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Siembra
Que hacemos?
Cómo lo hacemos?
Porque lo hacemos?
Medio De Cultivo
Generales: permiten el crecimiento de cualquier tipo de bacteria
Selectivos: solo permiten el crecimiento de cierto tipo, por ej: solo un genero
Deferenciales: permiten distinguien entre dos o mas bacterias por caracteristicas bioquimicas.
Líquidos y otro materiales
Líquido Cefalorraquídeo
Centrifugar
BHI
ACh
Gram
Otro
Fresco / Tinta China
AS
Meningitis Bacteriana0-2 meses de edad:
• Bacilos Gram negativos.
• Estreptococos grupo B.
• Listeria monocytogenes.
2 meses-6 años de edad:
• Neumococo.
• Haemophilus influenzae.
• Neisseria meningitidis.
> 6 años de edad:
• Neumococo.
• Meningococo.
(80 %).
M.B. post-neurocirugía:
• Bacilos gram negativos (80%)
• Estafilococo aureus
• Estafilococos epidermidis (20 %).
M.B. asociada a "Shunts" :
• Estafilococo epidermidis (60 %)
• Estafilococo aureus (30 %)
• Bacilos gram negativos u otros (10 %).
M.B. recurrente:
• Neumococo
Líquidos de punción normalmente estériles articular, sinovial, extrabdominales, humor vítreo
Centrifugar
BHI
ACh
Gram
T-M Solo Sinovial
L AS
ZN
Giemsa
Fresco
Líquidos de punción abdominales, abscesos, empiemas, secreciones purulentas
Centrifugar
BHI
ACh
Gram
T-M EIP
L AS
ZN
Giemsa
(según la consistencia)
Fresco
Delgado
Líquidos de punción abdominales, abscesos, empiemas, secreciones
purulentas
Liquido ascítico
Fresco:– Celularidad, hongos, leucos, parásitos– KOH ( mucosas o dificil de disgregar)
10 ml(Con orden médica)
Biopsias De Tejido
TejidoObs
ervar
SF
Cortar rasgando en trozos pequeños
BHI
AChAS
Gram ZN
Giemsa
Fresco (KOH con trozo de tejido)
Rasgando!!
Averiguar por BACU u Hongos si no se pide
Muestras respiratorias
Hisopado Fauces
BC
AS OvinaCortes
(2 hemolisinas)
Baci S
Búsqueda: Streptococcus pyogenes
Muestras Respiratorias Bajas
Esputo– Espontaneo o inducido
Aspirado traqueal– Se introduce una sonda por la traquea y se
aspiran las secreciones. Similar al esputo en cuanto a procesamiento
Lavado bronquial– Con sln fisiologica mediante un endoscopio
Lavado bronquioalveolar (BAL)– Con fibroendoscopio se instila 120 ml de sln
fisiologia y se aspira. – Muestra de alveolos y bronquíolos. De
elección.
Tipos de muestras
Muestras Respiratorias Bajas
Mini-BAL– Se introduce un catéter telescopado en el
árbol bronquial y se hace avanzar hasta encontrar resistencia, seguidamente se hace avanzar el catéter interno y se instilan con una jeringa unos 25 ml de suero fisiológico estéril.
– El líquido recuperado y la punta del catéter interno se emplean para los estudios microbiológicos.
– Ventaja de no requerir el empleo de fibrobroncoscopio y se plantea como una alternativa a éste en el diagnóstico de la neumonía asociada a ventilación mecánica
Tipos de muestras
Esputo – Lavado bronquial – Asp. traqueal
3er. estría
1er. estría
2da. estría
Quemar
AS
Levin(Internados)
ACh
Gram
ZN
Giemsa
Fresco
“Frotis”
Importancia del fresco en el esputo
MUESTRA REPRESENTATIVA
>25 PMN/c < 10 Cel/c
<25 PMN/c > 10 Cel/c
MUESTRA NO ES REPRESENTATIVA
De la comunidad Nosocomiales
Streptococcus pneumoniae
Haemophilus influenzae
Moraxella catarrhalis
Staphylococcus aureus,
Streptococcus pyogenes
Bacilos gram-negativos
Bacilos Gram negativos:
P. aeruginosa,
K. pneumoniae,
A. baumanii,
Enterobacter spp.,
S. marcescens.
Cocos Gram positivos como S. Aureus
Agentes mas frecuentes de neumonia
Cocos gram
+C
ocos G-
AS
Levin
ACh
Gram
ZN
Giemsa
Fresco
MS
CLDE + ATB
Esputo -Aspirado traqueal – Lavado bronquialFIBROSIS QUISTICA
•Staphylococcus aureus •Haemophilus influenzae
•Burkholderia cepacia•Pseudomonas aeruginosa
Manitol Salado• Selectivo por su alta concentracion salina.• Stafilococos crecen y pueden o no fermentar el manitol.• SCP fermentan el manitol colonias amarillas • SCN no fermentan el manitol colonias rojas
CLDE + ATB: Selectivo para Burkholderia
Esputo -Aspirado traqueal – Lavado bronquialFIBROSIS QUISTICA
BAL
AS AChL AS50 uL 50 uL
Homog
enei
zar
10 a 20 ml o MAXIMO VOLUMEN posible
CentrifugarHomogeneizar
Gram
ZN
Giemsa
Fresco
4x P. carini
BAL
1 anzada en 1 placa de AS-Levin50 µl en 1 placa de AS50 µl en 1 placa de Ach
Siembra con ansa: Nro. de colonias x 200 (diluc. del ansa)= UFC/ml.
Siembra 50 µl (dilución 1/20): Nro. de colonias x 20 = UFC/ml.
Siembra 10 µl (dilución 1/1000): Nro. de colonias x 1000= UFC/ml.
Cultivo cuantitativo
Coprocultivo
XLDAS + ampi
Mac Conkey sorbitol
Caldo selenito
OtroAM
Observaciónmacroscópica
• Menores de 6 años
• MF sanguinolenta
• 18 hs de
incubacion (no más)
Coprocultivo
Azul de metileno
> 5 leucos/ campo 1000x
INFLAMACIÓN
Coprocultivo
XLD
Colonias rosadas con centro negro
(lactosa negativa, productora de sulfhídrico)
Colonias transparentes del mismo color del
medio (roja) o rosada (lactosa negativa)
Colonias amarillas(lactosa positiva)
Coprocultivo
ProbableShigellaProbable
Salmonella
ProbableE. coli
AS + AmpiAeromonas
spp (BGNNF)
Mac Conkey sorbitol
Colonias rosadas transparentes
(no fermentan sorbitol)
Probable E. coli
O157:H7
Salmonella Typhimurium ATCC
14028 XLD Agar - Klebsiella pneumoniae
Urocultivo
CLDE
CPS
1 anzada = 20 uL
1 colonia = 200 UFC/ml
Fermentadores de lactosa
Colonias amarillas
ROSA
INCOLORA CON FONDO MARRON
VERDE
E. coli
Grupo KES
Proteae
10 ml
1 ml
Urocultivo
Muestras genitales
Orina micción inicial Semen Exudado uretral Exudado endocervical Búsqueda de Streptococcus
agalactiae Exudado vaginal (Flujo)
Hombres
Mujeres
Muestras genitalesENDOCERVICAL o URETRAL FLUJO VAGINAL
Chlamydia trachomatis Candida
Neisseria gonorrhoeae Trichomonas vaginalis
Ureaplasma urealyticum Complego GAMM ( vaginosis bacteriana
Mycoplasma hominis St. agalactae
Actinomyces spp
Exudado vaginal• Agar sangre (G. vaginalis, St.agalactiae, S. aureus)
• Gram: Score de Nouget
• Fresco: levaduras, TRICHOMONAS
Exudado endocervical y uretral
CULTIVO– AS– Ach
Thayer – Martin: – Aislamiento selectivo de Neisseria gonorrhoeae y Neisseria
meningitidis. – Agregado de hemoglobina, un suplemento de enriquecimiento
(Britalex) y una mezcla antimicrobiana
Gram
Busqueda de St. agalactiae
BHI +colistin+nalidíxico o gentamicina
• Si tiene Flujo, se procesa primero eso• Si son dos hisopos se procesan por separado
AS
18 a 24 hs de incubación
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