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COPROCULTIVOINT. T.M. FELIPE ROMERO CHIRI
INTRODUCCCION
• La porción inferior del intestino tiene una flora bacteriana normal amplia, por lo que los agentes infecciosos causales de diarrea por diversos mecanismos y que pueden ser ubicados en diversos grupos de microorganismos
La mayor parte de estos microorganismos en el adulto en equilibrio, son anaerobio (90%) y son bifidobacterias y bacteroides; el resto esta constituida por germenes aerobios (colibacterias, enterococos y lactobacilos) que representan hasta el 9%, hasta que el restante 1% esta constituido por clostridios, estafilococos y algunas especies de hongo.
Las principales causas de trastornos gastrointestinales agudos incluyen:
•Toxinas (de: Estafilococos, Escherichia coli ), •Bacilos entéricos gram negativos invasores,•Fermentadores lentos de la lactosa, • Shigella, y la Salmonella.
• EL COPROCULTIVO : Es un prueba diagnostica que por medio del cultivo nos permite la información del origen de la causa de las gastroenteritis y también nos dan una idea de cual es el tratamiento mas optimo e idóneo para el caso
Recolección de la muestraLa muestra del coprocultivo será tomada en un vaso especial para recolectar muestra, es un frasco de boca ancha que debe de estar estéril. Las muestras de heces para estudio bacteriológico debenobtenerse en la etapa aguda de la enfermedad, antes deadministrar antimicrobianos y deben ser transportadas con prontitud al laboratorio.
Tamaño de la muestra
• Heces Pastosas formadas: El tamaño de un nuez ( 1-2gr)
• Heces Liquidas: volumen de 5-10 ml
Preservación• El líquido o solución conservadora se prepara de la siguiente manera:
• NaCl 4.2 g• K2HPO4 3.1 g• KH2PO4 1.0 g• Glicerol 300 ml • H2O 700 ml
• Añade rojo fenol
Se aconseja emulsionar aproximadamente 1g de heces en 1º ml de este liquido
Transporte
• Puede utilizar el medio de transporte Stuar o Cary Blair
Medio semisólido, no nutritivo. tioglicolato de sodio, azul de metileno,
• Si la muestra no se envía en forma inmediata se debe refrigerar.4 ºC• Si se va a procesar en el plazo de 1 o 2 horas después de su emisión,
no necesitan medio de transporte.• Mientras tanto mantener refrigerada las muestras, para evitar el
sobrecrecimiento de la flora normal que puede enmascarar o destruir a los enteropatógenos.
Reacción Inflamatoria• Dentro de las pruebas de laboratorio recomendadas para abordar la
enfermedad diarreica, se encuentra en primer lugar la citología del moco fecal, la cual nos permite diferenciar la etiología de una infección viral o bacteriana.
• Un reporte de más de 10 leucocitos por campo orienta a una etiología infecciosa:
• > MN: etiología viral,• > PMN: etiología bacteriana.
Medios de Cultivo
• Para facilitar el aislamiento de bacterias entéricas patógenas se utilizan :
• Medios de enriquecimiento • Medios selectivos.
Medios de enriquecimiento
• Caldo con tetrationato (Mueller y Kauffmann). Contiene tiosulfato de sodio, sales biliares y yodo-iodurada, Salmonella
• Caldo con selenito (Leifson). • Posee selenito, ácido de sodio permite el rápido desarrollo de salmonelas y
shigellas.• • Agua Peptonada Alcalina • La viabilidad de los vibrios se mantiene intacta a pH alcalino
Medios Selectivos
Agar MacConkey
Peptona
Sales Biliares
Lactosa
Cristal Violeta
Permite diferenciar las bacterias fermentadoras de lactosa de las no
fermentadorasSel-Dif
S.S agar
Citrato Fe, Tiosulfato Na
Sales biliares
Verde brrillante
Rojo Neutro
Permite aislar a las bacterias del género de las salmonellas y shiguellas
Lactosa
Shigella y Salmonella lactosa neg, aparecen como colonias lisas, transparentes a opacas
XLD agar
xilosa, Lactosa sacarosa
lisina
tiosufalto de sodio y
citrato férrico amonio
Rojo Fenol
Permite aislar a las bacterias del género de las salmonellas y shiguellas
Salmonellas: Negras prod SH2 y rojas sin SH2
Xilosa, Lisina, Desoxicolato
Shiiguella: Rojas
Desoxicolato de sodio
TCBS Agar
Tiosulfato Na
Citrato Na
Bilis
Cit ferricoPermite aislar al género
de los vibrios
la sacarosa es fermentada por los vibrios que dan colonias de tamaño mediano, lisas, opacas, de color amarillo
Inhib GP y coliformes alcalinizan el medio
H2S
Sacarosa
ClNa Crecimiento
MICROORGANISMOS PATÓGENOS CAUSANTES
DE ENFERMEDADES ENTÉRICAS
MORFOLOGIA• Bacilo Gram negativo.• No forma esporas• Móviles (flagelos perítricos).• Catalasa positivos.• Oxidasa negativos.
CARACTERÍSTICAS NUTRICIONALES:No exigente.Fermenta Glucosa, maltosa y manitol Lactosa y sacarosa neg.Es aerobio anaerobio facultativo
CARACT. COLONIAS:Agar Mac Conkey las colonias son lactosa –Transparente o incoloras 2-3 mmAgar SS: colonias incoloras 1-2 mm, colonias con centro obscuroAgar XLD: color rojo con el centronegro debido a la producción de H2S
SALMONELLA
Colonizan el intestino delg
Transmisión: alimentos de origen animal contaminados
La infección se localiza en el íleon y colon
• El aislamiento de salmonelas se puede realizar en medios poco selectivos como el agar MacConkey o en medios de cultivo con selectividad media como el agar S-S o agar Hektoen..
Epidemiologicamente :Las que infectan sólo al hombre: S Typhi, S Partyphi A y S Partyphi C y que se transmiten en forma directa ó indirecta de una persona a otra
Los coprocultivos son positivos en aproximadamente la mitad de los casos durante la primera semana con fiebre, pero el mayor número de cultivos positivos se obtiene en la segunda y tercera semanas de la enfermedad
Positiva con antisuero Vi = S. Typhi
Tratamiento: Las quinolonas: Ciprofloxacina. Sulfametoxazol-trimetoprim.cefalosporinas de 3a generación, ceftriaxonaEl cloramfenicol,
La identificación bioquímica se debe complementar con la aglutinación mediante antisueros polivalentes.
Positiva con antisuero D = suspechoso de S. Typhi*
No positiva con antisueros Vi o D = negativa
Bioquímica Diferencial Salmonella
• TSI +K/A -, +
• LIA +K/K SH2
• CITRATO +• UREA - • SIM
MOVILIDAD +INDOL -
H2S +
MORFOLOGIA• BGN.• Miden 0.7 µm x 3 µm• No forma esporas• No Móviles• Catalasa positivos.• Oxidasa negativos.
CARACTERÍSTICAS NUTRICIONALES:No exigente.Fermenta Glucosa, acido sin gas. Lactosa --Es aerobio anaerobio facultativo
CARACT. COLONIAS:Agar Mac Conkey las colonias son lactosa –Convexas incoloras 2-3 mmAgar SS: colonias incoloras Agar XLD: son transparentes 1-2 mm
SHIGUELLA
Cuatro especies y cada especie varios serotipos: Shigella dysenteriae (serogrupo A, 13 serotipos), Shigella flexneri (serogrupo B, 6 serotipos), Shigella boydii (serogrupo C, 18 serotipos) yShigella sonnei (serogrupo D, 1 serotipo).
Transmisión : alimentos contaminados
Ocasionan una diarrea disentérica por invasión de las células del colon. Los cultivos deben realizarse con muestras de las partes fecales con moco, pus o sangre. S. dysenteriae Y flexneri es el aislamiento más común en muchas partes del mundo, pero S. sonnei predomina en América del Norte y en Europa.
.[
Identificación serológica
Antisuero monovalente A1 (Si aglutinación + = S. dysenteriae 1)
Antisuero polivalente B (Si aglutinación + = S. flexneri
Antisuero polivalente D (Si aglutinación + = S. sonnei)
Debido a los elevados niveles de resistencia a la ampicilina y al trimetoprim-sulfametoxazol observados en los últimos años se ha sugerido como alternativa el tratamiento con: Fluoroquinolona : ácido nalidíxico, ciprofloxacina, norfloxacina, ofloxacina como tto 1 lineaCefalosporina de 3ª generación. ceftriaxona, pivmecilinam. Macrolidos: azitromicina
Diferencial de Shiguella
• TSI K /A -- , --• LIA K / A --• CITRATO --• UREA --• SIM
S --I -+M --
E. ColiMORFOLOGIA• Bacilo Gram negativo.• tienen forma de barra o
baston, poseen flagelos y pili.
• No forma esporas• Móviles (flagelos perítricos).• Catalasa positivos.• Oxidasa negativos.• Reducen nitratos a nitritos.• Producen vitamina B y K.
CARACTERÍSTICAS NUTRICIONALES:No exigente.Fermenta glucosa y lactosa con producción de gas.Es anaerobio facultativo
CARACT. COLONIAS:Agar Mac Conkey las colonias son rojas con halo turbioSS: colonias de color rosa a rojoXLD: grandes, amarillas con o sin precipitado de bilis
Afecta: mucosa colon
Diarrea secretora, fiebre
Afecta: mucosa intestinal
Evacuaciones escasasMoco, sangre dolor, fiebre
Diarrea inicio brusco, dolorSeguida hemorragia
Sindrome uremico hemolitico
Diarrea secretora acuosa con moco y sangre fiebre baja
8-12 dia/ 4 dias diarrea del viajero
Paises en desarrollo
adherencia difusa (DAEC
108 UFC
serotipo O157:H7
Para identificar a E. Coli como Enteropatogena se utiliza antisuero POLIVALENTE A, B y C
Para identificar a E. Coli como Entero invasiva se utiliza antisuero A Y Antisuero B
Para identificar a E. Coli comoEntero Hemorragica se utiliza antisuero 157
Diferencial E.Coli• Resultados• TSI A / A + , - • LIA K / A -• CITRATO --• UREA ---• SIM
S --I +M +
VIBRION SPPMORFOLOGIA• BGN. Ligeramente curvado• No forma esporas• Móviles (flagelos perítricos).• Catalasa positivos.• Oxidasa positivos.
CARACTERÍSTICAS NUTRICIONALES:Poco exigentesaerobios y anaerobios facultativosfermentan la sacarosa, lactosa +-
CARACT. COLONIAS:Agar Mac Conkey de incoloras a rosa clarasAgar TCBS: colonias amarillas brillantes de 2 a 4 mm de diámetro, lisas, opacas,Pueden ser planas con centro elevado
Habitat: ambiente hídrico, marino y fluvial.
El Vibrio cholerae presenta serogrupos toxigénicos O1 u O139 Serogrupo O1 están clasificados en dos biotipos: El Tor y el clásicodos serotipos (Inaba y Ogawa) con base en la aglutinación con antisueros
• Gastroenteritis : tipo colérico o no colérico. • La forma epidémica de cólera, cursa con vómitos y diarrea líquida
secretora muy abundante, con pérdida rápida de agua y electrolitos que causa una profunda deshidratación.
• De distribución prácticamente mundial, su prevalencia es baja, al menos en países desarrollados.
• La mayor parte de las especies son sensibles a :• Tetraciclinas: Doxiciclina • Fluoroquinolonas: Ciprofloxacino, Norfloxacino.• Macrolidos: Eritromicina, Azitromicina• Trimetoprina-sulfametoxazol,
Diferencial Vibrio• TSI A / A - , -• LIA K / K - , - • CITRATO --• UREA --• SIM
S --I --M +
GRACIAS……