Antigenos Febriles I

7/28/2019 Antigenos Febriles I

1/3

870090000 / 00 Pg. 1

SIGNIFICACION CLINICA

Las Salmonellas se consideran patgenos entricos obliga-

dos. Los alimentos y el agua contaminados son los mecanis-

mos de transmisin. La enfermedad puede presentarse como

gastroenteritis, septicemia con lesiones en diversos rganos

o fiebre tifoidea.

La Brucelosis se presenta en la mayora de los casos con

anorexia, fiebre, decaimiento y escalofros, pudiendo apare-

cer luego complicaciones importantes como son las seas y

neuropsquicas.

A pesar de que el mtodo definitivo para establecer la etiolo-

ga de estas enfermedades es a travs del aislamiento del

agente patgeno, esto resulta difcil debido a que la investiga-cin se realiza frecuentemente en perodos tardos de la en-

fermedad y luego de una terapia antibitica. Por este motivo

es de gran importancia diagnstica la deteccin de los

anticuerpos especficos producidos en el curso de cada una

de estas patologas. Una prueba aislada es de escaso valor,

siendo necesarias 2 o ms pruebas seriadas a fin de poner

en evidencia cambios en el ttulo de anticuerpos.

FUNDAMENTOS DEL METODO

El suero del paciente se pone en contacto con antgenos es-

pecficos. En este caso se utilizan suspensiones de Salmo-

nellas o Brucellas muertos. Si la muestra contiene los anti-

cuerpos correspondientes se producir una aglutinacin visi-

ble macroscpicamente.

REACTIVOS PROVISTOS

Antgenos Febriles Salmonella: suspensin en solucin

salina con conservantes apropiados, conteniendo los siguien-

tes antgenos bacterianos:

- Antgenos Paratyphoid A (Salmonella, antgeno flagelar a).

- Antgenos Paratyphoid B (Salmonella, antgeno flagelar b).

- Antgenos Typhoid H (Salmonella, antgeno flagelar d).

- Antgenos Typhoid O (Salmonella, antgeno somtico D).

Antgenos Febriles Brucella: suspensin de antgenos bac-

terianos (Brucella abortus, cepa 1119-3) en solucin fisiolgi-ca con conservantes apropiados. La concentracin celular de

los antgenos se encuentra entre el 4 y el 6%. Las bacterias

utilizadas se encuentran en fase lisa.

Antgenos Febriles Controles:

- Control Positivo: dilucin de suero humano inactivado positivo.

- Control Negativo: dilucin de suero humano negativo.

REACTIVOS NO PROVISTOSSolucin fisiolgica.

Antgenos FebrileReactivos para la determinacin de anticuerpos espficos contra Salmonella y Brucella

INSTRUCCIONES PARA SU USOLosreactivosseproveenlistosparausar. Llevar a temperaambiente y agitar vigorosamente antes de su empleo.

PRECAUCIONESLos reactivos son para uso diagnstico "in vitro".

Los controles han sido examinados para HIV, HCV y encontrndose no reactivos. No obstante, deben ser empdos como si se tratara de material infectivo.Utilizar los reactivos guardando las precauciones habitu

de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos.Todos los reactivos y las muestras deben descartars

acuerdo a la normativa local vigente.

ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DEALMACENAMIENTOReactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hla fecha de vencimiento indicada en la caja. No congela

INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOSREACTIVOSCualquier contaminacin bacteriana de los reactivos produdurante el uso puede ser causa de deterioro. En tal caso dese

MUESTRA

Sueroa) Recoleccin: debe obtenerse suero lmpido en forma esNo inactivar ni calentar ya que los anticuerpos son termolb

b) Aditivos: no se requieren.c) Sustancias interferentes conocidas: la hemlisis viy los quilomicrones pueden dar reacciones inespecfica

d) Estabilidad e instrucciones de almacenamientomuestras pueden conservarse 7 das en refrigerador (2-10

MATERIAL REQUERIDO (no provisto)- Placa de vidrio- Micropipetas- Tubos de hemlisis

- Varilla- Reloj o timer

PROCEDIMIENTO

I- TECNICA RAPIDA EN PLACAColocar en una placa una gota (50 ul) de suero y aggar una gota (50 ul) de suspensin de Antgeno. M

clar y agitar la placa en forma circular durante 2 minut

C


2/3

870090000 / 00 Pg. 2

Observar la presencia o ausencia de aglutinacin utili-zando una luz indirecta sobre fondo oscuro.

II- TITULACION RAPIDA EN PLACA1) Dividir una placa de vidrio en sectores de 4 cm2 aproxi-madamente.2) Empleando las micropipetas apropiadas colocar enestos sectores 80 ul, 40 ul, 20 ul, 10 ul y 5 ul de suerolmpido. Repetir el procedimiento para un control negati-

vo y uno positivo.3) Colocar 1 gota de Antgeno previamente agitado so-bre cada gota de suero.4) Mezclar el suero y el Antgeno utilizando una varillaabarcando un rea de 2 cm de dimetro aproximada-mente. Debe emplearse una varilla distinta para cadadilucin de suero o la misma varilla mezclando a partirde la muestra ms diluida.5) Agitar la placa durante 2 minutos en forma circular.6) Observar la aglutinacin utilizando luz indirecta sobrefondo oscuro.

INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS4+: todos los microorganismos aglutinan.3+: aglutinan aproximadamente el 75%.2+: aglutinan aproximadamente el 50%.1+: aglutinan aproximadamente el 25%.Negativo: no aparece aglutinacin.

Tcnica I: se indica solamente positivo o negativo.Tcnica II: el ttulo se considerar la ltima dilucin que daaglutinacin del 50% (++).Los resultados obtenidos en la titulacin en placa se aproxi-man a los de la prueba en tubo descripta en Bennett, C.W(ver Bibliografa), considerando las diluciones como se mues-tra a continuacin:

Volumen de Suero Dilucin aproximada en(ml) la prueba en tubo0,08 1:200,04 1:400,02 1:800,01 1:1600,005 1:320

METODO DE CONTROL DE CALIDADAntgenos Febriles Controles.

VALORES DE REFERENCIAGeneralmente ttulos de 1:40 1:80 son sospechosos de en-

fermedad. Slo ttulos mayores de 1:80 pueden considerarseprobatorios de diagnstico de enfermedad cuando estn acom-paados de la sintomatologa clnica. Ttulos mayores de 1:320,son concluyentes.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTOVer Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.Ttulos significativos pueden obtenerse en individuos inmuni-

zados por vacunas tifoideas. Pueden observarse reaccionesinespecficas con antgenos de Salmonella O grupo D en sue-

ro de pacientes con influenza.

Tambin se encontraron reacciones inespecficas en pates con enfermedad heptica crnica activa y consumid

de narcticos.

Los antgenos de Brucella pueden dar reacciones cruz

en individuos vacunados contra clera.

PERFORMANCEAntgenos Febriles Salmonella: en un estudio reali

sobre 191 muestras, comparando con otro mtodo de si

fundamento tomado como referencia, se obtuvieron los sig

tes resultados:

Salmonella Paratyphoid A:

Sensibilidad: 94,1%

Especificidad: 98,8%

Salmonella Paratyphoid B:

Sensibilidad: 89,3%

Especificidad: 100%

Salmonella Typhoid H:

Sensibilidad: 86,2%Especificidad: 99,3%

Salmonella Typhoid O:

Sensibilidad: 95%

Especificidad: 99,1%

Antgenos Febriles Brucella: en un estudio realizado s203 muestras comparando con otro mtodo de similar fu

mento tomado como referencia, se obtuvieron los siguie

resultados:

Sensibilidad: 100%Especificidad: 100%

Debe tenerse en cuenta que debido a las limitaciones de

tipo de reacciones serolgicas, el mtodo no sustituye e

lamiento e identificacin del agente etiolgico.

PRESENTACIONSalmonella (Cd. 1863151)Paratyphoid A: 1 x 5 ml

Paratyphoid B: 1 x 5 ml

Typhoid H: 1 x 5 mlTyphoid O: 1 x 5 ml

Brucella (Cd. 1503151)Brucella abortus: 1 x 5 ml

Controles (Cd. 1933151)Control Positivo: 1 x 2 ml

Control Negativo: 1 x 2 ml

BIBLIOGRAFIA- Widal, F. - Bull. Soc. Med. Hop. de Paris 13 (1896).

- Bennett, C.W. Clinical Serology, pg. 145, Charles ThoCo. (1964).

- Huddleson, J.B. - J. Infect. Dis. 42:242 (1928).


3/3

870090000 / 00 Pg. 3

Wiener la2000 Rosario - Argen

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.Riobamba 29442000 - Rosario - Argentinahttp://www.wiener-lab.com.arDir. Tc.: Viviana E. CtolaBioqumicaProducto Autorizado A.N.M.A.T.Disp. N: 1889/89 - 4957/00-153/05

SmbolosLos siguientes smbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnstico de Wiener lab.

CEste producto cumple con los requerimientos pre-vistos por la Directiva Europea 98/79 CE de pro-ductos sanitarios para el diagnstico "in vitro"

V Uso diagnstico "in vitro"

X Contenido suficiente para ensayos

H Fecha de caducidad

l Lmite de temperatura (conservar a)

No congelar

F Riesgo biolgico

Volumen despus de la reconstitucin

Cont. Contenidog Nmero de lote h Nmero de catlogo

Calibr. Calibrador

b Control

b Control Positivo

c Control Negativo

i Consultar instrucciones de uso

M Elaborado por:

Xn

Nocivo

Corrosivo / Castico

Irritante

Xi

P Representante autorizado en la Comunidad Eu-ropea

?

Documents

Antigenos Febriles I