ENZIMAS RECOP 2011

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Enzimas

Dr. Andres Aguirre Cruz 

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g z

 CONTENIDO

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Enzimas

² Catalizadores

² Clasificación

² Tipo de reacción

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Enzimas① Oxidorreductasas②  Trasfereasas③ Hidrolasas④  Liasas⑤  Isomerasas

⑥  Ligasas

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Enzimas² Grupos prostéticos

² Cofactores

² Coenzimas

Función importante

   M  o   l   é  c  u   l  a  s  n

  o  p  r  o   t  e   i  c  a  s

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Grupos prostéticos

Son molécula de origen no proteicocon actividad biológica.

Fosfato de piridoxal (B6)Hemoglobina 

Globina (proteína)Grupo hemo

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Enzimas

Sitio activo

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Mecanismo de Ping pong para

la trasnominaciónα-cetoácido

+aminoácidoNH3

NH3

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Modelo de adaptación inducidadel sitio activo de una Liasa

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Estructura del NAD+ y NADP+ 

o  NAD+, R = H

o  NADP+, R =PO2−3

Nicotinamida 

Adenina 

Dinucleótido

Nicotinamida 

Adenina 

Dinucleótido

Fosfato

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Sustrato dipeptídico 

Glisil tirosina

Carboxipeptidasa A

Sitio activo

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MECANISMOS DE

CATÁLISIS ENZIMÁTICA

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Las enzimas

v Se emplean en muchos mecanismos.

v Facilitar la catálisis.

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La catálisis 

Es el proceso por el cual se aumenta o disminuye la 

velocidad de una reacción química, debido a la

participación de una sustancia llamada catalizador .

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Mecanismos de reacción

①  Catálisis por proximidad

②  Catálisis acido básica 

③  Catálisis por tensión

④  Catálisis covalente

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Catálisis mediantefructosa −2,6− bifosfatasa  

Sustrato

①  Estabilizar carga delsustrato.

②  Ataque del nucleófilo al g.fosforilo−enzima.

③  Ataque del nucleófilo delH2O.Glu 327 actúa como una

 b a s e è  f o s f o r oinorgánico.

④  Liberación de ortofosfato inorgánico a partir de Arg257 y Arg 307.

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Secuencia de aminoácidos

²  Vecindad de los sitios catalíticos.

²  Proteasas bobinas. 

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 División del DNA

catalizado por unaendonucleasa de restricción 

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Espectros de absorción

NADH 

NAD+ 

NADP+ 

NADPH 

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Valoración de la enzimática acopladapara la actividad de hexosinasa 

Enzimas•  Transferir •  Grupo fosfato

• Transferir •  Grupo fosfato

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Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PD)

v Cataliza la 1a reacción

v Vía de la pentosa fosfato

v Ruta metabólica que provee

v NADPH

v Pentosas

v Para la síntesis de ácidos nucleicos.

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Principales enzimas séricasutilizadas en el diagnostico clínico

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Modelo Normal Patológico de isozimadel Lactato deshidrogenesa (LDH)

•  LDH•  Separada del suero•  Visualizadas•  Electroforesis en G.

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Electroferograma de las isozimsa

de lactato deshidrogenasa

Isozimas especificas

Ataque la miocardio

Normal

Enfermedad apática

Suero

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Electroforesis en Gel

Es un grupo de técnicas empleadas para separar moléculas basándose en propiedades como eltamaño, la forma o el punto isoeléctrico.

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Electroforesis en Gel

v  Propósitos analíticos

v  Purificar parcialmente moléculas

v  Antes de aplicar 

v  Espectrometría de masas

v  PCR (reacción en cadena de la polimerasa)

v  Clonación o secuenciación de ADN.

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 Uso de las proteínas de fusión 

Glutatión−s−trasnferasa(GST)

§  Purificar §  Proteínas recombinantes§  GSH, Glutatión