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UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farma. Carlos García MSc.

Alumno: Nelly Guaycha Pérez

Curso: Quinto Año Paralelo: “B”

Grupo: 7

Fecha de Elaboración de la Práctica: martes 24 de junio del 2014

Fecha de Presentación de la Práctica: martes 1 de julio del 2014

PRÁCTICA N° 5

Título de la Práctica:

INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO

Animal de Experimentación: Cobayo color café.

Vía de Administración: Vía Intraperitonial

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar las manifestaciones que presenta el cobayo debido a la administración de

Cloroformo.

2. Conocer los efectos tóxicos que produce el Cloroformo en el interior del organismo

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MATERIALES

Jeringuilla de 10cc

Probeta

Cronómetro

Equipo de disección

Bisturí

Vaso de precipitación

Erlenmeyer

Equipo de destilación.

Tubos de ensayo

Pipetas

Bata de Laboratorio

Guantes de látex

SUSTANCIAS

Solución de Cloroformo

Ácido tartárico al 20%

Agua destilada

Percloruro de Hierro

Nitrato de Plata

Beta naftol

Timol

Resorsinol

Lejía de Sosa (proporcion1:2)

Potasa alcohólica (proporción 1:10).

Cristales de Yodo

Clorhidrato de piperacina

Reactivo de Benedict

PROCEDIMIENTO

1. Materiales, equipos y reactivos listos en la mesa de trabajo.

2. Con la ayuda de una jeringuilla administrar 10 ml de cloroformo por vía Intraperitonial.

3. Inmediatamente colocar al cobayo en la campana y observar las manifestaciones que se

presentan y en qué tiempo hasta su muerte.

4. Colocamos el cobayo en la tabla de disección y con la ayuda del bisturí procedemos abrir el

cobayo.

5. Seleccionamos las vísceras que fueron afectadas en mayor proporción por el tóxico

administrado y colocándolas (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado

(Vaso de precipitación).

6. Preparar 2gr de ácido tartárico en 50ml de agua destilada y añadimos a las vísceras, con la

finalidad de acidular.

7. Luego de este tiempo se filtra, y se destila. El residuo de la destilación se recoge con

hidróxido de sodio.

8. Realizar las diferentes reacciones de reconocimiento

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REACCIONES Y CONDUCTA POST-ADMINISTRACIÓN

Toxico: Cloroformo.

Volumen de administración: 10 ml

Vía de administración: Intraperitonial.

Hora de administración: 7:56 am

Tiempo de muerte: 08:21 (25 minutos)

Síntomas: Perdida de actividad motora, estado de sueño profundo, Hinchazón abdominal, Hipoxia.

GRÁFICOS

1) Administramos al cobayo 2) Observación de conducta 3) Muerte del cobayo

4) En la tabla de disección 5) Hacemos una incisión 6) Extraemos las visceras 7) Picamos finamente

P

8) Colocamos en un balón 9) Añadimos acido tartárico 10) Destilamos en el equipo 11) Recibimos destilado

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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

1) Reacción Primera: (+) positivo no característico

Reacción positivo no característico Hubo leve cambio de coloración

2) Reacción de Dunas:

FeCl3 (+) positivo característico.

Reacción Positivo característico Hubo cambio de coloración a rojo

AgNO3 = (+) positivo característico.

Reacción Positivo característico Hubo disolución del precipitado

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3) Reacción de Lustgarten: positivo característico (+) coloración rojo grosella

Con B-Naftol: positivo no característico (+)

Reacción positivo no característico Leve cambio de coloración a azul

Con Timol: positivo característico (+)

Reacción positivo característico cambio de coloración a amarillo

Con Resorcina: positivo característico (+)

Reacción positivo característico cambio de coloración a rojo

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5) Reacción de Roseboom: positivo no característico (+)

Reacción positivo no característico leve coloración a amarillo rojizo

6) Reacción de Benedict: (-) negativo

Reacción negativo no hubo cambio de coloración

OBSERVACIONES

Esta vez el tiempo de muerte se prolongo mas de los esperado debido a que el cloroformo

no es un toxico altamente peligroso.

Al momento de armar el equipo de destilación hay que tener mucho cuidado ya que son

equipos de altos costos.

RECOMENDACIONES

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.

Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida.

Obtener una buena cantidad del destilado para así realizar las diferentes reacciones de

reconocimiento.

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CONCLUSIONES

Una vez finalizada la práctica y según los datos obtenidos podemos concluir de que el cloroformo

es un toxico débilmente peligroso razón por el cual era muy utilizado como agente anestésico pero

con el tiempo fue retirado del área médica debido a alguna intoxicación por el mismo; basándonos

así en el conocimiento de este tema por teoría y comprobando en el laboratorio en un animal de

experimentación.

CONSULTA

1) ¿QUÉ PROPIEDADES PRESENTA EL CLOROFORMO?

Los productos de descomposición del cloroformo son: fosgeno, cloruro de hidrógeno,

cloro y óxidos de carbono y cloro. Todos ellos corrosivos y muy tóxicos.

El cloroformo reacciona violentamente con:

Acetona en medios muy básicos.

Fluor, tetróxido de dinitrógeno, metales como aluminio, magnesio, sodio, litio y

potasio, sodio en metanol, metóxido de sodio, nitrometano, isopropilfosfina y

derivados alquilados de aluminio.

Es oxidado por reactivos como ácido crómico, formando fosgeno y cloro. Se

descompone a temperatura ambiente por acción de la luz del sol en ausencia de aire y

en la oscuridad en presencia de este último, siendo uno de los productos de esta

descomposición el fosgeno, el cual es muy tóxico.

2) ¿CUALES SON LOS PRINCIPALES USOS DEL CLOROFORMO?

El cloroformo es empleado habitualmente en tintorerías como disolvente de grasas en la limpieza a

seco, extintores de incendios, fabricación de colorantes, fumigantes, insecticidas.

3) ¿CUALES SON LOS EFECTOS TOXICOS DEL CLOROFORMO?

Efectos tóxicos agudos.- El cloroformo es un agente altamente irritante en estado líquido, produce

efectos irritantes en nariz, garganta, ojos, piel.15No obstante, no se han descrito efectos irritantes en

estado gaseoso.

En estudios de exposición a cloroformo por vía inhalatoria a corto plazo en animales de

experimentación se han descrito depresión del SNC, dilatación de pupilas de los ojos (midriasis),

reducción a la reacción a la luz, y reducción de la presión intraocular.

Efectos tóxicos Crónicos.- El cloroformo presenta una toxicidad de leve a moderada. La

exposición crónica (a largo plazo) tiene efectos sobre el hígado (incluyendo hepatitis e ictericia),

sobre el sistema nervioso central (como la depresión y la irritabilidad), y sobre los riñones.

GLOSARIO

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1. Cloroformo.- es un compuesto químico de fórmula química CHCl3. Puede obtenerse por

cloración como derivado del metano o del alcohol etílico o, más habitualmente en

laindustria farmacéutica, utilizando hierro y ácido sobre tetracloruro de carbono.

2. Anticongelantes.- Son compuestos que se añaden a los líquidos para reducir su punto de

solidificación, logrando de esta forma que la mezcla resultante se congele a

una temperatura más baja.

3. Toxicocinética.- Es el conjunto de fenómenos que experimenta el tóxico desde su entrada a

un organismo hasta su eliminación.

4. Acidosis.- Es un término clínico que indica un trastorno hidroelectrolítico que puede

conducir a academia, y que viene definido por un pH sanguíneo inferior a 7.35. La acidosis

puede ser metabólica o respiratoria.

5. Conversión a fosgeno.- El fosgeno es extremadamente tóxico porque reacciona con

muchas biomoléculas, produciendo la inactivación de sus funciones.

Machala 1 de junio del 2014

AUTORIA

o Bioq. Carlos García González

FIRMA

__________________________

NELLY GUAYCHA

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WEBGRAFÍA

CARACTERISTICAS DEL CLOROFORMO ECUARED. (En línea). [Fecha de consulta: jueves 26 de junio del 2014]. Disponible en: http://www.ecured.cu/index.php/Metanol

INTOXICACIONES POR CLOROFORMO. (En línea). [Fecha de consulta: jueves 26 de junio del 2014]. Disponible en: http://www.drmoscoso.com/cloroformo.html

ANEXOS

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INTOXICACION POR CLOROFORMO

Generalidades

El cloroformo es el tricloro metano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente anestésico, pero

poco después se abandonó este uso por s gran toxicidad hepática y renal.es un líquido incoloro y no

inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente volátil y muy liposoluble.

Fuentes de exposición

Está disponible como disolvente en laboratorios y en la industria química.se ha prohibido su uso

como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos como resultado de su efecto

carcinogénico en animales después de exposiciones crónicas. La intoxicación aguda y crónica

puede ocurrir por exposición a sus vapores.

Toxicocinética y mecanismo de acción

El cloroformo es un anestésico potente y origina una profunda depresión del SNC. Entra en el

organismo por vía respiratoria, digestivo dérmico. En humanos puede producir la muerte con la

ingestión oral de tan solo 10ml .exposiciones prolongadas o repetidas a los vapores pueden producir

hepato toxicidad, severa que se característica por necrosis centro lobular. Asimismo se ha descrito

degeneración grasa del hígado, el riñón el corazón. El mecanismo de lesión parece ser la oxidación

a nivel hepático del cloroformo a fosgeno a través del sistema microsomal. También se forma

fosgeno cuando los vapores de cloroformo se exponen al calor de una llama. El fosgeno inhalado se

convierte en ácido hidroclorhidrico y dióxido de carbono cuando reacciona con el agua en el

alveolo; y el ácido produce edema pulmonar.

Cuadro clínico

La severidad de los síntomas por exposición aguda, vía respiratoria, digestivo, dérmica, está en

relación directa con la dosis absorbida. El cloroformo, cuando se inhala, produce todos los niveles

de anestesia, teniendo un margen de seguridad muy estrecho, debido a que causa fallo cardiaco y

respiratorio de forma casi simultánea. No puede detectarse por el olfato hasta que su concentración

excede de 400 ppm. Una exposición durante 10 minutos a concentraciones de 1000 ppm produce

síntomas generales como nauseas, vómitos, vértigo cefaleas .exposiciones a una concentración de

1000 a 4000 ppm origina desorientación y concentraciones de 10000 a 20000 ppm dan lugar a

pérdida de conciencia, pudiendo originar la muerte.

Dependiendo de la dosis absorbida va a producir alteraciones más o menos importantes de la

función hepática, renal y cardiaca.

El cloroformo, por su acusado poder como disolvente de grasas, en contacto con la piel da lugar a

dermatitis local, y en los ojos produce irritación corneal.

Reacciones en medio biológico

El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio acido

tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación.

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1.-En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas

de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se observa que

esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado reacciona con el

nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata.

Reacción de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros

de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.

CHCl3 + 4 KOH ClK + Ç HCO2K + H 2 O

Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de

hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente.

A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro

de plata que se disuelve en amoniaco diluido.

Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución

alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol),

se obtiene un franco color azul.

Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la

coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.

Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de

2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos

instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del

rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de

cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua

clorofórmica.

Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se

agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la

muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.

Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict,

y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el

verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.