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Enfermedades infecciosas
Examen coproparasitoscópico, Examen general de heces,
Cultivos y Exudados
PonenteOscar A. Guzmán SuárezDiagnóstico clínico con Apoyo del Laboratorio
Recolección de la muestraRecipiente de boca ancha,
tapa hermética no necesariamente estéril, limpio sin residuos de
ningún tipo.
Muestra del tamaño de una nuez
(150-200g).
Muestras recolectadas
inmediatamente al laboratorio.
Uso de fijadores para detener el metabolismo y
cambios morfológicos.
Medios de transporte*Cary-Blair
*Solución de glicerol
Becerril M.,Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill 2013, Pág. 311-318
Técnicas Coproparasitoscópicas
Examen Macroscópico o Físico• 1)Olor
– Suigeneris– Aumentado: comida rica en carne– Débil: dieta vegetariana– Ligeramente agrio: lactantes– Pútrido: flora proteolítica aumentada– Agrio penetrante: flora sacarolítica – Nauseabundo: Descomposición de
tejidos
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
2) Color
• 3) Consistencia– Pastosas o heces
formadas– Semidiarreicas o
Semilíquidas– Diarreicas
Técnicas Cualitativas
Métodos ObservacionesDirecto (En fresco) Útil para detectar trofozoitos, no
requiere centrifugación
Concentración por flotación espontánea
(Willis)
No requiere centrifugación, útil para el hallazgo de formas parasitarias con
baja densidad.
Concentración por flotación y centrifugación
(Faust)
El más accesible y más usado, útil en el diagnóstico de la mayoria de las
parasitosis.
Concentración por sedimentación (Charles)
Detectar huevecillos de trematodos.A la par de una técnica de flotación.
Concentración por sedimentación centrifugación
(Ritchie)
Detectar huevecillos de trematodos.A la par de una técnica de flotación.
Blancas M., Fragoso P.,»Manual de Parasitología» CECyT No.15, 2012, Pág. 12-16
Métodos ObservacionesDirecto o del Frotis grueso
(Kato y Miura)Accesible y sencilla de realizar.
Útil en la detección de helmintos.
Concentración por flotación centrifugación
(Ferreira)
Se puede observar concentración de quistes.
Para el recuento de huevos y larvas.
Dilución (Stoll) No requiere centrifugación.Recuento de huevecillos
Técnicas Cuantitativas
Blancas M., Fragoso P.,»Manual de Parasitología» CECyT No.15, 2012, Pág. 12-16
Examen Microscópico
Consuelo M., Corredor A:, «Atlas de Parasitología» Ed. Manual Moderno 2006; Pág 1-56
DIGESTIBILIDAD
Los jabones indican mala digestión de lípidos.
Lípidos: grasas neutras y ácidos grasos.
Glúcidos: (almidón) indigestibilidad o exceso de ingesta de vegetales ricos en ellos.
Células Vegetales: Provienen de la dieta y su cantidad está relacionada con ésta.
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
Fibra muscular Grasas
JabonesAlmidón
Consuelo M., Corredor A:, «Atlas de Parasitología» Ed. Manual Moderno 2006; Pág 1-56
Fibra
Tricoma
Aire
Células vegetales
Haces vasculares
Célula vegetal
Consuelo M., Corredor A:, «Atlas de Parasitología» Ed. Manual Moderno 2006; Pág 1-56
Cristales de Charcot-leyden: disentería amebiana o degradación de eosinófilos.
Consuelo M., Corredor A:, «Atlas de Parasitología» Ed. Manual Moderno 2006; Pág 1-56
Formas Evolutivas Eliminadas PROTOZOARIOS
QUISTES/TROFOZOITOS:
Giardia lambliaEntamoeba histolyticaBalantidium ColiEndolimax nanaIodomoebaSchilomastixBlasstocistys hominis
Consuelo M., Corredor A:, «Atlas de Parasitología» Ed. Manual Moderno 2006; Pág 1-56
Formas Evolutivas EliminadasHELMINTOS
HUEVOS:-Ascaris lumbricoides-Trichuris Trichiura-Enterobius vermicularis-Ancylostoma duodenale-Necator americanus-Taenia Solium-Taenia saginata-Hymenolopsis nana-Schistosoma mansoni
LARVAS:- Strongyloides estercolaris
VERMES ADULTOS:
-Ascaris lumbricoides- Taenia sp (proglotes)-Enterobius vermicularis
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
Consuelo M., Corredor A:, «Atlas de Parasitología» Ed. Manual Moderno 2006; Pág 1-56
PARASITOS
Entamoeba histolytica: Quiste maduro con 4 núcleos, barra de
cromatina, trofozoíto grande, inclusiones celulares.
Indiferente morfológicamente de E. dispar
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
Giardia lamblia: Patógeno, axostilo y dos núcleos característicos. Trofozoitos y quistes.
Generalmente, con forma ovoide.
Consuelo M., Corredor A:, «Atlas de Parasitología» Ed. Manual Moderno 2006; Pág 1-56
Trichuris trichiura: Huevo como fase infectante con forma “Balón futbol americano”
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
Ascaris lumbricoides: Huevos mamelonados (capa albuminosa).
Huevo fértil e infértil.
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
Taenia sp.: Huevos redondeados con una especie de corona radiada y ganchos en su interior.
Morfología de huevo similar en especies T. saginata y T. solium.
Morfología de larva distintiva.
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
• Hymenolepis nana: Huevos ovales con dos engrosamientos polares cada uno con 4 filamentos polares finos.
• Hymenolepis diminuta: Huevos ovales carece de filamentos polares.
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
Uncinarias: No se diferencian entre sí en la fase de huevo. Son ovoides con capa hialina, delgada y transparente.
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
Enterobius vermiculari: Huevo ovoide con larva en su interior.
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
Strongyloides stercolarisSe aprecian las larvas rabditoides hembras (cuerpo alargado) y machos (tiende a enrollar parte de su cuerpo.
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
Medios de Cultivo
Medio de las NNN(Novy, MacNeal,
Nicolle)Útil para T. brucei Medio LIT
(Liver Infusion Tryptose)
Este mediose utiliza para
obtener antígenos, proteínas totales o
DNA.
Medio TYI-S-33 (Trypticase, extracto
de levaduras, hierro y suero)
E. histolytica E. dispar
Medio NNEAmebas
Medio SCGYEM(caseína, glucosa,
extracto de levaduras)
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
Medio TYI-S-33 (Trypticase, extracto
de levaduras, hierro, suero y bilis)Giardia Intestinalis
Medio TYM (Trypticase, extracto
de levaduras y maltosa)Trichomonas vaginalis
RPMI-1640 modificadoCryptosporidium parvum
Medio de cultivo para estadios asexuales
de paludismo (MCM)
Marco Becerril. (2013). Parasitología Médica, Ed Mc Graw Hill, Pág. 311-318
EXUDADO FARÍNGEO
• El exudado faríngeo se realiza utilizando un hisopo especial para detectar la presencia de estreptococo gropo A, que es la causa más común de la faringitis estreptocócicca.
• Una muestra tomada de la pared posterior de la garganta se coloca en un cultivo)ue permite el crecimiento de las bacterias.
EXUDADO FARINGEO
El tipo específico de infección se
determina utilizando análisis
químicos.
Si no hay crecimiento de
bacterias, el cultivo es negativo y la persona no tiene
una infección estreptocócicca.
• La faringitis estreptocóccica se presenta comúnmente en niños en edad escolar.
• La infección puede provocar dolor de cabeza, dolor de estómago, náuseas, vómitos y languidez.
• Las infecciones estreptocóciccas de la garganta no suelen ir acompañadas de síntomas de resfrío, como tos, estornudos, congestión o mucosidad nasal.
TOMA DE MUESTRA
• Nombre y apellido• Sexo - Edad• Procedencia (ambulatorio -
internado)• Número de historia clínica y
de cama (si está internado).• Tipo de muestra remitida• Fecha y Hora de la toma• Diagnóstico Presuntivo -
Enfermedad de base• Medicación recibida
(antibióticos)• Otros cultivos (previos y
paralelos)• Instrumentación (material
necesario que requerirá durante el análisis
• Se inclina la cabeza hacia atrás con la boca bien abierta y se frota la parte posterior de la garganta con un hisopo o aplicador de algodón estéril cerca de las amígdalas.
PROCEDIMIENTO DE LA TOMA
Se presiona la lengua hacia abajo para evitar queTenga contacto con el hisopo
La garganta puede doler al momento del examen e igualmente se puede experimentar una sensación de náuseas cuando se toca la parte posterior de la garganta con el aplicador de algodón, pero el examen sólo dura unos cuantos segundos.
Con el fin de mejorar las probabilidades de detectar bacterias, el aplicador se puede utilizar para raspar la parte posterior de la garganta varias veces.
Razones por las que se realiza el examen
Este examen se realiza cuando se sospecha de una infección en la garganta, en particular, una faringitis estreptocócica.
PROCEDIMIENTOUna vez obtenida la muestra, del exudado faríngeo, se
procederá a la identificación de los microorganismos que posiblemente estén presentes en la misma.
1.- Frotis de exudado faríngeo: en general el examen directo por tinción no tiene interés, ya que la abundante flora saprofita nos confunde; para identificar el germen hay que recurrir al cultivo.
Las tomas deben de ser sembradas enseguida y con medio de transporte adecuado; no se ha de tardar más de 4-5 horas. Se prosigue a sembrar en medios de cultivo, tomando como los más nutritivos agar sangre y agar chocolate, se pueden usar también el Agar McConkey, entre otros.
Después se procede a incubar a 37ºC y observar resultados en 48 horas.
2.- Cultivo y antibiograma de exudado faríngeo.
Valores normalesUn resultado normal o negativo significa que no se encontró ninguna bacteria u otros microorganismos que puedan causar un dolor de garganta.
Significado de los resultados anormalesUn resultado anormal o positivo en el cultivo significa que se observaron bacterias u otros microorganismos que pueden causar un dolor de garganta en el exudado faríngeo.
Exudado Nasofaríngeo
Razones por las cuales se realiza el examen
• Con este examen, se identifican los virus y bacterias que causan síntomas de las vías respiratorias altas.
• Los cultivos nasofaríngeos sirven para identificar virus respiratorios y bacterias específicas tales como:
• Bordetella pertussis• Neisseria meningitidis• Staphyloccus aureus
Formas en que se realiza la toma Se le indica al
paciente que extienda la
cabeza.
Se pasa el hisopo por la fosa nasal.
Parte posterior de la faringe que cubre el paladar.
Hasta la nasofaringe
El hisopo se rota y se retira.
El hisopo se mantiene in situ de 10-15 segundos durante el acceso de tos, después de lo cual se retira rápidamente.
Exudado vaginal
Examen realizado
para determinar etiología
*Vaginitis*Flujo
vaginal*ITS
*Vaginosis bacteriana
**Estreptococo B
Toma de muestra de secreciones vaginales
Camilla ginecológica Especulo vaginal
Hisopo de alginato de
calcio o Dacron
Tubo con 1 mm de suero
fisiológico pipeta
desechable
Material
No óvulos
No antiséptic
os
No antibiótic
osNo
pomadas
No lubricante
s
No relaciones sexuales 48 hrs
Condiciones previas
Posición de litotomía o
ginecológica
Procedimiento
• Con la paciente en posición ginecológica se introducirá un espéculo “sin lubricante” (si fuera necesario lubricar, utilizar solo agua tibia)
• Recoger la muestra,
bajo visión directa, con un hisopo del fondo del saco vaginal posterior.
• Repetir la operación con un segundo hisopo.
• Recoger con la pipeta una muestra de fondo de saco y descargar en el tubo con suero fisiológico.
Se obtendrán dos hisopos,
uno destinado al estudio
microscópico y otro al cultivo.
La muestra en suero
fisiológico se destinará al examen en fresco para
investigación de
Trichomonas vaginalis
Esta muestra se utiliza para
conocer la etiología en
casos de vaginitis y vaginosis.
Puede utilizarse para búsqueda de portadoras de Streptococcus del grupo B en embarazadas.
Medios de Cultivos
Base Agar Gelosa Sangre• Medio para propósitos generales, para el
aislamiento y cultivo de numerosos microorganismos.
• Con la adición de sangre, el medio es útil tanto para el aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de una gran variedad de muestras, como para la observación de reacciones de hemólisis.
• También, este medio de cultivo, puede utilizarse como medio base para preparar el medio agar chocolate.
E.M.B. Agar• Este medio es utilizado para el
aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales.
• Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.
Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un característico brillo metálico.
E. coli
Salmonella typhimuriumShigella flexneri Enterococcus
faecalis
Klepsiella pneumoniae
Mac Conkey Agar• Este medio se utiliza para el aislamiento de
bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos.
• Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos.
• Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
Estafilococo 110 Agar• Es un medio selectivo para el aislamiento y
diferenciación presuntiva de estafilococos, en base a la producción de pigmentos, la fermentación de manitol y la hidrólisis de gelatina, a partir de alimentos y otras muestras.
• En el medio de cultivo, el extracto de levadura y la tripteína aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos.
Sal y Manitol Agar• Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el
aislamiento y diferenciación de estafilococos. • Es recomendado para el aislamiento de estafilococos
patogénicos a partir de muestras clínicas, alimentos, productos cosméticos y otros materiales de importancia sanitaria.
• También, este medio puede utilizarse para el cultivo de especies de Vibrio, si no se dispone de medios apropiados (TCBS Medio, Medio Marino, etc.), aunque algunas especies pueden no desarrollar.
Los estafilococos coagulasa positiva
hidrolizan el manitol acidificando el
medio; las colonias aparecen rodeadas
de una zona amarilla brillante.
Los estafilococos coagulasa negativos,
presentan colonias rodeadas de una
zona roja o púrpura.
Las colonias sospechosas, se repicarán en un
medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles,
posteriormente, la prueba de la coagulasa.
Salmonella Shigella Agar• Medio de cultivo utilizado para el aislamiento
de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia.
• Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa, y a la formación de ácido sulfhídrico a partir del tiosulfato de sodio.
Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obteniéndose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo.
Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y producen colonias transparentes. La producción de ácido sulfhídrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formación de sulfuro de hierro.
Cerebro Corazón Infusión• Medio líquido adecuado para el enriquecimiento
y cultivo de bacterias aerobias y anaerobias, de microorganismos exigentes como estreptococos, neumococos y otros microorganismos de difícil desarrollo.
• Con el agregado de 20 Ul de Penicilina y 100 µg/ml de amikacina, se utiliza este medio para el cultivo de hongos patógenos.
Tetrationato Caldo• Medio de cultivo utilizado para el
enriquecimiento selectivo de Salmonella spp. a partir de heces, orina, alimentos y otros materia
• Permmite el desarrollo de bacterias que contienen la enzima tetrationato reductasa, como ser la Salmonella spp. e inhiben el desarrollo de la flora acompañante les de importancia sanitaria.