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Control de la podredumbre radical de encinas mediantefertilizantes inorgánicos II: efecto in vitro del Ca y el Ken la capacidad infectiva de Phytophthora cinnamomi

M. S. SERRANO, P. DE VITA, P. FERNÁNDEZ-REBOLLO, M. E. SÁNCHEZ

Se ha estudiado el efecto in vitro de varios productos de calcio y potasio (CaO,CaCO 3 , CaCl 2 , Ca(NO3 ) 2 , CaSO4 , Kl03 , KNO 3 . K,SO4 . KC1 y KOH) sobre el creci-miento micelial, la producción de esporangios y clamidosporas y la germinación de es-porangios (producción de zoosporas) de Phytophthora cinnamomi, principal agentebiológico causante de la podredumbre radical que afecta a las encinas que crecen en lasdehesas del sur de la Península Ibérica. Aunque ninguno de los productos a valores depH 6 inhibió el crecimiento micelial del patógeno, el CaO, CaCO 3 , CaSO4 . KOH yK10 3 inhibieron de forma muy efectiva la producción de esporangios, y por tanto, serí-an capaces de disminuir o incluso anular la producción de zoosporas infectivas, si bienno resultan tan efectivos en la inhibición de la germinación de esporangios ya forma-dos. El CaO, CaCO 3 . K2SO4 y CaCl 2 además inhibieron eficazmente la producción declamidosporas. La aplicación de enmiendas calizas (CaO y CaCO 3 fundamentalmente,y también CaSO4 ) a los suelos de dehesas infestados por el patógeno, por su elevadacapacidad de inhibición de la producción de esporangios y clamidosporas, podríanconstituir un tratamiento efectivo para el control de la enfermedad radical, limitando oimpidiendo nuevas infecciones de las encinas ya establecidas o evitando la infecciónradical de los plantones en las repoblaciones de dehesas afectadas por la enfermedad.

M. S. SERRANO, P. DE VETA, M. E. SÁNCHEZ. Dpto. Agronomía (Patología Agrofores-tal ), Universidad de Córdoba. aglsahem@uco.esP. FERNÁNDEZ-REBOLLO. Dpto. Ingeniería Forestal, Universidad de Córdoba.

Palabras clave: decaimiento, dehesa, Q. ilex subsp. ballota.

INTRODUCCIÓN

Phytophthora cinnamomi es el principalcausante de la podredumbre radical queafecta a encinas y alcornoques en las dehe-sas del suroeste de la Península Ibérica(BRAsIER eta!., 1993; BRASIER, 1996; SÁN-

CHEZ et al., 2002; 2003). Este patógeno desuelo causa la muerte masiva de las raicillasabsorbentes, reduciendo la capacidad delárbol para absorber agua y nutrientes (SÁN-

CHEZ et al., 2002).El microorganismo se encuentra en el

suelo en forma de estructuras de resisten-

cia (clamidosporas) capaces de subsistirdurante un tiempo relativamente ampliocomo propágulos en latencia (SÁNCHEZ etal., 2002; 2003; 2006; ROMERO et al.,2007). Estas esporas germinan producien-do esporangios, que a su vez germinanemitiendo zoosporas móviles. Este procesode germinación tiene lugar cuando hay hu-medad en el suelo y su temperatura es re-lativamente alta (� 25 °C), favoreciéndoseademás en suelos ácidos (ERWIN y RIBEI-

RO, 1996). La existencia de agua libre enel suelo facilita la dispersión de las zoos-poras flageladas, desplazándose activa-

1 10 M. S. SERRANO, P. DE VITA, P. FERNÁNDEZ-REBOLLO, M. E. SÁNCHEZ

mente por la película de agua que rodealas partículas del suelo, siendo entoncesatraídas químicamente por los exudadosradicales de las plantas susceptibles.Cuando infecta al huésped, el patógeno de-sarrolla su micelio en el interior de las raí-ces y se multiplica rápidamente en sucesi-vos ciclos de producción de esporangios yemisión de zoosporas, dando lugar a unaumento de su población mientras se man-tengan las condiciones de saturación hídri-ca del suelo (ERWIN y RIBEIRO, 1996).Tras la colonización y muerte de las raíceso cuando las condiciones ambientales noson favorables, el patógeno forma nuevasesporas de supervivencia (clamidosporas)que quedan en el suelo como estructurasde resistencia (ERWIN y RIBEIRO, 1996;ROMERO et al., 2007). Con estas premisas,los métodos de control que sean capacesde limitar la capacidad infectiva del pató-geno, actuando sobre la germinación de lasclamidosporas, la producción de esporan-gios y/o la germinación de los mismos,pueden resultar efectivos en la prevenciónde la enfermedad radical causada por P.cinnamomi en encinas y alcornoques, dis-minuyendo la producción de las zoosporascapaces de infectar las raíces.

El objetivo de este trabajo ha sido evaluarel efecto in vitro que distintos compuestosde calcio y potasio tienen sobre la capaci-dad infectiva de P. cinnamomi mediante laevaluación de la inhibición del crecimientomicelial y de la producción de clamidospo-ras y esporangios y germinación de estosúltimos.

MATERIAL Y MÉTODOS

Se utilizaron dos aislados de P. cinnamo-mi de la colección fiingica del Departamen-to de Agronomía de la Universidad de Cór-doba: PE90 y PA25, cada uno de ellos per-teneciente a uno de los grupos genéticosdescritos para los aislados de P. cinnamomide Quercus en el sur de la Península Ibérica(CAETANO et al., 2009).

Inhibición in vitro del crecimientomicelial

Se evaluaron distintas formulaciones decalcio (óxido, nitrato, carbonato, cloruro ysulfato) y de potasio (hidróxido, nitrato, clo-ruro, iodato y sulfato) para cuantificar su ca-pacidad de inhibición del crecimiento mice-lial de P. cinnamomi en el medio de cultivogenérico Corn Meal Agar (CMA, 17 g x L-').Las concentraciones ensayadas fueron: 0, 50,150, 300 y 600 ppm de ión Ca 2+ o Kt

Para cada formulación se preparó unasolución madre a 3.000 ppm, de donde seobtuvieron las demás concentracionespor diluciones consecutivas. Los diferen-tes medios de cultivo se obtuvieron apartir de medio CMA al que, cuando aúnestaba templado y fundido, se le añadie-ron las diferentes soluciones de calcio opotasio. A cada uno de los medios decultivo así obtenidos se le midió el pHmediante un pHmetro (CRISON, GLP21)y, posteriormente se vertieron en placasde Petri de 9 cm de diámetro y se dejaronenfriar. Las placas con CMA y concen-tración cero de iones se usaron comocontrol.

En el centro de las placas se colocarondiscos de agar de 6 mm de diámetro de cadauno de los dos aislados de P. cinnamomicrecidos durante 4 días en medio de cultivoCA (Agar-Zanahoria) (DHINGRA ySINCLAR, 1995), en oscuridad a 22 °C. Seprepararon tres repeticiones (placas) paracada uno de los aislados, compuestos y con-centraciones ensayadas. Todas las placas,incluidas las control, se incubaron en cáma-ra de cultivo a 25 "C en oscuridad. Diaria-mente se midió el crecimiento radial de lascolonias, hasta que las colonias del testigo ode alguno de los tratamientos ocuparon todala placa de Petri.

Aquellas formulaciones que variaronsustancialmente el pH del medio de culti-vo, se ensayaron también neutralizando elmedio mediante la adición de ácido lácticohasta que el pH era similar al del testigo(CMA).

BOL. SAN. VEG. PLAGAS, 37,2011 I 11

Inhibición in vitro de la producciónde esporangios y clamidosporas

Se evaluaron las mismas formulaciones delensayo anterior (óxido, nitrato, carbonato,cloruro y sulfato cálcico e hidróxido, nitrato,cloruro, iodato y sulfato potásico) para cuan-tificar su efecto sobre la producción de espo-rangios y clamidosporas de los aislados PE90y PA25. Las concentraciones de ión calcio ypotasio en este experimento fueron 600 ppmde Ca2+ y 50 ppm de le, lo que correspondea los valores habituales de fertilización cálci-ca o potásica que se aplican en dehesas (FER-NÁNDEZ-REBOLLO y CARBONERO, 2008).

Para estimular la producción de esporan-gios se preparó un extracto acuoso de suelo(121BEIR0, 1978), con un contenido inicial enCa 2+ de cambio de 37,91 meq x kg' y uncontenido en K+ de cambio de 2,8 meq x kg '.Al extracto obtenido se le añadieron los dife-rentes compuestos de calcio o potasio a ladosis seleccionada. A todos los extractos desuelo se les midió el pH con el mismo pHme-tro que en el ensayo anterior. Para comprobarque la microflora del extracto de suelo, queestimula la producción de esporangios, conti-nuaba viva, se sembraron alícuotas de 300 /tide cada extracto de suelo con su correspon-diente compuesto de calcio o potasio, en pla-cas de Petri de 6 cm de diámetro con unmedio de cultivo genérico para hongos y bac-terias, PDA (Patata-Dextrosa-Agar) (DHIN-GRA y SINCLAR, 1995) y un medio de cultivogenérico para bacterias, NBY (Nutrient BrothYeast Extract) (WELLER eta!., 1984).

Los dos aislados se hicieron crecer separa-damente durante 4 días en oscuridad a 22 'Ven el medio de cultivo PA (Agar-Guisante)al 20% (TRioNE, 1974). Posteriormente, setransfirieron discos de 6 mm de diámetro aplacas de Petri de 6 cm de diámetro vacías yse vertieron en estas placas los extractos desuelo previamente preparados, hasta el mar-gen de los discos (CAETANO, 2007). Se pre-pararon cuatro repeticiones (placas) por pro-ducto y aislado. Estas placas se incubaron enluz constante a 22 'V hasta que alcanzaron lamáxima producción de esporangios, a las 50

h del comienzo del ensayo para el aisladoPE90 y a las 55 h para el aislado PA25.Trascurrido este tiempo, se determinó la pro-ducción de esporangios y clamidosporas me-diante observación directa al microscopio in-vertido y conteo de estructuras maduras.

Inhibición in vitro de la germinaciónde esporangios

Se evaluaron las mismas formulaciones yconcentraciones del experimento anterior paralos aislados de P. cinnamemi PE9() y PA25.La capacidad germinativa de los esporangiosse determinó mediante la cuantificación de laproducción de zoosporas. Para estimular laproducción de esporangios, se transfirió a pla-cas de Petri de 6 cm de diámetro el micelioaéreo de cada uno de los dos aislados produ-cido tras 3 días de incubación en oscuridad a22 °C en medio de cultivo CA (Agar-Zanaho-ria al 20%, ERWIN y RIBEIRO, 1996) en placasde Petri de 9 cm de diámetro. Después, severtió en estas placas extracto de guisante(TRIONE, 1974). Estas placas se incubaron enoscuridad a 22 °C durante 3 días. El micelioformado, ya con esporangios maduros, setransfirió a placas de Petri de 6 cm de diáme-tro con los extractos de suelo previamentepreparados con los diferentes compuestos decalcio y potasio y el extracto de suelo sin nin-gún producto (testigo), siguiendo la mismametodología que en el apartado anterior. Serealizaron tres repeticiones para cada com-puesto y aislado. Las placas se sometieron aun choque frío (4-5 °C) durante 30 min yvuelta a temperatura ambiente (22 "C) durante2 h, para estimular la germinación de los es-porangios y la liberación de zoosporas (RIBE1-RO, 1978). Se cuantificó la producción de zo-osporas mediante conteo en cámara Neubauerde alícuotas del extracto de suelo.

Análisis de datos

Para cada experimento, los valores obteni-dos se refirieron a los correspondientes tes-

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tigos sin compuestos de Ca o K (testigos) yse expresaron como porcentaje de inhibición(o en su caso, estimulación) del crecimientomicelial, de la producción de esporangios,de la producción de clamidosporas y de lagerminación de esporangios (producción dezoosporas). Los datos se analizaron median-te un ANOVA mediante el programa Statis-tix (Analytical Software, Tallase, USA).

RESULTADOS

Inhibición del crecimiento micelial

El ensayo terminó a los 3 días, cuando lascolonias de algún tratamiento o el testigo,ocuparon toda la placa. Los dos aislados deP. cinnamomi (PA25 y PE90) mostraron di-ferencias significativas entre sí en cuanto asu tasa de crecimiento, pero la interacciónaislados por productos no resultó significati-va, por lo que el efecto de los productosevaluados fue similar para ambos aislados.Los porcentajes de inhibición calculadoscon respecto a cada uno de los dos testigosno difirieron entre sí, por lo que los datosque se muestran a continuación correspon-den a valores medios de inhibición paraambos aislados.

Las diferencias observadas en los pHs delos distintos medios respecto del pH delmedio testigo (pH=5,86) fueron muy marca-das para el CaO y el KOH, llegando a alcan-zar a las concentraciones más altas valores depH de hasta cuatro puntos por encima del tes-tigo (Cuadro 1). Al neutralizar el medio de

estos dos productos con ácido láctico se obtu-vieron valores de pH similares al testigo.

Los valores medios de porcentaje de inhi-bición del crecimiento micelial de los dife-rentes compuestos de calcio y potasio apare-cen en la Figura 1. Se observó un gradientede inhibición del crecimiento micelial a me-dida que aumenta la concentración de pro-ducto en el medio. Considerando comoefectivos los compuestos capaces de inhibirel crecimiento micelial al menos en un 50%,solamente el CaO y el KOH cumplen estapremisa a concentraciones elevadas (300 y600 ppm). Sin embargo, cuando se neutrali-za el medio, se obtienen porcentajes de inhi-bición muy bajos en el caso del CaO neutra-lizado y algo mayores, aunque no por enci-ma del 50%, para el KOH neutralizado (Fi-gura 1).

Inhibición de la producciónde esporangios y clamidosporas

En las placas con medios PDA y NBYsembradas con alícuotas de los extractos desuelo con compuestos de calcio o potasio, seobservó el crecimiento de colonias de hon-gos y bacterias respectivamente, por lo quese comprobó que la microflora del extractode suelo continuaba viva en todos los casos.Los valores de pH de los distintos extractosde suelo con los productos de calcio y pota-sio aparecen en el Cuadro 2.

Los dos aislados de P. cinnamomi (PA25y PE90) mostraron diferencias significativasentre sí en la producción de esporangios y

Cuadro 1. pH de los medios CMA tras la adición de los distintos productos de calcio y potasio a lasconcentraciones ensayadas

Concentración

(19111)CaO Ca(NO3)2 CaCO3 CaCl 2 CaSO4 KOH KNO3 KC1 KI03 K2SO4

50 8,31 5,71 6,60 5,79 5.88 7,49 5,86 5.79 5,83 5.86

150 10,44 5,65 6,50 5,66 5,88 10,17 5,75 5,77 5,84 5,87

300 11,45 5,59 6,75 5,59 5,72 11,22 5,76 5,75 5,73 5,93

600 11,94 5,41 6,86 5,55 5.70 11.76 5,74 5,61 5,60 6.08

a)

CaO

CaSO4

Ca(NO3)2

CaCO3

CaCl2

-e- CaO NEU

100

1111W----AM111111180

b)

- KI03

KNO3

- CKI

- KOH

• K2S 04

KOH NEU

CONCENTRACIONES ENSAYADAS (ppm)

100

60

60

40

20

o

20

BOL. SAN. VEG. PLAGAS, 37.2011

113

CONCENTRACIONES ENSAYADAS (ppm)

Figura 1. Porcentaje de inhibición del crecimiento micelial de P. cinnamomi para los diferentes compuestos de calcio(a) y potasio (b) a las distintas concentraciones ensayadas

o100

80Occ1 60

‘e 40

20

o

-20CaO (NO3 ), ' CaCO, CaCl 2CaSO4KOH <NEO KCI KI03 K2SO4

-40

-60

-80

-100

114 M. S. SERRANO, P. DE VITA, P. FERNÁNDEZ-REBOLLO, M. E. SÁNCHEZ

Cuadro 2. pH de los distintos extractos de suelo ensayados a las concentraciones de 600 ppm paralos compuestos de calcio y 50 ppm para los de potasio

Testigo CaO Ca(NO3 )2 CaCO3 CaCl2CaSO4KOH

KNO3 KCI K103 K2SO4

6,3 12,2 7,37 8,48 6.20

6.35 10,2 8,2 6,8 6,6 6,7

clamidosporas, pero el efecto de los distin-tos compuestos de calcio y potasio respectodel testigo fue similar para los dos aislados,no apareciendo diferencias significativas enla interacción aislado por compuesto para lainhibición/estimulación de la producción deesporangios y tampoco para la inhibi-ción/estimulación de la producción de cla-midosporas.

La Figura 2 muestra los valores mediospara ambos aislados del porcentaje de inhi-bición o estimulación de la producción deesporangios inducida por los distintos pro-ductos de calcio y potasio ensayados. Losextractos de suelo con CaO y CaCO, inhi-bieron la producción de esporangios casi al

100%. Considerando como eficaces a aque-llos compuestos capaces de inhibir la pro-ducción de esporangios en al menos el 50%,además de los ya citados, el KOH, KIO, yCaSO, también resultaron efectivos. El por-centaje medio de inhibición de los compues-tos CaC1 2 , KC1 y K2SO4 fue menor del 50%.Por otra parte, los nitratos de calcio y pota-sio estimularon la producción de esporan-gios, llegando incluso a un factor de estimu-lación del 1,9 en el caso del KNO,.

Respecto a la producción de clamidosporas(Figura 3), de nuevo el CaO resultó el com-puesto más eficaz, con una inhibición del100%. Siguiendo el mismo criterio que en losexperimentos anteriores, resultaron eficaces

Figura 2. Porcentaje de inhibición de la producción de esporangios de P. cinnamomi para cada uno de los compuestosde calcio y potasio ensayados

oocTa

100

80

1 60

40

20

o

-20

-40

-60

-80

-100

CaSO ., KNO3 KCICaO Ca(NO CaCO , CaCI K2SO4

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el CaCO3 , K,SO4 y CaCI„ con un porcentajede inhibición mayor del 50%. El resto de loscompuestos no resultaron efectivos e inclusoKOH y KIO, estimularon la formación declamidosporas, con un factor de estimulaciónde 2,0 y 1,3 respectivamente.

Inhibición de la germinación deesporangios (producción de zoosporas)

En valores absolutos, el aislado PE90mostró una tasa de germinación de sus espo-rangios significativamente mayor que elPA25, sin embargo el efecto de los produc-tos cálcicos y potásicos respecto del testigofue similar para ambos aislados. Por lotanto, en el porcentaje de inhibición de lagerminación de esporangios no se observa-ron diferencias significativas entre los dosaislados.

El porcentaje de inhibición de la germina-ción de esporangios de los diferentes com-puestos de calcio y potasio ensayados para

ambos aislados aparece en la Figura 4. ElCaCI, resultó claramente eficaz, con un por-centaje de inhibición de la germinación de es-porangios (producción de zoosporas) mayordel 80%. El resto de los compuestos no resul-taron efectivos, aunque el CaO y CaSO, pro-dujeron porcentajes de inhibición cercanos al50%. Cabe destacar que ninguno de los pro-ductos ensayados estimuló la germinación delos esporangios de P.cinnamomi.

DISCUSIÓN

Se han llevado a cabo distintos estudiosque relacionan el efecto que el calcio y elpotasio tienen sobre el crecimiento micelialde diversas especies de Phytoplahora. ParaPhytophthora nicotiatiae el óxido, el pro-pionato y el carbonato cálcico reducen elcrecimiento del patógeno (CAMPANELLA etal., 2002). Para el patosistema Phytophthorasojae-soja, se ha demostrado que el KNO, yel CaCI, son eficaces para disminuir el cre-

Figura 3. Porcentaje de inhibición de la producción de clamidosporas de P. cinnamomi para cada uno de loscompuestos de calcio y potasio ensayados

tin ilCaSO, KOH KNO3 KCI KI03 K2SO4CaO Ca(NO 3 ) 2 CaCO3 CaC2

100

80

60

40

20

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Figura 4. Porcentaje de inhibición de la germinación de esporangios (producción de zoosporas) de P. einnamomi paracada uno de los compuestos de calcio y potasio ensayados.

cimiento micelial de P. sojae, inhibiendoademás la infección del huésped (SuGimoToet al., 2005). Según nuestros resultados, elefecto inhibidor del CaO y el KOH sobre elcrecimiento micelial de P. cinnamomi sepuede deber más al efecto del aumento delpH del medio que al del propio ión Ca2+ oK+ . Además algunos de los productos ensa-yados (CaC1 2 , KC1, K 2 SO4 y CaO y KOHneutralizados a bajas concentraciones, yCa(NO 3 )2 a cualquier concentración) esti-mulan el crecimiento micelial, lo que con-cuerda con otros trabajos realizados porHALSALL y FORRESTER (1977), DUVENHA-GE y KOTZE (1991) y DUVENHAGE et al.(1992). No obstante la capacidad de P. cin-namomi para producir enfermedad no de-pende del crecimiento saprofítico del pató-geno, sino de su capacidad infectiva vía zo-osporas (ERWIN y RIBEIRO, 1996).

En P. nicotianae el óxido y el propionatocálcico disminuyen la producción de zoos-poras (CAMPANELLA et al., 2002). Para P.cinnamomi hemos comprobado que esta dis-

minución mediada por el óxido de calcio sedebe más bien a la inhibición de la produc-ción de esporangios que a un efecto directosobre su germinación. Según VON BROEM-SEN y DEACON ( 1997), el CaCI, reduce sig-nificativamente la liberación de esporas in-fectivas de Phytophthora parasitica, a pesarde que genera una mayor producción de es-porangios. Nuestros resultados indican elmismo efecto del CaC1, en P. cinnamomi in-hibiendo la liberación de zoosporas y ade-más, al contrario de lo observado para P.parasitica, también inhibe la producción deesporangios, aunque esta inhibición no llegaal 50%. En el caso de P. sojae, concentra-ciones bajas (0,4-10 mM) de CaC1, yCa(NO,), en el medio inducen la liberaciónde zoosporas, mientras que concentracionesmayores (20-30 mM) la inhiben significati-vamente (SuGimoTo et al., 2005). En estu-dios realizados con Aphanomyces, la aplica-ción de CaCl2 o Ca(NO 3 )2 al medio de culti-vo disminuye la concentración de zoospo-ras, aunque producen un incremento del cre-

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cimiento micelial. También las solucionessaturadas de CaCO 3 y CaSO, eliminan prác-ticamente la producción de zoosporas, perono la producción de micelio (HEYmAN etal., 2007).

En cuanto al efecto estimulador de la pro-ducción de esporangios de P. (-inflamo/niproducido por los nitratos cálcico y potásico,VON BROEMSEN y DEACON (1997) observa-ron que para P. parasitica, a pesar de que elCa(NO 3 ) 2 genera una mayor producción deesporangios, reduce significativamente lamovilidad de las zoosporas, produciendo unrápido enquistamiento de las mismas al libe-rarse de los esporangios y por tanto, las de-sactiva como estructuras infectivas. Aunqueeste punto no ha sido estudiado en el presen-te trabajo, es una cuestión a considerar.

En cuanto a la producción de clamidospo-ras, no se han encontrado referencias en laliteratura consultada. Nuestros resultados in-dican que el CaO es muy eficaz, inhibiendosu producción al 100%, aunque también re-sultaron eficaces el CaCO 3 , K 2SO4 y CaC1,.Por el contrario, el KOH y el KIO, estimu-laron la formación de clamidosporas.

De todo lo expuesto podemos concluirque el CaO, CaCO 3 , CaSO4 , KOH y KIO,son compuestos que inhiben de forma efec-tiva la producción de esporangios de P. citt-namotni, y como consecuencia, capaces deanular o en cualquier caso disminuir la pro-ducción de zoosporas infectivas. Los por-centajes de inhibición alcanzados por elCaO y el CaCO, (100%) limitarían porcompleto la capacidad del microorganismopara producir estas estructuras de reproduc-

ción asexual, por lo que no sería posible laformación y liberación de zoosporas infecti-vas para la raíz de las encinas en dehesas.Sin embargo, la producción de zoosporas deP. cinnamonti a partir de los esporangiospreviamente formados sólo se ve inhibidade forma efectiva por el CaC1 2 , productoque, si bien también inhibe la producción deesporangios, no lo hace en porcentajes quepodamos considerar efectivos. Además, elCaO y el CaCO 3 también inhiben la produc-ción de las esporas de resistencia en elsuelo, las clamidosporas. Estos resultadossugieren que la aplicación de enmiendas ca-lizas (CaO y CaCO 3 fundamentalmente,aunque también hay que considerar alCaSO 4 ) a los suelos de dehesas infestadospor el patógeno puede ser una vía a conside-rar como un tratamiento efectivo para elcontrol de la enfermedad radical. Las en-miendas calizas pueden impedir o limitarnuevas infecciones de las raíces de las enci-nas ya establecidas o, aplicándolas al hoyode plantación, evitar la infección radical delos plantones con los que se intenta repoblarlos oquedales generados por la muerte deencinas debido a la podredumbre radicalcausada por P. cintiamoitii en las dehesasandaluzas.

AGRADECIMIENTOS

Este trabajo ha sido financiado por el Mi-nisterio de Ciencia e Innovación (proyectoAGL2009-00530) y la Consejería de Agri-cultura y Pesca de la Junta de Andalucía.

ABSTRACT

SERRANO, M. S., P. DE VITA, P. FERNÁNDEZ-REBOLLO, M. E. SÁNCHEZ. 2011. Con-trol of the root rot of holm oaks by inorganic ammendments II: effect in vitro of Ca and Kin the infectivity of Phytophthora cinnatnomi. Bol. San. Veg. Plagas. 37: 109-118.

Phytophthora einnamomi is the main biological agent thai causes root rot affectingholm oak growing in rangelands at the south of the lberian Peninsula. We studied the in

vitro effectiveness of several calcium and potassium products (CaO, CaCO 3 . CaCL, Ca

(NO 3 ) 2 , CaSO4 . KI0 3 , KNO 3 , K 2 SO4 , KCI and KOH) on Phytophthora cinnaMontimycelial growth, sporangial and chlamydospore production and sporangial germination(production of zoospores). Although none of the products inhibited the mycelial growth atpH 6. CaO, CaCO 3 . CaSO4 , KOH and KI0 3 were very effective for inhibition of

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sporangial production and, therefore, they would be able to reduce or even avoid produc-tion of infective zoospores, since do not resulted effective in the inhibition of sporangialgermination. CaO, CaCO 3 , Can, and K 2SO4 also effectively inhibited chlamydosporeproduction. Because of its high capacity to inhibit (he production of sporangia andchlamydospores, limestone amendments (mainly CaO and CaCO 3 , and CaSO4) to soilsinfested by (he pathogen, may constitute an effective treatment for control the root dis-ease, limiting or preventing new infections of established oaks or preventing root infec-tions of seedlings in (he forestation of dehesas affected by the disease.

Key words: Decline . Q. ilex subsp. ballota, rangelands.

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(Recepción: 15 octubre 2010)(Aceptación: 28 febrero 2011)