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LEUCORREDUCCION E LEUCORREDUCCION E IRRADIACION DE IRRADIACION DE
HEMOCOMPONENTESHEMOCOMPONENTES
Dr. Oscar W. Torres
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
DEFINICIONDEFINICION AABB: Es aquel que tiene menos de
5 x 106 leucocitos del donante en el producto final, con por lo menos el 85% del elemento sanguíneo original
NORMAS EUROPEAS: lo definen a los que tienen menos de 1 x 106
leucocitos por unidad
Vista lateral
Entrada de sangre
Salida de sangre, tras la retirada de leucocitos y plaquetas
Prefiltro: retiene microagregados
Filtro principal: retiene leucocitos y plaquetas
Esquema de un Filtro
Filtración
Mecanismos
Tamizado mecánico: diferencia en el tamaño de poro dentro de la matriz
Adhesión directa: los leucocitos se adhieren directamente a las fibras en el filtro principal
Interacción célula - célula: las plaquetas se adhieren a las fibras. Los leucocitos se adhieren a las plaquetas
Filtración
Modalidades
Según el momento de filtración
•Prealmacenamiento
•Postalmacenamiento
Según el lugar de filtración
•Laboratorio
•Al lado de la cama del paciente
Filtros de leucorreducción
Bolsa-bolsa Bolsa-paciente (bed -side)
Filtración
Momento adecuado / Tiempo de almacenamiento
• Mínimo 2 hs post-extracción (aprovecha la capacidad
fagocítica de los leucocitos)
• Se recomienda antes de 48hs para evitar la
fragmentación de los leucocitos
Leucorreducción
Temperatura de filtración
• a 4ºC el atrapamiento mecánico juega un papel preponderante, ya que la rigidez de la membrana impide el paso de los leucocitos a través del poro
• a 4ºC la viscosidad es mayor y por tanto el flujo menor
• a TA cobran mayor peso los mecanismos de adhesión directa e indirecta debido a la mayor flexibilidad de la membrana celular
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
CONSIDERACIONESCONSIDERACIONES
I. Métodos y técnicas para una LR efectiva y mantenimiento de la capacidad terapéutica del componente
II. Indicaciones clínicasIII. Control y garantía de calidadIV. Tipo de LR
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
CONSIDERACIONESCONSIDERACIONES
I.I. Métodos y técnicas para una LR Métodos y técnicas para una LR efectiva y mantenimiento de la efectiva y mantenimiento de la capacidad terapéutica del capacidad terapéutica del componentecomponente
II. Indicaciones clínicasIII. Control y garantía de calidadIV. Tipo de LR
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
METODOSMETODOS
CENTRIFUGACION DIFERENCIAL LAVADOS CON SOLUCION SALINA CONGELAMIENTO/DESCONGELAMIENTO OBTENCION DE PLAQUETAS POR buffy coat.
OBTENCION DE PLAQUETAS CON NUEVAS TECNICAS DE AFERESIS
FILTRACION
3 log
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
FILTRACIONFILTRACION
• Filtros de microagregados (2-3 log)• Filtros de última generación (4-5 log)
PrealmacenamientoPostalmacenamiento
EFICACIA: 99.9 a 99.999 % de leucododepleción y contaminación residual > 5 x 106 leucocitos/unidad
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
REMOCION DE LEUCOCITOSREMOCION DE LEUCOCITOS
GB RESIDUALES PORCENTAJE
Logs UNIDAD COMPLETA
PREFILTRACION 1,80 x 10 9
(1.800.000.000)
POSTFILTRACION 90% 1 1,80 x 108
(18.000.000)
99% 2 1,80 x 106
(1.800.000) 99,9% 3 9,00 x 105
(900.000) 99,99% 4 1,80 x 105
(180.000)
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
CONSIDERACIONESCONSIDERACIONES
I. Métodos y técnicas para una LR efectiva y mantenimiento de la capacidad terapéutica del componente
II.II. Indicaciones clínicasIndicaciones clínicasIII. Control y garantía de calidadIV. Tipo de LR
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTESINDICACIONES CLINICASINDICACIONES CLINICAS
PREVENCION DE:
REACCION FEBRIL NO HEMOLITICA POSTRANSFUSIONAL
ALOINMUNIZACION HLA Y REFRACTARIEDAD PLAQUETARIA
TRANSMISION DE AGENTES INFECCIOSOS CMV BACTERIAS HTLV I-II ENFERMEDAD DE CREUTZFELD-JAKOB
INMUNOMODULACION POR TRANSFUSION
REACCION FEBRIL NO HEMOLITICAFISIOPATOLOGIA
Ac. del paciente
IL-1
TNFIL-6
Leucocitos del donante
FIEBRE
REACCION FEBRIL NO HEMOLITICAFISIOPATOLOGIA
Leucocitos del donante
Activación del Complemento
C5a
IL-1IL-6
TNF
FIEBRE
Estimulación de los macrófagos del paciente
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
INCIDENCIA DE RFNHINCIDENCIA DE RFNH
TRANSFUSION DE ERITROCITOSTRANSFUSION DE ERITROCITOSPACIENTES POLITRANSFUNDIDOS (de 10% a 1,3%) PACIENTES POLITRANSFUNDIDOS (de 10% a 1,3%)
PACIENTES TALASEMICOS (de 13% a 0,5%)PACIENTES TALASEMICOS (de 13% a 0,5%)
PACIENTES ONCOHEMATOLOGICOS (2,15%)PACIENTES ONCOHEMATOLOGICOS (2,15%)
TRANSFUSION DE PLAQUETASTRANSFUSION DE PLAQUETASDONANTES MULTIPLESDONANTES MULTIPLES: (de 27% a 17%)
DONANTE UNICODONANTE UNICO:(de 14% a 7%)
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTESALOINMUNIZACION HLAALOINMUNIZACION HLA
CONSIDERACIONES• Causa más común de refractariedad
plaquetaria de causa inmune
• Dosis dependiente
• Previene la aloinmunización primaria (no todas)
• No previene la respuesta anamnésica
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
ALOINMUNIZACION Y REFRACTARIEDAD ALOINMUNIZACION Y REFRACTARIEDAD PLAQUETARIAPLAQUETARIA
PREVENCIONLEUCODEPLECION RADIACION ULTRAVIOLETA
COSTO / BENEFICIOUso de CPsUso de CPs HLA compatiblesDías de internación y mayor recuperación
hematopoyética Incidencia de infecciones en pac. con LMA
LEUCORREDUCCION UNIVERSALRIESGO DE ALOINMUNIZACION
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
%
Control CPM F PDU F
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTESTRANSMISION DE CMVTRANSMISION DE CMV
OBJETIVO: REDUCCION DEL RIESGO
(23-27% 1-4%) MOTIVOS:• Elevada seroprevalencia en la población• Gastos innecesarios en serología• Riesgo de falsos negativos (por la técnica
o por período de ventana serológica)
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
INMUNOMODULACION POR TRANSFUSION Actividad de NK, la relación CD4/CD8 y la
blastogénesis linfocitaria
CONTAMINACION BACTERIANA
ENFERMEDAD DE CREUTZFELDT-JAKOB (variante nueva)
% Leucocitos por unidad
Días de almacenamiento
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
FRAGMENTACIÓN DE LEUCOCITOS DURANTE EL ALMACENAMIENTO DE GRD
0
10
20
30
40
50
60
70
80
7 14 21 28 42
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
INCIDENCIA DE RFNHTINCIDENCIA DE RFNHT
0
0,5
1
1,5
2
2,5
inci
denc
ia (
%)
Pie de cama Prealmac.
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
CONSIDERACIONESCONSIDERACIONES
I. Métodos y técnicas para una LR efectiva y mantenimiento de la capacidad terapéutica del componente
II. Indicaciones clínicas
III.III. Control y garantía de calidadControl y garantía de calidadIV. Tipo de LR
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTESCONTROL DE CALIDADCONTROL DE CALIDAD
METODO VOLUMEN ANALIZADO
(uL)
LIMITE DE DETECCION
(Leucocitos/uL)
Contador
Electrónico500 100-500
Cámara de
Neubauer1.8 2.8 – 5.6
Cámara de
Nageotte100 0.05 – 0.01
Citometría de flujo
Variable 0.1
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
CONSIDERACIONESCONSIDERACIONES
I. Métodos y técnicas para una LR efectiva y mantenimiento de la capacidad terapéutica del componente
II. Indicaciones clínicasIII. Control y garantía de calidad
IV.IV. Tipos de LRTipos de LR
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
CONCLUSIONES ICONCLUSIONES I• LAS INDICACIONES CLINICAS PUEDEN
SER DISCUTIDAS
• LOS BENEFICIOS COMPROBADOS PODRIANPODRIAN LLEVAR A LA LEUCORREDUCCION UNIVERSAL
• LOS COSTOS PODRIANPODRIAN SUPERAR A LOS PROVOCADOS POR LA COMPLICACIONES QUE PREVIENEN
LEUCORREDUCCION DE HEMOCOMPONENTES
CONCLUSIONES IICONCLUSIONES II
• ES MAS SEGURA CUANDO SE REALIZA PREALMACENAMIENTO PORQUE EVITA LA FRAGMENTACION DE LA MEMBRANA LEUCOCITARIA, LIBERANDO ANTIGENOS, PIROGENOS, CITOQUINAS INMUNOMODULADORAS Y AGENTES INFECCIOSOS
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTES
ENFERMEDAD INJERTO vs HUESPED POSTRANSFUSIONAL
Complicación infrecuente y fatal de la transfusión.
Fallo multiorgánico causado por los linfocitos T CD4 del donante que reaccionan contra Ags. HLA del receptor.
Dosis mínima de linfocitos capaz de desencadenarla es de 107L/kg peso
Componentes de riesgo: ST-GRD-CP-CG-PF
ENFERMEDAD INJERTO vs HUESPED POSTRANSFUSIONAL
CRITERIOS DE BILLINGHAM
• PRESENCIA DE CELULAS INMUNOCOMPETENTES EN EL DONANTE
• INCAPACIDAD DEL RECEPTOR PARA REACCIONAR CONTRA EL INJERTO
• RECEPTOR HOMOCIGOTA QUE COMPARTE UN HAPLOTIPO HLA CON EL DONANTE
ENFERMEDAD INJERTO vs HUESPED POSTRANSFUSIONAL
MANIFESTACIONES CLINICAS• HIPERTERMIA Y RASH CUTANEO
• COMPROMISO GASTROINTESTINAL
• AFECCION HEPATICA
• AFECCION DEL SISTEMA LINFOHEMATOPOYETICO (TIMO y MO)
• INFECCIONES
ENFERMEDAD INJERTO vs HUESPED POSTRANSFUSIONAL
DIAGNOSTICO
• ANTECEDENTE TRANSFUSIONAL
• CLINICA
• HISTOPATOLOGIA
• ESTUDIOS CITOGENETICOS
• TIPIFICACION HLA DE LINFOCITOS DEL DONANTE Y RECEPTOR
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTES
CALCULO DEL TIEMPO DE IRRADIACIONCALCULO DEL TIEMPO DE IRRADIACION
Dosis deseada (Gy)__________________ Valor de dosis central inicial (Gy/min) x Factor de decadencia
• EJEMPLO: 25 Gy_ = 2,5 minutos de exposición 11 Gy/min x 0,911
ENFERMEDAD INJERTO vs HUESPED POSTRANSFUSIONAL
PREVENCION
• Irradiación gamma (Cs137 /Co60)
• Rayos X (acelerador lineal/irradiador de hemocomp.)
• Métodos fotoquímicos (psoralenos + LUVA).
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTES
FUNDAMENTOFUNDAMENTO• IONIZACION CAPAZ DE PROVOCAR UN ENTRECRUZAMIENTO
QUIMICO EN EL ADN CELULAR SIN AFECTAR SU NORMAL FUNCIONAMIENTO, SALVO LA REPRODUCTIVA
OBJETIVOOBJETIVO• INACTIVACION DE LOS LT, CON UN DAÑO MINIMO AL RESTO
DE LAS CELULAS
DOSISDOSIS• 5 Gy: (-) PROLIFERACIÓN CELULAR EN UN CML.• 15 Gy: (-) ACT. MITÓTICA, TRANSF. BLÁSTICA Y Rta. A
MITÓGENOS.• 25-30 Gy: DOSIS ÓPTIMA.• 50 Gy: DOSIS MÁXIMA.
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTESIRRADIADORESIRRADIADORES
CARACTERISTICAS Cs137 Co60
VIDA MEDIA (AÑOS) 30 5,3
ENERGIA (meV) 0,662 1,17
TIEMPO DE EXPOSIC.
(en minutos)
5-8 2-4
VIDA UTIL Hasta 50 años Hasta 20 años
PERIOD. DE AJUSTES Cada 6 meses Cada 1-3 meses
IRRADIADORES
IRRADIADOR GAMMA IRRADIADOR DE R-X
INTERNATIONAL SPECIALTY PRODUCTS WAYNE N.J. 07470 (201)628-4000
IRRADIATEDNOT
OPERATOR MO. - DAY - YEAR
U.S. PAT.508462344
RAD-SURTMISP
Etiquetas de control visualHemocomponentes irradiados
INTERNATIONAL SPECIALTY PRODUCTS WAYNE N.J. 07470 (201)628-4000
IRRADIATEDNOT
OPERATOR MO. - DAY - YEAR
U.S. PAT.508462344
RAD-SURTMISP
T.Carini
Hemocomponentes irradiados
Vencimiento
Concentrado eritrocitario
Irradiado dentro de las 24 hs desde la extracción: 35 días
Irradiado dentro de los 14 días desde de la extracción: 28 días
Irradiado después de los 14 días: 24 hs
Para transfusión intrauterina (independientemente de la fecha de irradiación): 24 hs
Plaquetas
No se modifica el tiempo de vencimiento
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTESEFECTOS SOBRE LAS CELULASEFECTOS SOBRE LAS CELULAS
CONCENTRADO ERITROCITARIO• Hiperkalemia y peroxidación de lípidos de la
membrana• Hemólisis/Hemoglobinemia• ATP celular y la capacidad de recuperación
postransfusional. CONCENTRADO GRANULOCITARIO• metabolismo oxidativo, generación de superóxido
y quimiotaxis CONCENTRADO PLAQUETARIO• Metabolismo aerobio sin afectar la función
plaquetaria
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTES
EFECTOS SOBRE EL COMPONENTEEFECTOS SOBRE EL COMPONENTEVencimiento
Concentrado eritrocitario Irradiado dentro de las 24 hs desde la extracción: 35 días
Irradiado dentro de los 14 días desde de la extracción: 28 días
Irradiado después de los 14 días: 24 hs
Para transfusión intrauterina (independientemente de la fecha de irradiación): 24 hs
Concentrado granulocitario Debe ser irradiado tan pronto como fuera posible.
Concentrado plaquetario No se modifica el tiempo de vencimiento
IRRADIACION DE COMPONENTESMétodos fotoquímicos
Psoralenos (S-59) + LUVA• Inactivación de células presentadoras de Ags.• Elevada afinidad para ácidos nucleicos,
modificaciones irreversibles, inhibiendo capacidad proliferativa de leucocitos y síntesis de citoquinas
• CP: estudios fase I-II completados, continúan fase III
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTES
Indicaciones
• 5.16.2 Irradiación– 5.16.2.1.: El Banco de Sangre o Servicio de
Transfusión deberá participar en el desarrollo de políticas y procedimientos relacionados con la transfusión de componentes irradiados.
– 5.16.2.2: Cuando un paciente es identificado como de riesgo para EI-v-HPT, todos los componentes celulares deberán ser irradiados
Estándares de la AABB, 21º edición
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTES
Pacientes en riesgo para EIvsHPT• Fetos que reciben TIU.• Neonatos que recibieron TIU y deben ser
exanguinados o transfundidos.• Neonatos con peso menor a 1200 gs.• Neonatos con diagnóstico o sospecha de
inmunodeficiencia celular o combinada.• Receptores de CPH, alogénicas o autólogas.• Pacientes con Linfoma de Hodgkin• Pacientes tratados con antagonistas de las purinas
(fludarabina, cladrivina, 2-deoxicoformicina)• Receptores de plaquetas HLA compatibles
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTES
INDICACIONES ABSOLUTASINDICACIONES ABSOLUTAS
• Inmunodeficiencias celulares congénitas• Receptores de CPH (autólogas o alogeneicas)• Pacientes con Enfermedad de Hodgkin• Transfusión de granulocitos• Transfusiones intrauterinas y en neonatos que
recibieron TIU• Transfusiones a niños con peso menor a 1200g• Transfusión de unidades provenientes de donantes
consanguíneos de hasta 2º grado• Transfusiones de plaquetas HLA compatibles
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTES
INDICACIONES PROBABLESINDICACIONES PROBABLES
Pacientes con enf. hematológicas malignas en tratamiento con drogas citotóxicas.
Pacientes que reciben altas dosis de QT, RT ó terapia inmunosupresora agresiva.
Pacientes con anemia aplástica con terapia inmunosupresora
IRRADIACION DE HEMOCOMPONENTES
INDICACIONESINDICACIONES
CONTROVERSIALES:• Receptores de órganos sólidos• Anemia aplástica sin terapia
inmunosupresora
INADECUADAS:• Pacientes con SIDA• Pacientes anémicos por hemoglobinopatías,
defectos de membrana, metabólicos, etc.
GRACIAS !!!