El primer paso de toda técnica histológica es la obtención de la muestra. Aquí observamos un segmento de intestino, quede claro que no procesaremos toda la muestra. Deberemos seleccionar un fragmento representativo, que en la imagen se aprecia en el extremo inferior derecho.

Las muestras representativas seleccionadas se ponen en las cápsulas de inclusión. Estos dispositivos con

numerosos huecos permiten la entrada de las soluciones de procesamiento

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Atlas Digital del Departamento de Biología Celular y Tisular de la Facultad de Medicina

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA

Este es el procesador automático de tejidos. Aquí se pueden quedar las muestras ya encapsuladas de un

día para otro, con lo que se ahorra mucho trabajo

Aquí se observa el momento en que el procesador automático de tejidos levanta la canastilla con cápsulas en las que se encuentran las muestras para procesamiento histológico.

Aquí se observa el momento en que el

procesador automático de tejidos levanta

la canastilla con cápsulas en las que se

encuentran las muestras para

procesamiento histológico.

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Este acercamiento nos muestra el detalle de la canastilla y ahora podemos distinguir claramente las

numerosas cápsulas de inclusión que contiene

Esta imagen muestra el “centro incluidor de tejidos”.

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El personal técnico presiona suavemente, con lo que se libera la parafina líquida

Estos son los bloques de parafina. Note que la sombra del tejido se aprecia a simple vista.

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El microtomo es el dispositivo que permite fijar el bloque y obtener secciones cuyo espesor se mide en

milésimas de milímetro

Aquí se aprecia el bloque de parafina montado y sobre la cuchilla, la tira de cortes de parafina

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA

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Con el debido cuidado, el técnico separa la tira de cortes de parafina de la superficie de la cuchilla

Se le agrega alcohol a la tira de cortes que se encuentra sobre el portaobjetos, con el fin de que se

extiendan las secciones.

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Los cortes se extienden aún más en la superficie del baño de flotación.

Los cortes extendidos, son capturados por medio de un portaobjetos de la superficie del baño de flotación

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Esta es una cestilla portamuestras. Observe que con este dispositivo el técnico puede manejar hasta 50

laminillas.

Aquí observamos la batería de tinciones.

Aquí observamos la batería de tinciones.

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Alcohol-ácido

Hematoxilina

Alcoholes en grados

decrecientes Xilol

Agua amoniacal Eosina

Alcoholes en grados

crecientes Xilol

El técnico va pasando la canastilla con cortes en blanco a lo largo de la batería.

Nuestros cortes pasan a la famosísima hematoxilina

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA

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Aquí vemos dos canastillas con cortes ya teñidos con hematoxilina y eosina. Se encuentran en recipientes

con xilol, esperando el último paso: el montaje

El técnico agrega una gota de resina y posteriormente aplica la lámina cubreobjetos

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA

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Este es el criostato. Se trata de un microtomo rotativo común que se encuentra en el interior de una cámara fría. Con este instrumento se realizan los cortes congelados para estudios transoperatorios

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Un microscopio es un instrumento que permite observar estructuras pequeñas. Aquí vemos el aspecto de

una pulga y notamos detalles de las patas. Observe que las zonas más gruesas (cuerpo y dorso) se ven

obscuras; esto se debe a que para formar una imagen, la luz debe atravesar el cuerpo

Este es un corte de lengua teñido con tricrómico de Gomori. Para observar contraste de estructuras, con el

microscopio fotónico de iluminación común usamos generalmente colorantes

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. ILUMINACIÓN COMÚN

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MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. ILUMINACIÓN COMÚN

El microscopio estereoscópico, o de disección, nos permite observar el detalle de tejidos en fresco, como

esta superficie interna intestinal. Las pequeñas salientes se llaman vellosidades.

Aquí observamos a mayor aumento el detalle de las vellosidades intestinales con el microscopio

estereoscópico.

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. ESTEREOSCÓPICO

Estas son células de descamación de la mucosa oral. Cuesta trabajo identificar el detalle del citoplasma y de

los núcleos. Compare con las siguientes imágenes.

Aquí observamos las mismas células de descamación de la mucosa oral de la imagen anterior. Compárelas.

Note que ahora identificamos claramente los límites celulares, detalles del citoplasma y del núcleo. Este

sistema de contraste óptico se conoce como contraste de fases. Observe que las imágenes obtenidas con

este sistema se caracterizan por un halo brillante.

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO.

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO CONTRASTE DE FASES

Ahora vemos células de descamación de mucosa oral y la imagen nos permite apreciar claramente contraste

de núcleo y citoplasma. Note que la imagen recuerda el aspecto de un relieve. Este sistema de contraste

óptico se conoce como interferencia diferencial según Nomarski.

Frotis sanguíneo en fresco observado con contraste de fases. No olvide el halo o brillo claro. Estos son

eritrocitos.

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO NOMARSKY

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO CONTRASTE DE FASES

RETICULOCITOS

Frotis sanguíneo en fresco, observado con el sistema de interferencia diferencial según Nomarski. Observe el aspecto de relieve y note que algunos eritrocitos están muy plegados. Se trata de reticulocitos que normalmente se mueven en el preparado en fresco.

Frotis sanguíneo

observado con interferencia diferencial según Nomarski. Se identifican eritrocitos y dos leucocitos. Observe

que uno tiene gránulos gruesos y núcleo bilobulado (eosinófilo), mientras que otro tiene gránulos finos

(neutrófilo).

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO NOMARSKY

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO NOMARSKY

Eosinofilo

Neutrófilo

Estos son macrófagos observados con el sistema de contraste de fases. El halo claro brillante es evidente

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. CAMPO OBSCURO

El método más antiguo y fácil de realizar es el llamado sistema de campo obscuro. Estas son células de

descamación de mucosa oral. Observe que sus componentes se ven blancos, mientras que el fondo es

completamente negro.

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO CONTRASTE DE FASES

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. CAMPO OBSCURO

El método más antiguo y fácil de realizar es el llamado sistema de campo obscuro. Estas son células de

descamación de mucosa oral. Observe que sus componentes se ven blancos, mientras que el fondo es

completamente negro

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. LUS POLARIZADA

Esta imagen es parecida al campo oscuro en cuanto que el fondo se ve negro. Pero note que las zonas

brillantes pueden tomar varios colores, no sólo el blanco. Este sistema se conoce como luz polarizada. Aquí

observamos un fragmento de hueso

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. LUZ POLARIZADA

Este es otro hueso en el que se identifican las osteonas. Note el intenso brillo en diversos colores. En

realidad en esta imagen tomada con luz polarizada, el Dr. Joaquín Carrillo agregó colores de difracción

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. LUZ POLARIZADA

Este es un corte de músculo esquelético, previamente teñido y observado con luz polarizada. Observe el

intenso brillo de las bandas transversales (anisótropas).

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. FLUORESCENCIA

El microscopio de fluorescencia equipado con un sistema óptico especial es indispensable para la

observación de las técnicas de inmunofluorescencia

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. JAMIN-LEBEDEFF

Un sistema de interferencia diferencial que en su tiempo fue muy empleado, es el de Jamin-Lebedeff. En esta y las siguientes imágenes vemos las mismas células de descamación de mucosa oral con colores brillantes que van cambiando.

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. JAMIN-LEBEDEFF

Células de descamación de mucosa oral observadas con interferencia diferencial según Jamin-Lebedeff

MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. JAMIN-LEBEDEFF

Células de descamación de mucosa oral observadas con interferencia diferencial según Jamin-Lebedeff