Embed Size (px)
Citation preview
INTRODUCCIÓN:El primer estudio fue llevado a cabo por AlexanderCure en 1841.
En 1950 se descubrió diversas enzimas y losmecanismos implicados en la biotransformación defármacos.
En los años 60 se relaciono diferencias metabólicascon diferentes efectos farmacológicos.
En los años 70 se desarrollaron los modelos deeliminación hepática, se apresio la importancia delpolimorfismo genético, aumentó el conocimiento sobreisoformas especificas de enzimas y se introdujo elconcepto de medicamento marcadores delfuncionalismo hepático.
Conceptos y características generales
El metabolismo o biotransformación es una
alteración en la estructura química del fármaco que
ocurre en virtud de la permanencia de el mismo en un sistema biológico.
*Una única enzima puedemetabolizar una granvariedad de compuestosquímicamente diferentes.*Multidisciplinaridadenzimática: distintasenzimas pueden participaren la biotrasformación deun fármaco único.*Polifuncionalidad delsustrato y un fármacodeterminado pueden sufrirdiferentes tipos dereacciones.
El proceso de biotransformación no solo
facilita la excreción y minimiza la carga
xenobiótica total del organismo, mediante su
transformación en múltiples productos, sino que además supone un
descenso en las concentraciones.
Import
ancia
farm
acocin
éti
ca
y f
arm
acodin
ám
ica Condiciona el perfil farmacocinética al ser el
determinante de la biodisponibilidad y el aclaramiento.
La biotransformación condiciona la actividad farmacológica por diversos mecanismos que
implican inactivación, activación, potenciación o bien modificaciones en el
perfil de toxicidad.
El impacto PK-PD es tan significativo que la caracterización precoz del perfil metabólico, de la velocidad y grado de biotransformación,
de las rutas metabólicas implicadas, de las enzimas responsables de las mismas e incluso de sus posibles efectos sobre determinadas
enzimas es hoy en día, no solo necesario sino también exigible desde las fases iniciales del
desarrollo de los nuevos medicamentos.
Tipos de metabolitos
Los metabolitos importantes son aquellos cuyas concentraciones
son similares o superiores a las del
fármaco precursor o que representan
individualmente más del 30% de su eliminación
global.
Los metabolitos dependiendo de la
similitud estructural y como la conformación
bioactiva del precursor se mantenga o mejore
durante el proceso de biotrasformación pueden ser inactivos o activos e incluso antagónica a la del fármaco original.
Metabolismo de capacidad
limitada
𝑣𝑒𝑙𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒𝑙 𝑚𝑒𝑡𝑎𝑏𝑜𝑙𝑖𝑠𝑚𝑜 =𝑉𝑀𝐶
𝐾𝑀 + 𝐶
𝑣𝑒𝑙𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒𝑙 𝑚𝑒𝑡𝑎𝑏𝑜𝑙𝑖𝑠𝑚𝑜 =𝑉𝑀
𝐾𝑀C = 𝐾′𝑀C
1. Fisiología del hígado
2. Tipos de reacciones metabólicas
3. Sistema CYP-450
4. Reacciones de conjugación
1. Fisiología del hígado
2. Tipos de reacciones
metabólicas
3. Sistema CYP-450
4. Reacciones de conjugación
METABOLISMO HEPÁTICO Se localiza entre el tracto
gastrointestinal y el bazo y la vena cava
La sangre accede al hígado por la vena
porta y arteria hepática, pasa por los
sinusoides y sale del hígado por la
vena hepática
Hepatocitos dispuestos
tridimensionalmente están en
contacto con espacio de Disse y
canalículos de la bilis
Facilita el intercambio rápido de
fármaco y metabolitos entre el plasma y
hepatocitos, y entre hepatocitos y bilis.
En la actualidad se conoce transportadores que
intervienen en la captación y excreción de fármacos
METABOLISMO HEPÁTICO
T. Captación y salida por la
membrana sinusoidal
T. En la salida de fármacos y metabolitos
a la bilis por la membrana canalicular
biliar
OATP (poli péptido transportador
de aniones orgánicos)= ácidos
biliares (bilirrubina), hormonas
(tiroideas y esteroideas), fármacos
anti-cáncer, antibióticos, anti-
diabéticos, toxinas y venenos.
OAT(transportador de aniones
orgánicos)
OCT(Transportador de cationes
orgánicos)
NTCP (Transportador poli catiónico
de sodio y potasio)
MDR1
MDR3
MRP2
BCRP
BSEP
1. Fisiología del hígado
2. Tipos de reacciones metabólicas3. Sistema CYP-450
4. Reacciones de conjugación
FASE I FASE II
FUNCIONALIZACIÓN O
PRESINTÉTICASReacciones de oxidación, reducción e
hidrólisis
Mediadas por enzimas del citocromo P-
450, flavinmonooxigenasas, estearasas
y amidasas
DERIVATIZACIÓN O SNTÉTICASReacciones de conjugación
Mediadas por enzimas TRANSFERASAS
que en función del grupo incorporado a
la molécula son-. UGT,ST y NAT
1. Fisiología del hígado
2. Tipos de reacciones metabólicas3. Sistema CYP-450
4. Reacciones de conjugación
La oxidación es la RX. Metabólica
mas importante la que se produce
por el sistema CYP-450
Se encuentra en la fracción
microsomial del hígado (mb.
del Retículo endoplasmático
liso)
Consta de dos enzimas:
Citocromo p-450
NADPH-citocromoP-450
reductasa
NADPH + H+ + 02 + SH NAPD+ H20 + S-OH
Traspaso de electrones desde el NADPH al
citocromo P450, catalizado por la enzima de
membrana NADPH citocromo P450 reductasa.
Mecanismo de acción del
citocromo P450.
En él, el Fe3+ representa al
hierro del grupo heme del CYP
oxidado, RH y ROH a los
sustratos y productos
respectivamente. En este ciclo
de óxido-reducción se liberan
anión superóxido (O2•-) y
peróxido de hidrógeno (H2O2).
Nomenclatura actual de las
isoenzimas del CYP
CYP- 3A 4/5RAÍZ
FAMILIAS
SUBFAMILIA
ISOENZIMAS O
ENZIMAS
INDIVIDUALESLa familia 1,2 y 3 contribuyen en la biotransformación de
los medicamentos
Las 3A4 y 3A5 son las mas importantes porque predominan
en hígado e intestino
Interacciones en el proceso de biotransformación por la isoforma 3A4 del citocromo P450.
A)La enzima es responsable de la formación de metabolitos.
B)Cuando actúa un inhibidor disminuye la formación de metabolitos, se incrementan las concentraciones del fármaco y puede aparecer aumento del efecto farmacológico y del riesgo de reacciones adversas. RAM: reacciones adversas medicamentosas.
ENZIMAS DEL CITOCROMO P450
CYP 1A2 CYP2C9 CYP2C19 CYP2D6 CYP3A4
Sustratos
Imipramina1
Amitriptilina1
Clozapina3
Cafeína
Fenacetina
Tacrina
Tamoxifen
Teofilina
Fenitoina
Diclofenac
Hexobarbital
Ibuprofen
Losartan
Tolbutamida
Warfarina
Citalopram1
Clomipramin
a1
Diacepam2
Imipramina1
Mefenitoína
Moclobemid
a1
Omeprazol
Propanolol2
Neobarbital
Amitriptilina1
Codeína
Clomipramin
a1
Debrisoquina
Desipramina1
Dextrometor
fan
Encainida
Flecainida
Haloperidol3
Imipramina1
Metoprolol
Mianserina1
Nicotina
Nortriptilina1
Paroxetina1
Perfenacina3
Propafenona
Tioridacina3
Tropisetron
Zuclopentixo
l3
Carbamacepin
a4
Codeína
Ciclosporina
Diacepam3
Dapsona
Diltiazem
Eritromicina
Estradiol
Imipramina1
Lidocaína
Midazolam2
Nifedipina
Omeprazol
Quinidina
Tamoxifen
Terfenadina
Triazolam2
Verapamil
Inhibidores
Fluvoxamina1
Fluoroquinolon
as
Cimetidina
Eritromicina
Flucoconazol
Ketoconazol
Fenitoína
Tranilciprom
ina
Ketoconazol
Fluoxetina1
Cimetidina
Quinidina
Cimetidina
Eritromicina
Estradiol
Ketoconazol
Progestágenos
InductoresTabaco
Omeprazol
Carne a la
brasa
Rifampicina
Barbitúricos
RifampicinaRifampicina -----
Dexametasona
Fenitoína
Fenobarbital
Rifampicina
(1): Antidepresivos, (2): Ansiolíticos, (3): Antipsicóticos, (4): Estabilizadores del ánimo
Fuente: Avery, 1997 (2)
El tamoxifeno (TAM) es un anti estrógeno no esteroidal cuyo uso de
prevención de recidiva para pacientes pre y post menopáusicas tratadas por cáncer
(ca) de mama con receptores estrogénicos (RE) positivos. Ha sido el anti
cancerígeno de mayor uso en ca de mama en los últimos 30 años. El endoxifeno es
considerado hoy como el metabolito más activo del TAM y existe una gran
controversia en relación a las interacciones farmacológicas que puedan existir a
nivel de la CYP 2D6, principal enzima responsable de su activación.
INHIBIDOR
Antiarritmico calse I
Rifampicina, que es el inductor del CYP3A4
más potente fármacos que activan al
receptor nuclear PXR y estimulan el
metabolismo ddel tamoxifeno por lo que si
se asocian provocan una disminución de la
eficacia del tamoxifeno.
la rifampicina junto con la doxiciclina es el
tratamiento de elección para la brucelosis. En
este caso también pudiera ser sustituida
por estreptomicina más doxiciclina
1. Fisiología del hígado
2. Tipos de reacciones metabólicas3. Sistema CYP-450
4. Reacciones de conjugación
Son mediadas por transferasas, formando glucorónicos.
La glucoronización implica rx. Del ácido uridindifosfato glucorónico (UDP-
GA) y fármacos con grupo amino, hidroxilo o carboxilo, las enzimas se
encuentran en el retículo endoplasmático y en la membrana nuclear.
HIDROFÍLICOS E INACTIVOS
ALTA CAPACIDAD Y BAJA AFINIDAD
Regulada por la expresión de las enzimas UGT se clasifican en dos
familias: 1y2
3 subfamilias (UGT1A, UGT2A y UGT2B.
REACCIONES DE ACETILACIÓN : incorporación de un radical acilo o acetilo
a los radicales de carboxilo o amino de los fármacos. INFLUENCIADOS POR
aciltranferasas
Metabolismo extrahepático
Metabolismo extrahepático
MI es capaz de llevar a cabo reacciones metabólicas de
Fase I y II.
Para fármacos como midazolam, ciclosporina, nifedipina
o inmunosupresores constituye la principal vía
metabólica y una barrera para la captación y
transporte hacia la circulación sistémica.
Los procesos de biotransformación están mediados por
enzimas asociadas a la flora intestinal o por sistemas
enzimáticos localizados en células epiteliales de la
mucosa intestinal.
Oxidasas de función mixta
dependientes del CYP
Estearasas
Sistemas de conjugación
Acetilación
Sulfatación
Metilación
Glucuronidación
El metabolismo GI en la mayoríade l0s casos es aparente tras laadministración oral o rectal, yocurre durante el proceso deabsorción transcelular, cuando elfármaco entra en contacto conlas enzimas.
Familias del CYP HumanoFamilia Función Miembros Nombres.
CYP1Metabolismo de drogas y esteroides (especialmente
estrógenos)
3 subfamilias, 3 genes, 1
pseudogenCYP1A1, CYP1A2, CYP1B1
CYP2 Metabolismo de drogas y esteroides13 subfamilias, 16 genes, 16
pseudogenes
CYP2A6, CYP2A7, CYP2A13,
CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9,
CYP2C18, CYP2C19, CYP2D6,
CYP2E1, CYP2F1, CYP2J2, CYP2R1,
CYP2S1, CYP2U1, CYP2W1
CYP3Metabolismo de drogas y esteroides (incluyendo
testosterona)
1 subfamilia, 4 genes, 2
pseudogenes
CYP3A4, CYP3A5, CYP3A7,
CYP3A43
CYP4 Metabolismo del ácido araquidónico6 subfamilias, 11 genes, 10
pseudogenes
CYP4A11, CYP4A22, CYP4B1,
CYP4F2, CYP4F3, CYP4F8,
CYP4F11, CYP4F12, CYP4F22,
CYP4V2, CYP4X1, CYP4Z1
CYP5 Tromboxano A2 sintetasa 1 subfamilia, 1 gen CYP5A1
CYP7Biosíntesis de las sales biliares (7-alpha hidroxilasa del
núcleo esteroideo)2 subfamilias, 2 genes CYP7A1, CYP7B1
CYP8 Variada 2 subfamilias, 2 genes
CYP8A1 (prostaciclin sintetasa),
CYP8B1 (biosíntesis de sales
biliares)
CYP11 Biosíntesis de esteroides 2 subfamilias, 3 genes CYP11A1, CYP11B1, CYP11B2
CYP17 Biosíntesis de esteroides 17-alfa hidroxilasa 1 subfamilia, 1 gen CYP17A1
CYP19 Biosíntesis de esteroides 1 subfamilia, 1 gen CYP19A1
CYP20 Desconocida 1 subfamilia, 1 gen CYP20A1
CYP21 Biosíntesis de esteroides2 subfamilias, 2 genes, 1
pseudogenCYP21A2
CYP24 Degradación de la vitamina D 1 subfamilia, 1 gen CYP24A1
CYP26 Hidroxilasa del ácido retinóico 3 subfamilias, 3 genes CYP26A1, CYP26B1, CYP26C1
CYP27 Variada 3 subfamilias, 3 genes
CYP27A1 (biosíntesis de sales
biliares), CYP27B1 (vitamina D3 1-
alfa hydroxylase), CYP27C1
(función desconocida)
CYP39 7-alfa hidroxilación del 24-hidroxicolesterol 1 subfamilia, 1 gen CYP39A1
Isoenzimas CYP
en mucosa GICYP3A
2
• Las actividades en intestino
e hígado no están
correlacionadas.
• El jugo de pomelo es capaz
de inactivar con
especificidad y de manera
cuasi irreversible su
actividad a nivel intestinal
• Localizada estratégicamente
• La actividad de este
transportador puede
condicionar la velocidad y
magnitud del metabolismo
Intestinal.
CYP3A4
Fármaco absorbidoFármaco
Heces
Vía oral
TGIVena Porta
Enterocito
CYP 3A4
P-glicoproteína
Al hígado
Consideraciones
La actividad de Fase I es relativamente baja pero la actividad deconjugación es comparable con la realizada en el hígado.
La sulfatación de terbutalina es mayor en ID que en Hígado y laactividad de tiopurina metiltransferasa (TPMT) es comparable
Las rx metabólicas generalmente implicadas son degradativas,reductivas o hidrolíticas. (Digoxina, acenocumarol )
La actividad de B-glucoronidasas (alta) puede contribuir a laduración de efectos farmacológicos que sufren secreción biliar enforma de glucorónidos. Estos conjugados pueden sufrir hidrolisispor dichas enzimas y en consecuencia, producirse reabsorción ycirculación enterohepática del farmaco.
Epidermis
Oxidasas de función mixta
reductasasestearasas
glucoronosiltransferasas
Testosterona
Progesterona
Hidrocortizon
a
Vidarabina
La principal consecuencia de
disminución de la POTENCIA así
como de la DURACIÓN de los
fármacos aplicados a este nivel.
Los queratinocitos expresan de
forma constitutiva el CYP3A5,
mientras que no lo hace la
isoenzima CYP4A11, pero puede
ser inducido por la radiación
ultravileta A.
CYP2B19
Pulmón La actividad metabolizadora
puede influir en el acceso delfármaco a circulación arterialy a nivel de receptores parafármacosadministrados IV.(propanolol).
Además la formación local deciertos metabolitos puede serun mecanismo de toxicidad.
CYP1A1 CYP3A5CYP2A13 es
en la mucosa
nasal
Riñon
Alta expresión de CYP como UGT
“Para diflunisal y ácido micofenólico la glucorondación renal
es compatible con la producida en el hígado”(Fissher 2001)
CYP3A5-(Acetazolamida)
Un fármaco puede sufrir unoo varios efectos de primerpaso o bien accederinalterado a CS.
En vía intravenosa elfármaco puede sufrir unefecto del primer pasopulmonar.
La sangre que perfunde en eltracto gastrointestinal aexcepción de la cavidadbucal y el recto inferior,drena en el hígado vía venaporta.
Metabolismo
Presistémico
Perdida del
fármaco
antes de su
acceso a la
circulación
Debido a la
primera
exposición del
sistema
responsable de
su
biotransformaci
ón.
Efecto del primer paso
Significación clínica del efecto del primer paso
A nivel GI las enzimas constituyen una barrera enzimática difícil de sortear para medicamentos por vía oral.
Los mecanismos mediados por CYP y CYP3A son los más frecuentes.
Cuadro 4.9. Fármacos con significativo metabolismo
presistémico y enzimas implicadas (Fuente: G.R.
Wilkinson. Drug motabolism and variability among
patients in drug response N Engl J Med 2005; 352; 21)
Fármaco F media % Porcentaje
de
extracción
intestinal
Porcentaje
de
extracción
hepática
Ciclosporina 27 59 24
Midazolam 30 43±24 44±14
Verapamilo 16 58 62
Cuadro 4.10. Contribución intestinal al
metabolismo presistémico de algunos
fármacos
Mayor variabilidad interindividual de la BD del fármaco con un elevado
efecto del primer paso.
Alprenolol
Diferencia de
concentraciones
medias
Alcanzadas en
equilibrio tras la
administración de la
misma dosis en
voluntarios sanos es
14 veces VO frente 4
vía IV.
• Principal implicación clínica =
EPP(>50%)
Pentazocina
3omg IV
Pentazocina
100mg VO
El metabolismopresistémico supone
diferencias en el perfil de la curva
de concentraciones- tiempo de
metabolitos dependientes de la vía
de administración.
Ej: Nortriptilina, Co de 10-OH-
Nortriptilina (VO) > (IV)
Aunque el perfil de curva sea diferente
en función de la vía , la fracción de
dosis convertida al metabolito, no
debe ser muy distinta siempre que la
absorción sea completa, el
metabolismo sea la única vía de
eliminación y se trate de una cinética
lineal.
Vía oral
Lidocaina
Naloxona
Nitroglicerina
Dihidroergotamina
Genéticos yFisiopatológicos
Endógenos
Ambientales
Exógenos
Factores GenéticosPolimorfismo
genético (variaciones
en la secuencia de
DNA entre individuos)
Variaciones significativas
Cambios en la actividad
de la enzima, a la ausencia de la enzima
Numerosas isoenzimas de estasfamilias presentan una granvariabilidad interindividual en suactividad catalítica, debidaprincipalmente a influencias genético-ambientales (CYP1A1, 1A2, 2A6, 2C9,2C19, 2D6, 2E1, 3A4 y 3A5)
Base
mole
cula
r del polim
orf
ism
o g
enéti
co p
ara
enzim
as
implicadas
en la b
iotr
ansf
orm
ació
n d
e
fárm
acos
Enzima Frecuencia Fármacos Efectos
asociados
CYP2D6 5-10 % (deficientes
metabolizadores)
1-10 % (metabolizadores
ultrarrapidos)
Antiarritmic
os
Antidepresiv
os
Antipsicótic
os
Proarritmogénico
Toxicidad e
ineficacia
Discinesia
Polimorfismo genéticos en enzimas que intervienen en la
biotransformación de fármacos
(CYP2D6) es probablemente el polimorfismo genético mejor caracterizado entre las
enzimas citocromo, y representa la primera enzima metabolizadora de drogas
humana en ser clonada y caracterizada a nivel molecular
Isoniacida (tratamiento de la
tuberculosis) puede causar
efectos neurotóxicos en los
acetiladores lentos, pero
daños hepáticos en los
acetiladores rápidos
Acetiladores rápidosLa población europea (40%), Asia (80%)
Acetiladores lentosCaucasianos y Africanos (50%)
Factores
FisiológicosEDAD
Fármacos en la infancia
después del primer año de vida, los procesos
metabólicos están maduros, pero debido a
que el volumen hepático en proporción al
peso es mayor que en el adulto, la capacidad
metabólica es superior
El cloranfenicol es tóxico en recién nacidos
debido a la baja glucuronidación
Fetos
solo tienen subfamilia CYP 3A (pobre
metabolismo total)
Mayor
Metabolismo y excreción disminuidos
Capacidad enzimática disminuida
GÉNERO
Diferencias basada en ciclo menstrual
N-demetilación de eritromicina F>M
Oxidación de propanolol M>F
EMBARAZO
-Embarazo = concierne al feto (edad)
Placenta de fumadoras es alta en familia CYP1A
Consecuencias para el feto o neonato:
teratogénesis, carcinogénesis, hepatotoxicidad.
Factores Ambientales
Dietas bajas en proteínas pueden producir:
Disminución de los niveles plasmáticos de albúmina,lo que implica un aumento de la fracción libre detóxico no ligado a proteínas y por consiguiente unatoxicidad aumentada.
Disminución del nivel de enzimas microsomaleshepáticas y una consiguiente alteración en elmetabolismo de los tóxicos.
El alimento rico en grasa, aumenta la absorción de laGriseofulvina; también de ciertos Plaguicidas yorganoclorados.
La dieta hiperproteica tiende a aumentar el metabolismo
oxidativo de ciertos fármacos (ej: teofilina), el aumento de
carbohidratos tiende a reducirlo
Inducción del
Metabolismo
Incremento en la capacidad
de biotransformación como
consecuencia de una
estimulación especifica de
la síntesis de ciertos
sistemas enzimáticos o del
flujo hepático
Base fundamental del conocimiento del perfil de un nuevo fármaco.
Estudios in vitro
Estudios in vivo
ESTUDIOS IN VITRO
Identificar las
principales vías
metabólicas que afectan al fármaco
Anticipar los efectos del
fármaco
Indican si un fármaco es o no
inductor o inhibidor de las vías
metabólicas de otro.
Considera al hígado como
órgano principal de biotransform
ación
Se usan:Supersomas
Fracciones subcelulares(microsomas
, citosol, fracción S9)
Líneas celulares
Líneas celulares
transgénicas
Hepatocitos
Corte de hígado
ESTUDIOS IN VITRO
Supersomas UGT y CYP humanas
• Células de insectos carecen de actividad endógena del CYP y UGT
• Estudia la isoenzimaespecífica de la biotransformación
• Relación fármaco-fármaco
• Limitación S.UGT centro activo protegido por una barrera hidrofóbica
Fracciones subcelulares
• Caracterizar el perfil metabólico, las enzimas responsables del CL de los fármacos
• Los cofactores necesarios para la biotransformación.
• Inconveniente: obtención de las fracciones subcelulares, por centrifugación diferencial de homogenadoscelulares
Microsomashepáticos humanos
• Vesículas del retículo endoplasmático, a partir de homogeneados de hígado, contienen UGT y CYP
• Mantienen su actividad durante año a bajas °T (-70°C)
• Estudia la influencia de determinadas isoenzimas en presencia de inhibidores específicos
• Limitación: no aportan estimaciones cuantitativas de biotransformación in vivo
ES
TU
DIO
S I
N V
ITR
O
Fracciones citosólicasdel hígado humano
• Contiene enzimas solubles responsables de reacciones de fase II
• Estudia la capacidad de biotransformación de NAT, ST, CST en función de los cofactores añadidos .
Fracciones hepáticas S9
• Contienen fracciones microsomales y citosólicas
• Predice la mutagenicidad de un compuesto
• Sistema de activaviónmetabólica para provar la genotoxicidad del fármaco.
• Caracterización más completa de los perfiles metabólicos
Líneas celulares hepáticas
• Expresión incompleta de las enzimas
• Las células se aíslan de tumores primarios del parénquima hepático
• Mantiene la estabilidad de la expresión fenotípica en cultivos
• La línea celular más frecuente es la HepG2, mantiene funciones metabólicas hepáticas específicas.
ESTUDIOS IN VITRO
•Expresión recombinante de enzimas
•Mayor expresión de isoenzimas CYP y UGT
•Evaluar las diferencias en la citoxicidad de los metabolitos
•Genera metabolitos para estudiar su estructura e interacciones
Líneas celulares transgénicas
•Comportamiento similar al hígado humano in vivo
•Se aíslan con la técnica de digestión con colagenasa
•Modelo para estudios toxicológicos
•Mantiene la actividad enzimática fase I y II
Hepatocitos
Corte de hígado
Hígado perfundido
• No requiere proteasa
• Estudio de los a.a en varios órganos de diferentes especies
• Señalan biotransformación cuali-cuantitativa
• Limitación: daño celular en bordes del corte
• Método de obtención complejo, reproducibilidad pobre y la integridad funcional se limita a 3h
• Se puede recoger y analizar la bilis
• Limitación: hígado humano no disponible
El estudio en animales de acuerdo a la especie es decisivo para esclarecer las rutas metabólicas y los factores
que influyen en la biotransformación
Inconveniente: la extrapolación al hombre de los resultados
El estudio de los metabolitos in vivo dependen del metabolismo
extrahepático, tiempos de toma de muestras y la síntesis de los
metabolitos
Se realiza por V.I, molécula marcada con un radioisótopo adecuado a una
determinada posición
El muestreo en diferentes fluidos, tejidos mediante técnicas apropiadas
ESTUDIOS IN VIVO
