Toxinas lipofílicas en moluscos del noroeste de Baja California: Monitoreo y regulación
Ernesto Garcia Mendoza
Departamento de Oceanografía Biológica / CICESE
“V Simposio Internacional de Sanidad e Inocuidad Acuícola”
Estado actual y perspec/vas en la región
Ø Actividades importantes acuicultura y de pesquerías Ø De las descargas de sardina y anchoveta mas importantes en el país Ø La producción mas alta de mejillones y ostiones cultivados: Lagunas de Guerrero Negro, Manuela y San Quintín. Area de Rincón de Ballenas, BTS Ø Pesca de almeja chiluda (y cultivo) es una actividad de reciente desarrollo Ø Cultivo de atunes en encierros Ø Varios centros de investigación
Bahía de Todos Santos
Baja California, condiciones ambientales y ecología costera
Ø Forma parte del Sistema de la Corriente de California Ø Las condiciones oceanográficas originan ambientes ricos y productivos que sustentan pesquerías importantes
Ø Las surgencias es un proceso importantes de fertilizacion en al zona costra
Ø Ambiente adecuado para la acuicultura de moluscos bivalvos
Sea surface temperature
Sea surface height and geostrophical circulation
Producción acuícola de Baja California
Year2000 2002 2004 2006 2008 2010 2012
Pro
duct
ion
(mt)
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000Oyster 21%
Tuna 63%
Mussels 8%
Datos: Secretaria de Pesca de Baja California
La actividad de acuicultura pude estas condicionada por la presencia de especies de fitoplancton con potencial toxico
Conceptos básicos
N COOH
COOH
COOH
H3C
H3C
H
¿Que son las ficotoxinas marinas?
Compuestos químicos que son producidos (metabolitos secundarios) por las microalgas. Pueden afectar a otros organismos y tener un efecto negativo sobre la salud publica
Ficotoxina Familia química
Peso molecular
Característica Especie productora
Saxitoxina
alcaloide
299
Hidrofilica
Alexandrium spp.,Gymnodinium spp., Pyrodinium Bahamense
Acido domoico Aminoácido cíclico
311 Hidrofilica Pseudo-nitzschia spp.
Acido okadaico Polieter 804 Lipofilica Dinophysis spp., Prorocentrum lima
Azaspiracido Polieter 841 Lipofilica Azadinium spinosum
Pectenotoxinas Polieter 858 Lipofilica Dinophysis spp
Gymnodimina Imina ciclica 507 Lipofilica Karenia selliformis
Prorocentriolo Imina ciclica
979 Lipofilica Prorocentrum spp.
Espirolidos Imina ciclica 691 Lipofilica Alexandrium ostenfeldii
Yesotoxinas Polieter 1140 Anfifílica Protoceratium reticulatum, L. polyedrum
Brevetoxinas Polieter 894 Lipofilica Karenia brevis
Limite máximo permisible 160 µg/kg
1 mg/kg)
160 µg/kg
?Porque se monitorean este tipo de toxinas en México?
Ø No existe casos reconocidas de intoxicación, pero se monitorean desde el 2009. Reconocida en la NOM-242-SSA1-2009 publicada en el 2011 (Toxina diarreíca , acido okadaico)
Ø Prácticamente no existe investigación sobre este tipo de toxinas en el
país
Ø Se implementaron dos vedas sanitarias en al región en el 2010 (primera veda sanitaria en Norteamérica?), tres en 2012 y una en 2013.
Ø En 2010 no se confirmó analíticamente la presencia de toxinas de tipo
lipofilica. Las dos vedas se implementaron con base a resultados positivos por bioensayo en ratón.
DSP o toxinas lipofilicas: ¿Un problema emergente?
Proyecto: Toxinas diarreicas (lipofilicas) en moluscos bivalvos cultivados en el pacifico de Baja California: ¿Un problema emergente?
Tesis: Ocean. Yaireb Sanchez Bravo
?Es un problema del uso del bioensayo en ratón como método de prueba?
El caso del 2012 § Comunidad fitoplanctonica § Medición temperatura a diferentes profundidades • Evaluación de la concentración de toxinas lipofilicas en mejillón Bioensayo en ratón utilizando el hepatopáncreas (Yasumoto, 1979) Bioensayo en ratón en cuerpo completo (EU Harmonized protocol) LC-MS/MS (EU Harmonized protocol). Centro de Investigaciones Marinas (CIMA). Centre for Environment, Fisheries and Aquaculture (CEFAS). Aquity Xevo TQ MS/MS Aquity I-Class Xevo TQ-S Okatest Jellets
Time (2012)
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
Din
ophy
sis
abun
danc
e (C
el L
-1)
0
1000
2000
3000
4000
5000 OA
/DTX/PTX ( mg O
A eq/kg)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
180010 m
0 m
Toxinas lipo:licas en mejillones Toxinas diarreicas DSP .(AO, DTX y PTX) y abundancia de Dynophysis DTX1 detectada en 6 muestras. Concentración max. 8.5 µg/kg PTX2 concentraciones variables
Time (2012)
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
Rel
ativ
e ab
unda
nce
(%)
0
10
20
30
40
50
60
70 OA/D
TX/PTX ( mg OA eq/kg)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
Especies responsables
OA (mg kg-1)
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800
PTX
(mg
kg-1
)
0
10
20
30
40
50
Time (2012)
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
Abun
danc
e C
el L
-1
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
PTX / AO
0.0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
D. fortiiD. acuminata
Abundancia superficial
0 m
10 m
2012Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec Jan
Tem
pera
ture
(oC
)
10
12
14
16
18
20
22
24
26
Time (2012)
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
Abun
danc
e Cel
L-1
0
1000
2000
3000
4000
5000
0 m 10 m
Yesotoxinas
Se detectaron cuatro análogos YTX: 19 to 62% HYTX: 45 to 65% OHYTX OH hYTX.
YTX detectadas en dos muestras de mejillón (0.7 y 0.10 mg/kg) en la jolla L polyedrum fue las especies responsable (Howard et al, 2008)
Lingulodinium polyedrum
Time (2012)
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
Abun
danc
e C
el L
- 1 (x
103 )
0
10
20
30
40
50
60
70
YTX ( mg/kg)
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
Yesotoxinas
La especies responsable no fue detectada. ?La especies toxica (Gonyaulax spinifera or Protoceratium reticulatum??) estuvo asociada a un consorcio de dinoflagelados dominada por C. furca?
Ceratium furca
Tiempo
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec 0
10
20
30
40
50
YTX ( mg/kg)
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2A
Abun
danc
e C
el L
- 1 (x
103 )
Yesotoxinas
Time 2012
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
SPX1
(µg
kg-1
)
0
1
2
3
4
5
Otras toxinas: Iminas cíclicas
Las especies responsables no se detectaron
Karenia selliformis ?? Alexandrium ostenfeldii??
Tiempo
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
GYM
(mg/
kg)
0
1
2
3
4
Tiempo
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
AZA
1 (m
g/kg
)
0
2
4
6
8
Azaspiracidos
Azadinium spinosum?
BIOENSAYO EN RATÓN
XEVO - TQ XEVO- TQS
HP CC HP CC
TOTAL 37 43 31 43
FALSOS POSITIVOS 20 8 17 7
FALSOS NEGATIVOS 1 9 3 11
COINCIDENCIAS 16 26 11 26
% ERROR 57 39.5 64.5 41.8
Implicaciones: regulación .
En México no hay un protocolo normado
POSITIVO
NEGATIVO
A
BPOSITIVO
NEGATIVO
Tiempo
ene. feb. mar. abr. may. jun. jul. ago. sep. oct. nov. dic.
Abu
ndan
cia
Cel
L-1
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
Tiempo
ene. feb. mar. abr. may. jun. jul. ago. sep. oct. nov. dic.
Abu
ndan
cia
Cel
L-1
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
C
Tiempo
ene. feb. mar. abr. may. jun. jul. ago. sep. oct. nov. dic.
OA
/DTX
/PTX
(mg
OA
-eq
kg-1
)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
YTX (mg)
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
A.Oceanica Aqua LapYTX
BER-‐ hepatopáncreas
BER-‐ cuerpo entero
POSITIVO
NEGATIVO
A
BPOSITIVO
NEGATIVO
Tiempo
ene. feb. mar. abr. may. jun. jul. ago. sep. oct. nov. dic. A
bund
anci
a C
el L
-1
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
Tiempo
ene. feb. mar. abr. may. jun. jul. ago. sep. oct. nov. dic.
Abu
ndan
cia
Cel
L-1
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
C
Tiempo
ene. feb. mar. abr. may. jun. jul. ago. sep. oct. nov. dic.
OA
/DTX
/PTX
(mg
OA
-eq
kg-1
)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
YTX (mg)
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
A.Oceanica Aqua LapYTX
Time (2012)
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
YTX
DSP toxins maximum permted level
Cierres asociados a resultados por masas
ID BER AO LIBRE
AO ESTERIFICAD
O
DTX/PTX/AO
AO ESTER/LIBRE
30 CC 31.30 113.24 170.93 3.62 36 CC 49.80 153.39 214.48 3.08 37 CC 89.59 396.10 532.18 4.42 38 CC/HP 50.77 137.71 191.37 2.71 41 CC 46.96 125.23 175.571 2.67 44 CC 101.55 156.00 266.78 1.54 53 CC 105.04 380.82 493.33 3.63 55 CC 79.63 178.02 258.56 2.24 56 CC 59.77 444.03 542.07 7.43
DSTx en muestras en que BER presentaron falsos negativos La concentración FN es
de 316.14 µg AO-eq kg-1. Esto representaría el nivel de detección de la BER-CC. Si no se consideran la muestras con una proporción alta de AO esterificado (muestras 37 y 56) la concentración promedio de las DSTx disminuye a 253 ± µg AO-eq kg-1 y no se presentó ninguna muestra positiva por BER y LC-MS/MS por debajo de este nivel.
PerpecXvas
LC-MS/MS DSP concetration (mg/kg)
200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800
Oka
test
OA
con
cetr
atio
n (m
g/kg
).
0
100
200
300
400
500
600
Métodos alterno al BER Okatest
D. fortii-2012
Tiempo
Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
Abu
ndan
cia
Cel
L-1
0
1000
2000
3000
4000
5000
Superficie10 metros
D.fortii-2013
TiempoJan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec
Abu
ndan
cia
Cel
/L0
1000
2000
3000
4000
5000
Superficie10 metros
Veda 2013: 16 de julio al 23 de agosto
FICOTOX : Colaboradores y personal asociado
Yaireb, Sánchez-Bravo . Juan Blanco J Andrew Turner Mancera-Flores J David Rivas D., Paula Perez-Brunius Antonio Almazán Becerril
Agradeccimientos
Secretaria del Pesca y Acultura de B.C.