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drogas de abuso
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Drogas de Abuso
Bioq Mario Ariel Aranda
Que vamos a ver
bull Marihuana
bull Cocaiacutena
bull Opio
bull Anfetaminas
Drogas de Abuso
1048713 Para Naciones Unidas las drogas de abuso constituyen el uso de cualquier sustancia que se encuentre bajo control internacional fuera de las indicadas para uso terapeacuteuticos en dosis excesivas o durante un periacuteodo
de tiempo injustificado
1048713 La OMS establece que Droga es toda sustancia que introducida en el organismo por cualquier viacutea de administracioacuten produce una alteracioacuten del
funcionamiento del sistema nervioso central del individuo y es ademaacutes susceptible de crear dependencia ya sea psicoloacutegica fiacutesica o ambas
Drogadependencia
bull Estado de intoxicacioacuten perioacutedica o croacutenica producida por el consumo repetido de sustancias psicoactivas y caracterizado por
1- Deseo dominante de consumir y obtener las sustancias por cualquier medio
2- Tendencia a incrementar la dosis 3- Dependencia fiacutesica y generalmente
psicoloacutegica con siacutendrome de abstinencia por retirada de la droga
4- Efectos nocivos para el individuo y la sociedad
Dependencia
bull Compulsioacuten
bull Tolerancia
bull Dependencia Psiacutequica
bull Dependencia Fiacutesica
bull Siacutendrome de Abstinencia
Marihuana
Canabis Con este nombre se designa la preparacioacuten seca de las hojas y flores de la cannabis sativa siendo la marihuana una de las formas de presentacioacuten
Tratamiento
bull Lo mas frecuente es cortar la planta secarla y hacer la picadura para armar los cigarrillos
bull Tambieacuten a partir de la planta de canabis se obtiene el aceite
bull Los principios activos son el acido cannabidioacutelico (CBA) el cannabidiol (CBD) el tetrahidrocannabidiol (THC) y el cannabidol (CBN)
Efectos fiacutesicos
Ligero aumento del ritmo cardiacuteacoAlteracioacuten de los tiempos de reaccioacuten a estiacutemulos visuales o auditivos (cuando vas en moto o en coche aumenta el riesgo de tener un accidente)Lentitud de las respuestas motoras disminucioacuten de la fuerza muscularDilatacioacuten de las pupilasIrritacioacuten de los ojos (ojos enrojecidos)Resecamiento de la bocaAumento del apetitoSomnolencia (produce suentildeo)El consumo de dosis altas tiene un efecto alucinoacutegeno
Muestras
Bioloacutegicas No bioloacutegicas
Orina Sangre Picadura cigarrillosRestos
vegetales
Identificacioacuten de los principios activos
Ensayos inmediatos Se trabaja con picadura o restos vegetales Los principios activos de la marihuana se extraen con eter de petroacuteleo y quedan impregnados en el papel de filtro donde su presencia se revela a traveacutez de agregado e solucion de Fast Blue B Salt por formacioacuten de color rojo cereza
Este ensayo no es especiacutefico para Marihuana por eso su valor analiacutetico es un resultado negativo
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Que vamos a ver
bull Marihuana
bull Cocaiacutena
bull Opio
bull Anfetaminas
Drogas de Abuso
1048713 Para Naciones Unidas las drogas de abuso constituyen el uso de cualquier sustancia que se encuentre bajo control internacional fuera de las indicadas para uso terapeacuteuticos en dosis excesivas o durante un periacuteodo
de tiempo injustificado
1048713 La OMS establece que Droga es toda sustancia que introducida en el organismo por cualquier viacutea de administracioacuten produce una alteracioacuten del
funcionamiento del sistema nervioso central del individuo y es ademaacutes susceptible de crear dependencia ya sea psicoloacutegica fiacutesica o ambas
Drogadependencia
bull Estado de intoxicacioacuten perioacutedica o croacutenica producida por el consumo repetido de sustancias psicoactivas y caracterizado por
1- Deseo dominante de consumir y obtener las sustancias por cualquier medio
2- Tendencia a incrementar la dosis 3- Dependencia fiacutesica y generalmente
psicoloacutegica con siacutendrome de abstinencia por retirada de la droga
4- Efectos nocivos para el individuo y la sociedad
Dependencia
bull Compulsioacuten
bull Tolerancia
bull Dependencia Psiacutequica
bull Dependencia Fiacutesica
bull Siacutendrome de Abstinencia
Marihuana
Canabis Con este nombre se designa la preparacioacuten seca de las hojas y flores de la cannabis sativa siendo la marihuana una de las formas de presentacioacuten
Tratamiento
bull Lo mas frecuente es cortar la planta secarla y hacer la picadura para armar los cigarrillos
bull Tambieacuten a partir de la planta de canabis se obtiene el aceite
bull Los principios activos son el acido cannabidioacutelico (CBA) el cannabidiol (CBD) el tetrahidrocannabidiol (THC) y el cannabidol (CBN)
Efectos fiacutesicos
Ligero aumento del ritmo cardiacuteacoAlteracioacuten de los tiempos de reaccioacuten a estiacutemulos visuales o auditivos (cuando vas en moto o en coche aumenta el riesgo de tener un accidente)Lentitud de las respuestas motoras disminucioacuten de la fuerza muscularDilatacioacuten de las pupilasIrritacioacuten de los ojos (ojos enrojecidos)Resecamiento de la bocaAumento del apetitoSomnolencia (produce suentildeo)El consumo de dosis altas tiene un efecto alucinoacutegeno
Muestras
Bioloacutegicas No bioloacutegicas
Orina Sangre Picadura cigarrillosRestos
vegetales
Identificacioacuten de los principios activos
Ensayos inmediatos Se trabaja con picadura o restos vegetales Los principios activos de la marihuana se extraen con eter de petroacuteleo y quedan impregnados en el papel de filtro donde su presencia se revela a traveacutez de agregado e solucion de Fast Blue B Salt por formacioacuten de color rojo cereza
Este ensayo no es especiacutefico para Marihuana por eso su valor analiacutetico es un resultado negativo
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Drogas de Abuso
1048713 Para Naciones Unidas las drogas de abuso constituyen el uso de cualquier sustancia que se encuentre bajo control internacional fuera de las indicadas para uso terapeacuteuticos en dosis excesivas o durante un periacuteodo
de tiempo injustificado
1048713 La OMS establece que Droga es toda sustancia que introducida en el organismo por cualquier viacutea de administracioacuten produce una alteracioacuten del
funcionamiento del sistema nervioso central del individuo y es ademaacutes susceptible de crear dependencia ya sea psicoloacutegica fiacutesica o ambas
Drogadependencia
bull Estado de intoxicacioacuten perioacutedica o croacutenica producida por el consumo repetido de sustancias psicoactivas y caracterizado por
1- Deseo dominante de consumir y obtener las sustancias por cualquier medio
2- Tendencia a incrementar la dosis 3- Dependencia fiacutesica y generalmente
psicoloacutegica con siacutendrome de abstinencia por retirada de la droga
4- Efectos nocivos para el individuo y la sociedad
Dependencia
bull Compulsioacuten
bull Tolerancia
bull Dependencia Psiacutequica
bull Dependencia Fiacutesica
bull Siacutendrome de Abstinencia
Marihuana
Canabis Con este nombre se designa la preparacioacuten seca de las hojas y flores de la cannabis sativa siendo la marihuana una de las formas de presentacioacuten
Tratamiento
bull Lo mas frecuente es cortar la planta secarla y hacer la picadura para armar los cigarrillos
bull Tambieacuten a partir de la planta de canabis se obtiene el aceite
bull Los principios activos son el acido cannabidioacutelico (CBA) el cannabidiol (CBD) el tetrahidrocannabidiol (THC) y el cannabidol (CBN)
Efectos fiacutesicos
Ligero aumento del ritmo cardiacuteacoAlteracioacuten de los tiempos de reaccioacuten a estiacutemulos visuales o auditivos (cuando vas en moto o en coche aumenta el riesgo de tener un accidente)Lentitud de las respuestas motoras disminucioacuten de la fuerza muscularDilatacioacuten de las pupilasIrritacioacuten de los ojos (ojos enrojecidos)Resecamiento de la bocaAumento del apetitoSomnolencia (produce suentildeo)El consumo de dosis altas tiene un efecto alucinoacutegeno
Muestras
Bioloacutegicas No bioloacutegicas
Orina Sangre Picadura cigarrillosRestos
vegetales
Identificacioacuten de los principios activos
Ensayos inmediatos Se trabaja con picadura o restos vegetales Los principios activos de la marihuana se extraen con eter de petroacuteleo y quedan impregnados en el papel de filtro donde su presencia se revela a traveacutez de agregado e solucion de Fast Blue B Salt por formacioacuten de color rojo cereza
Este ensayo no es especiacutefico para Marihuana por eso su valor analiacutetico es un resultado negativo
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Drogadependencia
bull Estado de intoxicacioacuten perioacutedica o croacutenica producida por el consumo repetido de sustancias psicoactivas y caracterizado por
1- Deseo dominante de consumir y obtener las sustancias por cualquier medio
2- Tendencia a incrementar la dosis 3- Dependencia fiacutesica y generalmente
psicoloacutegica con siacutendrome de abstinencia por retirada de la droga
4- Efectos nocivos para el individuo y la sociedad
Dependencia
bull Compulsioacuten
bull Tolerancia
bull Dependencia Psiacutequica
bull Dependencia Fiacutesica
bull Siacutendrome de Abstinencia
Marihuana
Canabis Con este nombre se designa la preparacioacuten seca de las hojas y flores de la cannabis sativa siendo la marihuana una de las formas de presentacioacuten
Tratamiento
bull Lo mas frecuente es cortar la planta secarla y hacer la picadura para armar los cigarrillos
bull Tambieacuten a partir de la planta de canabis se obtiene el aceite
bull Los principios activos son el acido cannabidioacutelico (CBA) el cannabidiol (CBD) el tetrahidrocannabidiol (THC) y el cannabidol (CBN)
Efectos fiacutesicos
Ligero aumento del ritmo cardiacuteacoAlteracioacuten de los tiempos de reaccioacuten a estiacutemulos visuales o auditivos (cuando vas en moto o en coche aumenta el riesgo de tener un accidente)Lentitud de las respuestas motoras disminucioacuten de la fuerza muscularDilatacioacuten de las pupilasIrritacioacuten de los ojos (ojos enrojecidos)Resecamiento de la bocaAumento del apetitoSomnolencia (produce suentildeo)El consumo de dosis altas tiene un efecto alucinoacutegeno
Muestras
Bioloacutegicas No bioloacutegicas
Orina Sangre Picadura cigarrillosRestos
vegetales
Identificacioacuten de los principios activos
Ensayos inmediatos Se trabaja con picadura o restos vegetales Los principios activos de la marihuana se extraen con eter de petroacuteleo y quedan impregnados en el papel de filtro donde su presencia se revela a traveacutez de agregado e solucion de Fast Blue B Salt por formacioacuten de color rojo cereza
Este ensayo no es especiacutefico para Marihuana por eso su valor analiacutetico es un resultado negativo
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Dependencia
bull Compulsioacuten
bull Tolerancia
bull Dependencia Psiacutequica
bull Dependencia Fiacutesica
bull Siacutendrome de Abstinencia
Marihuana
Canabis Con este nombre se designa la preparacioacuten seca de las hojas y flores de la cannabis sativa siendo la marihuana una de las formas de presentacioacuten
Tratamiento
bull Lo mas frecuente es cortar la planta secarla y hacer la picadura para armar los cigarrillos
bull Tambieacuten a partir de la planta de canabis se obtiene el aceite
bull Los principios activos son el acido cannabidioacutelico (CBA) el cannabidiol (CBD) el tetrahidrocannabidiol (THC) y el cannabidol (CBN)
Efectos fiacutesicos
Ligero aumento del ritmo cardiacuteacoAlteracioacuten de los tiempos de reaccioacuten a estiacutemulos visuales o auditivos (cuando vas en moto o en coche aumenta el riesgo de tener un accidente)Lentitud de las respuestas motoras disminucioacuten de la fuerza muscularDilatacioacuten de las pupilasIrritacioacuten de los ojos (ojos enrojecidos)Resecamiento de la bocaAumento del apetitoSomnolencia (produce suentildeo)El consumo de dosis altas tiene un efecto alucinoacutegeno
Muestras
Bioloacutegicas No bioloacutegicas
Orina Sangre Picadura cigarrillosRestos
vegetales
Identificacioacuten de los principios activos
Ensayos inmediatos Se trabaja con picadura o restos vegetales Los principios activos de la marihuana se extraen con eter de petroacuteleo y quedan impregnados en el papel de filtro donde su presencia se revela a traveacutez de agregado e solucion de Fast Blue B Salt por formacioacuten de color rojo cereza
Este ensayo no es especiacutefico para Marihuana por eso su valor analiacutetico es un resultado negativo
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Marihuana
Canabis Con este nombre se designa la preparacioacuten seca de las hojas y flores de la cannabis sativa siendo la marihuana una de las formas de presentacioacuten
Tratamiento
bull Lo mas frecuente es cortar la planta secarla y hacer la picadura para armar los cigarrillos
bull Tambieacuten a partir de la planta de canabis se obtiene el aceite
bull Los principios activos son el acido cannabidioacutelico (CBA) el cannabidiol (CBD) el tetrahidrocannabidiol (THC) y el cannabidol (CBN)
Efectos fiacutesicos
Ligero aumento del ritmo cardiacuteacoAlteracioacuten de los tiempos de reaccioacuten a estiacutemulos visuales o auditivos (cuando vas en moto o en coche aumenta el riesgo de tener un accidente)Lentitud de las respuestas motoras disminucioacuten de la fuerza muscularDilatacioacuten de las pupilasIrritacioacuten de los ojos (ojos enrojecidos)Resecamiento de la bocaAumento del apetitoSomnolencia (produce suentildeo)El consumo de dosis altas tiene un efecto alucinoacutegeno
Muestras
Bioloacutegicas No bioloacutegicas
Orina Sangre Picadura cigarrillosRestos
vegetales
Identificacioacuten de los principios activos
Ensayos inmediatos Se trabaja con picadura o restos vegetales Los principios activos de la marihuana se extraen con eter de petroacuteleo y quedan impregnados en el papel de filtro donde su presencia se revela a traveacutez de agregado e solucion de Fast Blue B Salt por formacioacuten de color rojo cereza
Este ensayo no es especiacutefico para Marihuana por eso su valor analiacutetico es un resultado negativo
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Tratamiento
bull Lo mas frecuente es cortar la planta secarla y hacer la picadura para armar los cigarrillos
bull Tambieacuten a partir de la planta de canabis se obtiene el aceite
bull Los principios activos son el acido cannabidioacutelico (CBA) el cannabidiol (CBD) el tetrahidrocannabidiol (THC) y el cannabidol (CBN)
Efectos fiacutesicos
Ligero aumento del ritmo cardiacuteacoAlteracioacuten de los tiempos de reaccioacuten a estiacutemulos visuales o auditivos (cuando vas en moto o en coche aumenta el riesgo de tener un accidente)Lentitud de las respuestas motoras disminucioacuten de la fuerza muscularDilatacioacuten de las pupilasIrritacioacuten de los ojos (ojos enrojecidos)Resecamiento de la bocaAumento del apetitoSomnolencia (produce suentildeo)El consumo de dosis altas tiene un efecto alucinoacutegeno
Muestras
Bioloacutegicas No bioloacutegicas
Orina Sangre Picadura cigarrillosRestos
vegetales
Identificacioacuten de los principios activos
Ensayos inmediatos Se trabaja con picadura o restos vegetales Los principios activos de la marihuana se extraen con eter de petroacuteleo y quedan impregnados en el papel de filtro donde su presencia se revela a traveacutez de agregado e solucion de Fast Blue B Salt por formacioacuten de color rojo cereza
Este ensayo no es especiacutefico para Marihuana por eso su valor analiacutetico es un resultado negativo
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Efectos fiacutesicos
Ligero aumento del ritmo cardiacuteacoAlteracioacuten de los tiempos de reaccioacuten a estiacutemulos visuales o auditivos (cuando vas en moto o en coche aumenta el riesgo de tener un accidente)Lentitud de las respuestas motoras disminucioacuten de la fuerza muscularDilatacioacuten de las pupilasIrritacioacuten de los ojos (ojos enrojecidos)Resecamiento de la bocaAumento del apetitoSomnolencia (produce suentildeo)El consumo de dosis altas tiene un efecto alucinoacutegeno
Muestras
Bioloacutegicas No bioloacutegicas
Orina Sangre Picadura cigarrillosRestos
vegetales
Identificacioacuten de los principios activos
Ensayos inmediatos Se trabaja con picadura o restos vegetales Los principios activos de la marihuana se extraen con eter de petroacuteleo y quedan impregnados en el papel de filtro donde su presencia se revela a traveacutez de agregado e solucion de Fast Blue B Salt por formacioacuten de color rojo cereza
Este ensayo no es especiacutefico para Marihuana por eso su valor analiacutetico es un resultado negativo
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Muestras
Bioloacutegicas No bioloacutegicas
Orina Sangre Picadura cigarrillosRestos
vegetales
Identificacioacuten de los principios activos
Ensayos inmediatos Se trabaja con picadura o restos vegetales Los principios activos de la marihuana se extraen con eter de petroacuteleo y quedan impregnados en el papel de filtro donde su presencia se revela a traveacutez de agregado e solucion de Fast Blue B Salt por formacioacuten de color rojo cereza
Este ensayo no es especiacutefico para Marihuana por eso su valor analiacutetico es un resultado negativo
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Identificacioacuten de los principios activos
Ensayos inmediatos Se trabaja con picadura o restos vegetales Los principios activos de la marihuana se extraen con eter de petroacuteleo y quedan impregnados en el papel de filtro donde su presencia se revela a traveacutez de agregado e solucion de Fast Blue B Salt por formacioacuten de color rojo cereza
Este ensayo no es especiacutefico para Marihuana por eso su valor analiacutetico es un resultado negativo
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Ensayo de Duquenosis
bull La marihuana en presencia de este reactivo y por agregado posterior de acido clorhiacutedrico concentrado da un color verde azul o violeta Si se agrega cloroformo el color violeta se extrae y pasa a la fase orgaacutenica
bull Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccioacuten
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Reaccioacuten de Fulton
bull Este ensayo se realiza sobre el extracto eteacutereo de la muestra Se basa en la formacioacuten de un compuesto rojo puacuterpura en presencia de marihuana Utiliza etanol y solucioacuten alcohoacutelica de Furfural al 1 HCl y posterior evaporacioacuten a bantildeo Mariacutea Finalmente al residuo obtenido se le agrega solucioacuten de acido sulfuacuterico etanol (5545)
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Cromatografiacutea en capa fina
bull Para la siembra puede partirse de extracto etereo
bull Fase estacionaria Silica gelbull Fase moacutevil Benceno Tolueno BencenoHexano Hidroxilamina ( 75305)
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
El reveladobull Solucioacuten resiente de Fast blue 02 en
hidroacutexido de sodio 01N
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Microscopia
bull Una porcioacuten del material en estudio (picadura) se trata con solucioacuten de NaOH al 10 se calienta casi hasta ebullicioacuten y se deja enfriar agitando suavemente se toma una gota de la suspensioacuten y se coloca entre porta y cubre Se observa al microscopio para identificar estructuras caracteriacutesticas
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Tricomas Cistoliticos
Tricoma Glandular pluricelular
Glaacutendulas secretoras
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Estructuras microscoacutepicas
bull Pelos cistoliticos caracteriacutesticos de la Marihuana Son unicelulares curvos no glandulares con una base ensanchada que generalmente contiene el cistolito (carbonato de calcio solubles en medio aacutecido)
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Otras determinaciones
bull Investigacioacuten de los componentes del Cannabis por cromatografiacutea gaseosa (GC)
Identificar con testigos THC CBN y CBDbull Identificacioacuten en muestras Bioloacutegicas El Δ9 THC es metabolizado en el hiacutegado y sus
metabolitos son excretados en orina El metabolito mas abundante en orina es el acido 11-nor- Δ9-THC-9-carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con acido glucuronico
bull Test inmunoloacutegicos tipo ELISA
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Caso Cliacutenico
Una madre concurre al laboratorio con unos cigarrillos de elaboracioacuten casera que encontroacute en el bolso de su hija luego del regreso del viaje de egresados
Dado que la hija era no fumadora desea analizar la naturaleza de los restos vegetales encontrados Su hija afirma que no le pertenece
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Se trataraacute de MARIHUANA
Para la identificacioacuten de eacuteste toxico en muestras no bioloacutegicas se pueden utilizar distintos meacutetodos
Ensayos cromaacuteticos Inmediato Extraccioacuten con eacuteter de petroacuteleo donde los ppios activos
quedan impregnados el un papel de filtro y se revelan con sn de Fast Blue B Salt Color rojo cereza Su valor analiacutetico es cuando la rn da negativa ya que es inespeciacutefico
Duquenois Es un reactivo que en presencia de marihuana y posterior agregado de HCl da color verde azul o violeta (El cannabidiol da negativa eacutesta reaccioacuten)
Fulton Sobre el extracto eteacutereo de la muestra se agrega reactivo de Fulton y se forma un complejo rojo-puacuterpura en presencia de marihuana
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Cromatografiacutea en capa fina (TLC)Se puede partir de un extracto eteacutereo Se revela con Fast Blue 02 en NaOH y se observa Mancha
anaranjada= CBD rojo cereza THC y rojo violaacuteceo=CBN Microscopiacutea El material se trata con NaOH 10 se lo calienta y
luego (ya friacuteo) se lo coloca entre porta y cubre y se buscan estructuras caracteriacutesticas de la marihuana
Pelos y glandulas
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Y la nintildea Fuma
La viacutea de administracioacuten maacutes usual es la inhalatoria a traveacutes de porros se absorbe muy eficazmente pero en el proceso de la combustioacuten se destruye gran parte del principio activo por lo que tan soacutelo el 20 se incorpora como tal al organismo De todos modos la absorcioacuten puede oscilar entre el 2 y el 50 dependiendo de la teacutecnica de fumado La velocidad de absorcioacuten es muy raacutepida casi tanto como la viacutea endovenosa La concentracioacuten maacutexima en sangre se alcanza entre los tres y siete minutos despueacutes de comenzar la administracioacuten
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
bull Inmediatamente despueacutes del incremento en los niveles en sangre caen raacutepidamente debido al paso del delta-9-THC a los tejidos Accede faacutecilmente al cerebro (donde produce los efectos) debido a que es una sustancia muy liposoluble y atraviesa faacutecilmente la barrera hematoencefaacutelica En el hombre dos terceras partes de la eliminacioacuten de estas sustancias se realiza por las heces los cannabinoides se transforman en otras sustancias menos toacutexicas y maacutes faacuteciles de eliminar en el hiacutegado luego van a la vesiacutecula biliar y se excretan al intestino en la bilis y por uacuteltimo son eliminadas junto con las heces El tercio restante se elimina por la orina
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Identificacioacuten en las muestras bioloacutegicas
bull El metabolito mas abundante en la orina es el acido 11-nor-∆ 9-THC-9 carboxiacutelico que puede encontrarse libre o conjugado con ac glucuroacutenico
bull Test inmunoloacutegicos Se puee utilizar ELISA etc Punto de corte 50 ngml
bull Cromatografiacutea en capa fina (TLC)
Luego se revela y se compara con un estandar bull Tambieacuten se puede realizar GCMS
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Cocaiacutenabull Se extrae de varias especies del genero
Erythroxylon Popularmente se usaron las hojas con el propoacutesito de aumentar la fuerza de resistencia de los indiacutegenas para el trabajo quienes las masticaban o bien preparaban infusiones Actualmente persiste el consumo de coca mediante mascado o ingesta de te de coca en el norte del paiacutes y en cierta regiones de Bolivia y Peruacute
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Presentacioacuten
bull La cocaiacutena se presenta como un polvo blanco cristalino pudiendo estar adulterada con distintas sustancias como anesteacutesicos locales (Procaina Lidocaina) dipirona Bicarbonato aacutecido boacuterico hidratos de carbono (Manitol lactosa o glucosa)
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Formas de consumo
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Cocaiacutena-Mecanismo de accioacuten
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
HOJAS DE COCA HOJAS DE COCA
PASTA BASICAPASTA BASICA
COCAINA BASECOCAINA BASE
CLORHIDRATO DE CLORHIDRATO DE COCAINACOCAINA
OXIDO DE CALCIO AGUA QUEROSENE ACIDO SULFURICO HIDROXIDO DE AMONIO
4 KG 300 LITROS 250 LITROS 1 LITRO
1 LITROACIDO SULFURICO
PERMANGANATO POTASIO PERMANGANATO POTASIO HIDROXIDO DE AMONIO
05 LITROS 05 05 KGKG
15 LITROS ACETONA - MEK
ETER ETILICO ACIDO CLORHIDRICO
10 - 15 LITROS 10 - 15 LITROS
025 LITROS
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Metabolismo de la cocaiacutena
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Muestras
bull Bioloacutegicas Orina Homogenato de viseras Sangre etc
bull No bioloacutegicas Polvos residuos de jeringas hipodeacutermicas y contenedores
COQUEO y TE DE COCA MMetabolitos en etabolitos en OOrina rina
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Marcha Analiacutetica
bull Esta serie de ensayos se aplican a muestras en forma de polvo
1-Observacioacuten de los cristales se observa el aspecto de los cristales a simple vista o con lupa la cocaiacutena se presenta como cristales blancos mate y el acido boacuterico como polvo fino color blanco
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
2-Observacioacuten al UV la cocaiacutena presenta aspecto brillante mientras que la procaiacutena y otros presentan fluorescencia blanco azulada
3-Solubilidad en agua destilada Las sales de cocaiacutena y la de los anesteacutesicos locales son totalmente solubles mientras que el acido boacuterico presenta solubilizacioacuten incompleta
3-pH de la solucioacuten acuosa En presencia de cocaiacutena salificada el pH es acido por el efecto hidrolitico salvo en el caso de estar presente el bicarbonato como adulterante En este ultimo caso podriacutea observarse un pH alcalino
4-Identificacioacuten de anioacuten cloruro la cocaiacutena como la mayoriacutea de los adulterantes pueden encontrarse como clorhidratos
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
5-Reaccioacuten con agua de bromo La aparicioacuten de color azul indicaraacute probable presencia de cocaiacutena
6-Ensayo con KMNO4 en medio acuoso acido en presencia de cocaiacutena de elevada pureza se forma un precipitado violeta de permanganato de cocaiacutena cuyos tiacutepicos cristales se pueden observar al microscopio en presencia de adulterantes reductores se puede observar un precipitado blanco de MnO2
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Identificacioacuten de Acido Boacuterico
bull Ensayo del ester metil boacuterico El aacutecido boacuterico se esterifica con metanol en presencia de acido sulfuacuterico y el ester metil boacuterico se inflama con llamas con bordes verde esmeralda
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Identificacioacuten de Cocaiacutena en Muestras Bioloacutegicas
bull Este procedimiento se realiza en muestras de Orina
bull Test inmunoloacutegicos ELISAbull Cromatografiacutea de capa fina Se parte de un extracto de orina en medio alcalino el cual puede obtenerse mediante una extraccioacuten liquido-liquido
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Trafico y contrabando-Mulas
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Descripcioacuten Se obtienen del exudado lechoso de las
semillas inmaduras encapsuladas de la planta papaver somniferum o adormidera
Es una planta natural de Asia menor
egipto y china
El exudado lechoso es sometido a una intensa desecacioacuten y se obtiene un polvo que contiene alcaloides activos
Los principales provenientes del opio son la morfina codeiacutena y tetabaiacutena
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
El teacutermino opiaacuteceo es con frecuencia usado incorrectamente para referirse a todas las drogas con accioacuten farmacoloacutegica similar al opio o a la morfina Eacutestas pueden clasificarse maacutes apropiadamente bajo el teacutermino opioide definiendo a las drogas que interaccionan con los receptores opioides
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Morfina
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Llega al laboratorio una jeringa que fue encontrada en la habitacioacuten de un residente meacutedico con antecedentes de adiccioacuten a drogas por viacutea endovenosa
El paciente se encuentra en la guardia del hospital presentando la siguiente sintomatologiacutea miosis puntiforme depresioacuten respiratoria y de la conciencia con signos de venopuncioacuten en los antebrazos
Se le administra Naloxona con lo que mejora su nivel de conciencia
Caso cliacutenico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
a- iquestDe queacute toacutexico se tratariacutea
Opiaceo probablemente morfina
El individuo al ser tratado con Naloxona
mejora su condicioacuten
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Es un faacutermaco antagonista de los receptores opioides muy usado en el tratamiento de la intoxicacioacuten aguda por opiaacuteceos
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Se investiga el residuo que contiene
- reacciones cromaacuteticas
Reaccion de Marquis
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
TLCFase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
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Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Componente Sol metil de iodo
Dragendorff Ac iodopl Acidif
morfina marroacuten naranja azul-violeta
codeiacutena marroacuten naranja gris-violeta
tebaiacutena marroacuten naranja violeta
papaverina marroacuten naranja rosa-violeta
narcotina marroacuten naranja rosa-violeta
narceiacutena marroacuten naranja violeta
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punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
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Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
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Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
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Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Muestra orina del residente meacutedico
Ensayos directos test inmunoloacutegicos
-ELISA
punto de corte 03 ugml
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
muestra de orina
opiaacuteceos conjugados con glucuroacutenico
1deg paso
hidroacutelisis (aacutecida yo enzimaacutetica) y llevar a pH apropiado 85 (ampolla) 6 (fase soacutelida)
2deg paso
extraccioacuten con cloroformoisopropanol (91)
fase organica - secado - metanol
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
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bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Fase fija silica gel G o GF 254
Fase moacutevil Metanolamoniacuteaco (10015)
Acetato de etilometanolamoniacuteaco (80105)
Reveladores solucioacuten metiacutelica de iodo
Dragendorff
Aacutecido iodoplatiacutenico acidificado
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
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Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Sistema comercializado
Sensibilidad 1 ug
Otros meacutetodos
GC y GCMS
derivatizar el analito
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Luego de haber visto un programa de televisioacuten el familiar de una adolescente de 16 antildeos que recibe un tratamiento homeopaacutetico para adelgazar consulta al laboratorio refiriendo que la chica ha perdido peso en forma raacutepida con anorexia y alteraciones en la conducta como nerviosismo excitacioacuten psicomotriz insomnio y a veces taquicardia
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
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bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
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bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
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MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Las anfetaminas son consumidas en el mundo occidental como faacutermacos antifatiga y para el control de la obesidad generalmente al margen de la prescripcioacuten meacutedica Durante la deacutecada de los sesenta y los setenta tambieacuten se extendioacute su consumo con fines recreativosLa efedrina es el principio activo de la planta efedra (Ephedra vulgaris en chino ma huang) la cual es conocida por sus propiedades estimulantes y broncodilatadoras desde hace varios miles de antildeos A principios de los antildeos treinta por razones comerciales se introdujo la anfetamina como una alternativa a la efedrina para el tratamiento del asma y la narcolepsia
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
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CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Las anfetaminas pertenecen a la familia de los faacutermacosAdreneacutergicos
Se absorbe bien en el tracto gastrointestinal y por viacutea oral sus efectos aparecen a los 30- 60 min
Atraviesa con rapidez la barrera hematoencefaacutelicaEs hidrolizada y desmetilada en el hiacutegado
eliminaacutendose en la orina como p-hidroxiefedrina y norefedrina y en parte sin metabolizar
Su excrecioacuten urinaria aumenta al acidificar la orina Su semivida es de unas 10 horas
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
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bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
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Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
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MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
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bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Modo de accioacuten
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
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bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
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Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
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MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
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bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
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bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
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bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
BioloacutegicasOrinaHomogenato de viacutesceras
No bioloacutegicasPreparados farmaceacuteuticos
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
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bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
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bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
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En capa fina (TLC)
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Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Extraccioacuten liacutequido-liacutequido previa alcalinizacioacuten en ampolla de decantacioacutenExtraccioacuten en columnas de tierra de diatomeas o en columnas en fase soacutelida (SPE)Extraccioacuten previa destilacioacuten (son compuestos volaacutetiles) en medio alcalino (pH 10-11) recoleccioacuten del destilado en HCl 1 y re-alcalinizacioacuten a pH 10-11 realizando posteriormente la extraccioacuten directa en medio alcalino
En homogenatos de viacutesceras Marcha de Curry trabajando con la fraccioacuten DEn preparados farmaceacuteuticos pulverizar la capsula o comprimido disolver una pequentildea porcioacuten en 1-2 ml de metanolSi se sospecha que el preparado contiene mas de una sustancia se puede realizar extraccioacuten secuencial
TODOS LOS EXTRACTOS DEBEN EVAPORARSE EMPLEANDO CORRIENTE DE AIRE FRIacuteO DADA LA VOLATILIDAD DE LOS COMPUESTOS
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Ensayos de orientacioacuten e identificacioacuten (cromaacuteticas)
Ensayos inmunoloacutegicos
Cromatografiacutea Espectrofotometriacutea
bull Reaccioacuten de Marquis
bull Reaccioacuten con nitroprusiato de sodio y acetaldehido en medio alcalino
bull En capa fina (TLC)
bull En capa fina normalizada
bull Gaseosa (GLC)
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Reaccioacuten cromaacutetica
bull Caracterizan grupos funcionales
bull Poco sensibles y poco especificas
MARQUIS
bull Rvo de Marquis Formaldehiacutedo + Ac Sulfuacuterico
bull Reconoce grupos aromaacuteticos
Placa de toque 2 gotas de extracto + 1 o 2 gotas del Rvo
ANFETAMINAS dan color amarillo y luego marroacuten por oxidacioacuten
Nitroprusiato de Sodio y Acetaldehido
bull En medio alcalino dado por el Bicarbonato de Sodio
bull Reconoce aminas secundarias
ANFETAMINAS dan color azul
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
bull FPIA (Inmunoensayo de fluorescencia polarizada) ELISA o AMIA (multi inmunoensayo ascendente)
bull Se usa directamente la orina no necesita extraccioacuten previa
bull Obtencioacuten de resultados relativamente raacutepido
bull ELISA en 90 minutos se puede procesar gran cantidad de muestras Se justifica su uso cuando el numero de muestras es elevado (mas de 6 o 7 muestras)
bull AMIA permite determinar anfetaminas junto con otras drogas (opiaacuteceos benzodiacepinas barbituacutericos etc) en un mismo ensayo SCREENING DE DROGAS DE ABUSO EN GENERAL
DESVENTAJAbull Frecuencia de falsos positivos por reacciones cruzadas e inespeciacuteficas
VENTAJASbull Costo accesiblebull Importancia del resultado negativo
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
En capa fina (TLC)
bull Fase fija Silicagel G o GF254
bull Fases moacuteviles Acetato de etilometanolamoniaco
CloroformoMetanol
bull Reveladores Solucioacuten metiacutelica de iodo
Acido iodoplatiacutenico acidificado
Fluoresceiacutena alcalina
Ninhidrina
En capa fina normalizada
Mas sensible que la TLC estaacutendar y permite la deteccioacuten de numerosas sustancias en un uacutenico procedimiento
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Gaseosa (GLC)
bull Se derivan las anfetaminas (aminas) para transformarlas en amidas
bull De esta forma disminuye su polaridad y su interaccioacuten con la columna logrando asiacute picos mas reproducibles
bull Los detectores utilizados son ionizacioacuten de llama o de nitroacutegeno-foacutesforo
bull Se el extracto derivatizado
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico
Se utiliza el extracto evaporado
Procedimiento
Extracto se disuelve en 3 ml de Acido clorhiacutedrico 1 o Acido sulfuacuterico 01N
La lectura se la realiza haciendo un barrido desde 220 nm a 390 nm
Las anfetaminas presentan un barrido claacutesico