Jose Vicente Marcos Tomás Análisis Clínicos. DEFINICIÓN de ANA Anticuerpos dirigidos contra el...

Jose Vicente Marcos Jose Vicente Marcos TomásTomás

Análisis ClínicosAnálisis Clínicos

DEFINICIÓN de ANA

Anticuerpos dirigidos contra el núcleo y, también, contra elementos no nucleares (membrana nuclear, aparato mitótico y citoplasma), por ello se ha propuesto la denominación de anticuerpos anti-celulares.

ENFERMEDADES ANA +

1.Enfermedades autoinmunes sistémicas:a. Lupus Eritematoso Sistémico (LES) y otros

Lupus.b. Esclerosis Sistémica (ES). c. Síndrome de Sjögren (SS).c. Polimiositis/Dermatomiositis (PM/DM).d. Enfermedad Mixta del Tejido Conectivo

(EMTC).e. Artritis Crónica Juvenil (ACJ) y Reumatoide

(AR).

2.Enfermedades hepáticas autoinmunitarias:a. Cirrosis Biliar Primaria (CBP).b. Hepatitis Autoinmunitarias (HAI).c. Colangitis Esclerosante Primaria (CEP).

3.Otras enfermedades (infecciones víricas, hepatopatías, cáncer, síndromes neurológicos paraneoplásicos, principalmente)

4. Sin patología aparente (aumentan con la edad y género ♀)

SINTOMATOLOGÍA en la que PROCEDE VALORAR la SOLICITUD de ANA

METODOLOGÍA

ELISA vs IFI

Sustrato Extractos + Proteínas Tejido HEp-2 ó antigénico recombinantes HEp-2000

Sensibilidad / Falsos + (fondo proteico) Técnica referenciaEspecificidad Falsos - (faltan antígenos)

Lectura de Cuantitativa y Semi-cuantitativa yResultados automatizada ¡ automatizada !

Tipo de 1 (numérico) 2 (título + patrón)Resultados Objetivo Subjetivo

GPC No Si

RESULTADOS en ANA (IFI)

TITULACIÓN ≤ 1/40 (NEGATIVO)(puntos de corte) 1/80 -1/160 (POSITIVO BAJO)

≥ 1/320 (POSITIVO ALTO)Discrimina sanos de enfermos

PATRÓN de 40 / 20 / 10 (ver tabla posterior)

FLUORESCENCIA Orientación sobre patologíaDiscrimina mejor que el título

FALSOS NEGATIVOS Células HEp-2000Células HEp-2Tejido de rata o ratón

FALSOS POSITIVOS ANA + en sanos, no suele ser significativo- Sanos: 10-20% (1/80); 5% (1/160)- Edad/Sexo: 38% de >65ã 1/80, sobre todo ♀

Viriasis, cáncer, hepatopatías…

( : 1/40) ( : 1/160)

(SUSTRATOS) Sensibilidad

MÁS y MÁS… HABITUALESMÁS y MÁS… HABITUALES

PATRONES ANTÍGENOS PATOLOGÍASHOMOGÉNEO dsDNA, Histonas, Nucleosomas… LES, LES-ID, AIJ…

MOTEADO y Ro Sm, Sm/RNP, U1RNP, Ro (SS-A), La (SS-B), Mi-2 …

LES, EMTC, SS, Lupus-Nn, Lupus-CS, DM, ES, Raynaud …

NUCLEOLAR Pm/Scl, U3RNP, Scl-70, Ku, ARNp … ES, Raynaud, PM, DM …

CENTROMÉRICO CENP-(B, A, C, F) ES-L (CREST), Raynaud, CBP …

CITOPLASMÁTICO DIFUSO tRNAsint (Jo-1, PL7, PL12), SRP, RibP … DM, PM, LES…

MITOCONDRIAL AMA-M2 … CBP…

MÁS y POCO… HABITUALES

PATRONES ANTÍGENOS PATOLOGÍASMEMBRANA NUCLEAR gp210, Laminina, Nucleoporina… CBP, HAI, LES, PM, DM, AR …

PUNTOS NUCLEARES MÚLTIPLES Sp100, Coilina… CBP, HAI, SS …

PLEOMÓRFICO (ciclo dependiente) PCNA LES

FIBRAS CITOPLASMÁTICAS f-Actina (ASMA), Vimetina, Tropomiosina, Citoqueratinas… HAI, DM, EII …

PATOLOGÍAS ANTÍGENOS (principales) PATRONES (principales)

LES dsDNA, Ro (SS-A), La (SS-B),Sm, U1RNP, RibP, PCNA

HOMOGÉNEO, MOTEADO, CITOPLASMÁTICO, PLEOMÓRFICO

LES-ID Histonas HOMOGÉNEO

Lupus-Nn Lupus-CS Ro (SS-A) Ro

SS Ro (SS-A), La (SS-B) Ro, MOTEADO

ES Pm/Scl, U3RNP, Scl-70, Ku, RNAp NUCLEOLAR, MOTEADO

ES-L (CREST) CENP-B CENTROMÉRICO

EMTC U1RNP MOTEADO

PM DM Jo-1, PL7, PL12, Mi-2, Pm/Scl, Ku, SRP CITOPLASMÁTICO DIFUSO, MOTEADO

Raynaud U1RNP, CENP-B, Jo-1, PL7, PL12MOTEADO, NUCLEOLAR, CENTROMÉRICO,

CITOPLASMÁTICO DIFUSO

CBP AMA-M2, gp210, sp100MITOCONDRIAL, Membrana Nuclear,

Puntos Nucleares Múltiples

HAI f-Actina (ASMA), LKM, SLA, LC1

FIBRAS CITOPLASMÁTICAS, Membrana Nuclear

DESARROLLO en la SOLICITUD ANALÍTICA de

ANA:

NO PROCEDE si…: - Anterior + - Anterior Ø en <6 mesesEXCEPCIONES: - Pediatría - Anterior Dudoso - Anterior +, con auto-IgG específicos por hacer, y con indicación clínica expresa

ANA a 1/80(1/40 si son pediátricos):

NEGATIVO:

No realizan mas auto-IgG aunque

se soliciten

POSITIVO BAJO(1/80-1/160):

Solo se realizan mas auto-IgG si solicitaban

(acorde al patrón)

POSITIVO ALTO(≥1/320):

Se realizan los auto-IgG que el patrón oriente, aunque no se soliciten

PATRÓN IFI ANTÍGENOS DESENCADENADOS (27)Homogéneo dsDNA (cuantificar si procede), Histonas, NucleosomasMitocondrial, Membrana Nuclear, AMA-M2, sp100, gp210, LKM1, LC1, SLA, Puntos Nucleares, Fibras Citoplasmáticas F-actina (ASMA)Citoplasmático densotRNAsintetasas (Jo1, PL7, PL12), SRP, RibPResto (Moteado, centrómero, nucleolar…) Ro, La, PCNA, Sm, RNP, Mi-2, Scl70, PMScl, Ku, CENP

COMENTARIOS ACERCA DE LOS AUTO-IgG POSITIVOS

INFORME del LABORATORIO

INFORME del LABORATORIO

RECOMENDACIONES respecto a los ANA (I)

1.DIAGNÓSTICO• Criterios clínicos (GPC) Imprescindible valorarlos para mejorar la utilidad diagnóstica de los ANA. Resultados ANA +, aisladamente, son insuficientes para establecer un diagnóstico.

• Criterios diagnósticos (GPC) ANA solo forman parte del LES (dsDNA, Sm, AAF), Lupus inducido por fármacos (histonas) y EMTC (RNP). Determinar otros anticuerpos frente a antígenos extraíbles del núcleo (ENA), no deberá realizarse fuera de su contexto clínico específico.

• EAS Los ANA son una prueba con un elevado valor predictivo negativo.• LES Existe <3% de enfermos ANA Ø (menos con Hep-2000).

• LES y ES La mayor capacidad diagnóstica de los ANA en las principales EAS (debido a su mayor sensibilidad).

• ES Con sospecha clínica, un resultado negativo de los ANA puede indicar otro tipo de enfermedad fibrosante no autoinmune.

• AR Los ANA no son de utilidad diagnóstica.

RECOMENDACIONES respecto a los ANA (II)2.PRONÓSTICO

• LES dsDNA.

• LES-embarazo Ro y La (riesgo LES neonatal y bloqueo cardíaco congénito).

• ES ScL-70.

• Síndrome CREST CENP.

• PM/DM Jo-1 (implicación pulmonar).

• SS Ro y La (riesgo de LES neonatal y bloqueo cardíaco congénito).

Ro y La (manifestaciones sistémicas extraglandulares).

• ACJ ANA (riesgo de uveítis).

• Fenómeno de Raynaud ANA (su presencia incrementa el riesgo de desarrollar una EAS asociada, mientras que su negatividad reduce dicho riesgo).

3.MONITORIZACIÓN

• LES dsDNA (junto a C3, C4, PTo) cada 1-3 meses ó 6-12 meses según la actividad del LES. También, PCNA (aunque solo en <5% es +).