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UNIVERSIDAD DEL QUINDO FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS Y
TECNOLOGAS
PROGRAMA DE QUMICA
LABORATORIO DE FITOQUIMICA 2
Laboratorio Fitoqumica 2
EXTRACCION Y AISLAMIENTO DE ALCALOIDES PRESENTES EN
BORRACHERO
(BRUGMANSIA CANDIDA PERS)
Presentado por:
Andrs David Naranjo Buitrago
Presentado al Profesor:
M.Sc. Fernando Agudelo A.
Fitoqumica II
Armenia-Quindo
21 de Abril del 2015
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RESUMEN
En esta serie de prcticas de laboratorio se utilizaron plantas
que en su contenido
existiera gran presencia de alcaloides la planta en para ello
tomamos la planta de
borrachero, en donde encontramos el alcaloide denominado
escopolamina y otros no
relevantes por su poca cantidad en el material vegetal. Se
realizaron una serie de
procesos con el fin de obtener este metabolito en un alto grado
de concentracin y asi
determina la presencia de alcaloides de la escopolamina en una
planta de borrachero de
la familia solancea conocida cuyo nombre cientfico es brugmansia
candida pers. Para
esto se emplearon procesos de seleccin, secado y molienda de
material vegetal,
desengrasado, extraccin de alcaloides, aislamiento y pruebas
para alcaloides.
Obteniendo as resultados positivos de la presencia de alcaloides
en esta Planta.
Palabras clave: alcaloides, desengrase, aislamiento y pruebas
para alcaloides
Imagen 1
Escopolamina
INTRODUCCIN
Brugmansia es un gnero con 10 especies aceptadas de plantas de
la familia solancea,
nativo de las regiones subtropicales de Sudamrica, a lo largo de
los andes
de Colombia hasta el norte de Chile e incluso el sudeste de
Brasil. Son conocidas como
"Trompetas de ngel" debido a sus enormes flores y comparten
dicho nombre con el
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gnero Datura con el cual est estrechamente emparentado. El
nombre comn en
Colombia es "borrachero" o "cacao sabanero.
Son grandes arbustos o pequeos rboles que alcanzan alturas de 3
a 11 metros. Las
hojas son alternas generalmente largas de 10 a 30 cm y con una
anchura de 4 a 18 cm
con bordes enteros o someramente dentados, a menudo con base del
limbo asimtrica, y
cubiertas de finas vellosidades. Las flores pendulares llegan a
medir 30 cm de largo; son
generalmente blanquecinas o amarillas aunque tambin rosas,
naranjas o rojas. Su
perfume, que sobre todo se manifiesta al anochecer, atrae
insectos nocturnos y, sobre
todo, murcilagos que son los principales responsables de la
polinizacin.
Este gnero se han usado desde tiempos muy antiguos en rituales
indgenas, desde
magia negra, hasta ceremonias de iniciacin y con propsitos
medicinales; ya sea solas o
mezcladas con otras plantas, generalmente su uso es externo, y
no se recomienda su
consumo, adems los curanderos que las utilizan, generalmente
conocen la forma de
detener los efectos despus del tiempo necesario. En Suramrica se
ha reportado el uso
para aliviar dolores de cabeza y para dolores reumticos como
analgsico.
Imagen 2
Plata de borrachero (brugmansia candida per)
No existe un mtodo nico para extraer y aislar alcaloides, pues
este depende tanto de
una naturaleza del material a procesar como de las estructuras
qumicas y por ende, las
propiedades fsicas, de los alcaloides presentes o que se de
desean separara del material
vegetal. Sin embargo gracias a su basicidad pueden proponerse un
proceso general de
separacin l se puede emplear a conveniencia al realizarlo todo o
solo una parte.
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Desengrase
Es un proceso que consiste en lavado del material vegetal con
ter de petrleo
normalmente para este proceso se emplea un extraccin Soxhlet
mediante la cual se
extraen los compuestos grasos antes de pasar a la extraccin.
Lixiviacin
Es el proceso de remocin o extraccin de un compuesto soluble
(soluto contenido en
medio solido) mediante un solvente apropiado. Este es un proceso
de trasferencia de
masa por lo que es indispensable que exista contacto ntimo entre
el solvente y soluto.
Aislamiento
Proceso mediante el cual se separan metabolitos de inters de una
matriz, este proceso
se lleva a cabo conociendo las caractersticas de las molculas
objetivos.
Pruebas para alcaloides
Son sustancia que al reaccionar con un alcaloide producen un
cambio o una seal, la cual
es evidencia de precia de este tipo de molcula.
Meyer: 1.3 g de bicloruro de mercurio en 60 mL de agua y 5 g de
yoduro de potasio se
afora a 100 mL. Los alcaloides se detectan como un precipitado
blanco que es soluble en
cido actico y etanol.
Dragendorff: se prepara mezclando8 g de nitrato de bismuto
pentahidratado en 20 mL de
cido ntrico al 30 % con una solucin de 27.2 g de yoduro de
potasio en 50 mL de agua.
Se deja reposar por 24 h, se decanta y se afora a 100 mL. La
presencia de alcaloides se
detecta al producirse una coloracin naranja rojiza cuando un
papel impregnado con el
reactivo se pone en contacto con una solucin acida de
alcaloides. Cuando se usa como
reactivo de precipitacin las bases precipitan como solidos
marrones.
Bouchardat: solucin de yodo y yoduro de potasio que indica
prueba positiva cuando se
forma un precipitado de color marrn.
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Diagrama general:
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METODOLOGA
Parte 1 seleccin, secado y molienda de material vegetal
Se tomaron hojas (aproximadamente 500g de material humero) de un
rbol de
borrachero en el barrio San Jos de Armenia en la casa de uno de
los integrantes del
grupo, la recoleccin se realiz en horas de la maana. (brugmansia
candida pers) las
hojas se dejaron secar al sol durante 2 semanas, luego se
molieron. As al final de este
proceso se obtuvieron 120 g de material vegetal en polvo.
Parte 2 desengrase de material vegetal empleando una extraccin
soxhlet
Materiales.
Extractor Soxhlet
Pinzas y sus nueces
Condensador de reflujo (bolas) y sus mangueras.
Baln de fondo redondo de 1000 mL.
Estufa elctrica
Beaker de 400 mL.
Beaker de 500 mL.
Probeta de 100 mL.
Balanza con dos cifras decimales.
Frasco lavador
Reactivos
ter de petrleo
Metodologa
Se tomaron 100 g de material en polvo, los cuales se
introdujeron en una columna soxhlet
y posteriormente se agregaron 700 mL de ter de petrleo, la
solucin formada fue
refluida durante 9 horas en un rango de temperatura entre 60-80
C. finamente se obtuvo
una solucin de color oscura y el marco vegetal hmedo, este ltimo
se dej secar al aire
libre durante 8 das.
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Imagen 3
Montaje de reflujo
Resultado parcial
Se obtuvo una solucin oscura rica en lpidos y carotenoides adems
de un marco vegetal
libre de grasas un poco hmedo el cual se dej secar para tomarlo
como matriz y en
esta analizar la presencia de alcaloides.
Parte 3. Extraccin por medio de lixiviacin
Materiales.
Bolsa de suero vaca para la Lixiviacin.
Embudo pequeo de gravedad
Balanza con dos cifras decimales.
Probeta de 100 mL.
Beaker de 400 mL.
Pinza y su nuez para el embudo en la Lixiviacin.
Esptula metlica
Frasco lavador
Gafa de seguridad.
.
Reactivos
500 mL de etanol al 95 %
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Metodologa
Se tom el marco vegetal secado durante 8 das y obtenido de la
segunda parte, se
introdujo en un embudo de decantacin, se tomaron 500 mL de
etanol los cuales se
hicieron pasar a travs de la muestra y seguidamente llenar la
bolsa de suero. Despus
de llenada la bolsa de suero se puso a gotear lentamente el
lquido y atravesar la
muestra, este procedimiento se repiti durante un semana.
Resultado
Se obtuvo una solucin viscosa de color verde oscuro
Parte 4. Aislamiento de alcaloides
Materiales.
Equipo de Rotaevaporador
8 Tubos de ensayo pequeos
Centrfuga
Gradilla
3 Pipeta de 1.0 mL. graduada
1 Pipeta de 5 mL. graduada
Placa excavada
Esptula metlica
Erlenmeyer de 125 mL.
Beaker 250 mL
Aro y su nuez
Soporte universal
Embudo de separacin de 250 mL.
Frasco lavador
Pera succionadora
Gafa de seguridad.
Reactivos.
600 mL HCl 0.5 N
800 mL NaOH 15%
Etanol 95%.
Cloroformo o diclorometano
Reactivos de Mayer, Dragendorf, Bouchardat, Reinecke.
Carbn activado
Papel indicador
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Metodologa
El extracto etanlico fue tratado con HCl 0.5 N hasta pH acido
agitado durante 2 horas y
luego centrifugado con el fin de observar la formacin de gomas,
en este proceso se
remueven las bases como sales solubles. 8 das despus la solucin
cida fue basificada
con 15% NaOH a pH 10, luego se realizaron 3 extracciones
liquido-liquido empleando 20
mL cloroformo en cada una de ellas, posteriormente fueron unidas
y llevadas a al
rotavapor para concentrar en esta solucion de pueden para las
bases libres (alcaloides
secundarios y terciarios).
Resultados
Se obtuvo un extracto de color oscuro en el cual debe estar
disuelto el alcaloide
secundario y terciario.
Parte 5. Pruebas para alcaloides
Materiales.
Caja escavada
Pipeta
Tubos de ensayo
Gotero
Fraco lavador
Reactivos
Meyer
Dragendorf
Acido pcrico
Bouchardat
Metodologa
Se tomaron gotas del extracto clorofrmico y se transfirieron en
una caja escavada de 12
huecos, en cada uno de los huecos se agreg gotas del extracto y
algunas gotas de los
reactivos de precipitacin obteniendo cada resultado por
triplicado.
Se tom 1 mL de extracto y se transfiri a cada tubo de ensayo,
luego se agregaron
algunas gotas de cada reactivo y se observ los cambios de
coloracin y formacin de
precipitados
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OBSERVACIONES
El extracto etanolico presento una coloracin verde intensa con
algunos solidos de color
negro. Cuando a este se le adiciono NaOH al 15% la coloracin
paso de verde a naranja
ladrillo. En el momento de la extraccin la separacin presento
dos fases: la acuosa con
una coloracin caf y la orgnica de color verde muy tenue.
Cuando se llev esta fase orgnica al rotavapor, la solucin que se
obtuvo aparentaba ser
ms viscosa y pareca ser algo blanquecina.
Despus de ser tratada con cido, se utilizaron los reactivos de
precipitacin para
evidenciar la presencia de alcaloides. Utilizando el reactivo de
Mayer, se presento un
precipitado color blanco, lo que nos indica que es positiva la
presencia de alcaloides; asi
mismo sucedi con el reactivo de Bouchardat, que presento un
precipitado color caf o
naranja ladrillo y Hager que presento gran turbidez y un
precipitado blanco, nos muestran
la presencia de alcaloides en la planta.
En la fase acuosa tambin se efectuaron estas pruebas, las cuales
dieron todas
negativas, evidenciando la inexistencia de alcaloides en ella,
adems que nos indica que
las extracciones fueron realizadas satisfactoriamente; pues el
objetivo ltimo era el de
aislar los alcaloides.
Resultados
Placa excavada
Prueba Abundancia Evidencia Color
Meyer +++ Precipitado Blanco
Dragendorf +++ Precipitado Naranja
Bouchardat +++ Precipitado Caf naranja
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CONCLUSIONES
Si bien la Extraccin Soxhlet es un proceso simple; ya que consta
de solo tres
partes;(tubo refrigerante, tubo extractor y el baln de
destilacin) y que adems su
proceso es bastante lento, los resultados que se pueden obtener
de este son muy
eficientes y beneficiosos.
Se logr identificar la presencia de alcaloides por medio de los
diferentes reactivos
de precipitacin, en el extracto etanolico con un alto grado de
abundancia.
La extraccin se realiz satisfactoriamente puesto que los anlisis
con los
reactivos de precipitacin para identificacin de alcaloides en la
fase acuosa,
dieron negativos; lo que nos indica que las dos extracciones
fueron muy bien
realizadas porque extrajimos todos los alcaloides presentes.
BIBLIOGRAFA
Universidad de Antioquia, Gabriel Jaime Arango Acosta,
alcaloides y compuestos
nitrogenados, Medelln junio 2008.
Deanna et al. Fitoquimca Orgnica. universidad central de
Venezuela.
2002.
Profesor Fernando Agudelo. Laboratorio fitoquimca II
