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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NUEVO LEÓNFACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
UDIRECCIÓN DE POSGRADO
Título:Grupos trabajando en inmunología
Dr. Peter Mundel
presenta: Felipe de Jesús Torres del Muro
Clase:Tópicos en
Inmunología II
02 de Marzo del 2016, San Nicolás De los garza, Nuevo
León.
INTRODUCION:Departamento se encarga en la búsqueda de nuevos blancos de estudio en nefrología, tratamientos personalizados para proteinuria de daño renal, con los detalles mecánicos y bajo que vías de señalamiento se regulan las funciones de podocitos sanos y en enfermedad.
PRINCIPALES:
Dr. Peter MundelLaboratorio de
nefrología
OBJETIVOS DE GRUPO DE TRABAJO: Se encarga del estudio del citoesqueleto de actina, mecanismo de vida y regulación metabólica en estados sanos y enfermedades, con específicos focos en sinaptopodina y señalización de Rho GTPase, así como el rol de B7-1/CD80 en señalización en podocitos.
Autoasociación
Regulación transcripcional Dominio de unión a DNA/RNA
408-410
KTS
71
17 aa
449250-26618092 1011
SD
R A ZN ZN ZN ZN
Su principal función es la de activar o inhibir la transcripción de mas de 20 genes diferentes mediante su unión a los promotores.
activación
represión
Jamie A. Davis, 2003.Sangeeta y cols.
Diferenciación proliferación celularOrganogenesisapoptosis
WT1
Trabajo del Dr Mundel:El trabajo con una cultivo primario de podocitos inmortales de raton (immunomorten).EL Dr Sallem , transformo e inmortalizo un cultivo primario de podocitos humanos (SV-40).
Expresión de WT1 en podocitos de SU. A-C) Muestras de SS. D-F) Pacientes con SIN. A y D) WT1 marcado con Rojo Texas. B y E) DAPI núcleos(azul). C y F) Traslape de la marca de WT1 y DAPI. C) Localización núcleo/citoplasma de la expresión de WT1 en podocito en SS (mayor correlación). F) Localización de la expresión de WT1 en el citoplasma (menor correlación) en SNI.
SSSN
I
WT1/Rx DAPI Traslape
A
FED
CB
Determinación del número de podocitos en SU en SS y con SNI.
Diseño experimental
Línea celular de podocitosCultivo primario de podocitos
•Viabilidad•Adherencia •Movilidad
RT-PCRmicroarreglosRNA
Tratamiento con RNAi y WT1 exógeno
1
DNAc
sacrificio
Diseño experimental2
RNAi y WT1 exógeno en cultivo de tejido (24 y 48 horas)
Nefrotecmización
Morfología glomerular por H&E y microscopia
PCR punto final para determinar que Isoformas de WT1 prevalecen en el tejido renal
Modulación por wt1 en la expresión de genes involucrados en apoptosis, adhesión de podocitos y mantenimiento del glomérulo por IFI
Sedimento Urinario y tejido
renal
Inmunofluorescencia indirecta
Determinar la colocalización y el número de podocitos en el SU que expresan WT1Observación, análisis y fotografía (20 y 40X) por microscopia de fluorescencia.
3
Diseño experimentalPCR punto final para determinar que Isoformas de WT1 prevalecen en el sedimento y en tejido renal
Coeficiente de correlación de Pearson (r2)•Valores < 0.57 = expresión de WT-1 en citoplasma•Valores ≥ 0.58 = expresión de WT-1 en núcleo y citoplasma•Valores > 0.80 = expresión de WT-1 en núcleo