Control de calidad en microbiología

Capacitación del PersonalCapacitación del Personal

ENTRENAMIENTOENTRENAMIENTOFORMACIÓNFORMACIÓN

“Proceso continuo y sistemático destinado a la formación, entrenamiento, actualización o perfeccionamiento específico del personal”

Incorporación de conocimientos

Generales y específicos. Formación académica del

personal

Enseñar las habilidades.

Carácter eminentemente

práctico

Requisitos en la Formación del PersonalRequisitos en la Formación del Personal

Se debe realizar un estudio de las necesidadesde capacitación y entrenamiento

Planificación

La formación permanente de su personal

La formación a ser adquirida deberá orientarse agarantizar la competencia en las técnicas y métodos realizados por el personal involucrado enel ensayo.

El laboratorio debe asegurar …

Capacitación del Personal en el Capacitación del Personal en el Laboratorio de MicrobiologíaLaboratorio de Microbiología

Todo el personal técnico debe recibir un adecuado entrenamiento que incluyen:

Técnicas básicas de microbiología para la manipulación de cultivos y muestras enCondiciones de esterilidad

Adecuado Criterio para el manejo Potencialmente Infeccioso

Conocimiento de normas de bioseguridad

RegistrosRegistros

El laboratorio debe elaborar, conservar

y actualizar registros:

De la autorización del personal

Curriculum vitae

Capacitación en la realización de la tarea

asignada.

Relativos a la competencia del personal.

http://images.google.co.ve/imgres?imgurl=http://iesocaparratvaa.files.wordpress.com/2008/09/curriculum-vitae.jpg&imgrefurl=http://iesocaparratvaa.wordpress.com/2008/09/18/&usg=__D3n22XOjHTAU-o6fi0bBFfIg_bY=&h=900&w=700&sz=165&hl=es&start=1&tbnid=-og-8_X2un6K8M:&tbnh=146&tbnw=114&prev=/images%3Fq%3Dcurriculum%2Bvitae%26gbv%3D2%26hl%3Des

Documentación de los ProcedimientosDocumentación de los Procedimientos

Registro de los cultivos en existencia Potencia y sensibilidad de los discos Registro de la comprobación de los medios Controles de tinción Controles positivos y negativos Los autoclaves deben comprobarse por registros de temperatura o termógrafos “Se hace lo que se escribe

y se escribe lo que se hace”

¤ Almacenamiento y Conservación¤ Preparación ¤ Control de esterilidad y funcionamiento

Medios de CultivosMedios de Cultivos

Medios de CultivosMedios de Cultivos(Almacenamiento y Conservación)(Almacenamiento y Conservación)

LOS MEDIOS DESHIDRATADOS NO PUEDEN ALMACENARSE DURANTE MUCHO TIEMPOPUEDE OCURRIR OXIDACION Y DESHIDRATACIÓN

SISTEMA DE INVENTARIO EFECTIVO

LOS ESTANTES DEL ALMACEN NO DEBEN SER LOCALIZADOS CERCA DEL AUTOCLAVES

LISTA DE INVENTARIONOMBRE DEL FABRICANTENUMERO DE CONTROLFECHA DE RECEPCIÓNFECHA EN QUE SE ABRIO LA BOTELLA

Medios de Cultivos (Preparación)Medios de Cultivos (Preparación)

Todos los medios deben inspeccionarse visualmente Las muestras procedentes de cada preparación

deben ensayarse para verificar su funcionamiento

Medios de CultivosMedios de Cultivos(Control de Esterilidad y Funcionamiento)(Control de Esterilidad y Funcionamiento)

METODOS PARA COMPROBAR LA CALIDAD DE MEDIOS EN TUBOS

METODOS PARA COMPROBAR LA CALIDAD DE MEDIOS EN PLACAS

Los tubos y placas deben refrigerarse.

METODOS PARA COMPROBAR LA CALIDAD

DE MEDIOS EN PLACAS

Se seleccionan placas

Se inoculan con los cultivos almacenados

Se deben emplear menos de 2 microorganismos

Positivo Negativo

Tamaño e inoculo deben normalizarse

Caldos nutritivos Asa calibrada

Se anotan los resultados del Análisis

Se dispone del medio si funcionan adecuadamente

Importancia del Espécimen en Importancia del Espécimen en Microbiología Microbiología

Los especímenes clínicos deben recogerse cuidadosamente para minimizar la contaminación de la flora microbiana normal del lugar donde se toma la muestra. Y una vez recogido debe ser enviado al laboratorio lo más rápido posible(1 a 2 horas).

Espécimen aceptable muestras conEspécimen aceptable muestras con

para el diagnostico predominancia de para el diagnostico predominancia de

Bacteriológico células inflamatorias. Bacteriológico células inflamatorias.

se comprueba la se comprueba la

aceptabilidad por losaceptabilidad por los

resultados cuantitativos resultados cuantitativos

Importancia del Espécimen en Importancia del Espécimen en Microbiología Microbiología

Control de calidad de equipos Control de calidad de equipos

Todo equipo debe ser evaluado por un programa de control de calidad en base a las instrucciones del proveedor y las regulaciones internas del laboratorio.

Incubadoras• Controlar diariamente la temperatura.• Observar el termorregulador.

• Colocar las muestras, platos y tubos en una posición segura.

• Limpieza mensual y llevar un record de mantenimiento preventivo.


AutoclavesProcedimiento por corrida diario, semanal, mensual• Examine record de temperatura y precisión.• Utilice indicadores de esterilización.• Chequeo del nivel del agua.• Limpieza interior y exterior.• Limpieza de la pantalla de temperatura.


Cámaras de seguridadCámaras de seguridad• Apague la lámpara ultravioleta antes de empezar a

trabajar.• Observe que no se obstruye el flujo de aire.• Compruebe los sistemas de alarma de funcionamiento.• Desinfecte la cabina antes y después de utilizar.


Incinerador• Temperatura optima de esterilización (815°c)• Bastan 5 seg para lograr la destrucción de bacterias,

hongos y mico bacterias.

• Inspeccione la cerámica del incinerador por rajaduras.

• Aleje el incinerador de elementos que puedan incendiarse por el calor generado.


Generadores de ambiente- sistema Gas Pak• Mantenga los generadores de gas a T.A y sobre

sellado• Mantenga indicadores de anaerobiosis a temperatura

de (2-8°C)

• El tiempo de generación de la atmosfera dentro de la jarra es de 30 min.

• Una evidencia sugestiva de ambiente anaerobio, es el cambio de color de rojo vino del agar sangre.


Refrigeradoras• Control diario de la temperatura entre 4-8°C.

• Utilice refrigeradores que no hacen escarcha.

• No coloque medios de cultivos aun ligeramente calientes dentro de la refrigeradora.

• Evite abrir con frecuencia la puerta de la refrigeradora.

• No guarde alimentos en refrigeradoras para especímenes clínicos.


Microscopios• Limpieza del aceite de objetivos, condensador, etc.• Apagar la fuente de luz.

• Colocar cobertor contra polvo.

• Limpieza de ocular, diafragma con liquido de limpieza de lentes.

• Limpieza y ajuste del sistema óptico. • Limpieza y lubricación del sistema mecánico.


Control de calidad de reactivosControl de calidad de reactivos

Los reactivos son fundamentales para la caracterización de microorganismos

Colorantes

Discos impregnados

Antisueros

Colorantes

El control de calidad cada lote preparado.

semanal para mantener

la seguridad


Discos impregnados

Pruebas de para microorganismos de Sensibilidad rápido crecimiento.

(NCCLS M2-A6) evalúa multiresistencia, escogencia y valoración de un antibiótico.


PTZ CAZ

MER

IMP

CXT

AMC

COL

Antisueros son considerados exámenes bacteriológicos y no test

serológicos.

• Para uso exclusivo de cepas in vitro.

• Conservar los reactivos en refrigeración.• Colocar la fecha en que se abre el kits. • Nunca pipetear con la boca muestras o reactivos.• Dejar los reactivos a T.A antes de utilizarlos.


Mantenimiento de medios de cultivos Mantenimiento de medios de cultivos almacenadosalmacenados

Las cepas deben almacenarse de forma adecuada para preservar sus características morfológicas y fisiológicas conocidas.

Para el almacenamiento a largo plazo se debe:

almacenar en un medio estabilizador apropiado, como caldo de soya tripticasa con 10 – 15% de glicerol o sangre de cordero desfibrinada.

Almacenarlas liofilizadas (congelación seca).

Obtenga caldos de cultivos liofilizados comercial

Para trabajar una o mas veces al mes:

Subcultive el caldo de cultivo permanente (congelado o liofilizado) a medios sólidos en placa.

Subcultive 4 – 5 colonias aisladas de medios en placa a un tubo con agar inclinado e incube durante la noche para preparar caldo de cultivo listo para trabajar.

Mantenimiento de medios de Mantenimiento de medios de cultivos almacenadoscultivos almacenados

Almacenar las cepas no fastidiosas en tubos picos de flauta con agar tripticasa de soya inclinado.

Dos días antes de las pruebas de CC:

Subcultive el crecimiento del agar inclinado a medios en placa e incube durante la noche.

Seleccione 4 – 5 colonias aisladas de la placa para la prueba de CC y pruebe con el mismo método utilizado para los aislamientos de pacientes.

Pruebas de sensibilidad antimicrobianaPruebas de sensibilidad antimicrobiana

NCCLS: El Instituto para la normatización de Laboratorios Clínicos anteriormente conocido como El Comité Nacional para la Normatización de Laboratorios Clínicos

(NCCLS) es una organización sin fines de lucro, con miembros representando a varias disciplinas. Es una organización educativa que enseña a través de foros el desarrollo, promoción y uso de normas nacionales e internacionales relacionadas con las pruebas de susceptibilidad, su uso apropiado y la interpretación de los resultados.

ATCC: también conocida como American Type Culture Collection.Suministra cepas certificadas como: S.aureus, E. coli y Pseudomonas sp

PruebasPruebas de sensibilidad antimicrobianade sensibilidad antimicrobianaPruebas de sensibilidad antimicrobianaPruebas de sensibilidad antimicrobiana

• Prueba de difusión en disco: El método del disco esta bien normalizado y es capaz de producir resultados fiables.

• El proceso que se recomienda corrientemente es aplicable a las pruebas con la mayoría de patógenos comunes de crecimiento rápido, como: enterobacterias, S. aureus y Pseudomonas sp.

• los estudios aun no están adecuados para desarrollar patrones de zonas fiables para la interpretación de pruebas de disco con microorganismos que:

1. Son exigentes en sus requerimientos nutricionales.

2. Necesitan de una atmósfera anaeróbica o una concentración ce CO2 incrementada para crecer.

3. Crecen a una velocidad lenta en agar Mueller – Hinton.

4. Los que manifiestan una marcada variación en la velocidad de crecimiento cepa a cepa


• Para controlar la técnica de difusión en disco, los tres microorganismos control designados S. aureus , E.coli y P. aeruginosa deben emplearse cada día que se realice un ensayo.

•La precisión y exactitud de este proceso analítico puede determinarse por métodos estadísticos patrones ; es decir, que el 95% de las zonas deben estar dentro de 2SD por encima o por debajo de la media cada agente antimicrobiano.

•Se debe controlar la densidad del inóculo.

•Verificar que los discos no estén deteriorados.

•Controlar el pH de los medios.

•La desviación típica máxima es la diferencia entre el tamaño de la zona minima para cepas susceptibles y el tamaño de la zona máxima para cepas resistentes.


Fuentes de errores técnicos:

• preparación inadecuada del agar Muller – Hinton

•Introducción de un nuevo lote de agar sin probarlo.

•Almacenamiento inadecuado de los discos.

•Normalización inadecuada de la densidad de caldo de cultivo.

•Preparación inexacta o almacenamiento de patrones de referencia turbios.

•Fallo al exprimir el liquido sobrante de la torunda.

•Incubación a temperatura distinta de 35 ºc

•Lectura prematura de las placas

•Fallo al medir los bordes de la zona.

•Errores de transcripción

Empleo de laboratorio de referenciaEmpleo de laboratorio de referencia

Incluso los laboratorios clínicos más sofisticados, ocasionalmente encuentran un aislamiento microbiano que no pueden identificar. Deben establecer algunas disposiciones para que un laboratorio de referencia (tal como laboratorios del departamento de salud estatal o nacional o laboratorios clínicos en los centros médicos más importantes) examinen los cultivos problemáticos.

Pruebas de eficacias:Pruebas de eficacias:Externa e InternaExterna e Interna

Es recomendable que los laboratorios de microbiología puedan participar en programas de evaluación externa. Estos programas miden la capacidad del laboratorio para evaluar una muestra desconocido y llegar a un resultado seguro. Los mismos consisten en la identificación de muestras o microorganismos desconocidos y se debe informar del resultado de la identificación, pruebas utilizadas para el diagnóstico etiológico y sensible a los antibióticos. Estos programas de control de calidad externos pueden ser nacionales o internacionales.

El laboratorio, debe diseñar sistema de control interno para verificar que la calidad alcanzada es la especificada. Es importante, para todo tipo de laboratorio que el sistema de control proporcione al personal información clara y fácilmente comprensible para que sirva de base para la toma de decisiones. Se debe poner énfasis a la eliminación de errores en el manejo de muestras, solicitudes, exámenes e informes.

El control de calidad en el laboratorio tiene como objetivo , que el producto final del trabajo tenga un grado aceptable de seguridad, de conformidad con los limites establecidos. Debido a que la mayoría de los resultados en microbiología son producto de interpretaciones y evaluación de reacciones bioquímicas de seres vivos donde la capacidad y experiencia del evaluador tienen un gran valor

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Control de calidad en microbiología