Técnica Analítica
• Conjunto de procedimientos o recursos que se usan en un arte, en una ciencia o en una actividad determinada, del cual resulta una medida de un analito de interés
Standard de oro
• La validez de una nueva prueba diagnóstica puede ser estudiada con la sensibilidad y la especificidad de la misma. Para ello debemos tener una prueba de referencia (patrón de oro o gold-standard) que debe ser la mejor disponible hasta el momento y que asumimos que clasifica siempre correctamente a los pacientes sanos y enfermos.
• Nuestro “gold-standard” puede ser una única prueba o bien incluir una combinación de pruebas y procedimientos diagnósticos
Precisión
• “Es la diferencia entre los resultados obtenidos en repetidos análisis de la misma muestra.
Independientemente del verdadero valor de la sustancia medida”.
• Expresa la reproducibilidad. El desvío estándar (S) mide el alejamiento de los
datos del valor medio.
Sensibilidad
• “Probabilidad de que un individuo enfermo
obtenga un resultados positivo con la metodología empleada”
V positivosSensibilidad = x 100 V positivos + F negativos
Falso Negativo: Muestra con resultado negativo cuando su verdadero estado es positivo.
Especificidad
• Probabilidad de que un individuo sano
obtenga un resultados negativo con la metodología empleada”
V negativos Especificidad = X 100 V negativos + F positivos
Falso Positivo: Muestra que da un resultado positivo cuando su verdadero estado es negativo.
Valor predictivo positivo (VPP)
• “Probabilidad de que un individuo con un resultado positivo realmente se encuentre enfermo”
VPP=
FP + VP
VP
Todos los positivos
Valor Predictivo Negativo (VPN)
• “Probabilidad de que un individuo con un resultado negativo realmente se encuentre sano”
VPN =VN
VN + FN Todos los Negativos
“El valor predictivo positivo varia en función de la tasa de Prevalencia de la enfermedad”
PREVALENCIA “Número de personas enfermas en un momento dado, en relación con el total de la población o número de personas”
INCIDENCIA “Número de casos nuevos en un momento dado, en relación con el total de la población o número de personas”
Punto de corte o Cut off• Es el valor por sobre el cual se considera
positivo o negativo el resultado de un test
• Define la Sensibilidad y Especificidad de una prueba
ESTANDARIZACIÓN DE LA PRUEBA DE ELISA PARA EL INMUNODIAGNÓSTICO DE HIDATIDOSIS HUMANA EMPLEANDO
ANTÍGENOS DE PRODUCCIÓN LOCAL
La evaluación de la técnica de ELISA empleando extractos totales de líquido hidatídico mostró una sensibilidad del 100% (A /A +C); especificidad del 96 % (D/B +D); valor predictivo positivo del 94 % (A / A + B) y un valor predictivo negativo del 100% (D/C + D).
Diagnostico de infecciones
Identifican el agente etiológico
frotis
Detectan la respuesta inmune, Ac
Serología
Métodos directos
-Cultivo del agente involucrado.
Bacterias, Virus, Hongos y parásitos.• Muchas especies son aún no cultivables
o su cultivo es lento y/o muy complejo.
-Detección del agente o de sus componentes.• Tinciones específicas e inespecíficas.• Detección de antígenos.• Detección/amplificación de ácidos nucléicos.
Métodos indirectos
-Detección / Cuantificación de anticuerpos específicos.
-Detección / Cuantificación de anticuerpos
inespecíficos.
-Permiten identificar el estado con respecto a la infección (Virgen, Pasada, Aguda y Crónica), su monitoreo y pronóstico. Portación.
A quien y para que?
• Para realizar un diagnóstico correcto, los
resultados obtenidos en el laboratorio de
bioquímica clínica deben ser analizados
dentro de un contexto clínico y
epidemiológico.
Condiciones y tipo de muestra
• Para la toma de una muestra de sangre es
conveniente que el paciente tenga un
ayuno de ocho horas.• Suero tomar la muestra por punción venosa
y colocarla en un tubo seco, sin anticoagulante.
Separación posterior. Se pueden utilizar tubos con gel o partículas aceleradoras de la coagulación.
DETERMINACION INMUNOLOGICA
“Todo procedimiento inmunológico en la muestra de un paciente es una instancia única que requiere un criterio científico riguroso, por lo tanto es necesario que los niveles de precisión, sensibilidad y especificidad sean los adecuados”
Periodo de ventana• Lapso entre el momento de la infección y
la aparición de los primeros marcadores
que se detectan en el laboratorio
DE TAMIZAJE O SCREENING
• Permiten discriminar a los pacientes sanos de los presuntamente enfermos.
“ALTA SENSIBILIDAD Y ADECUADA ESPECIFICIDAD”
Ej Tamizaje de HIV
DIAGNÓSTICAS
• Permiten confirmar el diagnóstico de los pacientes enfermos.
“ALTA O ADECUADA SENSIBILIDAD
PERO CON ALTA ESPECIFICIDAD”
Ej: WB para HIV
Comprobar
• Linealidad Calibradores
• Valores de referencia Verificación
• Controles Comerciales o “in house”
• Programas externos
• UMBRAL DE SIGNIFICACIÓN :Valor por debajo del cual no posee significación clínica.
• CONTROL DE CALIDAD INTERNO:
Evalúa los errores casuales y sistemáticos
que se producen dentro del laboratorio.
REPRODUCIBILIDAD
CONTROL DE CALIDAD EXTERNO
• Son programas donde se comparan los
resultados emitidos por los laboratorios
participantes.
EXACTITUD
Caso clínico:• Llega al Laboratorio de guardia una muestra
para testeo de VDRL del servicio de maternidad.
• Mujer que hace dos día a luz una niña• El resultado de la VDRL dio: Reactivo• La mujer que solo fue al hospital para tener su
bebe, admite que nunca se realizo ningún control durante la gestación
• Se decide realizar la VDRL semicuantitativa
• Por las causas mas que evidentes se solicita la punción del recién nacido para obtener LCR, para ello se realiza un hemograma el cual da normal.
• Recepción de dos tubos conteniendo LCR del neonato, el primero es remitido inmediatamente al área de Bacteriología y el segundo es procesado
• Se realiza un estudio Fisicoquímico y VDRL
Resultado
• VDRL en LCR: Negativa• Fisicoquímico: Aspecto: ligeramente
hemorrágico y xantocromico
Células: 13 x mm3 Predominio: mononuclear Proteínas 40 mg/dl Glucosa +