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Técnicas Espectroscópicas GLEIDY MALLMA VILCA

espectrofotemetria

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tema en patologia clinica

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TcnicasEspectroscpicasGLEIDY MALLMA VILCAIntroduccinLas tcnicas espectroscpicas utilizan la medida de los efectos que produce la interaccin de las radiaciones electromagnticas con la materia Miden la radiacin asorida ! emitida! transmitida ! dispersada o refle"ada con diferentes mtodos#RADIACINELECTROMAGNETICALas radiaciones electromagnticas son un conjunto de corpsculos, los fotones, que llevan asociada una onda. Radiaciones Electromagnticas = C/ (Ciclos/s) (Hz)E = h (nm)CicloLongitud de ondaFrecuencia E= h x C/ TCNICAS ESPECTROSCPICAS AbsorbanciaEn funcin de la concentracin de la muestraLey de Lambert- BeerA=clESPECTROFOTOMETRIAspectrum Imagen !enmeno "ista#Espectro!ometr$aEspectro+foto+metraphoto %&' metron Medida instr&mentoInstr&mento (&e se &tili'an para medir la a)sorcin de l&' por las disol&ciones#Tipos deespectrofotmetrocomp&tadoracomp&tadoraComponentes delespectrofotmetroLas l$mparas incandescentes % los l$seres son los tipos de fuentes de luz que se emplean en los espectrofotmetros# La fuente de luz que m$s se &a utilizado para las medidas en la regin 'isile del espectro ()*+,-.+ nm/ &a sido la l$mpara de 0olframioF&entes%*mpara de de&terio e +idrgeno#Para las medidas en la regin &ltra"ioleta ,--./01. nm2 se &tili'an las l*mparas de descarga de +idrgeno o de de&terio#Eslapartemsimportantedelequipo,determinandoengranpartesu calidad. Son dispositivos que filtran el espectro producido por la fuente, dejando"pasar"sloradiacionesenunrangodelongituddeonda determinada.Selectores de longit&d de ondaREFRACCINEsunpequeotubodeseccin circularocuadrada,selladoenun extremo,fabricadoenplstico, vidrioocuaro!diseadopara mantenerlasmuestrasdurantelos experimentos de espectroscopia."as cubetas deben ser tan claras o transparentes como sea posible, sin impureasquepuedanafectara una lectura espectroscpica. C&)etas#onvierte la energ$a radiante en una seal el%ctrica.3etectorM&estraFuncionamiento!"E#FE#E!CA$ E! LA$ %E"E#&!AC'!E$E$(EC"#'$C)(CA$Interferencias estticas%asprod&cens&stancias presentesenelespcimen(&e noe4perimentan"ariacin d&rantelareaccinanal$tica#%os e5emplosm*st$picosdeestas inter!erenciasenlosla)oratorios cl$nicos son la ictericia la lipemia 6 la +emlisis#Interferencias cinticasS&stanciaspresentesenel espcimen(&ereaccionan conalg7ncomponentede lame'cladereaccin#%a importanciarelati"adela contri)&cindeesas s&stanciasdependedel tiempode reaccin 6 de la concentracindelas mismas#&E%%A %E $*$"#A"'$ ('# &+"'%'$ %E AB$'#C)! &'LEC*LA#&+"'%'$ %E (*!"' F!AL1eincualamuestra%elreacti'o duranteuntiempodeterminado%a unatemperaturadeterminadapara quesecompletetotalmentela reaccin! de tal forma que la sustancia queuscamosdeeconsumirse totalmente#1inofueraas2%quedase partedelasustanciasinconsumir!al medirelproducto!estar2amos midiendomenoscantidaddelaque realmente &a%# 3or lo tanto se mide al final de un tiempo fi"o de incuacin#&+"'%'$ C!+"C'$Enellossemidela'elocidaddelareaccinmediantelamedidadela 'ariacindelaAsoranciaeneltiempo%estoserelacionaconla concentracin# Es una medicin continua! a diferencia de la del punto final!semideentiemposregulares#1epuedemedirlacantidadde sustrato no transformado la cantidad de producto formadolinealidadAbsorbanciaConcentracinT8R9I3IMETRIA : NEFE%OMETRIA TURBIDIMETRAMide el descenso de la luz transmitida a travs de la disolucin particulada a consecuencia de su dispersin por las partculass4uridimetr2a5 Medicin de la disminucin de la luz transmitida a tra's de una solucin#AplicacionesControl de calidad de agua, bebidas y productos alimenticios Contenido de macromolculasReacciones de precipitacinMonitoreo del crecimiento de cultivos bacterianosLa determinacin de aminocidos, vitaminas y antibiticos!Nefelometra !EFEL'&E"#,Adetectorlightscatter source o- lightsoluci.nCorrelacin entre turbide" y solidos suspendidosMonitorea la luz reflejada por las partculas y no a la disminucin a causa de la turbidez#$L%C#C%&'E(