Verificación de Técnicas Analíticas “Caso de Aplicación” Hematologia f.pdfInforme de Tietz Textbook of Clinical Chemistry ... recuento total de glóbulos blancos, considerando

Verificación de Técnicas Analíticas “Caso de Aplicación”

AgendaAgenda

Introducción

Conceptos Generales

Caso de Aplicación

Conclusiones

IntroducciIntroduccióónnValidación de Métodos

“Estudios de evaluación que se realizan para determinar si un ensayo cumple con los requerimientos de calidad del usuario (laboratorio)”

EvaluaciEvaluacióón de errores.n de errores.Empleo de herramientas estadEmpleo de herramientas estadíísticas.sticas.

Magnitud del error Utilidad clMagnitud del error Utilidad clíínica del resultadonica del resultado

TE TE

a

IntroducciIntroduccióónn

““ValidaciValidacióón Analn Analííticaticadede

MMéétodostodos””

““Control de CalidadControl de Calidad””


En los laboratorios es una práctica frecuente efectuar control de calidad

‐

¿Por qué?

Asegurar la utilidad clAsegurar la utilidad clíínica de los nica de los resultados.resultados.

‐¿Qué

controlamos?

La estabilidad del sistema analLa estabilidad del sistema analíítico.tico.


¿Qué

voy a controlar?

¿Cómo puedo conocer el desempeño del método en condiciones estables?

Control de Control de CalidadCalidad

Estabilidad del sistema analEstabilidad del sistema analííticotico

Para poder controlar algo, primero debo conocerlo!!!!Para poder controlar algo, primero debo conocerlo!!!!

ValidaciValidacióón analn analííticaticade mde méétodostodos

““Un proceso de control de calidad arbitrariamente Un proceso de control de calidad arbitrariamente asignado no nos asegura que nuestro laboratorio asignado no nos asegura que nuestro laboratorio cumpla con los requerimientos de calidad cumpla con los requerimientos de calidad

establecidosestablecidos””

Objetivo Principal del LaboratorioObjetivo Principal del Laboratorio““Resultados ClResultados Clíínicamente nicamente úútilestiles””


AgendaAgenda

Introducción

Conceptos Generales

Caso de Aplicación

Conclusiones

Conceptos GeneralesConceptos GeneralesNecesidad

Selección del

Método

Requerimientos

de Calidad

Evaluación del Método

Implementación

Desarrollo del

Método

Mantenimiento

Muestra Análisis Control de Calidad

Informe de

resultadosTietz Textbook of Clinical Chemistry

Conceptos GeneralesConceptos GeneralesClaves para la validaciClaves para la validacióón de mn de méétodostodos

1)‐

Definir los Requerimientos de Calidad (TEa).

2)‐

Seleccionar los experimentos apropiados para detectar los distintos tipos de error.

3)‐

Juntar los datos experimentales.

4)‐

Aplicar los operadores estadísticos apropiados.

5)‐

Comparar el TE (error total) con el TEa (error máximo tolerable) establecido previamente como requerimiento de

calidad.

6)‐

Juzgar la aceptabilidad del método considerando su desempeño.

Conceptos GeneralesConceptos Generales

TE < TEaTE: Error TotalTEa: Error Máximo Tolerable

Conceptos GeneralesConceptos Generales

Error Total

El TE por sEl TE por síí solo no nos dice solo no nos dice si los resultados cumplen si los resultados cumplen con los requerimientos de con los requerimientos de calidad.calidad.

Para lograr esa informaciPara lograr esa informacióón n debo definir previamente los debo definir previamente los requerimientos de calidad. requerimientos de calidad. (TEa)(TEa)

Performance Driven Quality Control Zoe C Brooks

AgendaAgenda

Introducción

Conceptos Generales

Caso de Aplicación

Conclusiones

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióónn

Recuento de GlRecuento de Glóóbulos bulos BlancosBlancos

Contador HematolContador Hematolóógico gico

Sysmex XT 1800iSysmex XT 1800i

““Uso de reactivos recomendados por el fabricante del instrumentoUso de reactivos recomendados por el fabricante del instrumento””

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: TEan: TEa

“Definir los Requerimientos de Calidad (TEa)”


Requerimientos de CalidadRequerimientos de Calidad

‐Buscar los requerimientos de calidad disponibles para el recuento total de glóbulos blancos, considerando el uso

previsto del ensayo en el laboratorio.

‐Laboratorio privado que atiende pacientes ambulatorios.


¿¿De dDe dóónde obtengo esta informacinde obtengo esta informacióón?n?

‐

Literatura

‐

Páginas web

www.westgard.com

www.dgrhoads.com

http://www.westgard.com/

http://www.dgrhoads.com/


¿¿QuQuéé

criterio debo elegir?criterio debo elegir?

‐

Considerar el uso previsto del ensayo.

‐

Considerar la jerarquía de los requerimientos de calidad.

‐

Aplicar algoritmos.


1)‐

Requerimientos Médicos.2)‐

Variabilidad Biológica.

3)‐

Intervalos de Referencia.4)‐

Requerimientos Regulatorios (Ej. CLIA 88 ).

5)‐

Error Alcanzable‐

EQAs o PT (resultados por grupo).

‐

SD del proceso.‐

CLSi (NCCLS) EP 21.

6)‐

Especificaciones del fabricante para el método.


www.westgard.com


Calcular el Mínimo TEa y el Máximo TEa.Mínimo:

3 * SD 0 CV del proceso

Máximo:

CLIA 88 (Cómo máximo se emplea un TEa regulatorio)Seleccionar el TEa a partir de la fuente de mayor jerarquía disponible.Si el TEa seleccionado se encuentra entre el máximo y el mínimo utilizarlo.Si es menor que el mínimo, emplear el mínimo.Si es mayor que el máximo, emplear el máximo.www.dgrhoads.com

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: TEan: TEaMMíínimonimo

Nivel de decisión Médica: 2,90 x

103/mm3

SD:

0,09 x

103/mm3

CV:

3,1%

3*CV= 9,3%

MMááximoximo

CLIA: 15%

Mayor JerarquMayor Jerarquííaa

Variabilidad Biológica: 14,6 %

9,3Mínimo

15Máximo

14,6VB

<< <<


‐

CLIA

‐ VB‐ 3*CV

Niveles de decisiónMédica

0.5 x

103/mm3

3.0 x

103/mm3

12.0 x

103/mm3

30.0 x

103/mm3

EP Evaluator R8


““Seleccionar los experimentos apropiados para detectar Seleccionar los experimentos apropiados para detectar los distintos tipos de errorlos distintos tipos de error””

““

Juntar los datos experimentalesJuntar los datos experimentales””

““Aplicar los operadores estadAplicar los operadores estadíísticos apropiadossticos apropiados””


Premisas:Premisas:

‐Contamos con documentos actualizados que describen los protocolos a emplear durante la evaluación del ensayo.

‐Contamos con un plan para la evaluación.

‐Existe una validación previa realizada por el fabricante del reactivo en el instrumento que vamos a

emplear.(Verificación ó

Validación)

‐Contamos con manual del instrumento con las especificaciones de desempeño del ensayo.

Documentos externosDocumentos externos

‐

Manual del Operador del instrumento.

‐

Inserto del calibrador.

‐

Certificado de trazabilidad e incertidumbre del calibrador.

‐

Inserto del material a emplear en el ensayo de linealidad. (opcional)

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: Rango Reportablen: Rango Reportable


Rango Reportable: 0 –

310.0 x 103/mm3




Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: Linealidad/ Rango Reportablen: Linealidad/ Rango Reportable

EP Evaluator R8

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: Linealidad Acotadan: Linealidad Acotada

EP Evaluator

R8

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: Backgroundn: Background

Experimento Desarrollo: Se ensaya el diluyente recomendado por el fabricante 10

veces.

Se verifica que los resultados sean menores al límite de fondo especificado por el fabricante.

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: Precisin: Precisióónn

““PrecisiPrecisióónn””

Analizo la información provista por el fabricante en el manual del instrumento.

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: Precisin: PrecisióónnVeo que el fabricante ha establecido el perfil de precisión empleando el protocolo EP 5 de la CLSi.

Decido emplear el protocolo EP 15 A2 de la CLSi, que es el que se recomienda para verificación, cuando los datos de referencia son generados por el EP 5.

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: Veracidadn: Veracidad

““Exactitud/VeracidadExactitud/Veracidad””Busco la posibilidad de realizar la comparación frente a un método de referencia.

‐

dentro del laboratorio

‐

fuera del laboratorio

‐

control de calidad externo

‐

programa interlaboratorio

Busco la posibilidad de contar con materiales de referencia.

Analizo las posibilidades.


Decido emplear material de referencia (controles de veracidad) con el protocolo EP 15 A2.


Busco el reporte del programa interlaboratorio.

Laboratorio Dr. House

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: Precisin: Precisióón y Veracidadn y Veracidad

““VerificaciVerificacióón de Precisin de Precisióón y Veracidadn y Veracidad””

A partir del mismo protocolo puedo verificar precisión y veracidad.

Planifico el diseño para un mejor aprovechamiento del protocolo.

Preparo las planillas de Excel para procesar los datos.

Selecciono las especificaciones a emplear.


Esquema:

‐

Selecciono 2 ó 3 materiales de referencia con concentraciones próximas a niveles de decisión médica.

‐Proceso los 2 ó 3 materiales por triplicado durante 5 días.

‐

Durante los 5 días que dura el protocolo continúo con el esquema de calibraciones, y corro los controles

normalmente.






SDgSa=

√Ng




Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: n: PrecisiPrecisióón Simple a Concentracin Simple a Concentracióón Bajan Baja

SD: 0.009 x

10 3/mm3

CV: 0.9%Media: 0.997 x

10 3/mm3

EP Evaluator R8

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: n: PrecisiPrecisióón Simple a Concentracin Simple a Concentracióón Bajan Baja

EP Evaluator R8

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: Comparacin: Comparacióón de n de MMéétodostodos

Selecciono 20 muestras de pacientes que cubran el rango reportable del ensayo de manera homogénea.

Proceso 4 muestras por día en paralelo por los dos métodos a evaluar.

Verifico diariamente la presencia de datos aberrantes.

La diferencia en tiempo entre el procesamiento de las muestras por uno y otro método no supera la 2 horas.

Proceso los datos y evalúo las diferencias obtenidas.

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: n: ComparaciComparacióón de Mn de Méétodostodos

EP Evaluator R8

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón:n: ComparaciComparacióón de Mn de Méétodostodos

EP Evaluator R8


EP Evaluator R8


“Comparar el TE (error total) con el Tea (error máximo tolerable) establecido previamente

como requerimiento de calidad”

“

Juzgar la aceptabilidad del método considerando su desempeño”

Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón:n: ComparaciComparacióón de Mn de Méétodostodos““EvaluaciEvaluacióón del desempen del desempeñño del Mo del Méétodotodo””

Considero el requerimiento de calidad establecido.

Tomo los datos del estudio de precisión.

Tomo los datos del estudio de verificación de veracidad.

Tomo herramientas de la Web. (www.westgard.comwww.westgard.com)

Analizo los datos.


Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón:n: DesempeDesempeñño del Mo del Méétodo todo

Test or Analyte WBC Low Analyst Dr House

Methodology Sysmex XT 1800i Date 23/03/2008

Quality Requirement Sigma Limits sAllowable Total Error 14,6 6 2,43Offset 0,0 5 2,92

Method Performance 4 3,65Bias (% diff) 2,8 3 4,87Imprecision (% CV) 2,4 2 7,30Sigma Metric 4,9

Vectors6 Sigma 0 14,6 0 0

2,43 0 0,00 05 Sigma 0 14,6 0 0

2,92 0 0,00 04 Sigma 0 14,6 0 0

3,65 0 0,00 03 Sigma 0 14,6 0 0

4,87 0 0,00 02 Sigma 0 14,6 0 0

7,30 0 0,00 0

www.westgard.comwww.westgard.com




Test or Analyte WBC Normal Analyst Dr House





2,43 0 0,00 05 Sigma 0 14,6 0 0

2,92 0 0,00 04 Sigma 0 14,6 0 0

3,65 0 0,00 03 Sigma 0 14,6 0 0

4,87 0 0,00 02 Sigma 0 14,6 0 0

7,30 0 0,00 0




Test or Analyte WBC High Analyst Dr House





2,43 0 0,00 05 Sigma 0 14,6 0 0

2,92 0 0,00 04 Sigma 0 14,6 0 0

3,65 0 0,00 03 Sigma 0 14,6 0 0

4,87 0 0,00 02 Sigma 0 14,6 0 0

7,30 0 0,00 0


Caso de AplicaciCaso de Aplicacióón: V.I.R. n: V.I.R.

““VerificaciVerificacióón de Intervalos de Referencian de Intervalos de Referencia””

Verifico el intervalo de referencia del Laboratorio.

En nuestro laboratorio el valor vigente difiere levemente del propuesto por el fabricante.

Laboratorio IR Pacientes Adultos: 4 a 11 x

103/mm3

Manual del instrumento


Selecciono 20 pacientes “normales”.Proceso los 20 pacientes seleccionados.Comparo la distribución obtenida con la propuesta.Máxima desviación permitida: 10 %


EP Evaluator R8


La implementación del ensayo comprende las siguientes etapas:

‐

Redactar los procedimientos y procesos relacionados con el ensayo e incorporarlos al sistema de gestión de calidad.

‐

Preparar material de entrenamiento para el personal que realizará

el ensayo y efectuar la capacitación correspondiente.

‐

Planificar los procedimientos de control de calidad en base a los datos de desempeño obtenidos durante la validación del ensayo.

‐

Implementar los procedimientos de control de calidad.

‐

Monitorear cuidadosamente el desempeño del ensayo durante los primeros meses para identificar posibles errores.

‐

Una vez descubiertos los errores, aplicar medidas correctivas.

AgendaAgenda

Introducción

Conceptos Generales

Caso de Aplicación

Conclusiones

ConclusionesConclusiones

Resultados de PacientesResultados de Pacientes“La validación de métodos es el punto de partida para lograr

resultados de alta calidad.”

“Las validaciones analíticas deben llevarse a cabo sobre instrumentos calificados.”

“La validación de métodos analíticos forma parte del proceso de planificación de la calidad que da comienzo al circuito de

gerenciamiento de la calidad.”

ConclusionesConclusiones

El nuevo método cumple con los requerimientos de calidad establecidos por el laboratorio de acuerdo a su uso previsto.

Los datos de la verificación analítica se emplearán en la planificación del control de Calidad Interno.

El seguimiento del desempeño del método se complementará con un esquema interlaboratorio y un control de calidad externo.

MUCHAS GRACIAS!MUCHAS GRACIAS!

Documents

Verificación de Técnicas Analíticas “Caso de Aplicación” Hematologia f.pdfInforme de Tietz Textbook of Clinical Chemistry ... recuento total de glóbulos blancos, considerando