Figura I. Cél~ de Langerhans humanas identificadas por la pro-ducción de la enzima a-naftil acetato característica dellin~e mono-cito-macrófago. Donada por Imelda Campo-Aasen.

Las células dendríticas

de la piel:

de Paul Langerhans

al concepto de los

inmunocitos viajeros

Félix Jacobo Tapiaa, Zelandia Fen1Úna y José A. Coradob

alnstituto de Biomedicina. Universidad Central de Venezuela. bDepartamentode Ciencias Fisiológicas. Universidad d: Carabobo. Valencia. Venezuela.

Paul Larigerhans, siendo estudiante de medicina, iden-tificÓ las células dendríticas de la piel y los islotes delpáncreas endocrino, estructuras que recibieron su nom-bre como carta de presentación de uno de los investiga-dores más prominentes del siglo XIX1,2. No fue hasta me-diados de los años sesenta en que las células deLangerhans o células dendríticas de la piel fueron reco-nocidas como inmunocitos por los trab~os pioneros deCampo-Aasen y Pearse (figs. 1 y 2)3.

Desde entonces estas células han recibido la atencióncorrespondiente gracias a su participación cardinal enlos inicios de la respuesta inmunitaria frente a agentesvivos o sustancias químicas.

Figura 2. Células de Langerhans que expresan COla en la epidennisde una lesión de leishmaniasis tegumentaria localizada. Avidina-bio-

tina-inmunoperoxidasa.

BIOLOGÍA DE LAS CÉLULAS DENDRÍTICAS

Origen de las células dendríticasLas investigaciones señalan dos vías ontogénicas para

las células dendríticas: aquellas que provienen de célu-las precursoras mieloides y las que derivan de célulasprecursoras linfoides. Los precursores hematopoyéticosrnieloides dan origen a granulocitos, monocitos, célulasde Langerhans epidérmicas ya las células dendríticas delos órganos linfoides secundarios4-10. Estudios recienteshan demostrado que el cultivo de células madres CD34 +

en presencia del factor estimulador de colonias de gra-nulocitos y macrófagos (GM-CSF) y factor de necrosistumoral alía (TNF-a) genera dos tipos de células precur-soras específicas de linaje: células CLA + /CD la+ que deri-

van en células de Langerhans y células CLA/CD14+ queresultan en células dendríticas intersticiales como los

.

dendrocitos dérnlicosll, El antígeno asociado a linfoci-"tos T cutáneos (CLA) es una molécula de anidamientoespecífico de la piel cuyo ligando natural es la E-selecti-na presente en las células endoteliales vasculares acti-vadasde lapieP2,

La adición del factor transformador de crecimientobeta (TGF-~) favorece la obtención de células de Langer-hans a partir de células CD34+13, Además, esta posibilidadse evidenció en ratones knock out, para el gen que codifi-ca al TGF-~I, los cuales carecen de células dendríticas enla epidernlis pero no en el resto de los tejidos linfoides14;

Las células dendríticas de la piel

Células de Langerhans o células dendríticas epi-dérmicas. Las células de Langerhans llegan a la piel porvía sanguínea. En la epidemús, al igual que otros epite-lios, ejercen su función de inrnunovigilancia, y cuandose activan por un desafío antigénico núgran hacia los Ór-ganos linfoides secundarios para desplegar su funciónirununoestirnuladora, como célula presentadora de antí-geno (CPA) profesioná1, iniciando la respuesta de linfo-citos TlO,l5.

Correspondencia; Dr. F.J. Tapia.Laboratorio de Biología Molecular. Instituto de Biomedicina.Apartado 4043. Caracas lOlOA. Venezuela.Correo electrónico: ftapia@telcel.net. ve

Piel 2000; 15: 419-427.

Piel. Vol. 15, Núm. 9, No\iembre 2000

las dendríticas, y en sinergia con otras citocinas median-do la sobrerregulación de moléculas de coestimulación18,Por su parte, la lIrI2 induce la expresión de CD8O y po-tencia la actividad inmunoestimuladora de las célulasdendríticasl9, Otros mediadores, como la lIrIO producidapor los queratinocitos, inhiberi la expresión de moléculascoestimuladoras y la capacidad presentadora de antíge-nos de las células de Langerhans2°,21,

Igualmente, el péptido relacionado con el gen de lacalcitonina (CGRP), además de irrigar a las células deLangherhans epidérmicas, es capaz de inhibir su capaci-dad presentadora de antígenos22,23,

Figura 3. Dendrocitos dénnicos que expresan FCERI en la dennis deuna lesión de leishmaniasis tegurnentaria difusa. Avidina-biotina-in-

munoperoxidasa.

Dendrocitos dérmicos. En las. áreas perivascularesde la dennis superior, Headington describió un grupo decélulas con morfología dendrítica a las cuales denominódendrocitos dérmicos24. Estas células, de diferente lina-je de las células de Langerhans, expresan CD45, CDllb,CDllc, CD36, Fcf,RI, MHC-II y factor XIIIa (fig. 3). Laexpresión del factor XIII~ es fundamental en la identifi-cación de este grupo celular.

Al igual que las células de Langerhans, los dendrocitosdérmicos son células dendríticas de origen rnieloide yposeen semejantes propiedades migratorias e inmuno-estimuladoras25,26.

.En condiciones nonnales, las células de Langerhans

epidérmicas se caracterizan por una tasa de recambiorelativamente baja. Sin embargo, en respuesta a unairrupción de la barrera epitelial se produce un rápido re-clutamiento celular desde la circulación sanguíneal6.Los mecanismos de migración en condiciones nonnalesson similares a los que promueven el reclutamiento decélulas dendríticas activadasl7.

Los epitelios, por ser sitios de inrnunorregulación, soncapaces de producir un sinnúmero de citocinas. La epi-dermis sana produce en forma constitutiva algunas ¿ito-cinas como inteJ'leucina 1 (Ilr1), 11..-7 y TGF-~, lo cualaumenta a plétora de citocinas cuando ocurre una altera-ción de la barrera epidérmica (tabla 1). Esta activaciónepidérmica induce a los queratinocitos a participar comocélulas inrnunocompetentes, los cuales junto a las célulasdendríticas proveen mediadores y señales de la respuestainrnunitaria o inflamatoria. Las citocinas epidérmicas ac-túan sobre las procesos de diferenciación y migración delas células dendríticas. Por ejemplo, 11..-1, TNF -a y GM-CSF participan en la diferenciación funcional de las célu-

EL SISTEMA INMUNITARIO CUTÁNEOLos acontecimientos más importantes de la defensa

inmunológica OCUlTen en la red periférica constituidapor los tegumentos y los órganos linfoides secundarios.La importancia inmunológica de estos tegumentos esconferida por la participación de las células epitelialescomo células inmunocompetentes y por l~ células den-dríticas, protagonistas esenciales de las fases inmunoes-timuladora y efectora de la respuesta inmunológica.

En la piel el microambiente de defensa periférica reci-be el nombre de sistema inmunitario cutáneo (SIC)27,28.El SIC incluye inmunocitos como células de Langerhans,queratinocitos, dendrocitos dérrnicos y linfocitos T cuta-

TABLA I. Citocinas producidas por las células epidérmicas

CÉLULA DENDRITICA! CITOCINA AJ¡REVIATURA

IL-la

IL-l~IL-6

IL-7

IL-8.

IL-I0

IL-12

IL-15

IL-18GM-CSF .

TNF-a

MIP-la

MIP-yMIP-2

IFN-yTGF-B

PDGF

.BFGF

QUERATINOCITO

Interleucina-l alía*Interleucina-l beta*Interleucina-6IIiterleucina- 7*Interleucina-8Interleucina-1OInterleucina-12Interleucina-15Interleucina-18Factor estimulador de colonias de granulocitos y macrófagosFactor de necrosis tumoralProteína inflamatoria ~ macrófagos 1 alíaProteína inflamatoria de macrófagos 1 gammaProteína inflamatoria de macrófagos 2Interferón gammaFactor transfonnador de crecimiento beta*Factor de crecimiento derivado de plaquetasFactofbásico de crecimiento fibroblástico

*Citocina producida en fonna cons'titutiva.

F J. Tapia e! al.- Las células dendrí!icas de la piel. de Paul LangerhaÍ1s al concepto de los inmunoci!os vi1\ieros

Figura 4. Regulación inmuniffiria en la piel. La irrupción de la barrera epitelial por el antígeno(Ag) activa los queratinocitos(QC) y las célulasde Langerhans (CL). Por acción de citocinas, las células dendríticas rnigran al ganglio linfáticq circunvecino, donde estimulan a linfocitos T vír-genes y los transfonnan en linfocitos T memoria efectores. Estos últimos son extravasados con ayuda de quimiocinas y en el epitelio reciben se-ñales accesorias para generar la respuesta inflamatoria. Células de la inmunidad natural colaboran en la activación celular durante la capturadel Ag y fonnación de la respuesta inflamatoria. .

neoespecíficos, la unidad perivascular déImica, ganglioslinfáticos circunvecinos, factores solubles como citoci-nas y quimiocinas, y los componentes de la matriz extra-celular. La unidad perivascular déImica incluye al endo-telio vascular alto, mastocitos, dendrocitos déImicos,pericitos y linfocitos f29. Las células de Langerhans sonlas CPA profesionales de la epidermis. Por su parte, losqueratinocitos actúan como células inmunocompetentesal recibir un estímulo antigénico30,3t.

nológico37, Por su parte, el endotelio vascular se activaexpresando en su superficie moléculas de adhesión ca:-paces de frenar a leucocitos polimorfonucleares y otrosleucocitos protagonistas de la primera línea de defensa

inmunológica.

Captura/procesamiento de antígenos. Las célulasdendríticas participan en la inm'unidad natural al reco-nocer y destruir sustancias nocivas en fonna no especí-fica. Al igual que los macrófagos, las células dendríticasfagocitan partículas o glucoconjugados solubles captu-rados por el receptor de manosa, el cual es una lectinatipo C con promiscua afinidad hacia hidratos de carbo-no. Las partículas son endocitadas en vesículas recu-biertas y transportadas a los lisosomas donde son dige-ridas. En ratones, el anticuerpo NLDC-145 pennitióidentificar a un segundo r~ceptor recolector, homólogoal receptor de manosa, denominado DEC-205~'39, Ade-más de la captura y destrucción de agentes nocivos porestos receptores, se ha podido demostrar que antígenos .capturados por los receptores de manosa y DEC-205pueden ser presentados eficientemente por las célulasdendríticas4°, Las células dendríticas también reconoceny fagocitan lipopolisacáridos a través de receptores deLPS, En coI1diciones nomiales, las células dendríticasen la epidermis expresan FcyRII (CD32), FCERI, C3bi

Procesos de regulación inmunitaria en la pielLos procesos de inmunorregulación en la piel pueden

dividirse en las siguientes fases: desafío/activación, cap-tura de antígeno/procesarniento, migración, inmunoesti-mulación/fase efectora, reclutamiento, retención/proli-feración y supresión (fig. 4)32,33.

Desafío/activación. Una vez que sucede un desafíoantigénico en la piel, la barrera epitelial se activa y éstaa su vez activa al eRdotelio vascular mediante la produc-ción de citocinas, neuropéptidos y otros mediadores.

La agresión antigénica puede provenir del ambienteexterno o interno de la piel, pudiendo ser el primero unagente patógeno, hipoxia, sustancia química o radiaciónultravioleta35,36, y el segundo una célula dañada o turno-ral capaz de enviar señales de peligro al sistema inrnu-

Piel. Vol. 15, Núm. 9, Noviembre 2000

Figura 5. Células dendríticas activadas, caracterizadas por la expre-sión de CD83 en la epidem1is de una lesión de leishrnaniasis tegu-menWia localizada. Avidina-biotina-inmunoperoxidasa.

.(CDllb-CD18), CDllc y antígenos clase II del complejoprincipal de histocompatibilidad'(MHC-ll), las cuales le

proveen capacidad para capturar y procesar antígenos41.Al activarse las células dendríticas epidérmicas por

contacto directo con el antígeno, o indirectamente al re-cibir señales no específicas ( citocinas, quimiocinas,componentes del complemento y productos de la matrizextracelular )42 por la sola irrupción de la barrera epite-lial por el antígeno, se aumenta la capacidad para captu-rar antígenos de las células dendríticas (fig, 5); Esteefecto es transitorio y permite restringir la toma de antí-geno al sitio:,," momento de entrada del ~gente invasor.Al mismo tiempo, células dendríticas aCtivadas se diri-.gen a los ganglios linfáticos circunvecinos, sobrerregu-lando señales de activación que permitirán la estimula-ción de los linfocitos T vírgenes43,44.

y la Ilr 1 ~ son capaces de inhibir la expres~ de E-ca-dherina por las células dendríticas y así facilitar su mi-gracióndesde la epidermis48.

La direccionalidad de la migración de las células deLangerhans activadas, y liberadas"de la relación simbió-tica con los queratinocitos, puede ser regulada por com-ponentes de la matriz extracelular49. En su viaje hacialos ganglios linfáticos y mientras atraviesan la membra-na basal, las células dendríticas se relacionan primerocon larninina y colágeno tipo IV de la membrana basal, yluego con colágeno tipo I de la dermis superior y fibro-nectina de 16s linfáticos aferentes50,51. La expresión delas ~1-integrinas, a5~1 y a6~1, por las células de Langer-hans les permite adherirse a fitronectina y larninina,respectivamente52. Staquet et al49 observaron en un mo-delo in vitro que las células de Langerhans sólo se ad-hieren a los componentes de la matriz extracelular dér-mica después del contacto con los componentes de lamembrana basal (larninina y colágeno tipo IV), mientrasque un contacto inicial con el colágeno tipo I dérmicoreduce su capacidad de unión a la larninina. Estos resul-tados sugieren que las células dendríticas, al interactuarcon la dermis, no pueden regresar a la epidermis. Estu-dios recientes demuestran que las células de Langer-hans activadas producen metaloproteasas para facilitarsu travesía a través de la membrana basal. Estas investi-gaciones demostraron que inhibidores y anticuerpos di-rigidos a estas metaloproteasas previenen la migraciónde las células de Langerhans epidérmicas53,54.

La CC quirniocina de tejido linfoide secundario (SLC)y su receptor CCR7 participan en la migración de las cé-lulas dendríticas desde la periferia hacia los ganglíos lin-fáticos55.

Inmunoestimulación/fase efectora. Las células den-dríticas activadas se acumulan en la zona de linfocitos To paracorteza del ganglio linfático y participan en la pre-sentaciÓn de antígenos a linfocitos T vírgenes circulan-tes, transfolmándolos en linfocitos T memoria56,57, Estoslinfocitos T memoria efectores, sensibilizados con unantígeno de procedencia cutáneá, expresan en su .super-ficie la molécula de anidamiento CLA, la cual es un li-gando natural para la E-selectina expresada por las célu-las endoteliales activadas (fig. 6)12.

La reproducción in vitro del microambiente de citoci-nas de los ganglios linfáticos demuestra que las célulasdendríticas disminuyen la expresión de FcRIl y FctRIentre otras, y aumentan y regulan la expresión de MHC-I, MHC-II, CD24, CD25, CD40, CD54, CD5S, CDSO, CD83y CDS6; además, producen Ilrl~, IL-6 e lIr12, moléculasy citocinas esenciales en la inducción de respuestas vi-gorosas de linfocitos Tlo.

En el ganglio .linfático las células dendríticas, en sufunción como CPA profesionales, proveen tres señales alos linfocitos T vírgenes58,59. Estas señales, inicialmente,son gestadas en la piel después del desafío antigénico.La señall depende del reconocimiento específico de unpéptido derivado del antígeno unido a moléculas delcomplejo principal de histocompatibilidad, y estimula

Migración. La migración de las ~élulas dendríticas serealiza a través del endotelio vascular. Ésta se desenca-dena por la captura del antígeno y es modulada por di-versas citocinas y qUimiocinas liberadas en la piel y enlos ganglios linfáticos32, Las células dendriticas epidér-micas y los queratinocitos producen citocinas como IL-1, 1lr6, IL-8, GM-CSF, INF-a y TNF-~. La IL-l es liberadapor los queratinocitos y las células de Langerhans y ac-tÚa en forma autocrina y paracrina, induciendo la expre-sión de receptores para IL-l por estas mismas células45.La IL-la estimula al queratinocito a producir IL-la yTGF-a, promoviendo este último su migración46. Ade-más, los queratinocitos activados producen GM-CSF, elcual promueve la expresión de receptores del GM-CSFen las células epidérmicas. El TNF-a y el GM-CSF indu-cen a las células de Langerhans a migrar a los ganglioslinfáticos circunvecinos.

Uno de los prirn~ros acontecimientos en la migraciónde las células de Langerhans es la inhibición de la molé-cula de adhesión E-cadherina por parte de los queratino-citos y las rnismas células de Langerhans47. En condicio-nes normales, la E-cadherina, mediante una interacciónhomofílica, mantiene el contacto entre estos dos gruposcelulares, y de ellas con la matriz extracelular. El TNF -a

F,J, Tapia et al,- Las células dendríticas de la piel' de Paul Langerhans al concepto de los inmunocitos vi1\Íeros

Figura 7. EndoteIio vascular que exp'esan E-selectina en una le-sión de leishmaniasis cutánea intennedia. Avidina-biotina-inmuno-

peroxidasa.

Figura 6. Linfocitos T que expresan la molécula de anidación cutá-nea CLA en pietlesionada de alopecia areata. Nótese la extravasa-ción celular en el endotelio vascular, los linfo.citos CLA+ en el infil-trado: A vidina-biotina-inmunoperoxidasa.

tia del TN~ siendo las más estudiadas el CD40L y TRAN-CE ( citocina inducida por activación relacionada con elTNF). Ambas inducen a las células dendríticas a producircitocinas proinflamatorias y otros factores que median elcrecimiento y la diferenciación de linfocitos T, y protegende la apoptosis aumentando la sobrevida de las célulasdendríticas67.68. La propiedad de TRANCE en potenciar lapresentación de antígenos por las células dendríticas hapermitido demostrar cómo la longevidad y alta densidadde células dendríticas son fundamentales para defuúr lavigorosidad tle la respuesta linfoproliferativa69.

Recientes estudios demuestran que la expresión deMDC ( quirni()cina derivada del macrófago) por las célu-las de Langerhans promueve una mayor atracción de lin-focitos T activados que de linfocitos vú:genes. Estos re-sultados sugieren que las células dendríticas, en su viajehacia los ganglios linfáticos, utilizan este mecanismopara promover el contacto con linfocitos T antígeno-es-pecíficos70. Otra quimiocina, la fractalcina, parece pro-mover la formación de agregados de células dendríticasy linfocitos T71.

Reclutamiento. La fase de 1'eclutarniento involucrala extravasación de leucocitos, incluyendo a los linfoci-tos T memoria específicas de piel, a través del endoteliovascular, y la subsiguiente migración de éstas célulashacia la epidermis. La extravasación de leucocitos en elsitio donde ocurre la agresión antigénica cutánea es unproceso escalonado que requiere interacciones secuen-ciales entre los leucocitos y el endotelio, las cuales sondirigidas por una cascad.a de adhesión 72,73.

La secuencia de acontecimientos se puede dividir enadhesión primaria (unión y frenado), adhesión fmne( activación y fijación) y diapédesis. En la adhesión pri-maria los leuco~itos circulantes son atraídos al endote- .lio, donde se frenan y unen a la membrana de la célulaendotelial por medio de moléculas de adhesión denomi-nadas selectinas (fig. 7)74. Las L-selectina y P-selectinaactúan en la fase de unión, P-selectina yE-selectina du-rante el frenado, y la E-seIectina y las integrinas ICAM-ly VCAM-) durante la adhesión firme. La interacción en-

los linfocitos T. La señal 2 es de coestimulación e invo-lucra pares de moléculas de adhesión celular (CD80/

CD28, CD.86/CD28, ICAM-1/LFA-1, CD40/CD40L, etc.).La señal 3 es de. direccionalidad e incluye mediadoresque determinan el tipo de respuesta linfocitaria ( citoci-nas Th1, Th2 o Th3; componentes de la matriz extrace-lular, etc. ). Los linfocitos Th1 secretan llr2, TNF-~ eIFN-y, y median respuestas de inmunidad celular talescomo hipersensibilidad tardía y activación macrofágica;los linfocitos Th2 secretan IL-4, llr5, llr6 e llr10, y con-tribuyen en la producción de anticuelJ>os para la inmu-nidad humoral60-Q3. La señal1 informa sobre la naturale-za molecular del antígeno, la señal 2 sobre el potencialproliferativo, y la señal 3 sobre el curso de la respuestainmunitaria58,59.

Una citocina crucial en la conversión de linfocitos Tvírgenes en Th1 memoria es la llr 1264. Recientes estu-dios señalan que la capacidad de las células dendríticaspara inducir resp~stas Th1 y Th2 por parte de los linfo-citos T vírgenes o quiescentes depende de la cantidadde llr12producida65;66, la cual puede ser sobrerreguladao inhibida por el contacto con el antígeno o por factoresgenerados por el microambiente tisular59.

Los linfocitos T también pu~den modular la función delas células dendríticas por medio de moléculas de la fami-

..

Piel. Vol. 15, Núrn. 9, Noviembre 2000

periferia del infiltrado, y linfocitos T cooperadores CD4 +

y células epitelioides localizadas en el centro. Esta orga-nización ha sido observada en respuestas de hipersensi-bilidad tardía y granulomas tipo tuberculoide82.85-88. Enrelación con el patrón de citocinas I'roducido, la res-puesta inmunitaria puede ser del tipo Thl o del tipoTh25g. Otros fenotipos incluyen a los linfocitos T vírge-nes y T memoria, los cuales producen llr259 y los linfoci-tos Th3 productores de TGF-p62.

El tipo de respuesta inmunitaria cutánea puede tam-bién estar influido por el microambiente de citocinas enla dermis; así, IFN-ye IL-l2 inducen respuestas tipo Thl,y la IL-4 promueve respuestas tipo Th289. .Además delmicroambiente de citocinas, la rncUnación hacia unarespuesta Thl o Th2 puede depender de la concentra-ción y tipo de antígeno, y quizás del tipo de CPA pre-sentego.

tre pares de moléculas de adhesión, expresadas en elleucocito y en su contraparte en la célula endo.telial, y laparticipación de citocinas que inmovilizan la membranaendotelÍal son necesarias para que se consolide la ad-hesión finne. Entre las moléculas de adhesión asocia-das con la adhesión firme están las ~2-integrinasCD11a/CD18 y CD11b/CD18 que interactúan con ICAM-1y otros ligandos del endotelio, y la ~l-integrina VLA-4(CD49d/CD29) que se une a VCAM-1 y fibronectina75.76.Otras células de la uriidad perivascular dérmica, comolos mastocitos, pueden contribuir al proceso de extrava-sación leucocitaria al secretar neuropéptidos y aminasbioactivas que inducen la vasodilatación. .

Las quirniocinas producidas por las células epidérmicasgeneran un gradiente que promueve la diapédesis. Deigual forma, las células endoteliales producen y expresanquirniocinas en la membrana para optimizar la unión a losleucocitos77.78. El linfocito extrav~ado responde al gra-diente de quirniocinas migrando a la epidermis. Entre losfactores quirniotácticos producidos por la epidermis sehan identificado prostaglandina E2, leucotrieno B4, sus:tancia P e IL-832. Estudios reci~ntes han demostrado quelas células dendríticas y sus precursoras CD34+ puedenresponder quirniotácticamente a las C-C quirniocinas:RANTES (factor regulado. bajo activación, expresado ysecretado por linfocitos T normales), MIP-1a (proteínainflamatoria de macrófago), MIP-1~, MIP-3~, MCP-1 (pro-teína quirniotáctica de monocito), MCP-3, SDF-1 (factorderivado de células estromales 1) y MDC15.79-81.

Én la respuesta inflamatoria, los linfocitos T CLA + es-

tán íntimamente asociados al endotelio vascular en ladermis superior72. En piel normal, el 400/0 de los linfoci-tos T intraepidérmicos y perivasculares expresan CLA;sin embargo, esta expresión no se observa en zonas dis-tantes a los vasos sanguíneos, la cual sugiere la partici-pación de otras moléculas de adhesión en el anidamien-to cutáneo de los linfocitos28.

Supresión. Una vez eliminado el antígeno, la inflarna-ción debe desaparecer por mecanismos de inmunosu-presión que implican la generación de vías opuest2s alos procesos de inducción. En la piel, el proceso de eli-minación de la agresión antigénica comienza con la inhi-bición de señales accesorias por parte de las células deLangerhans y los queratinocitos, lo cual promueve la eli-minaciÓn o retorno a la circulación de las células infla-matorias32. Estos mecanismos de inmunosupresión soncomplejos e involucran un escenario de iriteraccionescelulares y actuacion de péptidos bioactivos como cito-cinas y neuropétidos. Al~os ejemplos de los antesdescrito son:

1, Las células dendríticas pueden ser inhibidas o eli-minadas por células natural kiUer (NK) o linfocitos Tcitotóxicos, A su vez, estas últimas también pueden eli-minar a las células diana que estimularon el proceso in-flamatorio91,

2, El neuropéptido CGRP, que irriga las células deLangerharis epidérmicas, modula la función presentado-ra de antígenos de estas células22,23,

3, Las citocinas producidas por los linfocitos T memo-ria efectores pueden controlar el tipo de respuesta in-munitaria, IFN-y e Ilr2 actúan en sinergia induciendo eldesarrollo de linfocitos T citotóxicos mientras que la di-ferenciación y proliferación de los linfocitos B dependemás de 1lr4, Ilr5 e Ilr6.

4. LoS' macrófagos secretan una variedad de metaboli-tos y enzimas tóxicas de oxígeno y'nitrógeno que consu-men nutrientes esenciales para el crecimiento linfoci-tario92.

PERSPECTIVASLas células dendríticas, como CPA profesionales de los

tegumentos, ejercen Una función primordial en el inicio yregulación de la respuesta inmunitaria. Esta cualidad deadyuvantes naturales las identifica como candidatas parala aplicación de esquemas terapéuticos (tabla U). En der-matología, esquemas terapéuticos con utilización de cé-lulas de Langerhans o los dendrocitos dérmicos prome-

Retención/proliferación. En la epidennis, las célu-las de Langerhans y los queratinocitos activados pro-veen adhesión adicional, pernútiendo la unión con losleucocitos extravasados. Esta unión es esencial para de-ternúnar la especificidad de la localización leucocitariay el anidamiento necesario para establecer la respuestainflamato ria 33.82-84 .

En la epidermis, las células de Langerhans y los quera-tinocitos participan en la generación del proceso infla-matorio expresando MHC-II y moléculas de adhesiónQCAM-l, CD44), ambas necesarias para promover elanidamiento (migración) y el contacto (fase de reten-ción) de las células inflamatorias30-32.33.84. Además, se es-tablece un mecanismo control de retroalimentación en-tre la respuesta epidGrnúca y los llIfiltrados dérnúcoscon la participación de citocinas. Las células de Langer-hans y los queratinocitos producen citocinas como Ilr 1,Ilr6, Ilr8, GM-CSF, TNF -a y TNF -~32.

ElllIfiltrado. dérnúco puede tener una configuraciónmicroanatómica particular, con linfocitos T citotóxicosCD8+ y células de Langerhans CDl'a+ distribuidas en la

..

F.J. Tapia et al.- Las células dendriticas de la piel: de Paul Langerhans al co~epto de los inmunocitos vi:lieros

TABLA II. Estrategias utilizadas en inmunoterapiacon células dendríticas

ten el control y solución de numerosas infecciones, neo-

plasias y enfermedades autoinmunes de la piel. Futurosestudios permitirán profundizar nuestro conocimiento

sobre la ontogenia y diversidad celular, mecanismos de

captura, procesamiento y presentación de antígenos,vías de señalización intracelular e identificar a las molé-

culas y genes de utilidad para la manipulación funcional

de las células dendríticas.

AGRADECIMIENTO

Este trabajo está dedicado a la Dra. Imelda Campo-Aasen, investi-gadora venezolana pionera en la identificación de la célula de Lan-gerhans como célula inmunitaria. Las ideas presentadas son produc-to del estímulo y financiamiento de las siguientes instituciones:UNDP/World Bank/WHO Special Programme for Research and Trai-ning in Tropical Diseases, Comisión Europea Programa INCO,CDCH-Universidad Central de Venezuela y Consejo Nacional de In-vestigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICI) SI-98000041 aF.J. T.; CONICIT Programa Pasantía Posdoctoral N." 99000924 a Z.F.;Consejo de Desarrollo Científico y Humanístico (CDCHT) de la Uni-versidad de Carabobo aJ.A.C.

8. Young JW, Szabolcs P, Moore MAS. Identification of dendritic cell colonyfor-

ming units arnong nonnal CD34+ bone marow progenitors that are expandedby c-kit ligand and yield pure dendritic cell colonies in the presence of gra-

nulocyte/macrophage colony-stimulating factor and tumor necrosis factor a.J Exp Med I995; 182: 1111-1120.

9. Caux C, Banchereay J. In vitro regulation 6f dendritic cell development andfunction. En: Whetton A, Gordon J, editores. Blood cell biochemistry. Vol. 7:

Hematopoietic growth factors and their receptors. Londres: Plenum Press,1996; 263.

10. Steinman RM, Pack M, Inaba K Dendritic cell in the T -cell areas of lymphoid

organs. Inununol Rev 1997; 156: 25-37.l1. Caux C, Lebecques S, Jju Y-J, Banchereau J. Development pathways of hu-

man myeloid dendritic cells. En: wtze MT , Thomson A W, editores. Dendritic

cells: biology and clinical applications. San Diego: Academic Press, 1999; 65-92.

12. Picker LJ, Michie SA, Rott lB, Butcher EC. A unique phenotYpe of skinasso-ciated Iymphocytes fu humans. Am J Patholl990; 136: 1053-1068.

13. Strobl H, Riedl E, Scheinecker C, Bello-Fernández C, Pickl WF, Rappersber-ger K et al. TGF-~l promotes in vitro development of dendritic cells fromCD34+ hemopoietic progenitor. J InununoI1996; 157: 1499-1507.

14. Borkowski TA, Letterio JJ, Farr AG, Udey MC. A role for endogenous trans-

forming growth factor ~1 in Langerhans cell biology: the skin of transfor-ming growth factor ~1 null mice is devoid of epidermal Langerhans cells. JExp Med 1996; 184: 2417-2422.

15. Maurer D, Stingl G. Dendritic cells in the context of skin immunitY. En: LotzeMT, Thomson A W , editores. Dendritic cells: biology and clinical applications.San Diego: Academic Press, 1999; 111-122.

16. Krueger GG, Daynes RA, Emarn M. Biology of Langerhans cells: selective mi-gration of La!\gerhans cells into allogeneic and xenogeneic grafts of nudemice. Proc Natl Acad Sci USA 1982; 80: 1650-1654.

17. Saitoh A, Yasaka N, Osada A, Nakarnura K, Furue M, Tarnaki K Migration of

Langerhans cell in an in vitro organ culture system: !Ir6 and TNF-alpha arepartiall~ responsable for migration into the epidermis. J Dermatol Sci 1999;19: 166-174.

18. Kinlber I, Cumberbatch M, Dearman RJ, Knight SC. Langerhans cell migra-

tion and cellular interactions. En: Lotze MT, Thomson AW, editores. Dendri-tic cells: biology and clinical applications. San Diego: Academic Press; 1999;295-310.

19. Kellher P, Knight SC. Interleukin-12 increases CD80 expression and the sti-

mUlatory capacitY of bone marrow derived dendritic cells. Int InununoI1998;10: 749-755.

20. Chang C-H, Furue M, Tanaki K. B7.1 expression of Langerhans cells is upre-

gulated by proinflanunatory cytokines and is down-regulated ~y interferon-yor by interleukin-10. Eur J Immuno11995; 25: 394-398.

21. De Smedt T, Van Mechelen M, De Becker G, Urbain J, Leo O, Moser M. Ef-fect ofinterleukin-10 on dendritic cell maturation and function. Eur J Inunu-

no11997; 27: 1229-1235.22. Hosoi J, Murphy GF, Egan CL, Lerner EA, Grabbe S, Asahina A et al. Regula-

tion of Langerhans cell function by nerves containing calcitonin gene-related

peptide. Nature 1993; 363: 159-163.23. Torii H, Hosoi J, Asahina A, Granstein RD. Calcitonin gene-related peptide

and Langerhllns cell function. J Invest Dermatol Symp Proc 1997; 2: 82-86.24. Headington JT. The dermal dendrocyte. Auv DermatoI1986; 1: 159-171.

25. Lenz A, Heine M, Schuler G, Romani N. Human and murine dermis containdendritic cells. Isolation by means of a novel method and phenotYpical andfunctional characterizaction. J Clin Invest 1993; 92: 2587-2596.

26. Meunier L, G0nzález-Rarnos A, Cooper KD. Heterogeneous populations of

MHC class II+ cells in human demal suspensions. Identification of a smallsubset responsable for potent dermal antigen-presenting cell activitY with fe-atures analogous to Langerhans cells. J InununoI1993; 151: 4067-4080.

27. Bos JD, Kapsenberg ML. The skin immune system. Immunol Today 1986; 7:235-240.

28. Bos JD, Kapsenberg ML. The skin Iumune Sistem: progress in cutaneous bio-

logy. Inmunol Today 1993; 14: 75-78.29. Sontheimer RD. Perivascular dendritic macrophages as immunobiological

constituents of the human dennal microvascular unit. J Invest Dermatol1989; 93 (SupI2): 96-101.

30. Breathnach SM, Katz SI. Keratinocytes synthesize la antigen in acute cutane-ous graft-vs-host disease. J InununoI1983; 131: 2741-2745.

31. Aubock J, Romani N, Hrauber G, Fritsch P. HLA-DR expression ()n keratinocy-

tes is a common feature of diseased skin. Br J Dermato11986; 114: 465-472.32. Nickoloff BJ. Role of interferon-y in cutaneous trafficking of lymphocytes

with emphasis o~ mólecular and cellular adhesion events. Arch Dermatol

1988; 24: 1835-1843.33. Tapia FJ, Cáceres-Dittmar G, Sánchez MA Epidermal immune privilige in

American cutaneous leishmaniasis. En: Tapia FJ, Cáceres-Dittmar G, Sán-chez MA, editores. Molecular and immune mechanisms in the pathogenesisof cutaneous leishmaniasis. Austin: RGLandes, 1996; 57-72.

34. Kilgus 0, Payer E, Schreiber S, Elbe A, Strohal R, Stingl G. In vivo cytokineexpression in normal and perturbed skin. Analysis by competitive quantitati-ve polymares chain reaction. J Invet Dermato11993; 100: 674-680.

BIBLIOGRAFfA

1. Langerhans P. Uber die Nerven der menschlichen Haut. Virchoes Arch Pa-thol Abat 1868,44: 325-337.

2. Langerhans P. Beitriige zur mikroskopischen Anatomie der Bauchspeiche)-druse. Inaugural dissertation. Berlín: Gustav Lange, 1869.

3. Campo-Aasen I, Pearse AGE. Enzimo)ogía de la célula de Langherhans. Med

Cut 1996; 106: 888-889.4. Caux C, Dezutter-Dambuyant C, Schmitt D, Banchereau J. GM. CSF and

TNF-a coopearte in the generation of dendritic Langerhans ce)ls. Nature

1992; 360: 258-261.5. Inaba K, Steinman RM, Pack MW, Aya H, Inaba M, Sudo T et al. Identification

of pro1iferating denifr¡tic cell precursorsin mouse blood. J Exp Med 1992;175: 1157-1167.

6. Romani N, Gruner S, Brand D, Kiimpgen E, Lenz A, Trochenbacher B et al.

Pro1iferatmg dendritic cel progenitors in human blood. J Exp Med 1994; 180:83-93.

7. Sallusto F, Lanzavacchia A. Effient presentation of so)uble antigen by cultu-

red human dendritic cells is maintained by granulocyte/macrophage colony-stimulating factor pluz interleukin-4 and downregulated ~ tumor necrosisfactor a. J Exp Med 1994; 179: 1109-1118. .

Piel. Vol. 15, Núm. 9, No\iembre 2000

35. Enk AH, Angeloni VL, Udey MC, Katz SI. Early molecular events in the induc-tion phase of contact sensitivity. Proc Natl Acad Sci USA 1991; 89: 1398-1402.

36. Luger TA, T. Effect of UV light on cytokines and neuroendocrine hormones.En: Krutmann J, Elmets CA, editores Photoimmunology. Part 1. Oxford:Blackwell Science, 1995; 55-76.

37. Matzinger P. Tolerance, danger, and the extended family. Annu Rev lmmunol1994; 12: 991-1045.

38. Lraal G, Breel M, Janse M, Bruin G. Langerhans cells, veiled cells, interdigita-ting cells in the mouse recognized by a monoclona1 antibody. J Exp Med1986; 163: 981-997.

39. Sallnsto F, Cella M, Danieli C, Lanzavecchia A Dendritic cells use macropi-nocytosis and the mannose receptor to concentrate macromolecules in themJljor histocompatibility complex class II compartment: downregulation bycytokines and bacterial products. J Exp Med 1995; 182: 389-400.

40. Jiang W, Swiggard WJ, Heut1er C, Peng M, Mirla A, Steimnan RM et a1. Thereceptor DEC-205 expressed by dendritic cells and thy¡nic epithelial cells isinvolved in antigen processing. Nature 1995; 375: 151-155.

41. Romani N, Koide S, Crowley M, Witmer-Pack M, Livingstone AM, TathmanCG. Presentation of exogenoys protein antigens by dendritic cells to T cellsclones. Intact protein is presented best by immature, epiderma1 Langerhanscells. J Exp Med 1989; 169: 1169-1178.

42. Ibrahim MAA, Chain BM, Katz DR. The ir\iured cell: the role of the dendriticcell system as a sentinel receptor pathway. lmmunol Today 1995; 16: 181-186. .

43. Cella M, Sallusto F, Lanzavecchia A Origen, maturation and antigen presen-ting function of dendritic cells. Curr Opin ImmunoI1997; 9: 10-16.

44. Banchereau J, Steinman RM. Dendritic cells and the control of immunity. Na-ture 1998; 392: 245-252.

45. Kampgen E, Romani N, Koch F et a1. Cytokine receptors on epiderma1 Lan-gerhans cells. En: Moll H, editor. The immune functions of epiderma1 Langer-hans cells. Austin: RG Landes, 1995; 37-56.

46. Chen JD, Kim JP, Zhang K, Sarret Y, Wynn KC, Kramer RH et al. Epiderma1growth factor (EGF) promotes human keratinocyte locomotion on collagenby increasing the a1pha 2 integrin subunit. Exp Cell Res 1993; 209: 216-223.

47. Cumberbatch M, Darman RJ, Kimber 1. Adhesion molecule expression byepiderma1 Langerhans cells and lumph node dendritic cells: a comparison.Arch Dermatol Res 1996; 288: 739-744.

48. Schwarzenberger K, Udey MC. Contact a1lergens and epiderma1 proinflam-matory cytokines modulate Langerhans cell E-cadherin expression in situ. JInvest DermatoI1996; 106: 553-558.

49. Staquet MJ, Kobayashi Y, Dezutter-Dambuyant C, Schmitt D. role of specificsuccessive contacts between extracellular matrix proteins and epiderma1Langerhans cells in the control of their directed migration. Eur J Cell Biol1995; 66: 342-348.

50. Vitellaro-Zuccarello L, Gabelli R, Da1 Pozzo Ross V. Immunocytochemica1lo-calization of collagen type I, m, IV, and fibronectin in the human dermis. CellTissue Res 1992; 268: 505-51l.

51. Lubach D, Nissen S, Marghescu S. Loca1ization of fibronectin in the initialIymphastics and blood vessels of norma1 human skin: an immuno-electronmicroscopy investigation. J Dermatol Sci 1992; 4: 63-68.

52. Le Varlet.B, Staquet MJ, Dezutter-Dambuyant C, Delorme P, Schmitt D.In vitro adhesion of human epiderma1 Langerhans cells to laminin and fibro-nectin occurs through beta 1 integrin receptors. J Leukoc Biol 1992; 51:415-420.

53. Lebre MC, Kalinski P, Das PK, Everts V. Inhibition of contact sensitizer-indu-ced migration of human Langerhans cells by matric metalloproteinase inhibi-tors. Arch Dermatol Res 1999; 291: 477-452.

54. Kobayashi Y, Matsumoto M, Kotani M, Makino T. Possible involvement ofmatrix meta1loproteinase-9 in Langerhans cell migration and maturation. JImmunoll999; 163: 5989.5993.

55. Saeki H, Moore AM, Brown MJ, Hwang ST. Cutting edge: secondary lymp.hoid-tissue chemokine (SLC) and CC chemokine receptor 7 (CCR7) partici-pate in the emigration pathway of mature dendritic cells from the skin to re-giona1lymph nodes. J Immunoll999; 162: 2472.2475.

56. Macatonia SE, Knight SC, Edwards AJ et a1. Loca1ization of antigen on Iymphnode dendritic cells after exposure to the contac sensitizer fluorescein isot-hiocyanate. Functiona1 and morphologica1 studies. J Exp Med 1987; 166:1654-1667.

57. Van Wilsem EJG, Brevé J, Kleijmeer M, Kraa1 G. Antigen.bearing Langerhanscells in skin draining Iymph nodes: Phenotype and kinetics of migration. J In-vest DermatoI1994; 103: 217.220.

58. Steinman RM, Inaba K, Schuler G. Introduction: cutaneous dendritic cells:distinctive antigen.plesenting cells for experimenta1 models and disease sta-tes. En: Moll H, editor. The immune functions of epiderma1 Langerhans cells.Austin: RG Landes, 1995,1-19.

59. Ka1inski P, Hilkens CMU, Wierenga EA, Kapsenberg ML. T cell priming bytype-1 and type-2 polarized dendritic cells: the concept of a third signa1. Im-munol Today 1999; 20: 561-567.

60. Mosmann TR, Cherwinski H, Bond MW, Giedlin MA, Coffman RL. Two 'Fypesof murine helper T cell clone. I. Derlnition according to prorlles oftymphoki-ne activities and secreted proteins. J Immuno11986; 136: 2348-2357.

61. Mosmann TR, Moore KW. The role of I!r10 in crossregulation of THl andTH2 responses. En: Ash C, Gallagher RB, editores. Immunoparasitology to-day. Cambridge: E1sevier Trends Journal, 1991; 49-53.

62. Mosmann TR, Schumacher JH, Street NF, Budd R, O'Garra A, Fong TA et a1.Diversity of cfytokine synthesis and function of mouse CD4+ T ceUs. Immu-no1 Rev 1991; 123: 209-229. .

63. Mosmann TR. Cytokines and irnml)ne regulation. En: Rich RR, editor. Clini-ca1 irnmunology. Principies and practice. Voll. St. I.ouis; Mosby, 1996; 217-230.

64. Trinchieri G. Interleukin-12: a proinflammatory cytokine with irnmunoregu-Iatory functions that bridge innate resistance and anÍigen-specific adaptiveimunity. Annu Rev ImmunoI1995; 13: 251-276.

65. Hilkens CMU, Ka1inski P, De Boer M, Kapsenberg ML. Human dendritic cel1srequire exogenous interleukin-12-inducing factors to direct the developmentofnaive T-helpercel1s toward the Thl phenotype. Blood 1997; 90: 1920-1926.

66. Snijders A, Ka1inski P, Hilkens CMU, Kapsenberg ML. High-Ievel I!r12 pro-duction by hunlan dendritic cel1s requires two signa1s. Int ImmunoI1998; 10:1593-1598.

67. Heuf1er C, Koch F, Stanzl U, Topar G, Wysocka M, Trinchieri G et a1. Inter-leukin-12 is produced by dendritic ceUs and mediates T helper 1 develop-ment as well as interferon-gamma production by T helper 1 cel1s. Eur J Im-munoll996; 26: 659.Q6B.

68. Josien R, Wong BR, Li HL, Steinman RM, Choi Y. TRANCE, a TNF farnilymember, is differentially expressed on T cell subsets and induces cytokineproduction in dendritic cel1s. J Immunoll999; 162: 2562-2568.

69. Josien BR, Li HL, Ingulli E, Sarma S, R Eong B, Vologodskaia M et a1.TRANCE, a tumor necrosis factor family member, enhances the longevity anda(\juvant properties of dendritic cel1s in vivo. J Exp Med 2000; 191: 495-502.

70. Tang HL, Cyster JG. Chemokine up-regulation and activated T cell attractionby maturing dendritic cel1s. Science 1999; 30: 819-822.

71. Papadoopoulos EJ, Sasseti C, Saeki H, Yamada N, Kawamura T, Fitzhugh DJet a1. Tractalkine, a CX3C chemokine, is expressed by dendritic ceUs and isup-regulgted upon dendritic cell maturation. Eur J Immunoll999; 29: 2551-2559.

72. Butcher EC. Leukocyte-endothelia1 cell recognition: three (or more) steps tospecificity and diversity. Celll991; 677: 1033-1036.

73. Picker LJ. Mechanisms of Iymphocyte homing. Curr Opin ImmunoI1992; 4:227-286.

74. Dailey MO. The selectin farnily of cell-adhesion molecules. En: Shimizu Y,editor. Lymphocyte Adhesion Molecules. Austin: RG Landes, 1993; 75-104.

75. Dustin ML, Singer KH, Tuck DT, Springer T A Adhesion of T lymphob1a,sts toepiderma1 keratinocytes is regulated by interferon gamma and is mediatedby intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-l). J Exp Med 1988; 167: 1323-1340.

76. Elices MJ, Osbom L; Takada Y, Crouse C, Luhowskyj S, Hernler ME et a1.VCAM-l on activated endothelium interacts with the leukocyte integrin VLA-4 at a site distil1ct from the VLA-4/fibronectin binding site. Celll990; 60: 577-584.

77. Middleton J, Neil S, Wintle J, Clark-Lewis I, Moore H, Lam C et a1. Transcyto-sis and surface presentation of IL-8 by venular endothelia1 ceUs. Celll997;91: 385-395.

78. Williams IR, Rich BE, Kupper TS. Cytokines and chemokines. En: FreedbergIM, Eisen AZ, Wolff K, Austen KF, Goldsmith LA, Katz SI et a1, editores. Fitz-patrick's dermatology in genera1 medicine (5.. ed.). Nueva York: McGraw-Hill, 1999; 384-399.

79. Sozzani S, Sallusto F, Luini W, Zhou D, Pietmontli L, Allavena P et a1. Migra-tion on dendritic cel1s in response to formyl peptides. C5a and a distinct setof chemokines. J ImmunoI1995; 155: 3292-3296.

80. Xu LL, Warren MK, Rose WIL, Gong WH, Wang JM. Human monocyte che-motactic protein and other C-C chemokines bind an induce directional mi-gration of dendritic cel1s in vitro. J Leukocyte Bioll996; 60: 365-371.

81. Godiska R, Chantry D, Raport CJ, Sozzani S, Allavena P, Leviten D et a1. Hu-rnan macrophage-derived chemokine (MDC), a novel chemoattractant formonocytes, monocyte-derived dendritic ceUs, and natura1 killer cel1s. J Expmed 1997; 185: 1595-1604.

82. Picker LJ. Control of Iymphocyte horning. Curr Opin ImmunoI1994; 6: 394-406.83. Tapia FJ, Cáceres-Dittrnar G, Sánchez MA, Femández CT, Rond6n AJ, Convit

J. Adhesion molecules in lesions of Arnerican cutaneous leishmaniasis. ExpDermatoI1994; 3: 17-22.

84. Tapia FJ, Cáceres-Dittmar G, Sánchez MA Inadequate epidenna1 horning le-ads to tissue damage in hunlan cutaneous leishmaniasis. Immunol Today1994; 15: 160-165.

85. Mod1in RL, Hofman FM, Taylor CR, Rea TH. T Iymphocyte subsets in the .

skin lesions ofpatients with leprosy. J Arn Acad DermatoI1983; 8: 182-189.86. Mod1in RL, Tapia FJ, Bloom BR, Gallinoto ME, Castés M, Rondon AJ et al. In

situ characterization of the cellular immune response in Arnerican cutane-ous leishmaniasis. Clin Exp Immuno11985; 60: 241-248.

87. Gross A, Weiss E, Tapia FJ, Aranzazu N, Ga1linoto ME, Convit J. Leukocytesubsets in the granulornatous response produced after inoculation with My-CQbMterium leprae.BCG in leprornatous patients. Arn J Trop Med Hyg 1988;608-612.

F.J. Tapia et ai.- Las células dendríticas de la piel: de Paul Langerh3l1S al concepro de los inrnunocitos villien

88. Martínez-Arends A, Tapia FJ, Cáceres-Dittrnar G, Mosca W, Valecillos L, Con-vit J. Immunocytochemical characterization of imrnune cells in lesions ofAmerican cutaneous leishrnaniasis using novell T cell markers. Acta Trop1991; 49: 271-280.

89. Garside P, Mowat AMCI. Polarization ofTh-cell responses: a phylogenetic con-

sequence ofnonspecific imrnune defence? Immunol Today 1997; 16: 220-223.90. Constant S, Pfeiffer C, Woodard A, Pasqualini T, Bottom1y K Extent of T cell

receptor ligation can determine the functional differentiation of naive CD4+T cells. J Exp Med 1995; 182: 1591-1596.

91. Ottenhoff 11I, Mutis T. Specific killing of cytotoxic T cells and antingen-pre-

senting cells by CD4+ cytotoxiv T cell clones. J Exp med 1990; 171: 20l1-2024.

92. Austin JM, Wood IíJ. Principies of cellular and molecular imrnunology. Ox-ford: Oxford University Press, 1993.

93. Melcher A, Todryk S, Bateman A, Chong H, Lemoine NR, Vile RG. Adoptivetransfer of immature dendritic cells \Jtith autologous or allogeneic tumor cells

generates systemic antitumor imrnunity .Cancer Res 1999; 59: 2802-2805.94. Nestle FO, A1ijagic S, Gilliet M, Sun Y, Grabbe S, Dununer R et al. Vaccina-

tion of melanoma patients \Jtith peptide- or tumor Iysate-pulsed dentriticcells. Nature Med 1998; 4: 328-332.

95. Ash1ey DM, Faiola B, Nair S, Hale LP, Bigner DD, Gilboa E. Bone marrow-ge-nerated dendriti cells pulsed \Jtith tumor extracts or tumor RNA induce anti-

tumor imrnunity against central nervous system tumors. J Exp Med 1997;186: l177-l1882.

96. Osterroth F, Garbe A, fisch P, Veelk~n H. Stimulation of cytotoxic T cells

against idiotype imrnunoglobulin of malignant Iymphoma \Jtith protein-pul-sed or idiotype-transduced dendritic cells. 'Blood 2000; 95: 1342-1349.

97. Reichardt VL, Okada CY, Liso A, Benike CJ, Stockerl-Goldstein KE, Engle-man EG et al. Idiotype vaccination using dendritic cells after autologous pe-

ripheral blood stem cell transplantation for multiple myeloma. A feasibilitystudy. Blood 1999; 93: 24l1-2419.

98. Zitvogel L, Mayordomo JI, 1)andrawan T, DeLeo AB, Clarke MR, Lotze MT etal. Therapy of murine tumors \Jtith tumor peptide-pulsed dendritic cells de-

pendenceon T cells, B7 costimulation and T helper cell1-associated cytoki-.nes. J Exp Med 1996; 183: 87-97.

99. F1amand V, Sornasse T, Thielemans K, Demanet C, Bakkus M, Bazin H et al.

Murine dendritic cells pulsed in vitro \Jtith tumor antigen induce tumor re-sistance in vivo. Eur J lmmuno11994; 24: 605-610.

100. MayordomQ JI, Zorina T, Storkus WJ, Zitvogel L, Celluzzi C, Falo LD et al.Bone marrow-derived dendritic cell pulsed \Jtith synthetic tumour peptideselicit protective and therapeutic antitumor imrnunity. Nature Med 1995; 1:

1297-1302.101. PuIendran B, Smith JL, Jenkins M, Schoenbom M, Maraskovsky E, Malis-

zewski CR. Prevention of peripheral tolerance by a dendritic cell growth fac-tor: F1t3ligand as an a<ljuvant. J Exp Med 1998; 188: 2075-2082.

102. Esche C, Subbotin VM, Hunter O, Peron JM, Maliszewski C, Lotze MT et al.

Differential regulation of epidenrnll and denrnll dendritics cel1s by Ilr 12 andFlt3ligand. J lnvest Dernlatoll999; l13: 1028-1032.

103. Lotze MT, Shurin M, Esche C, Tahara H, Storkus W, Kirkwood JM et al. Inter-leukin-2: developing additional cytokine gene therapies using fibroblasts ordendritic cells to enhance tumor inununitY. 'Cancer J Sci Am 2000; 6 (Supl1):61-66.

104. Shimizu K, Fields RC, Redrnan BG, Giedlin M, Mule JJ. Potentiation of inunu-

nologic responsiveness to dendritic cell-based tumor vaccines by recombi-nant interleukun-2. Cancer J SciAm 2000; 6 (Supl1): 67-75.

105. Brugger W, Brossart P, Scheding S, Stuh1er G, Heinrich K, Reichart V et al.

Approaches to dendritic cell-based inununotherapy after peripheral bloodstem cell transplantion. Aun NY Acad Sci 1999; 872: 363-371.

106. Hartrnann G, Weiner GJ, Krieg AM, CpG DNA: a potent signal for growth, ac-

.tivation and maduration of human dendritic cel1s. ProcNatl Acad Aci USA1999; 96: 9305-9310. .

107. Miller PW, Sharma S, Stolina M, Butterfield LH, Luo J, Lin y et al. Intratumo-rai adrninistration of adenoviral interleukin- 7 gene-modified dendritic cel1s

augments specific antitumor inununitY and achieves tumor eradication. HumGene Ther 2000; l1: 53-{¡5.

108. Ozawa H, Ding W, Torii H, Hosoi J, Seiffert K, Campton K et al. Granulocyte-

macrpphage colony-stimulating factor gene transfer to dendritic cells or epi-dermal cells augments their antigen-presenting functiQn including inductionof anti-tumor inununitY. J lnvest DermatoI1999; l13: 999-1005.

109. Ahuja SS, Reddick RL, Sato N, Montalbo E, Kostecki V, Zhao W et al. Dendri-tic cell (DC)-based anti-infective strategies: DCs engineered to secrete Iir 12

are a potent vaccine in a murine model of an intracellular infection. J Immu-no11999; 163: 3890-3897.

l10. Ahuja SS, Mununidi S, Malech HL, Ahuja SK. Hurnan dendritic cell-based

anti-infective therapy: Engineering DCs to secrete functional INF -y and Ilr 12.J 1nununoll998; 161: 868-876.

ll1. Cao X, Zl¡ang W, He L, Xie Z, Ma Á, Tao Q et a1. Lymphotactin gene-modified

bone marrow dendritic cel1s act as more potent adjuvants for peptide deli-vefY to induce specific antitumor inununitY. J 1nununoll998; 161: 6238-6244.

112. Wei Y, Li J, Chen WY, Yu X, Sticca RP, Wagner TE. Enhanced transgene ex-

pression and effective in vivo antitumor inunune responses initiated by den-dritic progenitors transfected with a nonviral T7 vector expressing a modeltumor antigen. J 1nununother 2000; 23: 75-82.

l13. Cao X, Zhang W, Wang J, Zhang M, Huang x, Hamada H et al. Therapy of es-

tablished tumour with hybrid cellu1ar vaccine generated by using granu-

locyytes-rnacrophage colony-stimulating factor genetically modified dendri-tic cells. 1nununology 1999; 97: 61&{i25.

l14. Zitvogel L, Regnault A, Lozier A, Wolfers J, Flament C, Tenza D et al. Eradi-

cation of estabIished murine tumors using a novel cell-free vaccine: dendriticcell derived exosomes. Nat Med 1998; 4: 594.QO0.