Acido Úrico

Introducción

El acido úrico del suero es el producto final del metabolismo de las purinas en los tejidos y es eliminado a través de los riñones por filtración celular. Altos niveles de Acido urico son el resultado de enfermedades como Leucemia, Polistemia, la ingestión de comidas ricas en nucleoproteínas o cuando la función renal está deteriorada.

La gota resulta del depósito de Acido Úrico en las articulaciones.

El acido úrico ha sido ensayado por una variedad de procedimientos incluyendo la reducción del acido fosfotungstico, y por la edición directa a 293 nm antes y después del tratamiento con uricasa. Los productos del reactivode uricasa han sido usados también como base para las determinaciones del acido úrico. El método del acido fosfotungstico carece de especificidad y los procedimientos de uricasa son laboriosos e insensibles.

El procedimiento EAGLE (TPTZ) de acido urico emplea el método de reducción férrica propuesto por Morin. Este método ofrece una determinación sensible y rápida del acido úrico en la cual la interferencia es mínima.

Fundamento

Una mole de acido urico reduce cuatro moles de iones ferricos a la forma ferrosa, 2, 4, 6-tripyridyl – triazine (TPTZ) reacciona con los iones ferrosos para formar un complejo en color azul el cual absorbe fuertemente a 590 nm.

Reactivos

Reactivo amortiguado – ferrico0.66 mM iones ferricos en acetatto amortiguado (pH=4.65) Incluye estabilizadores

Reactivo TPTZ12.0 mM TPTZ en metanol, incluye estabilizador.

Calibrador de acido urico ATPZ10 g/dL Acido urico Estabilizador y preservativo incluidos.

Muestra

Suero sanguíneo no hemolizado

Procedimiento

Material

Reactivo TPTZ Calibrador Acido uricoMicropipeta 0.02 mL.Pipeta o dosificador 2.00 mL.

Condiciones de la reacción

Longitud de onda 590 nmSelección de filtro 580 – 610 nmTipo de reacción Punto final

Tiempo de incubación 15 min a 25 grados CTemperatura de incubación 10 min a 37 grados C

Volumen de la muestra 0.002 LVolumen del reactivo 2.00 mL

Volumen total 2.02 mLNormal bajo 2.02 mLNormal alto 7.0 mg/dL

Valor de calibrador 10.0 mg/dL

Técnica

1. Coloque 2.00 mL del Reactivo en función en tubos etiquetados: Blanco de Reactivos, calibrador, control, muestra 1, etc.

2. Colque 0.002 mL de la muestra en un tubo debidamente etiquetado. Use agua desionizada como muestra para el Blanco de reactivo. Mezcle bien.

3. Permita a las muestras de la prueba estar a temperatura ambiente por 15 min. (o 10 min a 37 C)4. Ajuste el instrumento a cero de absorción a 590 nm usando el Blanco del reactivo.5. Lea y registre los valores de absorción para el calibrador, control y desconocidos.

Calculo de resultados

La siguiente ecuación es usada para determinar la concentración de la muestra desconocida:

Con .Desc (mgdL )=|.|Desc .|.|Cal .

xCal .Conc . (mgdL

)

Valores esperados

Hombres 3.0 – 7.0 mg/dLMujeres 2.2 – 6.2 mg/dL