Antígenos de diferenciación aplicados al...

Antígenos de diferenciación aplicados al diagnóstico.

«Clúster de Diferenciación».

Dr. Jorge Torres R2H. miércoles, 25 de marzo de 2015

Definición.

• El clúster de diferenciación es un protocolo utilizado para la identificación e investigación de los anticuerpos monoclonales dirigidos contra epítopos en las moléculas de superficie de los leucocitos.

IUIS-WHO Nomenclature Subcommittee 1 “Nomenclature for clusters of differentiation (CD) of antigens defined on human leukocyte populations” Bulletin of the World Health Organization, 62 (S): 809- 811 (1984) World Health Organization 1984.

Historia.

CD 9 • BA-2 • MRP-1 • P24 • TSPAN29

IUIS-WHO Nomenclature Subcommittee 1 “Nomenclature for clusters of differentiation (CD) of antigens defined on human leukocyte populations” Bulletin of the World Health Organization, 62 (S): 809- 811 (1984) World Health Organization 1984. Zola H. Swart B, Nicholson I., Voss E. et al “Leukocyte and Stromal Cell Molecules: The CD Markers. 2007

MIC29

Historia.

• Dr. Laurence Boumsell y Dr. Alain Bernard. • Noviembre de 1984. – International Union of Immunological

Societies (IUIS). – Institut national de la Sante et de la

Recherche medicale (INSERM). – Medical Research Council. – Organización Mundial de la Salud.

IUIS-WHO Nomenclature Subcommittee 1 “Nomenclature for clusters of differentiation (CD) of antigens defined on human leukocyte populations” Bulletin of the World Health Organization, 62 (S): 809- 811 (1984) World Health Organization 1984. Zola H. Swart B, Nicholson I., Voss E. et al “Leukocyte and Stromal Cell Molecules: The CD Markers. 2007

Historia.

Bernard AR, Boumsell L, Dausset J, and Schlossman SF editors. Leukocyte Typing I. Berlin: Springer-Verlag; 1984 IUIS-WHO Nomenclature Subcommittee 1 “Nomenclature for clusters of differentiation (CD) of antigens defined on human leukocyte populations” Bulletin of the World Health Organization, 62 (S): 809- 811 (1984) World Health Organization 1984. Zola H. Swart B, Nicholson I., Voss E. et al “Leukocyte and Stromal Cell Molecules: The CD Markers. 2007

«First International Workshop on Human Leukocyte Differentiation

Antigens (HLDA)».

Historia.

55 grupos.

14 países.139 Anticuerpos.

IUIS-WHO Nomenclature Subcommittee 1 “Nomenclature for clusters of differentiation (CD) of antigens defined on human leukocyte populations” Bulletin of the World Health Organization, 62 (S): 809- 811 (1984) World Health Organization 1984.

Inmunofluorecencia.

Algoritmo por agrupamiento.

Definiciones.

• Dominio: Subunidad de una proteína. Cada uno con características distintas. Más de 20 descritos.

• Módulo: Término intercambiable con dominio. • Motif: Secuencia más corta que un dominio o

módulo. • Familia: Grupo de proteínas estructuralmente

similares. • Superfamilia: Grupo de familias con cualidades

similares.

Zola H. Swart B, Nicholson I., Voss E. et al “Leukocyte and Stromal Cell Molecules: The CD Markers. 201D

Fisiología.

• La función de la proteína depende de su estructura.

• El análisis de la estructura es un proceso complejo.

• No todos los CD tienen un análisis estructural.

• «Predicción».

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Dominios de Proteína.

• Distintas subunidades de proteína asociadas con una función en particular.

• Interacciones entre los residuos del mismo dominio son más fuertes que las interacciones entre diferentes dominios.

• Dominios extracelulares: Interacciones con otras células.

• Dominios intracelulares: señalización.

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Dominios de Proteína.

Zola H. Swart B, Nicholson I., Voss E. et al “Leukocyte and Stromal Cell Molecules: The CD Markers. 2007

Dominios de Proteína.

Zola H. Swart B, Nicholson I., Voss E. et al “Leukocyte and Stromal Cell Molecules: The CD Markers. 2007

Dominios de Proteína.

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Co expresión con Igs. Mediación de adhesión y migración de monocitos y eritrocitos.

Llamado B-LCAM Se une a CD45. Marcador de Linfocito B. Leucemia de Células Peludas.

Dominios de Proteína.

CD62LZola H. Swart B, Nicholson I., Voss E. et al “Leukocyte and Stromal Cell Molecules: The CD Markers201D

Tres dominios TNFR unidos. Sobreexpresión NFKB. Linfoma de Hodgkin. Utilidad en trasplante renal. Células plasmáticas, NK, LB y LT, monocitos.

E-selectina. Adhesión, diapedesis. Metástasis.

Fisiología.

Lichtman MA, Kipps TJ et al “Williams Hematology”, 8th edition.

Proteína transmembranal tipo I.

• Porción COOH en el citoplasma.

• Porción NH2 fuera de ella.

• Antígenos de superficie, ligandos.

• Superfamilia de inmunoglobulinas.

Aminoácidos Hidrofóbicos.

Lichtman MA, Kipps TJ et al “Williams Hematology”, 8th edition.

Proteína transmembranal tipo II.

• Porción COOH extracelular.

• Porción NH2 intracelular.

• Antígenos de superficie y proteínas plasmáticas.

Lichtman MA, Kipps TJ et al “Williams Hematology”, 8th edition.

Proteína transmembranal tipo III.

• Múltiples cruces por la membrana.

• Existen canales para transporte de moléculas y electrolitos.

• Dos subtipos. – Tetraspaninas. – 7 dominios.

Lichtman MA, Kipps TJ et al “Williams Hematology”, 8th edition.

Proteína transmembranal tipo V.

• Utilizan lípidos para anclarse a la membrana.

• GPI es el más representativo.

• Dos isoformas, una transmembranal, la otra membranal.

Lichtman MA, Kipps TJ et al “Williams Hematology”, 8th edition.

Familia de Proteínas.

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Definición.

CD10 [nT-nB, gp 1OO] J5.

CD10.

CALLA.IUIS-WHO Nomenclature Subcommittee 1 “Nomenclature for clusters of differentiation (CD) of antigens defined on human leukocyte populations” Bulletin of the World Health Organization, 62 (S): 809- 811 (1984) World Health Organization 1984.

Definición.

IUIS-WHO Nomenclature Subcommittee 1 “Nomenclature for clusters of differentiation (CD) of antigens defined on human leukocyte populations” Bulletin of the World Health Organization, 62 (S): 809- 811 (1984) World Health Organization 1984.

Nomenclatura del sistema de antígenos de diferenciación leucocitaria.

CD No. (cell, M.W.) nombre.

CD Cluster de Diferenciación.

No. Número otorgado oficialmente.

En paréntesis.

Célula Célula al que se asocia con mayor frecuencia.

M.W. Peso Molecular

gp:Glicoproteína. gl: Glucolípido. «u». Desconocido.

Después del paréntesis

Nombre del anticuerpo monoclonal.

Expresión. Variabilidad.« + » Hi

« - » Mid

Low

CD10 [nT-nB, gp 1OO] J5.

Clúster de Diferenciación.

• Más de 347 CD se han reportado hasta la fecha. • La molécula de la superficie propuesta se le

asigna un número de CD una vez que dos anticuerpos monoclonales específicos demuestran unirse a la molécula.

• Se le asigna el indicador «w» si no se encuentra bien caracterizada.

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Distribución en Tejidos.

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HDLA Workshop.CD

19821984198619891993199620002004200520102014

0 45 90 135 180

www.HCDM.org. Accesado 23.03.15

Aplicaciones.

Aplicación. Ejemplo.Identificación. Citometría de flujo.Localización. Inmunihistología.Cuantificación. Citometría/ELISA.Purificación. Purificación de proteínas.Terapia. Transplante, inmunoterapia.

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Identificación.

• Determinación de linajes celulares específicos. – p ej. • CD3 expresado en LT. • CD4 epresado en LTH. • CD3/CD4 la expresión de CD45R0 nos indica

células de memoria.

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CD34

• Glicoproteína. – Antígeno de células progenitoras hematopoyéticas.

• Codificada en el cromosoma: – 1q32.2.

• Molécula de adhesión. – Ligando de L-selectina. – Adhesión de CP a matriz extracelular o a células

estromales.

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CD38

• Glicoproteína. – ADP-ribosa ciclasa 1.

• Funciona como enzima que cataliza ADP-ribosa. • Adhesión de leucocitos. – Regulación de NAD.

• Identificación de Células plasmáticas (Mieloma). – Pronóstico en LLC (>30% LB se asocia a mal

pronóstico).

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CD 117.

• Mast/stem cell growth factor, c-kit. • Codificado en el gen KIT. • Receptor de tirosin kinasa III. – Se une con el SCF, formando un dímero que

activa tirosin kinasa. – Supervivencia, proliferación y diferenciación

celular.

Protoncogene.Zola H. Swart B, Nicholson I., Voss E. et al “Leukocyte and Stromal Cell Molecules: The CD Markers201D www.HCDM.org. Accesado 23.03.15 Lichtman MA, Kipps TJ et al “Williams Hematology”, 8th edition.

Linfocitos B.

CD19. • Glicoproteína. • Superfamilia de Ig. • Esencial en la activación y diferenciación

del Linfocito B. • Desaparece al momento de diferenciarse

en CP.

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Linfocitos B.

CD10. • Neprilisina. Endopeptdasa (NEP), CALLA. • Codificada en el gen MME. • Metaloproteasa dependiente de Zinc.

– Se expresa en Linfocitos pre B. – Centro germinal. – Neutrófilos.

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Linfocitos B.

CD20. • Fosfoproteína. L26 – Regulación de canales de Ca+

• Codificada en el gen MS4A1. • Marcador Pan-B. • Células dendríticas foliculares.

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Linfocitos B.

CD21. • Receptor de EBV y HHV8 • Receptor de complemento tipo 2. • Proteína codificada en el gen CR2. – Complejo CD19/CD81 – Interactúa con C3b. – Célula B madura. – Células dendríticas foliculares.

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Linfocitos B.

• CD23: LLC. – Receptor de IgE. – Células plasmáticas..

• CD79b: MB-1 • CD103: Leucemia de células peludas.

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Linfocitos T.

• CD3: – Co receptor de célula T. – 4 dominios distintos. – Se une a TCR. • Expresados en: • Timocitos. • Linfocitos T maduros.

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Linfocitos T.

• CD4: – Glicoproteína. – Miembro de la superfamilia de

inmunoglobulinas. – 4 dominios, D1/D3 (v) - D2/D4 (c) – Expresados en:

• LT cooperadores. • Monocitos. • Macrófagos. • Células dendríticas.

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Linfocitos T.

• CD5: – Expresado en LB-1 y LT. – Codificado en el cromosoma 11. – Se une a CD72. • Expresados en:

– Linfocitos T. – Timocitos.

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Resumen.Células Progenitoras.CD34, CD38

Marcadores eritroides.

CD71, CD235aCélulas NK.

CD16, CD56, CD57

Marcadores Células B.

CD10, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23 CD79b, CD103.Marcadores de Células T.

CD2, CD3, CD4, CD5, CD7, CD8, CD25

Megacariocitos.

CD41, CD42, CD61

Monocitos.

CD11c, CD15, CD64

Células Mieloides

CD13, CD14, CD33, CD117

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Conclusiones.

• Campo donde aún hay mucho que investigar. – Más de 9,000 receptores aún por descubrir.

• Tratamiento. • Trasplante.