Practica 7Reacción de hemolisis antiestreptolisinas

Dra. Patricia Gómez Ruelas.

Objetivo:

• Demostrar la presencia de anticuerpos mediante una técnica de hemolisis.

Producto extracelular estreptocócica que posee propiedades antigénicas producidas por

la mayoría de los estreptococos betahemolíticos A,C y G.

QUE ES LA ESTREPTOLISINA O?

Aparece a los 10 días de la infección estreptocócica.

Diagnostico de infecciones recientes por estreptococo betahemolíticos, en fiebre reumática y glomerulonefritis.

PARA QUE SE UTILIZA?

Se necesitan realizar 2 pruebas.

PCR, FR y aislamiento del estreptococo

betahemolítico del grupo A

Fundamento

• Los anticuerpos contenidos en el suero en presencia de antígeno especifico originan reacción de neutralización que se visualizan al añadir eritrocitos de carnero, los cuales forman un anillo en el fondo del tubo que tienen anticuerpos y en el tubo donde los eritrocitos son lisados por la estreptolisina no hay presencia de anticuerpos neutralizantes.

SUERO (SIN ANTICUERPOS) ESTREPTOLISINA O ERITROCITOS LISIS

SUERO (CON ACS) ESTREPTOLISINA O ERITROCITOS BOTON

Se reconstituye con agua destilada con el volumen indicado en la

etiqueta para cada 5 ml de estreptolisina reconstituida se

adiciona un tubo de hidrosulfito constituido e uno de los tubos

capilares que se adjuntan

Se agita por inversión hasta que se disuelva encontrándose en forma activa. Para emplearse de modo

inmediato ya que al reoxidarse este se inactiva.

Las diluciones del suero problema y la suspensión de glóbulos rojos se

preparan con la solución amortiguadora comercial para

estreptolisinas

SUSPENSIÓN DE GLOBULOS ROJOS

•Eritrocitos humanos o de carnero lavados 3 veces con solución isotónica y por ultimo se suspende en solución amortiguadora para estreptolisinas a una concentración del 5%.

DILUCION DEL SUERO.

Se usa una solución amortiguadora como diluyente.

1:10 0.5 ml de suero 4.5 ml de solución amortiguadora

1:100 0.5 ml de la dilucion1:10 4.5 ml de solución amortiguadora

1:500 1.0 ml de la dilucion1:100 4 ml de solución amortiguadora

Factores que interfieren en la prueba.

En portadores sanos se pueden encontrar títulos elevados de AEL.

Pacientes bajo tratamiento antimicrobiano suprimirá la respuesta del anticuerpo AEL.Aumentos considerables en la Beta-lipoproteína inhiben a estreptolisina O, dando por ende resultados falsos en el titulo de AEL.

INTERPRETACION.

Valores de referencia- menos de 166 unidades Todd.

Un titulo alto o aumento progresivo en los títulos es indicativo de una infección reciente o prevalencia por estreptococo

además de ser de apoyo para el diagnostico de escarlatina, erisipela, faringitis, tonsilitis estreptocócica, glomerulonefritis

y fiebre reumática.

PATOLOGIA TITULOS DE AEL UNIDADES TODD

Fiebre reumática activa 500-5000

Fiebre reumática inactiva 12-250

Artritis reumatoide. 12-250

Glomerulonefritis aguda 500-5000

Infecciones de vías respiratorias altas

100-333

Enfermedades de la colágena 12-250

Las unidades Todd son reciprocas de la dilución mas alta del suero que neutraliza completamente

la estreptolisina O. Así un suero que presenta hemolisis en el tubo 5 y hemolisis completa en los

demás tubos, es reportado como 125 unidades Todd

FIN