RECONOCIMIENTO DE MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS DE LABORATORIO.

INTRODUCCIÓN:

La prueba de Papanicolaou (llamada así en honor de Georgios

Papanicolaou, médico griego que fue pionero en citología y detección temprana de

cáncer), también llamada citología exfoliativa o citología vaginal, se realiza para

diagnosticar el cáncer cervicouterino.

El objetivo de esta prueba consiste en encontrar los cambios de las células

del cuello uterino que son precursoras del cáncer, antes de que empiecen a

causar síntomas y permitiendo que los tratamientos sean eficaces. El cáncer

cervicouterino es una enfermedad 90 % prevenible, si la prueba de Papanicolau se

realiza regularmente.

Esta prueba deben realizársela todas las mujeres que hayan iniciado su

vida sexual una vez al año durante dos o tres años consecutivos, y si los

resultados son negativos se repetirá cada tres a cinco años en caso de no haber

factores de riesgo y hasta los 65 años.

Si existen factores de riesgo para cáncer de cuello de útero (Factores

hereditarios, edad, inicio a temprana edad de relaciones sexuales, infección por

VPH o historia personal de ETS, tabaquismo, multiparidad, inmunodepresión o

toma de anticonceptivos orales) el seguimiento tendrá que ser anual.

La técnica de Papanicolau puede aplicarse asimismo a la citología de otro

órganos, desde material expectorado de las vías respiratorias hasta un cepillado

endoscópico gástrico sin dejar de mencionar un hisopado nasal o rectal.

OBJETIVOS.

1. Identificar cada uno de los equipos, reactivos y materiales que se usan en

el procedimiento de la coloración PAP.

2. Conocer el porqué del uso de los diferentes reactivos en este tipo de

coloración.

3. Conocer el fundamento de los colorantes usado

Marco teórico:

Los materiales, reactivos y equipos observados fueron los siguientes, a continuación se detallará a cada uno de ellos.

1. Materiales:1.1. Vidrio.1.1.1. Canastilla de vidrio:

Sirve para colocar un número limitado de láminas (10) para poder sumergirlas en cada uno de los reactivos a utilizar durante la coloración.

1.1.2. Cubeta de vidrio:Se utiliza para almacenar reactivos, agua, ácidos, alcohol, el cual facilitará el proceso de coloración de las láminas.

1.1.3. Bagueta. Se utiliza para mezclar los reactivos y realizar el montaje a las láminas con el bálsamo de Canadá.

1.1.4. Probeta.Se utiliza para medir volúmenes para realizar el preparado de los reactivos a utilizar en el proceso de coloración.

1.1.5. Embudo:Se utiliza para realizar el filtrado de los reactivos con ayuda de un papel filtro.

1.1.6. Beakers:Se utiliza para trasvasar volúmenes de un recipiente a otro.

1.1.7. Cubeta de Koplic.Se usa exclusivamente para depositar xilol u alcohol.

1.1.8. Láminas portaobjetos:Son utilizados para realizar el extendido de las muestras.

1.1.9. Pipetas. Se utiliza para medir reactivos en volúmenes pequeños.

1.2. Otros.1.2.1. Campo.

Se utilizado para trabajar en una zona más segura y evitar la contaminación de la muestra.

1.2.2. Papel filtro:

Utilizado para filtrar los reactivos al momento de su preparación.

1.2.3. Lápiz marcador de vidrio punta de diamante:

Utilizado en el marcaje de las láminas para evitar que se borre la codificación por acción de los reactivos.

1.2.4. Mascarilla: Se utiliza como protección personal para evitar el contagio con agentes patógenos.

1.2.5. Papel absorbente: Utilizado para el secado de las canastillas de vidrio antes de pasar de una cubeta de vidrio con reactivo a otro.

1.2.6. Parafilm : Se utiliza como protección de las cubetas de vidrio para dar protección a las cubetas que contienen los reactivos.

2. Reactivos:

2.1. Alcohol al 96 %:El Alcohol Etílico al 96% reemplazará el agua extracelular e intracelular debido a que los colorantes posteriores son más solubles en alcohol que en agua.

2.2. Hematoxilina: Las moléculas colorantes de Hematoxilina de Harris penetrarán en la célula y se dirigirán al núcleo de la misma por un proceso Físico Químico del Tipo Atracción Electrostática. Esta unión se debe gracias a los grupos Fosforitos Ácidos (-) del núcleo que le dan carga global Negativa a la estructura celular tiñéndolo de un color violeta.

2.3. Ácido clorhídrico: Es una dilución del Ácido Clorhídrico al 1%, por lo que presenta una carga fuertemente ácida (-). Las Cargas Negativas ingresarán a la célula y se unirán por diferencia de carga con las Cargas Positivas, en este caso, con los Grupos Auxocromos (+) de las moléculas de Hematoxilina.

2.4. Hidróxido de amonio. Le darán carga global negativa a algunas moléculas de Hematoxilina separándolas del núcleo, logrando la decoloración parcial evitando la sobresaturación de colorante en el núcleo que podrían impedir la observación de finos detalles nucleares.

2.5. Orange G: Es un colorante monocromático penetra rápidamente en el citoplasma celular y tiñe específicamente la Queratina de un color naranja brillante. La Queratina normalmente no se encuentra en el citoplasma de las células normales pero aparece en las células epiteliales cérvico vaginales en Carcinomas Queratinizados

2.6. Eosina. La Eosina teñirá de rosado el citoplasma de las Células Maduras: Superficiales, al unirse electrostáticamente a las proteínas citoplasmáticas exclusivas de células “Metabolicamente Inactivas”

2.7. Etanol absoluto :Busca eliminar el agua intra y extracelular, ya que los posteriores procesos de Aclaramiento y Montaje emplean insumos que nos son miscibles en Agua.

2.8. Xilol :Elimina de los espacios intra y extracelulares, ya que el posterior proceso de Montaje emplean sustancias que nos son miscibles en Alcohol. El Xilol cambia el Índice de Refracción de la Célula transparentándola y permitiendo una mejor observación de detalles celulares.

2.9. Bálsamo de Canadá:Se utiliza para realizar el montaje de las láminas para evitar la pérdida de la muestra coloreada.

3. Equipos:3.1. Microscopio:

Constituye uno de los principales y esenciales equipos del laboratorio, para dar lectura de las láminas coloreadas.

4. Pasos y orden de los reactivos:

1. Alcohol 96%. Remueve los restos de laca.2. Agua. Hidrata la muestra para recibir al primer colorante.3. Hematoxilina. Colorea al núcleo. 4. Agua.5. HCL al 0.5%.6. Agua.7. Agua amoniacal.8. Agua.9. Alcohol 96%. Mordiente y permeabiliza. 10.Orange.11.Alcohol 96%.12.Alcohol 96%.13.Eosina.14.Alcohol 96%.15.Alcohol 96%.16.Alcohol absoluto.17.Alcohol absoluto.18.Xilol.19.Xilol.20.Xilol.

Conclusiones:

1. Logre identificar cada uno de los equipos, reactivos y materiales que se

usan en el procedimiento de la coloración PAP en el laboratorio de

citología.

2. Con ayuda del docente se logró conocer el porqué del uso de los diferentes

reactivos en este tipo de coloración.

3. Durante el proceso de práctica y al elaborar el informe se logró conocer el

fundamento de los colorantes y reactivos usado en la coloración.