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COLERADANILO ALEJANDRO SOLARTE ORDOÑEZ
UNIVERSIDAD DE CALDASPROGRAMA DE MEDICINA
BACTERIOLOGIA 2016-1
Infección intestinal aguda, grave, que se caracteriza por la aparición de deposiciones diarreicas abundantes, con o sin vomitó y deshidratación que puede llevar al paciente a shock y acidosis en el terminó de 24 horas y en algunos casos puede ocasionar la muerte.
HISTORIAThomas Sydenham fue el primero en distinguir el cólera, la
enfermedad, de la cólera, el estado de ira. Propuso el término de colera morbus.
La era moderna del cólera se caracteriza por siete pandemias. Las primeras seis acontecieron entre 1817 y 1923.
La primera pandemia, en el año 1817, que persisti durante 6 años y ócausó gran mortalidad mayormente en la India.
La segunda, entre 1826 y 1851 comenz en India y afectó Asia, óEuropa (incluida Inglaterra), Africa y en 1832, América del Norte, América central (Cuba, México, Guatemala, Nicaragua, Panama, Jamaica) y América del Sur (Guyana, Brasil y Uruguay).
La tercera pandemia, de 1852 a 1859, afectó Asia, Africa y Europa (incluyendo Inglaterra) y América (Estados Unidos, Canada , Colombia, Trinidad y Tobago, Saint Thomas, Venezuela, Guayana, Brasil, Uruguay, Costa Rica, El Salvador, Honduras, Nicaragua, Guatemala y Argentina).
En Italia, en 1854, Filippo Pacini publicó sus observaciones al descubrir un bacilo curvo en las heces de las victimas de cólera, y acuñ el término de óVibrio cholerae para el patógeno.
La cuarta pandemia, entre 1863 y 1879, afectó Asia, Europa y América (Estados Unidos, Guadalupe, Republica Dominicana, Cuba, Saint Thomas, Nicaragua, Belice, Honduras, Paraguay, Brasil, Chile, Bolivia, Peru, Uruguay y Argentina).
1883 Robert Koch aisló por primera vez el biotipo clasico de V cholerae.La quinta pandemia entre 1881 y 1896 se extendi por Europa, Asia, ó
Africa, y América(Estados Unidos, Argentina, Brasil, Chile y Uruguay). La sexta pandemia de 1899 a 1923 comenzó en el subcontinente Indio y
se extendió por Africa, Asia Menor, y Europa. El Vibrio cholerae O1 El Tor fue descubierto por Gotschild en el contenido
intestinal de muertos por cólera en el campo de cuarentena (Sinai, Egipto) en 1905.
La séptima pandemia se originó en las islas Célebes, Indonesia en 1961. Esta pandemia ha sido la mas prolongada y ha afectado a un mayor numero de paises y continentes que las otras seis.
Epidemiologia Las especies de Vibrio, como V. cholerae, crecen de forma natural en los estuarios y en los mares de todo el mundo. Todas las especies de
Vibrio son capaces de sobrevivir y de replicarse en las aguas contaminadas con una mayor salinidad. Los vibrios patógenos pueden crecer rapidamente en aguas con crustaceos quitinosos (p. ej., ostras,
almejas, mejillo- nes), de ahi la asociación entre las infecciones por Vibrio y el consumo de crustaceos. Las personas con infecciones
asintomaticas pueden ser también un importante reservorio de este microorganismo en las ronas donde la enfermedad por V. cholerae es
endémica.
Las epidemias mas recientes tuvieron lugar en 2004 en Bangladesh después de una inundación, entre 2008 y 2009 en Zimbabwe y en 2010
en Haiti después del terremoto devastador. El cólera se propaga a través del agua y la comida contaminadas mas que por transmisión
directa de una persona a otra, debido al elevado inóculo (p. ej., mas de 108 microorganismos.
En 2012, un total de 48 paises de todos los continentes, reportaron casos de cólera a la OMS; una disminución de 17% en el numero de
paises en comparación con el 2011.
FISIOLOGIA Y ESTRUCTURA
V. cholerae es un bacilo gramnegativo curvo que mide 1-3 mm de longitud y 0,5-0,8 mm de
diametro.. La bacteria posee un flagelo polar unico que le confiere el movimiento irregular
observado en el examen microscópico y varios pili para la virulencia. todas las cepas cuentan
con lipopolisacarido formado por lipido A (endotoxina), polisacarido central y una cadena
lateral de polisacarido O.
Las especies de Vibrio pueden crecer en una variedad de medios sencillos con un amplio intervalo de
temperatura (de 14 °C a 40 °C). Todas las especies de Vibrio necesitan cloruro sódico (NaCl) para crecer. V
cholerae puede crecer en la mayor parte de los medios de cultivo sin añadir sal, pero la mayor parte de las demas especies (especies halófilas) necesitan de la
adición de NaCl. Los vibrios toleran un amplio intervalo de pH (p. ej., pH de 6,5 a 9), aunque son sensibles a los
acidos gastricos. Los pacientes con reducción o neutralización de la producción de acidos gastricos
son mas vulnerables a las infecciones por este género.
IMPORTANCIA DEL POLISACARIDO O??
La estructura antigénica de este patógeno es similar a la de otros miembros de la familia
Enterobacteriaceae, con un antigeno H flagelar y un polisacarido o antígeno O somatico.
El polisacarido O se emplea para subdividir las especies de Vibrio en serogrupos: se han definido 206 sero-grupos de V cholerae. V. cholerae O1 y 0139 son las mas importantes.
Entre otras cepas importantes de esta especie estan V cholerae no-O1 y no-O139(NOVC)
A
Polisacarido o Antígeno O
Polisacarido O Ag. A(+) O1 - O139 Ag. A(-) No O1 – No o139
SEROGRUPOS
LIPOPOLISACARIDO
V. Cholerae no-O1 y no-O139(NOVC) Algunas de estas cepas carecen de
CTXΦ(bacteriófago lisogenico) y también VPI(Isla de patogenicidad de Vibrio) y por ende muchas no producen tampoco la toxina(Aun asi producen diarrea algo mencionado adelante). No causan
enfermedad epidémica. suelen aislarse de fuentes ambientales y pueden producir casos esporadicos de
gastroenteritis y en el caso de las cepas no-O1 de infecciones extra-intestinales como septicemia…
Porque??
Porque junto a V. vulnificus produce capsulas polisacaridas acidas y son capaces estimular al sistema inmune y producir una gran descarga de mediadores inflamatorios por medio de las
OMVs (spherical outer membrane vesicles), originando infecciones diseminadas y
septicemia. V. cholerae O1 no produce ninguna capsula, asi que las infecciones provocadas por este organismo no se extienden mas alla de los
límites del intestino.
V. Cholerae O1 y O139 sintetizan la toxina del cólera y se
asocian a la aparición de epidemias de esta entidad entre estas dos la mas
importante es la cepa O1, por su importancia se hara una descripción de cada una de ellas por separado.
- Los Serotipos… se clasifican segun la expresión de Antigenos B o C ademas del Ag A ya expresado. AB C
LIPOPOLISACARIDO
Polisacarido o Antígeno O
Cepas O1 Ag. AB(+) Ogawa Ag. AC(+) Inaba Ag. AB-C(+) Hikojima
SEROTIPOS
V. Cholerae O1 : Es considerado el serogrupo virulento y epidémico por excelencia. puede
clasificarse en tres serotipos de acuerdo con la presencia de antigenos somaticos y en dos biotipos de acuerdo con las caracteristicas fenotipicas
especificas
- Los Biotipos…
Se han definido dos biotipos de V cholerae 01 De acuerdo a los métodos de biotipificación y perfiles
moleculares de la toxina, islas patogénicas y el factor de colonización de los cuales se encuentran:
Clasico y El Tor
V. Cholerae O139: Esta formado por varias cepas diversas
genéticamente, tanto toxigénicas como no toxigénicas, y se han identificado como minimo
nueve ribotipos diferentes. Este nuevo serogrupo esta mas próximo genéticamente a V. cholerae El
Tor y podria haberse originado a partir de él, adquiriendo caracteristicas distintivas de un donante no identificado, probablemente un
Vibrio no O1, a través de la recombinación del material genético, fabrican una capsula de polisacaridos parecida a las cepas no-O1
PATOGENIA
GENOMAV. cholerae, like many other bacterial enteric pathogens, is
classified as a γ-proteobacteria. Unlike most γ-proteobacteria, such as E. coli, whose genomes consist of single circular chromosomes, the genome of V. cholerae is unequally
divided between two circular chromosomes
Vibrionaceae species Genome size(Mb) %GC Proteins
Chromosome 1 2.96 47 2.742
Chromosome 2 1.07 47 1.093
CROMOSOMA 2-Proteinas ribosomales
-Proteinas para Transporte de azucares, iones metalicos y aniones
-Proteinas para el metabolismo de azucares
- Gran parte (59%) de marcos abiertos de lectura (ORFs) hipotéticos y ORFs de
los que se desconoce su función.-Gran sistema de captura de genes, conocido como isla de integrones.
CROMOSOMA 1- Replicación y reparación de ADN. ,Transcripción de genes,
Traducción de proteinas- Biosintesis de la Pared celular
- Una variedad de vias centrales de catabolismo y biosintesis
. La mayoria de los genes esenciales para la patogenicidad, como la toxina
colérica, el pilus co-regulado por toxina, los lipolisacaridos y la
maquinaria de secreción de proteinas extracelulares
Posible explicación para la presencia de los dos cromosomas
A plausible explanation for the evolution of the bipartite V. choleraegenome is that a remote ancestor of V. cholerae (and all vibrios),
acquired a large plasmid that subsequently obtained essential genesand other chromosome-like features. Acquisition of virulence-linked
genes from other (unknown) donor organisms via lateral gene transferhas also played a central role in the evolution of pathogenic V.
cholerae.
Factores de virulenciaFactor Siglas Gen Actividad enzimatica Mecanismo de accion
Sub unidad A Toxina colérica CTA ctxA Estimula la producción de enzima adenilciclasa
Alteración del transporte activo de electrolitos a través de la membrana celular, impidiendo la adsorción de liquido y susecreción por el intestino delgado.
Sub unidad BToxina colérica
CTB ctxB Unión a los receptores del gangliosido Gm1 en las células epiteliales de la mucosa intestinal
Pili corregulado por toxina TCP tcpP Pilus tipo Ivb Factor de colonización y receptor para CTX
Neuraminidasa VCNA nanH Remoción de residuos de acido sialico.Escinde moléculas de mucina desde la célula intestinal exponiendo GM1Actua sobre los gangliósidos de alto ordeny los convierte en gangliósidos GM1
Exponer el GM1, receptor esencial de la toxina colérica
Factor Siglas Gen Actividad enzimatica Mecanismo de accion
Hemaglutinina/proteasa HapA hapA zn-metaloproteasa, acción sobre lasproteinas asociadas a la zona ocludens
Perturba la barrera paracelular en los cultivos de células de epitelio intestinal
Motilidad Flg flg Promueve la penetración de la barrera mucosa
Colonización intestinal
Toxina multifuncionalauto-procesada RTXde Vibrio cholerae
MARTXvc rtxA Inactivación de las GTPasas pequeñas y entrecruzamiento covalente de monómeros de actina
Disrupción del citoesqueletoRedondeamiento celular
V. choleare citolisina(hemolisina)
VCC hlyA Oligos de HlyA inducen TLR2 Expresión de IgM e IgA
Monómeros de HlyA inducen caspasa-9y caspasa-3.
Lisis celular, vacuolización e incremento de la apoptosis en células del epitelio intestinal
Factor Siglas Gen Actividad enzimatica Mecanismo de accion
HemaglutininaManosa sensible
MSHA mshA Pilus del tipo IV, adherenciaa superficies abióticas
Facilita la supervivencia de la bacteria en ambientes acuaticos, formación de biopeliculas.
Toxina Cholix ADP-RibosiltransferasaInhibición de las sintesis proteicapor modificación especifica del factor2 de elongación
Sobrevivencia en el ambiente acuatico.
Otros factores de virulencia
- Isla de integrones: Sistema de captura de genes por el cual los miembros de esta especie pueden importar genes exógenos.- OMVs(outer membrane vesicles)
Producidos por el Bacteriofago
- Enterotoxina accesoria del cólera, - Toxina de la zónula oclusiva - Proteínas quimiotacticas.
Mecanismo De
Patogenicidad
1- ACCION DEL BACTERIOFAGO
Los genes de la toxina del cólera (CT) [ctxA y ctxB), son portados por el fago lisogenico CTXΦ. Este puede transmitir los genes tóxicos entre
cepas de esta bacteria que expresen TCP, receptor del fago. Cuando el fago se une a este receptor el ADN con los genes de la CT pasa al
interior de la célula bacteriana y se integran al genoma. Los genes son parte un operón ctxAB.
UNION A TCP y liberación del ADN con los genes de la toxina.
Luego de la unión al ADN bacteriano, el operon ctxAB se replica y se forma el transcrito (ARNm) del operón ctx el
cual tiene dos sitios de unión a ribosoma (RBS), uno en el gen A(ctxA) y otro en el gen B(ctxB). Este ultimo es, por lo
menos, siete veces mas fuerte y tiene mucha mayor afinidad por ribosoma que el sitio de la región A. De esta
forma el microorganismo es capaz de traducir mas proteinas B que A, lo cual se requiere para ensamblar la
toxina en la proporción apropiada (1A:5B), el ensamblaje de las dos sub unidades de la CT ocurre en el periplasma
después de la traducción.
El locus cromosómico de este bacteriófago lisogénico contiene, igualmente, otros factores de virulencia: - el gen ace: para la enterotoxina accesoria del cólera.- el gen zot para la toxina de la zónula oclusiva.- el gen cep para las proteinas quimiotacticas.
2- ACCION DE LA TOXINA COLERICA(CT)La toxina formada por el complejo A-B semejante desde el punto de vista estructural y funcional a la enterotoxina termolabil de Escherichia coli.
Un anillo compuesto por cinco subunidades B idénticas de la toxina del cólera se une a los receptores del gangliósido GM1 en la superficie de las células epiteliales
intestinales ( los cuales han sido expuestos por la acción de la Neuraminidasa)La porción activa de la subunidad A se internaliza y se divide en dos partes A1 y A2, A1 interacciona con proteinas G que controlan la adenil ciclasa y provoca la
conversión catabólica del trifosfato de adenosina (ATP) en monofosfato de adenosina ciclico [AMPc), lo que produce un incremento de la secreción de
cloruro y por con siguiente de agua y una disminución de la absorción de cloruro y de sodio. Los pacientes aquejados de una infección grave llegan a perder hasta
1 litro de liquido por hora durante el periodo de maxima actividad de la enfermedad.
3- ACCION DE OTROS FACTORES DE VIRULENCIA
HEMAGLUTININA/PROTEASA(HapA)- Puede degradar proteoliticamente varias proteinas de importancia fisiológica para el hospedero, incluyendo la mucina. - HapA perturba la barrera paracelular en las células del epitelio intestinal, por la acción en las proteinas asociadas a la zona ocludens. - Se ha probado que la proteasa HapA contribuye a la reactogenicidad en las vacunas de cólera de cepas atenuadas en humanos.
TOXINA MARTX DE VIBRIO CHOLERAEEsta codificada por un elemento genético situado muy cerca
del lugar de inserción del genoma del bacteriófago CTXØ, aunque su actividad es independiente del elemento CTX. El
gen rtxA es el marco abierto de lectura mas largo en el genoma de V. cholerae. La MARTXVc es secretada por un
sistema T1SS atipico, compuesto por cuatro componentes. Esta toxina rompe los filamentos de actina del
citoesqueleto de un amplio rango de tipos celulares. Esta disrupción se produce por la inactivación de las GTPasas
pequeñas, Rho.
HEMOLISINA O CITOLISINA(VCC)La mayoria de los aislamientos de V. cholerae O1 biotipo El Tor y no-O1/no-O139 producen una exotoxina hemolitica, llamada El Tor Hemolisina o V. cholerae citolisina (VCC) codificada por el gen cromosomal hlyA. VCC es capaz de causar severos efectos citotóxicos, tales como: - Lisis celular, vacualización e incremento de la apoptosis en células del epitelio intestinal. - Inducen la expresión de IgM e IgA.
HEMAGLUTININA MANOSA SENSIBLE
Una estrategia bacteriana alternativa para sobrevivir en el ambiente, es la formación de Biopelículas.
La presencia de este pilus del tipo IV, llamado Hemaglutinina manosa sensible (mannose-sensitive hemagglutinin, MSHA), codificado por el gen mshA esta implicado en la formación de dichas biopeliculas en un
mecanismo regulado por quorum sensing
Todo estos factores de virulencia por parte de la bacteria llevan a una acusada pérdida de
liquidos provocaria normalmente la eliminación de los microorganismos del aparato digestivo,
como hace la bacteria para no ser eliminada??
*TCP codificado por el complejo génico tcp *Las proteínas quimiotacticas codificadas por los genes cep del fago.
Las cuales le permiten a la bacteria la adherencia firme a la capa de células mucosas
En consecuencia, el TCP es un elemento destacado tanto como receptor del fago portador del gen de la toxina del cólera como para la adhesión a la mucosa
que tapiza el aparato digestivo. Las cepas no adherentes son incapaces de establecer una infección.
En ausencia de la toxina del cólera, V. cholerae 01 y las cepas NOVC aun pueden provocar una diarrea significativa por medio de la acción de
- La toxina de la zónula oclusiva - La enterotoxina accesoria del cólera.
La toxina de la zónula oclusiva relaja las uniones estrechas (zonula occludens] de la mucosa del intestino delgado, lo que incrementa la permeabilidad intestinal, mientras que la enterotoxina produce aumento de la secreción de liquido.
Ambas producidas por el genoma bacteriófago
QUORUM-SENSING Las bacterias son capaces de producir unas moléculas
pequeñas difusibles, llamadas autoinductores que se asocian a sensores expresados en la membrana para formar parejas de autoinductor-sensor. Los autoinductores se acumulan en el
medio cuando ocurre un incremento de la densidad celular, y regulan la expresión de un amplio numero de genes, que a su
vez controlan una variedad de funciones fisiológicas, en un proceso que se conoce como “quórum-sensing”. Es te “censo-
poblacional”, le permite al grupo bacteriano modular la expresión de genes específicos sólo en ciertos momentos de densidad de población. En V. cholerae se ha demostrado que el “quorum-sensing” regula negativamente y positivamente la
expresión de los genes de virulencia
OMVs contain peptidoglycan, which is sensed mainly by the pattern-recognition receptor NOD1 in the cytoplasm of host cells We showed that non-O1 non-O139 V. cholerae (NOVC) strains of V. cholera produce
OMVs. Of note, we revealed that NOVC can evade NOD1-mediated immune surveillance by the quorum sensing machinery.
1- Recognition of Bacteriaby the Host
2- Interaction of OMVswith the Host Cell
1
2
Taken together, this suggests that the mode of uptake of OMVs might be specific for the relevant bacteria and host cell-type
Como se habia dicho las cepas NOVC tienen la capacidad de producir enfermedades esporadicas, algunas veces
gastroenteritis, y estan muy involucradas en enfermedades sistémicas por la capacidad que tienen de formar una capsula
de polisacaridos.
Ademas estas mediante las OMVs pueden activar al sistema inmune y producir una gran descarga de factores pro
inflamatorios algo importante en la producción de septicemia y que de alguna manera compensa el déficit de algunos
factores de virulencia importantes como la CT en estas cepas, el quorum sensing es un factor muy importante en este
mecanismo de patogenicidad…
3- The Role of Quorum Sensingin OMV-Mediated Inflammation
Las principales parejas de auto inductores-sensores de V. cholerae son
- Cólera autoinductor 1 que se asocia al sensor de membrana CqsS( CAI-I/CqsS)
- Autoinductor 2 que se asocia al sensor LuxPQ(AI-2/LuxPQ), Que funcionan de manera sinergistica para la regulación de los
genes a traves de la modulación de la la actividad de un regulador de la transcripcion, HapR a través de la proteina
represora LuxO.
El regulador de transcripción HapR • Regula negativamente la expresión de factores de virulencia,
como TCP, HA/P, VCC, PrtV y de la CT• Regula positivamente la formación de OMVs y genes
implicados en la biosíntesis del peptidoglucano que las conforma especialmente en las cepas NOVC que carecen de otros importantes factores de virulencia.• Regula positivamente la formación del biofilm.• Regulación positiva de genes de la pared celular y otros
componentes de membrana• Regulación de la expresión de otros genes importantes como
vc2635, el cual codifica para una proteina ligadora de penicilna, entre otros.
A baja densidad de células y autoinductores inhibición del regulador HapR y asi regulación positiva para la expresión de factores de virulencia como tcpP(gen para TCP) HA/P, VCC, PrtV y otros para colonizar multiplicarse y producir la CT, secreción de OMVs pero con bajas concentraciones de peptidoglucano que no inducen respuesta inflamatoria.
A alta densidad de celulas y autoinductores activación del regulador HapR con regulación negativa de los F.V y positiva de las OMVs asi mismo activación de la respuesta Inmune(por la producción de peptidoglicano en las OMVs inducido por HapR que interactua con NOD1-NOD2 principalmente en cepas NOVC) y activación los genes para la formación del biofilm.
TRANSMISION La dosis infecciosa de Vibrio cholerae O1 ha sido estimada en
105-108 en humanos, pero puede ser tan bajo como 103 en presencia de aclorhidria o hipocloridria. El periodo de incubación
oscila entre 12 horas a 5 dias. Promedio de dos a tres dias .
MANIFESTACIONES CLÍNICAS En cólera grave, el volumen de diarrea acuosa puede exceder de 1 L /
hr. El vómito es comun. En las etapas iniciales, la diarrea puede contener contenido intestinal; Sin embargo, como la diarrea progresa,
se vuelve mas acuosa, con el tiempo cada vez mas claro, con las cubiertas de mucosidad blanca con olor a pescado. Los individuos con el cólera son generalmente a febril y pueden ser causa de hipotermia
severa deshidratación.La extensa secreción de fluido en el lumen intestinal puede conducir a
calambres abdominales y el malestar, y la deshidratación grave y perturbaciones en los niveles de calcio y de potasio puede conducir a
dolor y espasmo muscular, e incluso tetania. En los pacientes con deshidratación grave, la piel puede llegar a ser moteada o oscurecida.
El pulso periférico suele ser rapido en las etapas iniciales de la deshidratación; sin embargo, puede llegar a ser progresivamente mas débil, llegando a no ser
palpable con la progresión de la deshidratación.
La hipoglucemia puede ser grave, especialmente en niños con limitadas reservas de glucógeno, y puede contribuir a letargo, convulsiones y coma.
El cólera es una enfermedad aguda, y las complicaciones de cólera refleja hipoperfusión grave y puede incluir derrame cerebral, necrosis tubular aguda
con disfunción renal y neumonia por aspiración de la extensa vómitos.
El cólera es una enfermedad aguda, y las complicaciones de cólera refleja hipoperfusión grave y puede incluir derrame cerebral, necrosis tubular aguda
con disfunción renal y neumonia por aspiración de la extensa vómitos.
La enfermedad causada por el biotipo clasico de V. cholerae O1 es mas grave que la causada por cepas del biotipo El Tor O1, esto se evidencia en las diferencias en las secuencias de aminoacidos
de la toxina colérica producidos por los dos biotipos puede dar cuenta de la gravedad
aumentada de la diarrea asociada con el biotipo clasico.
GastroenteritisLos serogrupos NO-O1 Y NO-O139 . Son los que con mas frecuencia se asocian a gastroenteritis y septicemia.La mayoria de estas enfermedades son de gravedad leve, la mayoria de las personas se recuperan sin problemas y sin la necesidad de buscar atención médica. Las manifestaciones cli- nicas del cólera comienran, por término medio, entre 2 y 3 dias después de la ingestión de las bacterias, con el inicio brusco de una diarrea acuosa y de vómitos.V parahaemolyticus es la causa mas comun de transmisión alimentaria de Vibrio en los Estados Unidos y es una causa principal de gastroenteritis asociada a los alimentos en muchos paises, incluyendo Japón y Taiwan, donde los habitos culinarios a menudo implican el consumo de mariscos crudos o pescado como parte de la diaria dieta
Infecciones de HeridasOtro sindrome clinico asociado con especie de vibrio implica SST1(sistema de secreción tipo 1). Las vibriosis marinas que
involucran el SST1 son el resultado directo de los traumas que implican una lesión penetrante o una herida abierta
preexistentes, abrasión o laceración por contacto directo con el agua de mar o el contacto intimo con los productos del mar
asociada tal como una aleta de los pescados, gancho de pescados, u otro nautica equipos, incluidos los buques o barcos.
El rango de efectos puede variar desde una leve a moderada celulitis en individuos normales a infecciones invasivas
fulminantes como la fascitis necrotizante, que se encuentran principalmente en las poblaciones inmunocomprometidos.
Los síntomas asociados con infecciones por Vibrio incluyen la formación de vesículas con edema y eritema que puede progresar rápidamente a ampollas hemorrágicas
Septicemia
Infecciones transmitidas por la sangre han sido atribuidos a todas las especies patógenas, pero hasta la fecha V.vulnificus y
las cepas NOVC son los patógenos predominantes de este grupo.
Las bacteremias causadas por Vibrio se pueden distinguir de las causadas por otras sepsis por Gramm negativos, por la
aparición de lesiones metastasicas dentro de 36 horas desde el comienzo.
En el caso de V. vulnificus, puede ocurrir como una extensión de una infección invasiva de una herida, o puede aparecer como
una septicemia primaria sin una enfermedad preexistente.
DEFINICION DEL CASO
METODOS DE DIAGNOSTICO
MicroscopiaEn las heces de los pacientes con cólera es caracteristica la
presencia de grandes cantidades del microorganismo, por lo que el estudio microscópico directo de las muestras de heces puede proporcionar un diagnostico de sospecha rapido en los brotes endémicos de cólera. La valoración de una muestra de
herida teñida con Gram también puede resultar util en un ambito sugestivo de infección por V. vulnifcus (p. ej.,
exposición de individuos susceptibles a los mariscos o al agua de mar)
CultivoLas muestras se deben obtener en la fase inicial del proceso e inocularse rapidamente en los medios de cultivo. Si el cultivo se va a retrasar, la muestra se debe merclar con el medio de transporte de Cary-Blair y re- frigerarse. Los vibrios sobreviven mal en el tampón de glicerol salino, el medio de transporte que se usa para la mayoria de los patógenos entéricos. Los vibrios crecen en la mayor parte de los medios que se usan en los laboratorios clinicos para los coprocultivos y cultivos de las heridas, incluido el agar sangre y el agar Mac- Conkey.
PRUEBA DE OXIDASA:El dehidrocloruro de tetrametil-parafenilendiamina al 1% se emplea para la determinación de la citocromo oxidasa. Este reactivo actua como aceptor artificial de electrones sustituyendo al oxigeno. En su estado reducido es incoloro pero en la presencia de la citocromo oxidasa del microorganismo y el oxigeno atmosférico se oxida formando el azul de indofenol.
PRUEBA DE CUERDA:Esta prueba se realiza para diferenciar el género Vibrio de los demas géneros pertenecientes a la familia Vibrionaceae como Plesiomonas y Aeromonas. La actividad litica del acido desoxicólico sobre la pared de los Vibrios favorece la liberación de ADN que al contacto con el acido desoxicólico forma una suspensión adherente o mucoide. LecturaPositiva:Las células bacterianas se lisan por la acción del desoxicolato y el ADN se libera volviéndose la preparación mucoide; al tocarla con un asa y levantar el asa se formara un hilo.
SEROTIPIFICACION:• A partir de un cultivo en agar BHI de 18-24 horas
de incubación, transferir un asa llena de crecimiento a 0,5 ml de Solución salina al 0,85% estéril y emulsionar hasta homogenizar.
• En una lamina de vidrio colocar 10 μl de Antisuero polivalente Vibrio cholerae y una gota de la suspensión bacteriana.
• Mezclar el antisuero y la suspensión durante 1 minuto y luego observar si se ha producido aglutinación.
• Para poder realizar correctamente la lectura se debe realizar en la misma lamina un control de aglutinación colocando una gota de la suspensión bacteriana y una gota con solución salina, que al mezclar no debe aglutinar que en caso de que ocurra (autoaglutinación), el cultivo es rugoso y no se podra analizar. Se debe realizar un subcultivo en agar no selectivo y repetir la prueba.
DISEMINACION DE VIBRIO CHOLERAE EN EL AGUA
Medidas de ControlAbastecimiento de agua no contaminada. El agua debe
hervirse por diez minutos después de su punto de ebullición en caso de que no sea purificada; otra alternativa es clorarla, utilizando el hipoclorito de sodio comercial al 3.5%, sin olor y sin sabor (agregar 4 gotas a 1 Lt de agua).Una vez hervida o clorada el agua debe dejarse reposar por 20 a 30 min, almacenarse y taparse. Esta agua debe ser utilizada para consumo, almacenamiento y lavado de alimentos.
Disposición de liquidos corporales: Es preciso establecer mecanismos para la eliminación sanitaria de heces y vómito de pacientes con cólera, con el fin de evitar que el Vibrio cholerae.
Vacunación Aunque existen vacunas contra el cólera las cuales son seguras y eficaces, la vacunación contra el cólera todavia no es parte de los
programas de control del cólera fuera de Vietnam; hay discusiones en curso con respecto al uso potencial en Haiti y en otros lugares, las
razones de esto son de tipo logistico, financiero e histórico. Las vacunas contra el cólera se administran oralmente, tiene un excelente perfil de
seguridad.
GRACIAS
