FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA YCIENCIAS DEL MAR

FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO

CÓDIGO

MATERIA Microbiología FMAR03749

NOMBRE David Quiñonez

PARALELO 1

TEMA DE LA PRÁCTICA

Identificación Bioquímica de las Pseudomonas

OBJETIVOS GENERALES:- Establecer la metodología en la identificación de enterobacterias por medio de pruebas bioquímicas

estandarizadas y miniaturizadas.

INTRODUCCIÓN:API® 20 NE

Permite la identificación de bacilos gram negativos no pertenecientes al grupo de las enterobacterias como

por ejemplo Pseudomonas, Acinetobacter, Flavobacterium, Moraxella, Vibrio, Aeromonas, entre otros. Es

una galería conformada por 20 microtubos. (Biomerieux, 2014)

Consiste en:

Sistema de elección para bacterias responsables de infecciones oportunistas adquiridas en el hospital en

constante aumento (dado que estas bacterias están haciéndose cada vez más resistentes a los antibióticos,

es esencial una identificación precisa). (BioMérieux, 2010)

La combinación de pruebas bioquímicas estándar y pruebas de asimilación, totalmente adaptadas al

metabolismo no fermentativo de estas bacterias hace a estos tests, las pruebas de referencia para este tipo

de bacteria. (Biomerieux, 2014)

Fiabilidad garantizada por un inóculo estandarizado con una concentración bacteriana baja (0.5 MF),

evitando fallos de identificación por la presencia de cultivos mixtos y subcultivos. (BioMérieux, 2010)

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Fig1.-Prueba API 20 NE

Pueba Reacción / Enzimas Negativo Positivo

ONPG beta-galactosidasa sin color amarillo

ADH arginina deshidrolasa amarillo rojo o naranja

LDC lisina descarboxilasa amarillo rojo o naranja

ODC ornitina descarboxilasa amarillo rojo o naranja

CIT utilización del citrato verde azul oscuro o turquesa

H2S producción de H2Ssin precipitado

negro precipitado negro

URE ureasa amarillo rojo o naranja

TDA triptófano desaminasa amarillo marrón-rojo

IND producción de indol amarillo color rosa o anillo rosa-rojo

VP producción de acetoína (Voges-Proskauer) sin color rosa-rojo

GEL gelatinasa sin difusión difusión de pigmento

GLU fermentación/oxidación de glucosa azul o verde amarillo

MAN fermentación/oxidación de manitol azul o verde amarillo

INO fermentación/oxidación de inositol azul o verde amarillo

SOR fermentación/oxidación de sorbitol azul o verde amarillo

RHA fermentación/oxidación de ramnosa azul o verde amarillo

SAC fermentación/oxidación de sacarosa azul o verde amarillo

MEL fermentación/oxidación de melobiosa azul o verde amarillo

AMY fermentación/oxidación de amigdalina azul o verde amarillo

ARA fermentación/oxidación de arabinosa azul o verde amarillo

OX citocromo oxidasa

Tabla1.- Batería de pruebas API: Pruebas incluidas y tablas de lectura con coloraciones positivas y negativas

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EQUIPOS Y MATERIALES:

-Solución salina-Micropipeta-Agar con Pseudomona -Micropipeta-Api 20 NE -Tubo de ensayo Tubo de ensayo

PROCEDIMIENTO:

-Para la preparación del inoculo añadimos de 2 a 3ml de solución salina a la ampollo de Api, también se podría utilizar NaCl-Recogemos colonias de la placa y lo colocamos hasta crear una turbidez equivalente a 0.5 de Mc Farland-Una vez ya obtenida la suspensión con ayuda de una micropipeta añadimos 100L de la suspensión salina al Api en los diferentes medios, esta inoculación debe realizarse despacio procurando que la suspensión se deslice por las paredes de los medios evitando que queden burbujas.-Cerramos la caja de incubación, esto debe estar en un aproximado de 29 ° C durante 24 horas

RESULTADOS: (Puede incluir información, características)

Solo dio positivo para el ADH

Observaciones:-Mantener todo esterilizado al realizar la práctica.-Al momento de ver los resultados observar las coloraciones del API 20 NE y de la tabla que viene consigo.

Conclusión:-EL medio ADH se tornó de un color rojo por lo fue ahí que crecieron las pseudomonas aeruginosas.-Según la tabla1. la enzima que reacciona es la arginina deshidrolasa.

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BibliografíaBioMérieux. (2010). http://www.ucv.ve. Obtenido de http://www.ucv.ve:

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_SistemasAPI.pdf

Biomerieux. (2014). http://www.biomerieux.com.ar. Obtenido de http://www.biomerieux.com.ar: http://www.biomerieux.com.ar/servlet/srt/bio/argentina/dynPage?open=ARG_CLN_PRD&doc=ARG_CLN_PRD_G_PRD_CLN_29&pubparams.sform=4&lang=es_ar

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