacutecidobase conjugado
MEacuteTODO POTENCIOMEacuteTRICO Sirve para medir el Ph de una solucioacuten
5 REFERNCIAS
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotC3B3metro
httpdocenciaudeaeducocenQuimicaAnaliticaIIpot1html
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA Ndeg3 DETERMINACIOacuteN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE) EN FORRAJES POR EL MEacuteTODO DE NELSON-SOMOGYI
INTRODUCCIOacuteN
por el meacutetodo de fenol-aacutecido sulfuacuterico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos liacutequidos extractos liacutequidos materiales de celulosa entre otros esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio ya que los azucares simples oligosacaacuteridos polisacaacuteridos y sus derivados dan una coloracioacuten al entrar en contacto con fenol aacutecido sulfuacuterico
Las plantas vegetales estaacuten compuestos por carbohidratos estructurales y no estructurales los no estructurales se almacenan en oacuterganos vegetativos como raiacuteces rizomas estolones coronas y parte inferiores del tallo Los principales CNET en los tejidos de especies forrajeras son monosacaacuteridos como glucosa y fructosa disacaacuteridos como sucrosa y maltosa y polisacaacuteridos como almidones y fructosanos
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
Materiales y equipos
Materiales EquiposVidrieriacutea Tubos de ensayo
Gradillapinzas para bureta
Filtradopara carbohidratos no estructurales
erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal
Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Fenol C6H5OH 5
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N
Hidroacutexido de sodio NaOH O6N
Agua destilada H2O 20 mL
Glucosa C6H12O6 1
Procedimiento
En el campo Realizar toma de muestras
En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos
Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro
Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales
Lectura espectrofometrica
Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)
Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE
Indicadores Descripcioacuten Valor
wm Peso de la muestra
V FVolumen del filtrado
A st Absorbancia del estaacutendar
Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE
5 RESULTADOS ESPERADOS
La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles
6 GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos
ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas
El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR
AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL
06N
AGITAR DURANTE 3 MINUTOS
LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN
AL BANtildeO TERMOSTATADO
CALENTAR A 90degCDURANTE 20
MIN
DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR
SOBRE PAPEL FILTRO
MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO
ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N
AGITAR POR 15 SEGUNDOS
TAPAR Y ROTULAR
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
wwwprofesorenlineaCl
- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA Ndeg3 DETERMINACIOacuteN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE) EN FORRAJES POR EL MEacuteTODO DE NELSON-SOMOGYI
INTRODUCCIOacuteN
por el meacutetodo de fenol-aacutecido sulfuacuterico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos liacutequidos extractos liacutequidos materiales de celulosa entre otros esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio ya que los azucares simples oligosacaacuteridos polisacaacuteridos y sus derivados dan una coloracioacuten al entrar en contacto con fenol aacutecido sulfuacuterico
Las plantas vegetales estaacuten compuestos por carbohidratos estructurales y no estructurales los no estructurales se almacenan en oacuterganos vegetativos como raiacuteces rizomas estolones coronas y parte inferiores del tallo Los principales CNET en los tejidos de especies forrajeras son monosacaacuteridos como glucosa y fructosa disacaacuteridos como sucrosa y maltosa y polisacaacuteridos como almidones y fructosanos
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
Materiales y equipos
Materiales EquiposVidrieriacutea Tubos de ensayo
Gradillapinzas para bureta
Filtradopara carbohidratos no estructurales
erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal
Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Fenol C6H5OH 5
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N
Hidroacutexido de sodio NaOH O6N
Agua destilada H2O 20 mL
Glucosa C6H12O6 1
Procedimiento
En el campo Realizar toma de muestras
En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos
Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro
Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales
Lectura espectrofometrica
Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)
Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE
Indicadores Descripcioacuten Valor
wm Peso de la muestra
V FVolumen del filtrado
A st Absorbancia del estaacutendar
Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE
5 RESULTADOS ESPERADOS
La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles
6 GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos
ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas
El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR
AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL
06N
AGITAR DURANTE 3 MINUTOS
LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN
AL BANtildeO TERMOSTATADO
CALENTAR A 90degCDURANTE 20
MIN
DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR
SOBRE PAPEL FILTRO
MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO
ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N
AGITAR POR 15 SEGUNDOS
TAPAR Y ROTULAR
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
wwwprofesorenlineaCl
- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
Filtradopara carbohidratos no estructurales
erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal
Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Fenol C6H5OH 5
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N
Hidroacutexido de sodio NaOH O6N
Agua destilada H2O 20 mL
Glucosa C6H12O6 1
Procedimiento
En el campo Realizar toma de muestras
En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos
Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro
Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales
Lectura espectrofometrica
Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)
Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE
Indicadores Descripcioacuten Valor
wm Peso de la muestra
V FVolumen del filtrado
A st Absorbancia del estaacutendar
Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE
5 RESULTADOS ESPERADOS
La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles
6 GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos
ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas
El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR
AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL
06N
AGITAR DURANTE 3 MINUTOS
LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN
AL BANtildeO TERMOSTATADO
CALENTAR A 90degCDURANTE 20
MIN
DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR
SOBRE PAPEL FILTRO
MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO
ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N
AGITAR POR 15 SEGUNDOS
TAPAR Y ROTULAR
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
wwwprofesorenlineaCl
- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE
Indicadores Descripcioacuten Valor
wm Peso de la muestra
V FVolumen del filtrado
A st Absorbancia del estaacutendar
Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE
5 RESULTADOS ESPERADOS
La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles
6 GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos
ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas
El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR
AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL
06N
AGITAR DURANTE 3 MINUTOS
LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN
AL BANtildeO TERMOSTATADO
CALENTAR A 90degCDURANTE 20
MIN
DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR
SOBRE PAPEL FILTRO
MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO
ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N
AGITAR POR 15 SEGUNDOS
TAPAR Y ROTULAR
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
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- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos
httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa
Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA
INTRODUCCIOacuteN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos
Soporte Universal Pipeta graduada
MEacuteTODO PERMANGANOMEacute
TRICOCATALASA
SE OBTIENE A PARTIR DE
MICROORGANISMOS
ENZIMA QUE PERMITE
PERDURAN LA VIDA DE
ALGUNOS ALIMENTOS
INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS
GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE
AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN
LOS PEROXISOMAS
Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
wwwprofesorenlineaCl
- Registro Ndeg 188540
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
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Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten
Gradilla
22 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Peroacutexido de Hidrogeno
H2O2
Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N
Perganmanatode potasio
KMnO4 001M
Extracto de catalasa
(ECAT) 2 gr
23 Procedimiento
231 En el campo Recoger las muestras
232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Muestras tubos
Indicadores
PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA
PICADA Oacute PULVERIZADA
REGISTRAR EL VALOR COMO WM
COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA
ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO
005M PH=68-70 AGITAR
CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE
5MIN
FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN
REGISTRARLO COMO VF
TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO
TAPARLO ROTULARLO
COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO
Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
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Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
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Wm (g) Vf (mL) VKMnO4
(mL)
SueloHarinaForrajeVerduraBlanco
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
4 RESULTADOS ESPERADOS
Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5 GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O
REACCIONES OXIDATIVAS
Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten
6 REFERENCIAS
httpseswikipediaorgwikiCatalasa
Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf
Es propiedad
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Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST
INTRODUCCIOacuteN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje
1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
2 MATERIALES Y METODOS
21 Materiales y equipos
Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado
espectrofotoacutemetro
tubo de ensayo
22 2 Reactivos requeridos
Reactivo Foacutermula Concentracioacuten
Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA
( Cl3-C-COOH )
Al 10
Agua destilada
23 procedimiento
En el campo Toma de muestras
En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza
analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min
(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST
)
CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO
PROTEICO
REACTIVOS
ACIDO TRICLOROACEacuteTICO
(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )
AGUA DESTILADA
FORRAJES Y SUELO
PUEDE SER ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR EL ANIMAL
Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
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Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta
Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP
filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva
3 DIAGRAMA DE FLUJO
4 TABLA DE DATOS
Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)
Muestras tubos
Indicadores
Wm (g) Vf (mL)
Absorbancia (A)
Suelo
Forraje
Standar
Tipo de muestras analizadas
Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea
5 RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados
GLOSARIO
ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten
NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o
PESAR +- 20 G DE MUESTRA
(SUELO FORRAJE)
REGISTRAR Y COLOCAR EN
VASO PRECIPITADO
ADICIONAR 20 ml DE AGUA
DESTILADA FRIA
DEJAR REPOSAR POR 15
MINUTOS
ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN
DE ATA Y AGITAR POR UN
MINUTO
REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR
MEDIR VOLUMEN FILTRADO
ROTULAR Y GUARDAR
REFRIGERADO
APLICAR SOLUCION INDICADA
OBTENER ABSORVANCIA
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos
BIBLIOGRAFIA
httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm
Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf
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