Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP ......da microbiota intestinal facilita a extração de calorias da dieta, ajudam a estocá-las no tecido adiposo, além de prover

VERENA MACEDO SANTOS

Avaliaccedilatildeo da participaccedilatildeo dos micro-organismos da Classe Mollicutes

na microbiota intestinal de mulheres eutroacuteficas e obesas

Dissertaccedilatildeo apresentada ao Programa de Poacutes-

Graduaccedilatildeo em Microbiologia do Instituto de

Ciecircncias Biomeacutedicas da Universidade de Satildeo

Paulo para obtenccedilatildeo do Tiacutetulo de Mestre em

Ciecircncias

Satildeo Paulo 2015





Graduaccedilatildeo em Microbiologia do Instituto de Ciecircncias

Biomeacutedicas da Universidade de Satildeo Paulo para

obtenccedilatildeo do Tiacutetulo de Mestre em Ciecircncias

Aacuterea de concentraccedilatildeo Microbiologia

Orientador Prof Dr Jorge Timenetsky

Versatildeo original

Satildeo Paulo 2015

UNIVERSIDADE DE SAtildeO PAULO

INSTITUTO DE CIEcircNCIAS BIOMEacuteDICAS ____________________________________________________________________________

Candidato(a) Verena Macedo Santos

Tiacutetulo da Dissertaccedilatildeo Avaliaccedilatildeo da participaccedilatildeo dos micro-organismos da Classe

Mollicutes na microbiota intestinal de mulheres eutroacuteficas e obesas

Orientador (a) Prof Dr Jorge Timenetsky

A Comissatildeo Julgadora dos trabalhos de Defesa da Dissertaccedilatildeo de Mestrado

em sessatildeo puacuteblica realizada a considerou

( ) Aprovado(a) ( ) Reprovado(a)

Examinador(a) Assinatura

Nome

Instituiccedilatildeo


Nome


Presidente Assinatura

Nome


ldquoHoje lembrando-me dela me vendo nos olhos dela sei que o

tinha de ser se deu Por que era ela por que era eurdquo

Chico Buarque

Agrave minha matildee Maria Bernardete meu anjo de luz Dedico

AGRADECIMENTO ESPECIAL

Agrave Fundaccedilatildeo de Amparo agrave Pesquisa do Estado de Satildeo Paulo (FAPESP) agrave Fundaccedilatildeo de

Amparo agrave Pesquisa do Estado da Bahia (FAPESB) e agrave Coordenaccedilatildeo de

Aperfeiccediloamento de Pessoal de Niacutevel Superior (Capes) pelo apoio financeiro sem o

qual este estudo natildeo seria realizado

AGRADECIMENTOS

Agrave Deus e todos meus espiacuteritos de luz em vida e desencarnados por tudo que me

representam por me permitirem cruzar essa jornada com sabedoria resignaccedilatildeo feacute e

discernimento e por me mostrarem que os ldquoSinais seguem o que creemrdquo Ofereccedilo

Agrave melhor matildee que Deus poderia me permitir nascer que me mostrou a vida e me

ensinou os verdadeiros valores de amor perdatildeo caridade humildade e perseveranccedila

aleacutem de me mostrar que as barreiras da vida satildeo transponiacuteveis e que na verdade

devem ser encaradas como fronteiras Obrigada por continuar olhando por mim e me

incentivando mesmo de outro plano espiritual Sem o seu amor tudo isso seria

impossiacutevel A ti dedico

Agrave meu pai Oriston meu exemplo de vida e companheiro fiel por entender o meu

propoacutesito e me apoiar mesmo nas dificuldades Vocecirc me ensina mais a cada dia sobre

a leveza da vida e em como me tornar uma pessoa melhor uma filha melhor obrigada

Agrave meu irmatildeo Breno e minha cunhada Ariela pelo apoio e por me permitir ser a tia mais

feliz e amada desse mundo

Aos meus sobrinhos queridos Lulu Lis e Miguel por me mostrarem a pureza da vida e

do amor em sua essecircncia mais pura

Agrave Evinha minha ldquomatildee adotivardquo desde os meus 2 dias de vida por todo amor e

dedicaccedilatildeo Minha gratidatildeo seraacute eterna

Ao professor Jorge Timenetsky meu querido orientador por ter aceitado me orientar

natildeo soacute no planejamento e execuccedilatildeo do trabalho mas tambeacutem na vida Minha sincera

gratidatildeo pela orientaccedilatildeo dedicaccedilatildeo e competecircncia profissional

Ao professor Lucas meu mentor na vida e no trabalho pai matildee amigo e eterno

orientador Obrigada Marques por ter acreditado que essa semente um dia iria brotar

Sem o seu apoio e incentivo eu realmente natildeo conseguiria Ter vocecirc em meu caminho

eacute uma honra e um previleacutegio

Agrave Aricelma um dos maiores presentes que pude receber em minha trajetoacuteria pelo

amor conselhos carinhos e abraccedilos Vocecirc foi fundamental para eu me manter firme no

propoacutesito

Ao departamento de endocrinologia do HC-FMUSP e aos professores Alfredo Halpern e

Marcio Mancinni por abrirem as portas para a realizaccedilatildeo das coletas e por acreditarem

no trabalho

Aos funcionaacuterios do departamento de endocrinologia da HC-FMUSP sem os quais

seria inviaacutevel a realizaccedilatildeo das coletas

Aos pacientes por participarem deste estudo e me permitir aprender mais a cada

coleta

Ao professor Djanilson pelo auxiacutelio nas anaacutelises estatiacutesticas e por me apresentar

Jerusa um verdadeiro anjo sem a qual seria inviaacutevel as anaacutelises de consumo

alimentar

Agrave amiga e companheira de trajetoacuteria Aline Teixeira pela preciosa colaboraccedilatildeo nas

anaacutelises estatiacutesticas e por ser minha dupla imbatiacutevel

Ao amigo-irmatildeo Filipe Bezerra pela preciosa contribuiccedilatildeo nas adaptaccedilotildees das

ilustraccedilotildees e pela honra de sua amizade

Ao melhor grupo de pesquisa que jaacute sonhei fazer parte pelos ensinamentos e amizade

incondicional Juntos somos uma famiacutelia obrigada meus amigos

Agrave todos os amigos que passaram pelo aptdeg 63 ao longo desses anos vocecircs foram

fundamentais em todos os momentos dessa jornada

Aos funcionaacuterios do ICB II indispensaacuteveis no meu dia a dia pelo apoio amizade cafeacutes

e carinho

Agrave meus amigos-irmatildeos e suas respectivas famiacutelias por me ensinarem que amizade eacute o

sentimento que imanta as almas suave expressatildeo do ser que necessita intercambiar as

forccedilas da emoccedilatildeo sob os estiacutemulos do entendimento fraternal inspiradora de coragem

e de abnegaccedilatildeo que enfloresce as almas abenccediloando-as com resistecircncias para as

lutas Amo vocecircs gratidatildeo

Agrave todos que cruzaram meu caminho nesta jornada e que trouxeram consigo

ensinamentos que me transformaram em algueacutem melhor que outrora o meu muito

obrigada

Soacute o conhecimento vivido

O conhecimento de dentro para fora

Aquele que natildeo eacute aprendido nos livros nem na fria observaccedilatildeo

do fino repoacuterter de faro infaliacutevel

Soacute aquele conhecimento que se viveu dia a dia minuto a minuto

no erro e no acerto ()

Possibilita a criaccedilatildeo

Jorge Amado

18

RESUMO

SANTOS V M Avaliaccedilatildeo da participaccedilatildeo dos micro-organismos da Classe Mollicutes na microbiota intestinal de mulheres eutroacuteficas e obesas 2015 147 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Microbiologia) ndash Instituto de Ciecircncias Biomeacutedicas Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo 2015

A obesidade possui causas multifatoriais sendo caracterizada como um excesso de gordura

corporal acumulada no tecido adiposo causando impactos agrave sauacutede Estudos quanto agrave interaccedilatildeo

geneacutetica do indiviacuteduo com o ambiente mostram que alguns indiviacuteduos satildeo mais propensos ao ganho

de peso do que os outros em ambientes similares Satildeo muitas as evidecircncias de que o metabolismo

da microbiota intestinal facilita a extraccedilatildeo de calorias da dieta ajudam a estocaacute-las no tecido

adiposo aleacutem de prover energia e nutrientes para o crescimento microbiano Nesse contexto a

ocorrecircncia e participaccedilatildeo dos Mollicutes na microbiota intestinal eacute praticamente desconhecida

sendo necessaacuterios portanto o desenvolvimento de estudos que avaliem as implicaccedilotildees e

relevacircncia desses microrganismos nas respostas adaptativas da microbiota intestinal humana

Deste modo o objetivo do presente estudo foi analisar a participaccedilatildeo dos micro-organismos da

Classe Mollicutes e dos Filos Firmicutes e Bacteroidetes na microbiota intestinal de mulheres

obesas e eutroacuteficas Para a realizaccedilatildeo do estudo a casuiacutestica foi de 20 mulheres diagnosticadas

com obesidade (IMCgt 30kgm2) e 20 mulheres em eutrofia (IMC entre 185 e 249 kgm2 Foram

obtidas amostras de fezes sangue Foi aplicado um questionaacuterio semiestruturado sobre fatores

relacionados com obesidade e possiacutevel associaccedilatildeo com microbiota intestinal e ambiente aleacutem de

avaliaccedilatildeo antropomeacutetrica atraveacutes de Bioimpedacircncia e questionaacuterio de frequecircncia alimentar

Desenvolveu-se um ensaio quantitativo por meio de TaqMan PCR para a detecccedilatildeo de Mollicutes

nas amostras de fezes A metodologia foi especiacutefica sensiacutevel reprodutiacutevel e gerou dados

quantitativos para a detecccedilatildeo desses microrganismos nas fezes humanas Constatou-se no

presente estudo que o grupo caso apresentou consumo energeacutetico inferior ao recomendado e que

ambos os grupos apresentaram consumo superior de gorduras saturadas e inferior de fibras Em

relaccedilatildeo a determinaccedilatildeo do estado nutricional os dois grupos se apresentaram acima da meacutedia

referecircncia indicando excesso de gordura corporal Na determinaccedilatildeo da microbiota intestinal

constatou-se uma diferenccedila estatisticamente significante entre as meacutedias do nuacutemero dos micro-

organismos da classe Mollicutes entre os grupos caso e controle Detectou-se uma associaccedilatildeo

positiva estatisticamente significante entre a presenccedila de Mollicutes e mulheres obesas (OR= 115

IC= 242-554) Na quantificaccedilatildeo da presenccedila dos Filos Firmicutes e Bacteroidetes e Bacteacuterias

totais na microbiota natildeo foram observadas diferenccedilas estatisticamente significantes quanto a sua

quantidade entre as mulheres do grupo caso e controle No entanto foi observada maior proporccedilatildeo

de FirmicutesBacteroidetes na microbiota intestinal das mulheres obesas em relaccedilatildeo agraves eutroacuteficas

do grupo controle Os resultados obtidos permitiram obter evidecircncias importantes da participaccedilatildeo

dos micro-organismos da classe Mollicutes As alteraccedilotildees da microbiota intestinal tambeacutem

contribuiacuteram na definiccedilatildeo de subconjuntos de indiviacuteduos com diferentes perfis de risco metaboacutelico e

a da heterogeneidade associada a fenoacutetipos humanos relacionados com a adiposidade

Palavras-chave Obesidade Microbiota intestinal Mollicutes qPCR

ABSTRACT

SANTOS V M Evaluation of Mollicutes microorganismrsquos participation in the gut microbiota of obese and normal weight women 2015 147 p Masters thesis (Microbiology) ndash Instituto de Ciecircncias Biomeacutedicas Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo 2015

Obesity has multifactorial causes and it is characterized as an excess of corporal fat accumulated in adipose tissue causing health impacts Studies on the genetic interaction of the individual with the environment shows that some individuals are more prone to weight gain than others in similar environments There are many evidences that the gut microbiota metabolism facilitates the harvest of energy derived from ingested nutrients it help to store them in adipose tissue and provide energy and nutrients for microbial growth In this context the occurrence and participation of Mollicutes in the gut microbiota is pratically unknown requiring the development of studies to evaluate the implications and relevance of these microorganisms in the adaptive responses of the human gut microbiota Thus the aim of this study was to analyze the participation of the Class Mollicutes and Firmicutes and Bacteroidetes phylos in the gut microbiota of obese and normal weight women For the study it was collected samples of 20 women diagnosed with obesity (BMIgt 30 kg m2) and 20 women of normal weight (BMI between 185 and 249 kg m2) it was collected stool samples blood semi-structured questionnaire on etiological factors predisposing and associated with obesity and possible association with gut microbiota and the environment and anthropometric measurements using bioelectrical impedance A quantitative assay was developed through of TaqMan PCR for the detection of Mollicutes in stool samples from patients with the methodology specific sensitive reproducible and quantitative for the detection of these microorganisms in human stools It was found in this study that the case group had a lower energy consumption than recommended and that both groups had a higher intake of saturated fats and less fiber For determining the nutritional status of the two groups presented above average reference indicating excess body fat Regarding the determination of the intestinal microbiota of the study population there was a statistically significant difference between the mean of microorganisms of Mollicutes class between the case and control groups And it was detected a statistically significant positive association between the presence of Mollicutes and obese women (OR = 115 CI = 242 to 554) Regarding the analysis about the participation of phylos Firmicutes and Bacteroidetes and total bacteria in the microbiota of the study population no statistically significant differences observed for the microbial amount among women of the case and control group However there was a higher proportion of Firmicutes Bacteroidetes the gut microbiota of obese women compared to the control group normal weight women Analysis of the results provide important evidence about the participation of almost unknown Mollicutes class in the gut microbiota of the population studied as well as changes and interactions in intestinal microbiota can define subsets of individuals with different metabolic risk profiles and thus contribute to investigation of the heterogeneity associated phenotypes related to adiposity

Keywords Obesity Gut microbiota Mollicutes qPCR

LISTA DE ABREVIATURAS SIGLAS E SIacuteMBOLOS

A ndash Adenina

AEAndash N-araquidonoil etanolamina anandamida

AFndash Niacutevel de atividade fiacutesica

AGCCndash Aacutecidos graxos de cadeia curta

AgRPndash Peptiacutedeo Relacionado ao Agouti

AIDSndash Siacutendrome da imunodeficiecircncia adquirida

AIndash Adequate Intake

AMPndash Adenosina monofosfato

AMPKndash Adenosina proteiacutena quinase

AMPsndash Peptiacutedeos antimicrobianos bacterianos

APC ndash Ceacutelula apresentadora de antiacutegeno

APRILLndash Ligante indutor de proliferaccedilatildeo

atm ndash Atmosfera

ATP ndash Adenosina tri-fosfato

C ndash Citosina

C+G ndash Conteuacutedo citosina e guanina

Cb-1ndash Receptores canabinoacuteides

CCKndash Colecistocinina

CH4ndash Metano

CHOsndash Carboidratos

ChREBP ndash Carbohydrate response element-binding protein

CO2 ndash Gaacutes carbocircnico

CPT1ndash Carnitina palmitoil transferase 1

Ct ndash Cycle Treshold (Sinal de fluorescecircncia que pode ser

detectado)

CV ndash Coeficiente de variaccedilatildeo

DAG lipasendash sn-1-diacilglicerol lipase seletiva

DCs ndash Ceacutelulas Dendriacuteticas

DNA ndash Aacutecido Desoxirribonucleico

DRI ndash Dietary References Intakes

DP ndash Desvio padratildeo

dNTP ndash Deoxinucleotiacutedeo trifosfato

EAR ndash Estimated Average Requirements

EDTA ndash Aacutecido Etilenodiamino Tetra-aceacutetico

ELISA ndash Enzyme-Linked Immunoabsorbent Assay

EIndash Enzimas citoplasmaacuteticas do sistema PTS

EPIndash Equipamento de Proteccedilatildeo Individual

EROndash Espeacutecies reativas de oxigecircnio

FAAHndash Fatty acid amide hydrolase

FABFndash Fator de ativaccedilatildeo de ceacutelulas β

FFARndash Free fatty acids receptors

FIAFndash Fasting Induced Adipocyte Factor

g ndash Gramas

G ndash Guanina

GERndash Gasto energeacutetico de repouso

GETndash Gasto energeacutetico total

GLP-1ndash Peptiacutedeo semelhante ao glucagon

GPRndash Receptor acoplado agrave proteiacutena G

H2ndash Hidrogecircnio

HDLndash Lipoproteiacutena de alta densidade

HPRndash Enzimas citoplasmaacuteticas do sistema PTS

IBGEndash Instituto brasileiro de Geografia e Estatiacutestica

IC ndash Intervalo de Confianccedila

IECsndash Ceacutelulas epiteliais intestinais)

IFN-α ndash Interferon α

IFN-β ndash Interferon β

IFN-γ ndash Interferon gama

IgA ndash Imunoglobulina A

IL ndash Interleucina

IL-10 ndash Interleucina 10

IL-1β ndash Interleucina 1Beta




IMC ndash Iacutendice de massa corporal

IPAQ ndash International Physical Activity Questionnaire

kgndash Quilogramas

Kpb ndash Kilopares de bases

LPLndash Lipase lipoproteacuteica

LPSndash Lipopolissacariacutedeos

MAGndash Monoacilglicerol lipase

MAMPsndash Padrotildees moleculares associados agrave micro-organismos

MC4R ndash Receptor da Melanocortina 4

MDa ndash Megadaltons

mg ndash Miligramas

min ndash Minuto

mL ndash Mililitro

mm ndash Miliacutemetro

mM ndash Milimolar

mRNAndash RNA mensageiro

MSndash Ministeacuterio da Sauacutede

NAPE-PLDndash N-acil fostatidiletanolamida-fosfolipase D seletiva

NF-KBndash Fator nuclear Kappa B

NK ndash Natural Killers

nm ndash Nanocircmetro

NODndash Receptores de domiacutenio de digomerizaccedilatildeo de ligaccedilatildeo de

nucleotiacutedeos

NPYndash Neuropeptiacutedeo Y

ordm C ndash Graus Celsius

OMS (WHO) ndash Organizaccedilatildeo Mundial de Sauacutede

OR ndash Odds Ratio

pb ndash Pares de base

PC1 ndash Proacute-hormocircnio Convertase 1

PCR ndash Reaccedilatildeo em Cadeia da Polimerase

PGC-1ndash Peroxisome proliferator-activated receptor-gamma

coactivator 1 alpha

PGCndash Porcentagem de gordura corporal

pH ndash Potencial de hidrogecircnio iocircnico

pmol ndash Picomol

POFndash Pesquisa dos Orccedilamentos Familiares

POMCndash Proacute-oacutepio melanocortina

PPARndash Receptor Ativado por Proliferadores de Peroxissoma

PPI ndash Perda de peso intencional

PPLO ndash Pleuropneumonia-like Organisms

PTSndash Sistema fosfotransferase

PYYndash Peptiacutedeo tirosina-tirosina

QFAndash Questionaacuterio de frequecircncia alimentar

qPCR ndash PCR quantitativa ou PCR em tempo real

r2 ndash R da curva

RA ndash Aacutecido retinoacuteico

RCQndash Relaccedilatildeo cintura-quadril

REGIIIβndash Proteiacutenas antimicrobianas intestinais

REGIIIγndash Proteiacutenas antimicrobianas intestinais

RNA ndash Aacutecido ribonucleacuteico

rpm ndash Rotaccedilotildees por minuto

rRNA ndash RNA ribossocircmico

s ndash Segundo

SNCndash Sistema nervoso central

SREBP-1ndash Liver sterol response element binding protein type-1

SOCS-1 ndash Proteiacutenas supressora da sinalizaccedilatildeo de citocina-1


T ndash Timina

TAndash Tecido adiposo

TCLE ndash Termo de Consentimento Livre e Esclarecido

TGF-β ndash Fator de crescimento tumoral-β

TGIndash Trato gastrintestinal

TLR ndash Toll-like receptor

TMndash Tecido muscular

TMBndash Taxa de metabolismo basal

TNF-α ndash Fator de Necrose Tumoral alfa

Tregndash Ceacutelulas T regulatoacuterias

tRNA ndash RNA transportador

TSLPndash Linfopoietina estromal tiacutemica

U ndash Unidade

UFC ndash Unidade Formadora de Colocircnia

UFCmicroL ndash Unidade Formadora de Colocircnia por microlitro

USDAndash United States Departament of Agriculture

VETndash Valor energeacutetico Total

X ndash Vezes

ZO-1ndash Zocircnula de oclusatildeo-1

α ndash Alfa

β ndash Beta

χ2 ndash Teste Qui-quadrado

ndash Por cento

microL ndash Microlitro

microm ndash Microcircmetros

microms ndash Microcircmetros por segundo

2-AGndash 2-araquidonoil glicerol

IacuteNDICE DE FIGURAS

Figura 1 ndash Fatores envolvidos no estabelecimento da microbiota humana ao longo da

vida 37

Figura 2 ndash Interaccedilatildeo funcional entre a microbiota intestinal humana e o sistema

imunoloacutegico 42

Figura 3 ndash Doenccedilas influenciadas pelo metabolismo microbiano

intestinal46

Figura 4 ndash Crescimento de M hominis em meio SP4 com a produccedilatildeo de colocircnia em

forma de ldquoovo fritordquo (aumento 40X) 55

Figura 5 ndash Comparaccedilatildeo entre as meacutedias de consumo de macronutrientes dos Grupos

Caso e Controle com a Faixa de Distribuiccedilatildeo Aceitaacutevel de macronutrientes (AMDRDRI)

e AI (Adequate Intake) para a faixa etaacuteria de 20 a 70 anos Satildeo Paulo SP 2013-

201484

Figura 6 ndash Comparaccedilatildeo entre as meacutedias de consumo das Vitaminas A C E e folato

dos Grupos Caso e Controle com a Faixa de Distribuiccedilatildeo Aceitaacutevel de macronutrientes

(AMDRDRI) e AI (Adequate Intake) para a faixa etaacuteria de 20 a 70 anos Satildeo Paulo

SP 2013-201485

Figura 7 ndash Comparaccedilatildeo entre as meacutedias de consumo das Vitaminas B1 B2 B6 B12

D Niacina e Aacutecido pantotecircnico dos Grupos Caso e Controle com a Faixa de

Distribuiccedilatildeo Aceitaacutevel de macronutrientes (AMDRDRI)e AI (Adequate Intake) para a

faixa etaacuteria de 20 a 70 anos Satildeo Paulo SP 2013-201486

Figura 8 ndash Comparaccedilatildeo entre as meacutedias de consumo de Sais Minerais dos Grupos

Caso e Controle com a Faixa de Distribuiccedilatildeo Aceitaacutevel de macronutrientes

(AMDRDRI)e AI (Adequate Intake) para a faixa etaacuteria de 20 a 70 anos Satildeo Paulo SP

2013-2014 87

Figura 9 ndash Comparaccedilatildeo entre as meacutedias de consumo de Sais Minerais e outros

nutrientes dos Grupos Caso e Controle com a Faixa de Distribuiccedilatildeo Aceitaacutevel de

macronutrientes (AMDRDRI)e AI (Adequate Intake) para a faixa etaacuteria de 20 a 70

anos Satildeo Paulo SP 2013-2014 87

Figura 10ndash Curva-padratildeo gerada a partir dos pontos de Ct obtidos com o graacutefico de

amplificaccedilatildeo de diluiccedilotildees seriadas do controle positivo Mycoplasma hominis calculado

pelo software StepOne 21 (Applied Biosystems Life Technologies Corporation) Satildeo

Paulo SP 2013-201490

Figura 11 ndash Quantificaccedilatildeo por qPCR de Mollicutes (UFCmicrol) a partir das amostras de

fezes nos grupos caso e controle Satildeo Paulo SP 2013-2014 92

Figura 12 ndash Quantificaccedilatildeo por qPCR de Firmicutes Bacteroidetes e Eubacterias

(UFCmicrol) a partir das amostras de fezes nos grupos caso e controle Satildeo Paulo SP

2013-201493

Figura 13 ndash Quantificaccedilatildeo de IL-1β IL-10 IL17-A e TNF-α (pgmL) no plasma

sanguiacuteneo por meio do ELISA nos grupos caso e controle da populaccedilatildeo estudada

Satildeo Paulo SP 2013-201496

IacuteNDICE DE QUADROS

Quadro 1 ndash Criteacuterios utilizados na estimativa da frequecircncia diaacuteria de consumo dos

alimentos incluiacutedos no Questionaacuterio de Frequecircncia Alimentar 61

Quadro 2 ndash Sequecircncias dos iniciadores utilizados para amplificaccedilatildeo do gene 16S rRNA

para Mollicutes 66


para Firmicutes Bacteroidetes e Bacteacuterias Totais69

IacuteNDICE DE TABELAS

Tabela 1 ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 1 Dados

socioeconocircmicos Satildeo Paulo SP 2013-201472

Tabela 2 ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 2 Histoacuteria

Familiar Satildeo Paulo SP 2013-201472


Cliacutenica Satildeo Paulo SP 2013-2014 73


Obsteacutetrica Satildeo Paulo SP 2013-2014 74


Ginecoloacutegica Satildeo Paulo SP 2013-2014 75

Tabela 6 ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 6

Consumo atual de tabaco Satildeo Paulo SP 2013-2014 75

Tabela 7ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 7

Consumo atual de aacutelcool Satildeo Paulo SP 2013-2014 76

Tabela 8 ndash Tabela de determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo

8 Atividade Fiacutesica (IPAQ versatildeo curta) Satildeo Paulo SP 2013-2014 76


9 Mudanccedilas recentes nos haacutebitos alimentares Satildeo Paulo SP 2013-2014 77

Tabela 10 ndash Participaccedilatildeo dos alimentos nos grupos meacutedias de consumo por dia dos

alimentos consumidos pela populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014 144

Tabela 11 ndash Definiccedilatildeo dos grupos alimentares derivados do Questionaacuterio de Frequecircncia

Alimentar (QFA) e percentual de consumo da populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP

2013-201479

Tabela 12 ndash Anaacutelise de consumo de energia e nutrientes da populaccedilatildeo estudada Satildeo

Paulo SP 2013-2014 81

Tabela 13 ndash Comparaccedilatildeo das variaacuteveis dieteacuteticas relacionadas agraves razotildees de ingestatildeo e

Valor Energeacutetico Total (VET) da populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014 83

Tabela 14 ndash Comparaccedilatildeo de variaacuteveis antropomeacutetricas da populaccedilatildeo estudada 89

Tabela 15 ndash Repetibilidade intra-ensaio e inter-ensaio da qPCR para Mollicutes Satildeo

Paulo SP 2013-2014 91

Tabela 16 ndash Comparaccedilatildeo entre os resultados obtidos no teste de sensibilidade pelas

teacutecnicas de PCR convencional e qPCR para detecccedilatildeo de Mollicutes Satildeo Paulo SP

2013-201491

Tabela 17 ndash Nuacutemero meacutedio de coacutepias e percentual dos grupos Mollicutes estudados

frente ao Filo Firmicutes na populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014 94

Tabela 18 ndash Nuacutemero meacutedio de coacutepias e percentual dos grupos de bacterianos

estudados frente agraves bacteacuterias totais na populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-

201495

Tabela 19 ndash Proporccedilatildeo de Firmicutes em relaccedilatildeo agrave Bacteroidetes na populaccedilatildeo

estudada Satildeo Paulo SP 2013-201495

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 26

2 REFERENCIAL TEOacuteRICO 29

21 Obesidade 29

22 Microbiota Intestinal 31

221 Microbiota intestinal uma peccedila chave na sauacutede e na doenccedila31

222 Colonizaccedilatildeo e composiccedilatildeo da microbiota intestinal32

223 Fatores que influenciam a composiccedilatildeo da microbiota intestinal 34

2231 Fases da vida 34

2232 Tipo de parto 34

2233 Tipo de aleitamento 35

2234 Uso de antibioacutetico 35

2235 Dieta 36

224 Microbiota intestinal e a fisiologia do hospedeiro 38

2241 Nutriccedilatildeo e Metabolismo 38

2242 Proteccedilatildeo 39

22421 Competiccedilatildeo direta de nutrientes 39

22422 Imunomodulaccedilatildeo 40

2243 Funccedilatildeo Troacutefica 43

2244 Regulaccedilatildeo da adiposidade 43

225 Microbiota intestinal e disbiose44

226 Microbiota Intestinal e obesidade47

227 Mecanismos pelos quais a microbiota intestinal contribui para a obesidade49

2271 Extraccedilatildeo de energia adicional da dieta49

2272 Induccedilatildeo da inflamaccedilatildeo por meio da alteraccedilatildeo da permeabilidade intestinal51

23 MOLLICUTES 52

231 Caracteriacutesticas Gerais dos Mollicutes52

232 Mollicutes Microbiota Intestinal e Obesidade56

3 OBJETIVOS 58

31 Objetivo geral 58

32 Objetivos especiacuteficos 58

4 MATERIAL E MEacuteTODOS 59

41 Protocolo do estudo 59

42 Casuiacutestica 59

43 Delineamento experimental 60

44 Determinaccedilatildeo do estado nutricional 60

441 Avaliaccedilatildeo qualitativa do consumo alimentar 60

442 Avaliaccedilatildeo antropomeacutetrica do estado nutricional 62

4421 Anaacutelise da Composiccedilatildeo Corporal pelo Meacutetodo de Bioimpedacircncia 63

45 Coleta das amostras cliacutenicas 64

46 Determinaccedilatildeo da microbiota intestinal 65

461 Padronizaccedilatildeo de reaccedilatildeo de PCR quantitativo (qPCR) por meio de TaqMan para a detecccedilatildeo de

Mollicutes 65

4611 Cepas bacterianas e condiccedilotildees de cultura 65

4612 Desenvolvimento de primers e sonda para a detecccedilatildeo de Mollicutes pela PCR quantitativa 65

4613 PCR quantitativa 66

4614 Especificidade da qPCR e repetibilidade intra e inter-ensaios 67

462 Reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) convencional 68

463 Detecccedilatildeo de micro-organismos dos filos Firmicutes e Bacteroidetes e bacteacuterias totais (Eubacterias)

por PCR em tempo Real (qPCR) 68

47 Dosagem de citocinas do soro sanguiacuteneo 69

48 Anaacutelises Estatiacutesticas 70

5 RESULTADOS 71

51 Perfil da populaccedilatildeo estudada 71






Mollicutes 90

532 Detecccedilatildeo de micro-organismos dos filos Firmicutes e Bacteroidetes aleacutem de bacteacuterias totais

(Eubacterias) por PCR em tempo Real (qPCR) 93


6 DISCUSSAtildeO 97

7 CONCLUSOtildeES 107

REFEREcircNCIAS 108

APEcircNDICE A ndash TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO 127

APEcircNDICE B ndash QUESTIONAacuteRIO 131

APEcircNDICE C- TABELA 10 143

26

1 INTRODUCcedilAtildeO

A obesidade eacute definida pela Organizaccedilatildeo Mundial de Sauacutede (WHO 2002)

como o excesso de gordura corporal acumulada no tecido adiposo com implicaccedilotildees

para a sauacutede Algumas estimativas globais recentes indicam que em 2013 mais de

600 milhotildees da populaccedilatildeo mundial adulta (com 18 anos ou mais) eram obesos com

11 dos homens e 15 das mulheres (MARIE 2014) No Brasil em 2014 estimou-

se que na populaccedilatildeo adulta (20 anos ou mais) 105 milhotildees satildeo obesos com 124

dos homens e 169 das mulheres (IBGE 2014) Nesse contexto atualmente a

obesidade estaacute entre os maiores problemas de sauacutede puacuteblica e distuacuterbio da nutriccedilatildeo

A obesidade eacute considerada atualmente uma epidemia (BACON APHRAMOR 2011

OLSHANSKY et al 2005) As alteraccedilotildees nos padrotildees dieteacuteticos e nutricionais da

populaccedilatildeo brasileira tecircm sido analisadas no processo da transiccedilatildeo nutricional (KAC

VELAacuteSQUEZ-MELEacuteNDEZ 2003)

Neste processo verificou-se que ocorreu inversatildeo nos padrotildees de distribuiccedilatildeo

das alteraccedilotildees nutricionais A alta incidecircncia de sobrepeso e obesidade na

populaccedilatildeo implica no aumento da ocorrecircncia de doenccedilas cardiovasculares cacircncer

diabetes mellitus e hipertensatildeo arterial (AMUNA ZOTOR 2008 ARAI et al 2009

DUNCAN et al 1993 GIGANTE et al 1997 JIRTLE SKINNER 2007 KAC

VELAacuteSQUEZ-MELEacuteNDEZ 2003 LESSA 1998 MONDINI MONTEIRO 1998

POPKIN et al 2006) Na obesidade ocorre basicamente o balanccedilo energeacutetico

positivo cuja patogecircnese natildeo estaacute completamente elucidada estando associada a

fatores comportamentais culturais e bioloacutegicos A regulaccedilatildeo do balanccedilo energeacutetico e

do estoque de energia corporal satildeo influenciados pela susceptibilidade individual e

seu contexto social e econocircmico demograacutefico cultural educacional ambiental e

familiar aleacutem de fatores hormonais e de heranccedila geneacutetica (GORAN 2000 VEIGA

SICHIERI 2006)

O mapa gecircnico da obesidade humana estaacute constantemente em mudanccedila pela

identificaccedilatildeo de novos genes e regiotildees cromossocircmicas associadas com a

obesidade As alteraccedilotildees do comportamento alimentar e os haacutebitos sedentaacuterios

indicam ser os principais fatores de interferecircncia nos genes de susceptibilidade a

obesidade e consequentemente no aumento da obesidade mundial Eacute provaacutevel

27

portanto que a obesidade ocorra como a resultante de fatores poligecircnicos

complexos e um ambiente obesogecircnico (dieta e sedentarismo) (BAJZER SEELEY

2006 BOUCHARD 2000 CANI et al 2007 DERAM VILLARES 2009 DUNCAN et

al 2008 TURNBAUGH et al 2009)

A captaccedilatildeo de energia pode justificar em parte o metabolismo de alguns

pacientes obesos que natildeo apresentam ingestatildeo alimentar excessiva sugerindo que

a microbiota intestinal pode predispor o indiviacuteduo agrave obesidade (BACKHED 2004)

Alguns estudos tecircm demonstrado que o desenvolvimento da obesidade em

humanos pode ser determinado pelas proporccedilotildees relativas de dois filos principais de

bacteacuterias da microbiota intestinal humana Bacteroidetes e Firmicutes que diferem

consideravelmente entre indiviacuteduos eutroacuteficos e obesos (DUNCAN et al 2008 LEY

et al 2005 2006 TENNYSON FRIEDMAN 2008) Estudos comparativos

mostraram que ratos obesos possuem significativamente niacuteveis mais baixos de

micro-organismos do Filo Bacteroidetes e niacuteveis mais elevados de Firmicutes Este

uacuteltimo estaacute associado com um aumento de absorccedilatildeo de energia da dieta

(BACKHED 2004 CANI DELZENNE 2009 DIBAISE et al 2012 LEY et al 2005

RAOULT 2008 TURNBAUGH et al 2006) Turnbaugh et al (2008) obtiveram

resultados semelhantes em ratos com obesidade induzida por dieta Curiosamente

embora as alteraccedilotildees nos niacuteveis de Firmicutes e Bacteroidetes foram observadas

nos camundongos obesos por dieta induzida a diferenccedila foi relacionada

principalmente as bacteacuterias da classe dos Mollicutes

As espeacutecies do Filo Bacteriodetes pertencem agrave microbiota intestinal humana e

animal Estas bacteacuterias satildeo bacilos ou cocobacilos gram-negativos anaeroacutebios

obrigatoacuterios heterotroacuteficos mesoacutefilos sacaroliacuteticos natildeo formadores de esporos

imoacuteveis Satildeo resistentes agrave bile natildeo produzem pigmentos Tecircm como principais

produtos finais do metabolismo da glicose os aacutecidos succiacutenico e aceacutetico

(JOHANSSON PETTERSON 2002 MANILOFF 2002) O Filo Firmicutes

encontrado em maior proporccedilatildeo no trato gastrintestinal humano satildeo micro-

organismos Gram positivos na maioria Na classificaccedilatildeo atual o filo divide-se

tipicamente em trecircs classes Bacilli - aeroacutebios facultativos ou obrigatoacuterios Clostridia -

organismos anaeroacutebios e Erysipelotrichia Mollicutes eacute a uacutenica classe do filo

Tenericutes anteriormente classificada dentro do filo Firmicutes (BERGEYrsquos 2009

2010 LUDWIG KLENK 2001 RAZIN et al 1998)

28

Os estudos das interaccedilotildees de Bacteroidetes e Firmicutes na microbiota

intestinal e sua associaccedilatildeo com a obesidade tecircm aumentado No entanto a

participaccedilatildeo dos Mollicutes eacute praticamente desconhecida O gecircnero Mycoplasma foi

introduzido em 1929 para designar micro-organismos atualmente classificados

como membros da famiacutelia Mycoplasmataceae ordem Mycoplasmatales da classe

dos Mollicutes (Mollis = mole cuacutetis = pele) (RAZIN 1992) Os Mollicutes possuem

um genoma pequeno sendo que algumas espeacutecies apresentam o menor genoma

entre os procariotos e em consequecircncia apresentam metabolismo reduzido

(MILES NICHOLAS 1998 NEIMARK 1986 RAZIN TULLY 1983) Distinguem-se

de outros procariotos pela simplicidade celular genoma e metabolismo reduzido A

ausecircncia natural da parede celular confere resistecircncia aos antibioacuteticos beta-

lactamicos Incluem-se as sulfas e rimfapicina respectivamente pela ausecircncia da

siacutentese de aacutecido foacutelico e possuir uma polimerase diferente Com aproximadamente

200 espeacutecies estes micro-organismos infectam humanos animais insetos e

plantas Considerados em geral como oportunistas por excelecircncia colonizam

ldquopreferencialmenterdquo a superfiacutecie de mucosas de mamiacuteferos mas tecircm potencial de

causar infecccedilotildees sistecircmicas dependendo do hospedeiro (DYBVIG 1990 RAZIN

YOGEV NAOT 1998)

29

2 REFERENCIAL TEOacuteRICO

21 Obesidade

A prevalecircncia da obesidade tem crescido rapidamente e representa um dos

principais desafios de sauacutede puacuteblica neste seacuteculo A Organizaccedilatildeo Mundial da Sauacutede

(OMS) estima que pelo menos 28 milhotildees de pessoas morrem em decorrecircncia da

obesidade (IMC ge 30 kgm2) A prevalecircncia mundial quase duplicou entre 1980 e

2008 com uma transiccedilatildeo de 5 dos homens e 8 das mulheres em 1980 para

10 dos homens e 14 das mulheres (WHO 2014) A obesidade pode ser definida

como o grau de armazenamento de gordura no organismo associada ao ganho

excessivo de peso corporal total Eacute portanto considerada uma doenccedila crocircnica

podendo acarretar em consequecircncias para a sauacutede devido agraves suas relaccedilotildees com

diversas complicaccedilotildees metaboacutelicas (MS 2006)

A pesquisa dos Orccedilamentos Familiares (POF IBGE 2010) nos uacuteltimos seis

anos indicou que a frequecircncia de pessoas com excesso de peso aumentou em mais

de um ponto percentual ao ano Desta maneira em dez anos o excesso de peso

poderia alcanccedilar dois terccedilos da populaccedilatildeo adulta do Brasil magnitude idecircntica agrave

encontrada na populaccedilatildeo dos Estados Unidos Estimativas de inqueacuteritos nacionais e

internacionais das uacuteltimas deacutecadas indicam que a obesidade em 2025 alcance 40

da populaccedilatildeo nos EUA 30 na Inglaterra e 20 no Brasil (HU 2008)

O excesso de peso e a obesidade na populaccedilatildeo expressam essencialmente

o desequiliacutebrio entre ingestatildeo e utilizaccedilatildeo de calorias A justificativa estaacute na

mudanccedila dos padrotildees de alimentaccedilatildeo e de atividade fiacutesica Em 2002-2003 revelou-

se tendecircncia crescente de substituiccedilatildeo de alimentos baacutesicos e tradicionais na dieta

brasileira (como arroz feijatildeo e hortaliccedilas) por bebidas e alimentos industrializados

(como refrigerantes biscoitos carnes processadas e comida pronta) Caracteriza-se

portanto o aumento na densidade energeacutetica das refeiccedilotildees e padrotildees de

alimentaccedilatildeo capazes de comprometer a auto-regulaccedilatildeo do balanccedilo energeacutetico dos

indiviacuteduos e aumentar o risco de obesidade (LEVY-COSTA et al 2005)

Aleacutem disto em consequecircncia agrave obesidade tem sido observado aumento

consideraacutevel da prevalecircncia de doenccedilas crocircnicas natildeo transmissiacuteveis como doenccedilas

cardiovasculares cacircncer diabetes mellitus e hipertensatildeo arterial Pelo longo tempo

30

de evoluccedilatildeo destas doenccedilas ocorrem lesotildees irreversiacuteveis de intensidade variada

resultando no aumento de incapacidade ou oacutebito vecircm ocupando um maior espaccedilo

no perfil de morbimortalidade de populaccedilotildees latino americanas (DUNCAN et al 1993

LESSA 1998) Em importante estudo entre 1958 e 1951 envolvendo cinco mil

indiviacuteduos de 35 a 75 anos por periacuteodo de ateacute 44 anos a obesidade (IMC gt 30Kgm2)

foi independentemente associada ao maior risco para hipertensatildeo (mulheres

RR=26 IC95 22-31) diabetes tipo 2 (mulheres RR=14 IC95 1-18) e doenccedila

cardiovascular mulheres RR=14 IC95 11-17) (WILSON et al 2002) Os ganhos

na diminuiccedilatildeo das taxas de tabagismo ao longo do seacuteculo XX e as expectativas no

aumento de tempo de vida podem ser neutralizadas pelas prespectivas do aumento

da obesidade (STEWART et al 2009) Especialmente em paiacuteses em

desenvolvimento como o Brasil o custo anual para o Sistema Uacutenico de Sauacutede para

atender as doenccedilas relacionadas ao sobrepeso eacute estimado em US$ 20152102171

(BAHIA et al 2012)

O ganho de peso ocorre pela menor utilizaccedilatildeo de gordura como fonte de

energia do que oxidar carboidratos elevando o coeficiente respiratoacuterio obtido

atraveacutes da razatildeo entre a produccedilatildeo de gaacutes carbocircnico resultante da oxidaccedilatildeo de

carboidratos e o consumo de oxigecircnio determinado atraveacutes de calorimetria (MARRA

et al 2004) Seis lesotildees monogecircnicas principais produzem desordens endoacutecrinas

que resultam na obesidade Deficiecircncia congecircnita de Leptina defeitos no receptor

de Leptina deficiecircncia no proacute-hormocircnio convertase 1(PC1) deficiecircncia em proacute-oacutepio-

melanocortina (POMC) defeitos no receptor da Melanocortina 4 (MC4R) e defeitos

no Receptor Ativado por Proliferadores de Peroxissoma (PPAR) O controle da

ingestatildeo alimentar a curto prazo eacute controlado principalmente por vias de

sinalizaccedilatildeo que emanam do trato gastrintestinal incluindo o peptiacutedeo orexiacutegenico

grelina que ativa os sinais de fome e os peptiacutedeos anorexigecircnicos

colecistoquinina (CCK) peptiacutedeo similar ao glucagon 1- glucagon-like peptide 1

(GLP-1) e peptiacutedeo tirosina-tirosina (PYY) que geram sinais de saciedade Para o

controle da ingestatildeo agrave longo prazo parecem ser primordiais os sinais que emanam a

partir do tecido adiposo (leptina) e pacircncreas (insulina) liberados em resposta agrave

ingestatildeo de alimentos e depoacutesitos de gordura corporal (KONTUREK et al 2004)

Tem sido amplamente documentado na literatura o reganho de peso

sucessivo agraves dietas pois sabe-se que cerca de um a dois terccedilos do peso perdido

31

tendem a ser recuperados no ano seguinte sendo a recuperaccedilatildeo quase total ao final

de cinco anos (GOODRICK et al 1996) A partir disso tem sido questionado o

efeito das dietas restritivas sobre a biologia humana e sua contribuiccedilatildeo para tornar a

obesidade uma condiccedilatildeo que possivelmente se autoperpetua e se agrava de

maneira progressiva Diversos trabalhos mostram que a ciclagem de peso (ou efeito

sanfona) pode aumentar a suscetibilidade para o ganho de massa corporal no

futuro (KORKEILA et al1999 NEUMARK-SZTAINER et al 2006 2007)

22 Microbiota Intestinal

221 Microbiota intestinal uma peccedila chave na sauacutede e na doenccedila

Nas deacutecadas passadas acreditava-se que todos os micro-organismos da

microbiota possuiacuteam potencial de causar infecccedilotildees O estudo da interaccedilatildeo entre

micro-organismos e o desenvolvimento de enfermidades eacute um tema crescente na

justificativa de certas doenccedilas (DETHLEFSEN et al 2007) O termo microbiota

refere-se ao conjunto de micro-organismos no hospedeiro sadio e o termo

microbioma eacute o conjunto de genes microbianos (BACKHED 2004 LANGA 2006

VRIEZE 2010) O estudo da diversidade e distribuiccedilatildeo da microbiota e sua interaccedilatildeo

com hospedeiro tem contribuiacutedo na justificativa de algumas doenccedilas (LEY et al

2008 VENTURA et al 2008) A microbiota do trato gastrintestinal humano eacute o

ecossistema mais complexo constituiacutedo por diversas espeacutecies de micro-organismos

As bacteacuterias constituem o grupo com maior diversidade e abundacircncia Assim como o

genoma de cada indiviacuteduo eacute uma impressatildeo digital a composiccedilatildeo da microbiota

intestinal tambeacutem parece ser (LEY et al 2006 RAJILIĆ-STOJANOVIĆ SMIDT DE

VOS 2007 XU GORDON 2003)

O comensalismo e a simbiose bacteriana refletem uma ldquocorrida dinacircmicardquo

que se inicia no encontro da bacteacuteria com o hospedeiro vulneraacutevel e prossegue com

respostas adaptativas entre os dois organismos Em alguns casos a coevoluccedilatildeo

atenua a virulecircncia e conduz a uma coexistecircncia paciacutefica com ou sem franca

codependecircncia Em outras circunstacircncias a relaccedilatildeo patogecircnica eacute mantida por meio

da superaccedilatildeo dos mecanismos de defesas inatas ou adaptativas do hospedeiro

pelas bacteacuterias (GORDON HOOPER 2001) Estima-se que a microbiota intestinal eacute

composta por mais de 1000 espeacutecies bacterianas O nuacutemero de ceacutelulas microbianas

32

no luacutemen intestinal eacute de 10 vezes maior que as ceacutelulas eucarioacuteticas do organismo

representando em torno de 1 kg de peso corporal (SCARPELLINI 2010) Aleacutem

disso o microbioma eacute 100 vezes maior que o genoma humano podendo-se assim

considerar a microbiota intestinal como um oacutergatildeo virtual exteriorizado

metabolicamente adaptaacutevel e flexiacutevel aleacutem de rapidamente renovaacutevel o que

contribui para metabolismo e desempenha importante papel na obtenccedilatildeo de energia

da dieta (FRANCcedilOIS-PIERRE 2009)

A microbiota intestinal eacute crucial para a vida humana com impacto na fisiologia

e na nutriccedilatildeo do hospedeiro (HATTORI TAYLOR 2008) Considera-se que

humanos satildeo ldquosuperorganismosrdquo com metabolismo mediado pelos atributos

humanos e microbianos (GILL et al 2006) O conceito de ldquosuperorganismordquo

representa importante mudanccedila de paradigma no entendimento da biologia humana

e pode ter impacto expressivo na prevenccedilatildeo e na terapia de doenccedilas no futuro

(NICHOLSON 2006)

222 Colonizaccedilatildeo e composiccedilatildeo da microbiota intestinal

O trato gastrintestinal fetal eacute considerado praticamente esteacuteril No nascimento

eacute rapidamente colonizado por micro-organismos da matildee e do ambiente hospitalar

(PALMER et al 2007) Sugere-se que de trecircs a quatro semanas apoacutes o nascimento

a microbiota intestinal comeccedila a se estabilizar aumentando gradualmente a sua

complexidade Apoacutes um ano assemelha-se agrave microbiota de um adulto (MACKIE et

al 1999 PALMER et al 2007 SCHEacuteLE et al 2013) Contrapondo-se agrave percepccedilatildeo

da ausecircncia de micro-organismos no feto demonstrou-se a presenccedila de DNA

bacteriano na placenta e no cordatildeo umbilical (JIMEacuteNEZ et al 2005 SATOKARI et

al 2009) Aleacutem disso a identificaccedilatildeo de algumas bacteacuterias no mecocircnio explica a

origem dos primeiros micro-organismos colonizadores do intestino antes mesmo do

nascimento possivelmente como um mecanismo adaptativo para o desenvolvimento

do intestino fetal fora do organismo materno (JIMEacuteNEZ et al 2008)

Os micro-organismos presentes no trato gastrintestinal podem ser autoacutectones

ou aloacutectones Linhagens autoacutectones tecircm longa associaccedilatildeo com o hospedeiro e

formam uma populaccedilatildeo estaacutevel de tamanho caracteriacutestico em uma regiatildeo do

intestino Os organismos aloacutectones satildeo adquiridos principalmente atraveacutes dos

alimentos ingeridos e do ecossistema oral Eacute difiacutecil determinar se um organismo eacute

33

um autoacutectone verdadeiro Contudo as bacteacuterias aloacutectones natildeo persistem no

ecossistema e satildeo detectaacuteveis apenas por um periacuteodo limitado (GORDON

HOOPER 2001 LEY et al 2006 WALTER 2008)

Os micro-organismos satildeo encontrados em todo o trato gastrintestinal no

entanto as mudanccedilas nas condiccedilotildees fisioloacutegicas implicam diferenccedilas na

composiccedilatildeo de micro-organismos nos diversos locais No trato gastrintestinal

inferior o fluxo do conteuacutedo torna-se mais lento e o ambiente conteacutem menos

substacircncias antimicrobianas favorecendo a colonizaccedilatildeo microbiana e o

estabelecimento de maior densidade de micro-organismos (QIN et al 2010

ZOETENDAL et al 2006) A partir da cavidade oral ao acircnus tem sido observado o

aumento da densidade microbiana no jejuno iacuteleo e no intestino grosso em

comparaccedilatildeo com o estocircmago e duodeno O coacutelon refere-se a um ecossistema

complexo com ampla diversidade microbiana e presenccedila de diversos gecircneros

bacterianos O pH neutro e a abundacircncia relativa de nutrientes como os

carboidratos natildeo digeriacuteveis e outros componentes alimentares que escapam do

processo digestivo tornam o coacutelon um ambiente favoraacutevel agrave proliferaccedilatildeo microbiana

O coacutelon eacute a regiatildeo do TGI que apresenta maior densidade microbiana podendo

alcanccedilar 1014UFCg-1 Dados tem mostrado que cada indiviacuteduo carrega mais de

1000 filotipos que representam mais de 7000 linhagens (AZAD et al 2013

ECKBURG et al 2005 FRANK et al 2007 HOLZAPFEL 2006 KLEEREBEZEM

VAUGHAN 2009 LEY et al 2008 QUIGLEY 2013 ZOETENDAL et al 2006)

Aproximadamente 99 dos genes identificados por metagenoma do intestino

humano satildeo bacterianos Na maioria dos indiviacuteduos cerca de 90 dos filos satildeo

Firmicutes e Bacteroidetes seguidos por Actinobacterias (famiacutelia Bifidobacteriaceae)

e Proteobacterias (famiacutelia Enterobacteriaceae) O filo mais abundante refere-se ao

Firmicutes apresentando como principais integrantes as classes Bacilli Clostridia e

Molicutes e dos Bacteroidetes as classes Bacteroides Flavobacteria e

Sphingobacterias Os filos Actinobacterias e Proteobacterias se apresentam em

menor proporccedilatildeo (ARUMUGAM et al 2011 DE FILIPPO et al 2010

HUTTENHOWER et al 2012 QIN et al 2010 QUIGLEY 2013 VILLANUEVA-

MILLAacuteN et al 2015 VRIEZE 2010 ZOETENDAL et al 2006)

34

223 Fatores que influenciam a composiccedilatildeo da microbiota intestinal

A microbiota do TGI humano eacute uma comunidade complexa cuja composiccedilatildeo

eacute inconstante diferindo inter e intra-individualmente definida por uma seacuterie de

fatores como geneacutetica do hospedeiro alimentaccedilatildeo sucessatildeo bacteriana funccedilatildeo

imune e estado de sauacutede (LEY et al 2008 EVERARD et al 2011 2014)

2231 Fases da vida

A diversidade bacteriana no intestino infantil eacute inicialmente muito baixa ateacute os

dois anos ao contraacuterio da microbiota de adulto (GAREAU et al 2010 HAJELA et al

2015) A baixa diversidade de bacteacuterias na primeira infacircncia inibe a maturaccedilatildeo

regular da microbiota intestinal e maturaccedilatildeo tardia da mucosa do sistema

imunoloacutegico implicando em riscos do aumento da resposta imune assim como

doenccedilas aleacutergicas Neste contexto envolve o desenvolvimento da toleracircncia oral e a

susceptibilidade da crianccedila a alergias e inflamaccedilatildeo A microbiota sofre portanto

mudanccedilas substanciais nos extremos da vida essas ramificaccedilotildees ainda estatildeo sendo

exploradas (AURELI et al 2011 HAJELA et al 2015 SHERIDAN et al 2014

SMITH et al 2013)

2232 Tipo de parto

A microbiota maternal eacute uma fonte de micro-organismos para a colonizaccedilatildeo do

TGI do receacutem-nascido As bacteacuterias residentes no canal vaginal e na regiatildeo perineal

tambeacutem ganham acesso ao TGI de receacutem-nascidos (BRY et al 1996 MACKIE et

al 1999) Ocorrem diferenccedilas entre o microbioma de um bebecirc receacutem-nascido por

parto normal em comparaccedilatildeo ao bebecirc receacutem-nascido por parto cesaacuterea No parto

vaginal o bebecirc eacute colonizado por bacteacuterias vaginais e fecais maternas cujas

composiccedilatildeo microbiana reflete a microbiota intestinal materna composta

predominantemente pelos gecircneros Lactobacillus Prevotella Atopobium e Sneathia

As amostras fecais de bebecircs nascidos de parto cesariana apresentaram gecircneros

tiacutepicos de microbiota da pele e do ambiente hospitalar predominantemente

Staphylococcus e C difficile Estes bebecircs tambeacutem apresentaram niacuteveis

significativamente mais baixos de Bifidobacterium e diversidade bacteriana menor do

que os bebecircs nascidos por parto normal Estas diferenccedilas podem justificar o

aumento do risco de doenccedilas especiacuteficas em bebecircs receacutem-nascidos por parto

35

cesariana agrave longo prazo (AZAD et al 2013 BELLO et al 2010 COLLADO et al

2012 DOMINGUEZ- PENDERS et al 2006 PRINCE et al 2014)

As diferenccedilas no processo de colonizaccedilatildeo intestinal decorrentes do tipo de

parto poderiam refletir-se no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico visto que os

micro-organismos gastrintestinais influenciam esse processo por meio do envio de

importantes sinais regulatoacuterios necessaacuterios para o desenvolvimento da adequada

toleracircncia ao ambiente (BIASUCCI et al 2008 CARDWELL et al 2008

DOMINGUEZ-BELLO et al 2010 KOENIG et al 2011 MORELLI et al 2008

RENZ-POLSTER et al 2005)

2233 Tipo de aleitamento

O leite materno humano eacute considerado um dos principais fatores da iniciaccedilatildeo e

no desenvolvimento da microbiota do neonato uma vez que conteacutem substratos

(prebioacuteticos) para estimular o crescimento bacteriano e tambeacutem eacute fonte de micro-

organismos Estima-se que o consumo de 800 ml de leite materno por dia

proporcione 1 x 105 a 1 x 107 micro-organismos comensais durante a amamentaccedilatildeo

(MARTIN et al 2004) Desta maneira a contagem de Bifidobacterium aumenta

drasticamente Lactobacillus e Bacteroides aumentam em menor proporccedilatildeo e

enterobacteacuterias e enterococos diminuem Espeacutecies de Bifidobacterium

correspondem de 80 a 90 do total dos componentes da microbiota fecal infantil

presentes em bebecircs amamentados por leite materno Jaacute em receacutem-nascidos

alimentados com foacutermulas infantis a microbiota tem demonstrado ser muito mais

complexa sendo composta por Bifidobacterium Bacteroides Clostridium e

Streptococcus (ADLERBERTH WOLD 2009 CUMMINS THOMPSON 1997 DE

SANTA BARBARA et al 2003 DONOVAN ODIE 1994 DONOVAN 2006 MACKIE

et al 1999 MARQUES et al 2010 MCCRACKEN LORENZ 2001 PALMER

2011 POROYKO et al 2010)

2234 Uso de antibioacutetico

A eventual antibioticoterapia interfere tambeacutem no equiliacutebrio da microbiota A

disbiose (alteraccedilatildeo da microbiota) depende de fatores como espectro de accedilatildeo da

droga idade e dieta do indiviacuteduo dosagem e duraccedilatildeo do tratamento via de

administraccedilatildeo propriedades farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas aleacutem de grau de

36

resistecircncia da comunidade (LEY 2000 SULLIVAN et al 2001) A seleccedilatildeo de

bacteacuterias resistentes a drogas pela antibioticoterapia eacute um problema mundial Os

genes de resistecircncia passam para diversos gecircneros bacterianos no intestino A

aquisiccedilatildeo de genes de resistecircncia confere benefiacutecios a determinada espeacutecie

bacteriana diante da pressatildeo seletiva exercida pelo antibioacutetico Quando essa

pressatildeo seletiva eacute suspensa a cepa resistente apresenta menor desempenho em

comparaccedilatildeo com a espeacutecie susceptiacutevel No entanto esse clone menos competitivo

pode compensar essa perda de desempenho pela aquisiccedilatildeo de mutaccedilotildees

compensatoacuterias (JERNBERG et al 2010) No intestino os antibioacuteticos aleacutem de

selecionarem bacteacuterias resistentes tambeacutem aumentam o nuacutemero de transferecircncias

do pool de genes de ceacutelulas resistentes (DETHJEFSEN et al 2008 KARAMI et al

2007 YANG et al 2009)

2235 Dieta

Muitos estudos tem sido realizados no intuito de compreender a relaccedilatildeo entre o

consumo alimentar e a composiccedilatildeo da microbiota intestinal principalmente no

sentido de uma dieta ocidentalizada baseada em alimentos ricos em carboidratos

simples lipiacutedios e proteiacutenas de origem animal sal e poucos alimentos in natura

como frutas e hortaliccedilas ao comparar se com a dietas dos nossos antepassados

caracterizada pelo consumo de grandes quantidades de amido fibras e

polissacaacuteridos vegetais aleacutem de pequenas quantidades de gordura e proteiacutena

animal Em modelos murinos de obesidade induzida por padratildeo de dieta ocidental

no qual animais geneticamente idecircnticos que herdaram microbiotas semelhantes a

relaccedilatildeo entre dieta e representantes microbianos eacute dinacircmica e ajustaacutevel impactando

a capacidade da microbiota de promover a adiposidade no hospedeiro (CARMODY

et al 2015 DAVID et al 2014 DE FILIPPO et al 2010 FLEISSNER et al 2010

HILDEBRANDT et al 2009 LEY et al 2008 MENDONCcedilA ANJOS 2004 WALKER

et al 2011 WONG et al 2012 WU et al 2011)

Uma vez que a microbiota foi estabelecida nestes primeiros anos observa-se

um aumento na composiccedilatildeo microbiana tanto na diversidade quanto na riqueza

atingindo a mais alta complexidade em adultos com vaacuterias centenas de filotipos e

niacuteveis de espeacutecie Cada indiviacuteduo humano atinge um cliacutemax de composiccedilatildeo

homeostaacutetico o que provavelmente permanece relativamente estaacutevel durante a

37

maior parte da vida de um adulto saudaacutevel Nas fases tardias da vida a composiccedilatildeo

da microbiota torna-se novamente menos diversificada e mais dinacircmica

caracterizada por uma maior proporccedilatildeo de Bacteroidetes para Firmicutes aumento

de Proteobacteria e diminuiccedilatildeo da Bifidobacterium (MACKIE 1999 OTTMAN et al

2012 RAUTAVA et al 2012 VILLANUEVA-MILLAacuteN et al 2015) (Figura 1)

Figura 1 ndash Fatores envolvidos no estabelecimento da microbiota humana ao longo

da vida

Adaptado de MJ Villanueva-Millaacuten et al 2015

38

224 Microbiota intestinal e a fisiologia do hospedeiro

O intestino representa a interface natural entre microbiota intestinal e o

hospedeiro sendo a mucosa intestinal a localizaccedilatildeo principal para a interaccedilatildeo de

micro-organismos e antiacutegenos com o hospedeiro por meio de intenso cross-talk

(KINROSS et al 2011) Os achados de estudos cliacutenicos e experimentais tecircm

evidenciado que a interaccedilatildeo microbiotahospedeiro pode influenciar favoravelmente

a sauacutede do hospedeiro de diversas maneiras Ateacute agora as principais funccedilotildees

conhecidas da microbiota podem ser classificadas em quatro grupos metaboacutelica

(nutriccedilatildeo e digestatildeo) proteccedilatildeo (proteccedilatildeo contra agentes patogecircnicos

imunomodulaccedilatildeo) troacutefica (controle da proliferaccedilatildeo de ceacutelulas epiteliais e

diferenciaccedilatildeo) e regulaccedilatildeo da adiposidade

2241 Nutriccedilatildeo e Metabolismo

A microbiota intestinal eacute um importante fator que afeta a extraccedilatildeo de energia a

partir da dieta e do armazenamento de energia no hospedeiro A fim de realizar

estas funccedilotildees as enzimas metaboacutelicas da microbiota intestinal como as glicosidases

e polissacaridases tecircm a capacidade de extrair energia a partir de nutrientes

inacessiacuteveis uma vez que estas enzimas satildeo capazes de clivar ligaccedilotildees glicosiacutedicas

presentes em alguns polissacariacutedeos de plantas e fibras dieteacuteticas (BACKHED et al

2004 2005 GUARNER MALAGELADA 2003) Os polissacariacutedeos natildeo digeriacuteveis

como a oligofrutose (inulina) satildeo metabolizados pela microbiota colocircnica em

oligossacariacutedeos e monossacariacutedeos e entatildeo fermentados a aacutecidos graxos de

cadeia curta (AGCC) particularmente acetato propionato e butirato Estes AGCC

satildeo rapidamente absorvidos O Butirato fornece energia para o metabolismo celular

enquanto acetato e propionato seguem para a corrente sanguiacutenea sendo

transportados para o fiacutegado e oacutergatildeos perifeacutericos onde podem atuar como substratos

para a gliconeogecircnese e lipogecircnese (SHEN et al 2013 ZAIBI et al 2010)

A microbiota intestinal tambeacutem induz a expressatildeo do peptiacutedeo YY (PYY)

anorexigecircnico que geram sinais de saciedade atraveacutes de um mecanismo

dependente do receptor GPR41 Assim a produccedilatildeo de AGCC pela microbiota

intestinal estaacute associada com um aumento na saciedade e uma reduccedilatildeo na ingestatildeo

de alimentos no hospedeiro o qual por sua vez controla o ganho de peso corporal

(CLUNY et al 2015 SHEN et al 2013 ZAIBI et al 2010) Outros mecanismos

39

pelos quais as bacteacuterias do intestino podem influenciar metabolismo do colesterol

satildeo induzidos atraveacutes de Fasting Induced Adipocyte Factor (FIAF) que eacute

seletivamente suprimida no epiteacutelio intestinal pela microbiota intestinal (MARTINEZ

et al 2009)

Tambeacutem tem sido relatado o envolvimento da microbiota intestinal na

metabolizaccedilatildeo de polifenoacuteis que contribuem para o seu potencial antioxidante e

accedilotildees beneacuteficas aleacutem de siacutentese de algumas vitaminas como B12 e K aleacutem da

induccedilatildeo da expressatildeo do receptor de vitamina D pelos AGCC aumentando a sua

absorccedilatildeo e regulando o metabolismo do caacutelcio (BRENCHLEY DOUEK 2012

GUARNER MALAGELADA 2003 KIM et al 1998 MANACH DONOVAN 2004

RESTA 2009 SCALBERT WILLIAMSON 2000) Finalmente a microbiota intestinal

tambeacutem eacute capaz de executar uma seacuterie de biotransformaccedilotildees em xenobioacuteticos

como drogas e seus metaboacutelitos em formas que podem afetar sua absorccedilatildeo e

biodisponibilidade (WILSON NICHOLSON 2009) Neste contexto tem sido

demonstrado que a microbiota intestinal metaboliza toacutexicos e compostos

potencialmente canceriacutegenos tais como pirolisatos (BRENCHLEY DOUEK 2012)

2242 Proteccedilatildeo

Tem sido observado que a ausecircncia da microbiota intestinal torna o organismo

suscetiacutevel agrave infecccedilatildeo Alguns dos mecanismos envolvidos nessas accedilotildees protetoras

incluem competiccedilatildeo direta de nutrientes limitados e a modulaccedilatildeo de respostas

imunoloacutegicas no hospedeiro (GUARNER MALAGELADA 2003 KAMADA et al

2013 SEKIROV et al 2010)

22421 Competiccedilatildeo direta de nutrientes

Vaacuterios mecanismos tecircm sido implicados na resistecircncia agrave colonizaccedilatildeo do trato

gastrintestinal por patoacutegenos A camada de muco intestinal eacute capaz de manter

mutualismos mantendo as bacteacuterias no compartimento e restringindo estimulaccedilatildeo

imunoloacutegica ostensiva O hospedeiro fornece ativamente os nutrientes que a

microbiota precisa e a microbiota indica a quantidade de nutrientes que satildeo

necessaacuterios para o hospedeiro Esta relaccedilatildeo impede superproduccedilatildeo indesejada do

nutriente o que favoreceria a intrusatildeo de micro-organismos competitivos com

potencial de patogenicidade Finalmente as bacteacuterias podem inibir o crescimento

40

dos seus concorrentes produzindo peptiacutedeos antimicrobianos ou proteiacutenas

conhecidas como bacteriocinas que satildeo sintetizadas em ribossomos (GUARNER

MALAGELADA 2003 MONTALTO et al 2009 PURCHIARONI et al 2013

SEKIROV et al 2010)

22422 Imunomodulaccedilatildeo

As interaccedilotildees entre micro-organismos e ceacutelulas epiteliais e imunes baseiam-se

no reconhecimento de padrotildees moleculares associados agrave micro-organismos

(MAMPs) sendo mediado por receptores de reconhecimento padratildeo representados

pelos receptores do tipo toll (TLR) encontrados na superfiacutecie de ceacutelulas epiteliais e

imunes e pelos receptores de domiacutenio de digomerizaccedilatildeo de ligaccedilatildeo de nucleotiacutedeos

(NOD) que se encontram no citoplasma Esses receptores desempenham um

importante papel na gecircnese e na modulaccedilatildeo da resposta inflamatoacuteria (FRANCHI et

al 2009 MARANDUBA et al 2014 MONTALTO et al 2009 PURCHIARONI et al

2013)

A interaccedilatildeo funcional entre microbiota intestinal e sistema imunoloacutegico inicia-

se com a promoccedilatildeo de um ambiente anti-inflamatoacuterio pelas bacteacuterias (Figura 2) Em

um contexto simbioacutetico MAMPs estimulam continuamente atraveacutes das IECs (ceacutelulas

epiteliais intestinais) a secreccedilatildeo das proteiacutenas antimicrobianas intestinais REGIIIγ

para o luacutemen aleacutem de linfopoietina estromal tiacutemica (TSLP) IL-33 IL-25 e o fator de

crescimento tumoral-β (TGF-β) sob o epiteacutelio Esses mediadores imunoloacutegicos

induzem o desenvolvimento de macroacutefagos tolerogecircnicos e ceacutelulas dendriacuteticas

(DCs) tolerogecircnicas (KAMADA et al 2013 MAYNARD et al 2012)

Ceacutelulas Dendriacuteticas (DCs) tolerogecircnicas produzem TGF-β e aacutecido retinoacuteico

(RA) que estimulam o desenvolvimento de Ceacutelulas T regulatoacuterias (Treg) Assim

atraveacutes das ceacutelulas Treg (que utilizam diversos mecanismos de regulaccedilatildeo)

macroacutefagos (que produzem IL-10) e DCs tolerogecircncicos o sistema imunoloacutegico

intestinal eacute capaz de estabelecer e manter um ambiente anti-inflamatoacuterio Aleacutem dos

papeacuteis reguladores essenciais de TGF-β esta citocina tem sido associada com

outras substacircncias derivadas do epiteacutelio tais como fator de ativaccedilatildeo de ceacutelulas β

(FABF) e ligante indutor de proliferaccedilatildeo (APRILL) com o intuito de induzir o

desenvolvimento de ceacutelulas produtoras de IgA (plasmoacutecitos) (FAGARASAN et al

2010) Esta imunoglobulina eacute capaz de prevenir a ligaccedilatildeo de bacteacuterias comensais no

41

epiteacutelio do hospedeiro estando portanto envolvida na formaccedilatildeo da microbiota

intestinal (MACPHERSON et al 2012)

Aleacutem disto tem sido relatada que a produccedilatildeo de alguns tipos de peptiacutedeos

antimicrobianos bacterianos (AMPs) como a secreccedilatildeo das proteiacutenas

antimicrobianas intestinais REGIIIγ REGIIIβ e angiogenina-4 eacute influenciada pela

micro-organismos comensais via TLR MyD88 (FRANCHI et al 2009 GOTO

IVANOV 2013 VAN VLIET et al 2010) Desse modo verifica-se que no intestino

humano saudaacutevel a microbiota promove constante exposiccedilatildeo de ligantes aos TLR

garantindo a ativaccedilatildeo basal contiacutenua de vias de sinalizaccedilatildeo resultando em

inflamaccedilatildeo fisioloacutegica de baixa intensidade Aleacutem disso micro-organismos

comensais tambeacutem satildeo capazes de suprimir respostas inflamatoacuterias intensas (VAN

VLIET et al 2010)

42


imunoloacutegico

Legenda ndash O equiliacutebrio evolutivo eacute formado ao longo do tempo sendo modulado por pressatildeo ambiental A

microbiota intestinal e o ambiente intestinal satildeo desenvolvidas em conjunto sendo necessaacuterio para o benefiacutecio de ambos tolerar um ao outro O sistema imunoloacutegico monitora essa interaccedilatildeo garantindo a homeostase e contribuindo para a simbiose No entanto o desequiliacutebrio causado na presenccedila de disbiose pode causar a reaccedilatildeo do sistema imunoloacutegico Simbiose e disbiose dependem de equiliacutebrio entre bacteacuterias comensais e patogecircnicas Bacteacuterias comensais promovem um ambiente anti-inflamatoacuterio Em um contexto de simbiose MAMPs estimulam continuamente as IECs a secretarem moleacuteculas que atuam protegendo o epiteacutelio e produzindo um ambiente tolerogecircnico Em disbiose haacute uma liberaccedilatildeo significativa de MAMPs que podem induzir IECs DCs ativadas e macroacutefagos a secretar citocinas inflamatoacuterias Consequentemente haacute um desenvolvimento de efetores imunoloacutegicos IL-22 eacute produzida em ambas as situaccedilotildees mas a contribuiccedilatildeo para a remodelaccedilatildeo da barreira epitelial eacute controlada por regulaccedilatildeo imune M macroacutefago Com bacteacuterias comensais Pato bacteacuterias patogecircnicas

Adaptado de MARANDUBA et al 2014

43

2243 Funccedilatildeo Troacutefica

A microbiota intestinal desempenha funccedilotildees troacuteficas modulando a proliferaccedilatildeo

e diferenciaccedilatildeo de ceacutelulas epiteliais do coacutelon atraveacutes dos AGCC produzidos na

fermentaccedilatildeo de hidratos de carbono natildeo digeriacuteveis Neste contexto o butirato eacute

considerado o AGCC com maior efeito pois promove o crescimento e o turnover das

ceacutelulas epiteliais acelerando a maturaccedilatildeo intestinal da mucosa durante o seu

desenvolvimento ou para induzir seu reparo apoacutes uma lesatildeo O butirato eacute capaz de

aumentar proliferaccedilatildeo diferenciaccedilatildeo e maturaccedilatildeo aleacutem de reduzir apoptose de

enteroacutecitos normais no intestino delgado atraveacutes de sua influecircncia sobre a

expressatildeo de genes e a siacutentese de proteiacutenas (GUILLOTEAU et al 2010 HAMER et

al 2008)

O butirato parece exercer um efeito troacutefico em ceacutelulas epiteliais do iacuteleo e do

jejuno atraveacutes de um mecanismo de neuro-hormonal sugerindo um efeito indireto

No coacutelon a ausecircncia de butirato induziu apoptose massiva nos colonoacutecitos podendo

ser explicado pelo fato de que o butirato eacute a fonte principal de energia para estas

ceacutelulas aleacutem de estimular a liberaccedilatildeo de peacuteptidos gastrointestinais eou fatores de

crescimento que desempenham um papel fundamental na proliferaccedilatildeo celular

(GUILLOTEAU et al 2010 HAMER et al 2008)

2244 Regulaccedilatildeo da adiposidade

Tem sido evidenciado que a microbiota intestinal influecircncia a adiposidade do

hospedeiro A primeira evidecircncia do papel da microbiota intestinal na regulaccedilatildeo da

homeostase energeacutetica e adiposidade do hospedeiro foi demonstrada por Backhed

et al (2004) em estudo que foi demonstrado que ratos germ-free apresentavam

menor conteuacutedo de gordura corporal do que ratos convencionais mesmo ao

consumirem a mesma quantidade de alimentos Diferentes mecanismos tecircm sido

propostos para explicar a relaccedilatildeo entre microbiota intestinal e a adiposidade Assim

dependendo da sua composiccedilatildeo a microbiota pode aumentar a extraccedilatildeo energeacutetica

da dieta a partir de polissacariacutedeos natildeo digeriacuteveis com menor conteuacutedo de energia

disponiacutevel nas fezes aleacutem de maiores niacuteveis de AGCC no intestino Propotildee-se

ainda que a microbiota intestinal seja capaz de induzir a regulaccedilatildeo de genes do

hospedeiro que modulam o metabolismo energeacutetico (MUSSO et al 2011)

44

225 Microbiota intestinal e disbiose

Em condiccedilotildees saudaacuteveis existe um equiliacutebrio entre todos os micro-organismos

presentes no intestino estando as bacteacuterias beneacuteficas em maior quantidade

(eubiose) Entretanto pode ocorrer desequiliacutebrio na microbiota com consequente

predomiacutenio das bacteacuterias potencialmente patogecircnicas sobre as beneacuteficas Esse

desequiliacutebrio eacute definido como disbiose e pode comprometer a sauacutede do hospedeiro

uma vez que se associa agrave patogecircnese de vaacuterias doenccedilas (HAWRELAK MYERS

2004)

O uso de antibioacuteticos anti-inflamatoacuterios hormonais e natildeo hormonais abuso de

laxantes consumo excessivo de alimentos processados baixo consumo de

alimentos crus excessiva exposiccedilatildeo a toxinas ambientais incluindo alguns metais

pesados doenccedilas consumptivas como cacircncer e siacutendrome da imunodeficiecircncia

adquirida (AIDS) disfunccedilotildees hepatopancreaacuteticas estresse divertiacuteculos idade

tempo de tracircnsito e pH intestinal disponibilidade de material fermentaacutevel estado

imunoloacutegico do hospedeiro e infecccedilotildees satildeo fatores importantes para promover

alteraccedilatildeo da microbiota acarretando em disbiose intestinal e consequentemente

modificando vaacuterias funccedilotildees do TGI incluindo a digestatildeo a

biodisponibilidadeabsorccedilatildeo eliminaccedilatildeo desintoxicaccedilatildeo e funccedilatildeo imunoloacutegica

(ALMEIDA et al 2009 HAWRELA MYERS 2004 SEARS GENUIS 2012)

Em um contexto de disbiose (Figura 2) a presenccedila de agentes patogeacutenicos

pode perturbar a regulaccedilatildeo do ambiente anti-inflamatoacuterio Quando patoacutegenos

enteacutericos superam as bacteacuterias comensais o desequiliacutebrio entre comensais e

bacteacuterias patogecircnicas provoca uma liberaccedilatildeo significativa de MAMPs Este aumento

pode induzir IECs DCs e macroacutefagos ativados a secretar citocinas inflamatoacuterias

como a IL-1β IL-6 IL-12 e IL-23 Estas citocinas estimulam o desenvolvimento de

ceacutelulas CD4+ T auxiliares (T helper - TH1) e ceacutelulas TH17 (produzem IL-17A IL-

17F e IL-22) resultando na inflamaccedilatildeo crocircnica (MAYNARD et al 2012)

Na vigecircncia da disbiose intestinal pode ocorrer perda de funccedilotildees importantes

da microbiota do hospedeiro As alteraccedilotildees qualitativas e quantitativas na microbiota

intestinal aleacutem das alteraccedilotildees nas atividades metaboacutelicas e na distribuiccedilatildeo dos

micro-organismos ao longo do intestino associam-se a diversas condiccedilotildees tais

como diarreias deacuteficits nutricionais doenccedila celiacuteaca cacircncer colorretal doenccedilas

45

inflamatoacuterias intestinais siacutendrome do coacutelon irritaacutevel e supercrescimento bacteriano

(ALMEIDA et al 2009 HAWRELAK MYERS 2004)

A disbiose pode provocar aumento da permeabilidade intestinal alterando uma

importante funccedilatildeo da mucosa intestinal que eacute a atividade de barreira Assim

moleacuteculas antigecircnicas ou toacutexicas e micro-organismos nocivos podem se translocar

atraveacutes da barreira promovendo a passagem destas substacircncias atraveacutes da mucosa

epitelial para o sangue ou sistema linfaacutetico gerando uma resposta inflamatoacuteria

sistecircmica A ligaccedilatildeo entre disbiose e desenvolvimento de doenccedilas como obesidade

diabetes e doenccedilas cardiovasculares vem sendo explorada A obesidade representa

uma das doenccedilas mais estudadas associadas agrave perturbaccedilotildees na microbiota

intestinal no entanto requer mais estudos (Figura 3) (ALMEIDA et al 2009

HAWRELAK MYERS 2004 KINROSS et al 2011)

46

Figura 3 ndash Doenccedilas influenciadas pelo metabolismo microbiano intestinal

Legenda ndash A variedade de doenccedilas sistecircmicas que satildeo diretamente influenciadas pelo metabolismo da microbiota intestinal e a sua influecircncia sobre outras vias em mamiacuteferos tais como o sistema imunitaacuterio inato tem sido demonstradas Especificamente em destaque incluem as vias metaboacutelicas envolvidas com o metabolismo de drogas e a obesidade que satildeo diretamente influenciados pelo teor microbiano intestinal Ags antigeacutenios C bolteae Clostridium Bolteae DCs ceacutelulas dendriacuteticas AGCC aacutecidos graxos de cadeia curta TLR receptor Toll-like

Adaptado de Kinross et al 2011

47

226 Microbiota Intestinal e obesidade

A partir de 2004 mais um fator ambiental passou a ser apontado como

importante para o controle do peso e da homeostase energeacutetica a microbiota

intestinal As primeiras evidecircncias da relaccedilatildeo microbiota intestinal versus obesidade

foram constatadas em animais germ-free convencionalizados Esses animais

demonstraram que mesmo ao consumir uma menor quantidade de dieta e portanto

menos calorias em comparaccedilatildeo aos animais germ-free apresentaram aumento da

quantidade de gordura corporal (BACKHED et al 2004)

Especificamente tem-se observado que a microbiota de ratos obesos tem uma

maior capacidade de extraccedilatildeo de energia da dieta e esta caracteriacutestica pode ser

transmissiacutevel atraveacutes da colonizaccedilatildeo de ratos germ-free com a microbiota fecal de

doadores obesos resultando em um aumento significativamente maior no percentual

de gordura corporal total com o intuito de armazenar os lipiacutedeos produzidos Estes

estudos demonstraram que microbiota intestinal eacute um potencial fator de contribuiccedilatildeo

adicional agrave fisiopatologia da obesidade (BACKHED et al 2004 HARRIS et al 2012

LEY et al 2005 TURNBAUGH et al 2006)

A definiccedilatildeo da alteraccedilatildeo na composiccedilatildeo da microbiota intestinal de obesos

ainda permanece controversa na literatura tanto no que se refere agrave abordagem em

niacutevel de filo quanto de espeacutecies em humanos (LYRA et al 2010) Aleacutem destes

estudos realizados com animais germ-free outros observaram associaccedilotildees

importantes entre obesidade e mudanccedilas na composiccedilatildeo da microbiota intestinal tal

como uma diversidade bacteriana reduzida (no filo eou outros niacuteveis) eou

representaccedilatildeo alterada de genes e vias metaboacutelicas bacterianas (DE LA SERRE et

al 2010 LEY et al 2006 TURNBAUGH et al 2006)

Em geral vaacuterios autores tecircm demonstrado associaccedilotildees entre obesidade e

mudanccedilas na abundacircncia relativa dos dois filos bacterianos dominantes

Bacteroidetes e Firmicutes Mais especificamente um aumento do filo Firmicutes e

uma diminuiccedilatildeo do filo Bacteroidetes em modelos de ratos obesos e pacientes tecircm

sido observado Aleacutem disso indiviacuteduos magros e pessoas que perderam peso

apresentaram maior abundacircncia do filo Bacteroidetes (ABDALLAH et al 2011

BACKHED et al 2007 CANI et al 2008 LEY et al 2005 2006 TURNBAUGH et

al 2006 VERDAM et al 2013)

48

O aumento da razatildeo FirmicutesBacteroidetes em ratos obesos pode estar

associada com possiacuteveis mediaccedilotildees de respostas adaptativas pelo hospedeiro para

limitar a absorccedilatildeo de armazenamento de energia eou para promover a adiposidade

(LEY et al 2005) Embora os resultados dos estudos demonstrem diferenccedilas na

proporccedilatildeo de grupos bacterianos entre indiviacuteduos eutroacuteficos e obesos ainda natildeo se

sabe se algum grupo de micro-organismos em especial contribui de maneira direta

para o desenvolvimento da obesidade e de alteraccedilotildees metaboacutelicas Associaccedilotildees

entre tipos de bacteacuteria e as variaacuteveis metaboacutelicas tecircm sido observadas seja em

humanos ou em modelo animal indicando que a modulaccedilatildeo de determinados

grupos bacterianos possa exercer efeito no contexto da obesidade Os desafios

enfrentados agora se referem ao entendimento dos mecanismos pelos quais grupos

bacterianos influenciam paracircmetros metaboacutelicos e se intervenccedilotildees dieteacuteticas ou

medicamentosas utilizadas para modular a proporccedilatildeo desses grupos bacterianos

podem melhorar o perfil metaboacutelico ou ao contraacuterio agravaacute-lo (TURNBAUGH et al

2009)

Em relaccedilatildeo agrave composiccedilatildeo da microbiota intestinal seguida agrave perda de peso de

acordo com estudos de coorte a proporccedilatildeo de Bacteroidetes aumentou enquanto o

nuacutemero de Firmicutes diminuiu parecendo restaurar a relaccedilatildeo

FirmicutesBacteroides que estava inicialmente aumentada em indiviacuteduos obesos

Na verdade apoacutes 10 semanas de restriccedilatildeo energeacutetica e de exerciacutecio os

participantes que perderam mais de quatro quilogramas (kg) de peso corporal

mostraram um aumento significativo na populaccedilatildeo de Grupo B fragilis bem como

um aumento na proporccedilatildeo BacteroidesPrevotella positivamente correlacionada com

a perda de peso (HARRIS et al 2012 NADAL et al 2009 SANTACRUZ et al

2009)

No que se diz respeito aos efeitos do exerciacutecio fiacutesico na microbiota intestinal

Evans et al (2014) demonstraram que o exerciacutecio teve efeitos significativos tanto em

camundongos eutroacuteficos quanto em camundongos obesos que ingeriam dieta rica

em gordura sobre o equiliacutebrio relativo dos principais filos bacterianos juntamente

com a prevenccedilatildeo de obesidade e normalizaccedilatildeo da toleracircncia agrave glicose induzida por

dieta De fato a distacircncia percorrida eacute proporcional agrave diminuiccedilatildeo observada para a

razatildeo FirmicutesBacteroides (EVANS et al 2014) Tambeacutem eacute importante ressaltar

que o exerciacutecio aumentou significativamente a proporccedilatildeo relativa de bacteacuterias

49

produtoras de butirato tais como Bacteroidales S24-7 que estatildeo associados com a

sauacutede da ceacutelula epitelial intestinal Aleacutem disso o exerciacutecio fiacutesico aumentou a

diversidade da microbiota intestinal apenas em ratinhos alimentados com uma dieta

rica em gordura No entanto sugere-se que o exerciacutecio pode agir de forma

independente da microbiota intestinal aumentando a utilizaccedilatildeo de energia apesar

de um consumo de uma dieta rica em gordura

227 Mecanismos pelos quais a microbiota intestinal contribui para a obesidade

2271 Extraccedilatildeo de energia adicional da dieta

A noccedilatildeo de que a microbiota intestinal fornece energia para o hospedeiro eacute

suportada por achados em ratos germ-free natildeo naturalmente colonizados com

micro-organismos que apresentaram um menor ganho de peso quando alimentados

com uma dieta rica em gordura do que os ratos germ-free controles (BACKHED et

al 2007 CAESAR et al 2012 DING et al 2010 TREMAROLI BACKHED 2012)

Esses resultados evidenciam que na ausecircncia da microbiota o consumo de uma

dieta obesogecircnica parece natildeo estimular o desenvolvimento da obesidade A

Microbiota intestinal pode afetar ambos os lados da equaccedilatildeo do balanccedilo energeacutetico

natildeo apenas como um fator que influencia a colheita de energia a partir de

componentes da dieta mas tambeacutem como um fator que afeta genes do hospedeiro

que regulam o gasto de energia eou de armazenamento (BACKHED et al 2004

GILL et al 2006 WOLEVER et al 1991)

A fermentaccedilatildeo de polissacariacutedeos pela microbiota pode gerar um aumento no

fluxo de monossacariacutedeos para o fiacutegado e adipoacutecitos favorecendo a lipogecircnese de

novo atraveacutes da ativaccedilatildeo da expressatildeo de dois reguladores nucleares de enzimas

lipogecircnicas- carbohydrate response element-binding protein (ChREBP) e liver sterol

response element binding protein type-1 (SREBP-1) - os quais ativam as enzimas

lipogecircnicas acetil-CoA carboxilase e aacutecido graxo sintase (BACKHED et al 2004

MUSSO et al 2011 TSUKUMO et al 2009) Nesse contexto o menor acuacutemulo de

gordura corporal demonstrado em animais germ-free que consumiram dieta

hiperlipiacutedica e apresentaram absorccedilatildeo semelhante aos animais convencionalizados

indica que a microbiota pode exercer efeito sobre o fluxo de lipiacutedios entre os tecidos

reduzindo o acuacutemulo de gordura (BACKHED et al 2007)

50

A proteiacutena Fasting Induced Adipose Factor (FIAF) eacute suprimida pela presenccedila

de microbiota sendo um inibidor da lipase lipoproteacuteica (LPL) produzido pelo

intestino fiacutegado e tecido adiposo limitando a captaccedilatildeo de aacutecidos graxos e

favorecendo o acuacutemulo de triacilgriceroacuteis nesse tecido Tem sido demonstrado que

animais germ-free apresentaram uma maior expressatildeo de FIAF e fenoacutetipo resistente

agrave obesidade (BACKHED et al 2004 2005 2007) A participaccedilatildeo de FIAF no

metabolismo lipiacutedico foi reforccedilada atraveacutes de estudos com ratos germ-free que

diferiram apenas na expressatildeo dessa proteiacutena (FIAF ++ versus FIAF --) onde

verificou-se que a deficiecircncia dessa proteiacutena induzida geneticamente natildeo eacute um fator

protetor para animais germ-free contra o ganho de peso promovido pela dieta

hiperlipiacutedica (BACKHED et al 2007)

Aleacutem de promover a lipogecircnese (atraveacutes das enzimas lipogecircnicas e inibiccedilatildeo da

FIAF) a microbiota tambeacutem desempenha um papel importante no gasto de energia

obtida a partir da dieta Mais especificamente a microbiota de obesos parece

favorecer uma inibiccedilatildeo de oxidaccedilatildeo de aacutecidos graxos (que por sua vez favorecem a

deposiccedilatildeo e armazenamento de lipiacutedios no tecido adiposo fiacutegado eou tecido

muscular) por mecanismos complementares mas independentes (HARDIE

SAKAMOTO 2006 PUIGSERVER SPIEGELMAN 2003 RABOT et al 2010)

A microbiota tambeacutem pode influenciar a homeostase energeacutetica por meio da

sinalizaccedilatildeo exercida pelos aacutecidos graxos de cadeia curta (AGCC) Os AGCC agem

natildeo apenas como fonte de energia mas tambeacutem como moleacuteculas de sinalizaccedilatildeo

atraveacutes de receptores acoplados agrave proteiacutena G (GPRs) GPRs satildeo um grupo de

receptores transmembracircnicos intestinais que respondem aos aacutecidos graxos Entre

os receptores dessa famiacutelia os receptores Gpr41 e Gpr43 satildeo fundamentais sendo

expressos abundantemente no intestino delgado distal no coacutelon e nos adipoacutecitos

Essa ligaccedilatildeo resulta na ativaccedilatildeo desses receptores induzindo a secreccedilatildeo de

polipeptiacutedeo YY (PYY) e leptina hormocircnios que influenciam nas funccedilotildees intestinais

e na regulaccedilatildeo do apetite (BELLAHCENE et al 2013 BINDELS et al 2013

HARDIE SAKAMOTO 2006 INOUE et al 2014 MUSSO et al 2011 ZAIBI et al

2010)

51

2272 Induccedilatildeo da inflamaccedilatildeo por meio da alteraccedilatildeo da permeabilidade intestinal

As concentraccedilotildees sanguiacuteneas de lipopolissacariacutedeos (LPS) sofrem significativa

influecircncia da microbiota intestinal Principalmente as bacteacuterias Gram-negativas

apresentam em sua superfiacutecie celular os LPS que funcionam como antiacutegenos

estimulando a resposta imune do hospedeiro Assim a microbiota intestinal

representa um grande reservatoacuterio dessa endotoxina especialmente naqueles

indiviacuteduos que habitualmente consomem dieta com alto teor de gorduras

(HOTAMISLIGIL 2010)

A principal via de sinalizaccedilatildeo do LPS envolve o fator nuclear Kappa B (NF-KB)

O LPS pode aumentar os niacuteveis circulantes de resistina espeacutecies reativas de

oxigecircnio (ERO) e proteiacutenas supressoras da sinalizaccedilatildeo de citocinas-1 e 3 (SOCS-1 e

SOCS-3) A elevaccedilatildeo de citocinas proacute-inflamatoacuterias como interferon-gama (IFN-α)

TNF- α interleucina (IL)-6 e IL-1β geralmente observada em pacientes obesos

pode ser originada de macroacutefagos no tecido adiposo ou da interaccedilatildeo do LPS com

seu receptor O aumento dessas citocinas pode contribuir para a translocaccedilatildeo de

LPS favorecendo a ocorrecircncia de endotoxemia metaboacutelica e consequentemente

potencializar a inflamaccedilatildeo subcliacutenica por meio da reduccedilatildeo da expressatildeodistribuiccedilatildeo

de proteiacutenas formadoras de junccedilotildees oclusivas (tight junctions) como zocircnula de

oclusatildeo-1 (ZO-1) e ocludina aumentando a permeabilidade intestinal (CANI et al

2008 LAM et al 2012)

Aleacutem da reduccedilatildeo da expressatildeo das junccedilotildees oclusivas intestinais haacute tambeacutem

uma evidecircncia de que a microbiota intestinal pode regular a permeabilidade

intestinal atraveacutes do sistema endocanabinoacuteide Em um estudo realizado por Muccioli

et al (2010) a modulaccedilatildeo da composiccedilatildeo microbiana do intestino seja por

colonizaccedilatildeo em ratos germ-free ou por tratamento com antibioacuteticos reduziu a

expressatildeo dos receptores canabinoacuteides (Cb-1) tanto do coacutelon quanto do tecido

adiposo enquanto em animais alimentados com uma dieta rica em gordura foi

observado aumento da expressatildeo Cb1 (EVERARD et al 2013 GEURTS et al

2011 MUCCIOLI et al 2010)

52

23 MOLLICUTES

231 Caracteriacutesticas Gerais dos Mollicutes

Os micoplasmas foram primeiramente isolados por Norcard e Roux em 1898

que estudavam a Pleuropneumonia Bovina doenccedila descrita haacute mais de um seacuteculo

na Europa e na Aacutefrica Em seguida micro-organismos semelhantes isolados de

humanos e de animais foram descritos por outros pesquisadores e denominados de

PPLO ndash ldquoPleuropneumonia-Like Organismsrdquo (MOROWITZ 2002 RAZIN JACOBS

1992)

O termo ldquomicoplasmardquo foi usado para denominar os micro-organismos da

Classe Mollicutes (Mollis = mole cuacutetis = pele) mas sugeriu-se o uso do termo

geneacuterico molicutes como nome trivial para designar qualquer microrganismo desta

classe O termo micoplasma aplica-se apenas aos membros do gecircnero Mycoplasma

Recentemente algumas riqueacutetsias e outras bacteacuterias de taxonomia indefinida foram

incluiacutedas aos Mollicutes A classe eacute composta por quatro ordens (Mycoplasmatales

Entomoplasmatales Acholeplasmatales Anaeroplasmatales) sete famiacutelias

(Mycoplasmataceae Incertae sedis (ordem Mycoplasmatales)

Entomoplasmataceae Spiroplasmataceae Acholeplasmataceae Incertae sedis

(ordem Acholeplasmatales) e Anaeroplasmataceae) 11 gecircneros (Mycoplasma

Ureaplasma Eperythozoon Haemobartonella Entomoplasma Mesoplasma

Spiroplasma Acholeplasma Phytoplasma Anaeroplasma Asteroplasma) e mais de

200 espeacutecies A famiacutelia Mycoplasmataceae conteacutem os principais micro-organismos

de interesse meacutedico dentre os quais estatildeo os gecircneros Mycoplasma Os molicutes

compreendem aproximadamente 200 espeacutecies distribuiacutedas ente plantas insetos

animais e humanos (BERGEYrsquos 2010 RAZIN 1992 RAZIN YOGEV NAOT

1998)

Mollicutes eacute a uacutenica classe do filo Tenericutes sendo anteriormente

classificado dentro do filo Firmicutes tendo essa mudanccedila justificada em parte

pela anaacutelise de uma seacuterie de marcadores filogeneacuteticos conservados Esta

classificaccedilatildeo eacute ainda apoiada pela ausecircncia de parede celular caracteriacutestica desses

micro-organismos As sequecircncias do gene 16S rRNA contribuem para sua

classificaccedilatildeo em grupos filogeneacuteticos sendo essa sequecircncia obrigatoacuteria para a

caracterizaccedilatildeo de novas espeacutecies Aleacutem disso a atribuiccedilatildeo de espeacutecie aos grupos eacute

53

feita principalmente por hibridaccedilatildeo DNA-DNA sorologia e semelhanccedila na sequecircncia

do gene 16rRNA Algumas espeacutecies foram atribuiacutedas individualmente a grupos

filogeneacuteticos clusters e subclusters que tambeacutem compartilham outras

caracteriacutesticas (BERGEYrsquos 2009 2010 BROWN WHITCOMB BRADBURY 2007

WEISBURG et al 1989)

A natureza dos molicutes tem representado um desafio na compreensatildeo da

sua biologia classificaccedilatildeo e taxonomia Por muito tempo os micoplasmas foram

considerados viacuterus devido a capacidade de transpor filtros que bloqueavam a

passagem de bacteacuterias (RAZIN 1992) Os membros da classe Mollicutes satildeo

caracterizadas pelo genoma de tamanho reduzido (058 - 22 Mb) ausecircncia de

parede celular (RAZIN 1998) e por apresentarem requerimentos nutricionais

diferenciados quando comparados agrave maioria das bacteacuterias de interesse veterinaacuterio e

humano Aminoaacutecidos nucleotiacutedeos e esteroacuteis exoacutegenos satildeo utilizados para seu

crescimento in vitro O esterol presente no soro ou ceacutelulas do hospedeiro eacute

incorporado pela membrana da maioria das espeacutecies Este composto contribui na

fluidez necessaacuteria agrave membrana e confere resistecircncia parcial agrave lise osmoacutetica

(RUHNKE ROSENDAL 1994)

A membrana dos micoplasmas tem composiccedilatildeo semelhante agraves das eubacteacuterias

e estaacute exposta ao ambiente com exceccedilatildeo de poucas espeacutecies que possuem

glicocaacutelice (WIESLANDER et al 1992) Localizam-se principalmente nas ceacutelulas de

mucosas e com potencial de invasatildeo (VOELKER DYBVIG 1996) As mutaccedilotildees tecircm

sido mencionadas como estrateacutegia de sobrevivecircncia que podem ter ocorrido em

funccedilatildeo da evoluccedilatildeo associada a perdas genocircmicas (DAVID et al 2002)

Natildeo apresentam flagelos entretanto algumas espeacutecies exibem deslizamento

sobre superfiacutecies liacutequidas Alguns micoplasmas possuem um tipo de estrutura ou

prolongamento polar em sua superfiacutecie onde haacute alta concentraccedilatildeo de moleacuteculas de

adesatildeo que permitem a sua aderecircncia agrave ceacutelula hospedeira (RAZIN 1992) Acredita-

se que estas estruturas em algumas espeacutecies como Mycolasma penetrans de

origem humana estejam envolvidas na invasatildeo celular (LO et al 1992)

Os molicutes exibem estrita relaccedilatildeo aos hospedeiros e especificidade a tecidos

e oacutergatildeos que reflete as suas caracteriacutesticas nutricionais e adaptaccedilatildeo parasitaacuteria

Estas bacteacuterias podem ocorrer em hospedeiros e tecidos diferentes de seu ldquohabitatrdquo

normal entretanto como observado por Goulet et al (1995) existem variaccedilotildees e

54

eventualmente eacute possiacutevel isolar espeacutecies de siacutetios e hospedeiros diferentes

daqueles habituais (ERICKSON ROSS BOVE 1988 HORNOK et al 2012 ISO et

al 2013 RAZIN 1992 RAZIN YOGEV NAOT 1998 WAITES et al 1987)

A maioria dos molicutes vivem como comensais e em muitos artroacutepodes

podem mesmo ser considerados simbiontes Infecccedilotildees com micoplasmas

patogecircnicos satildeo raramente agudas e usualmente seguem um curso crocircnico (RAZIN

YOGEV NAOT 1998) Os Mollicutes principalmente as espeacutecies encontradas em

mamiacuteferos apesentam-se como parasitas ideais geralmente vivendo em harmonia

com seu hospedeiro mas por outro lado satildeo tambeacutem considerados como

ldquooportunistas ideaisrdquo Diversas doenccedilas nos seus respectivos hospedeiros satildeo

causadas ou associadas aos Mollicutes (RAZIN YOGEV NAOT 1998) Estas

bacteacuterias parecem preferir estabelecerem-se em nichos com ceacutelulas em constante

renovaccedilatildeo favorecendo a sua adesatildeo (GABRIDGE CHANDLER DANIELS 1985)

Micoplasmas em especial as espeacutecies com os menores genomas tecircm altas

taxas de mutaccedilatildeo o que sugere que eles estatildeo em um estado de evoluccedilatildeo raacutepida

Esses dados foram confirmados por estudos de sequecircncias de genes 5S rRNA que

incluiu uma seacuterie de acholeplasmas anaeroplasmas micoplasmas ureaplasmas e

Clostridium innocuum (BOVEacute 1999 RAZIN 1995 ROGERS et al 1985)

Quanto ao seu metabolismo os Mollicutes podem ser divididos em

fermentadores e natildeo-fermentadores Os fermentadores produzem aacutecidos por meio

da metabolizaccedilatildeo de glicose e de outros carboidratos diminuindo o pH do meio de

cultivo e os natildeo- fermentadores possuem a via da arginina-deidrolase para

obtenccedilatildeo de ATP aumentando o pH (RAZIN 1978 2004) Quando ambas as vias

ocorrem os aacutecidos produzidos da glicoacutelise podem mascarar a alcalinizaccedilatildeo do caldo

causada pela hidroacutelise da arginina (BASEMAN TULLY 1997 OLSON et al 1993

RAZIN 2004)

Um dos maiores empecilhos na pesquisa e no diagnoacutestico laboratorial das

infecccedilotildees causadas por molicutes tem sido a dificuldade em cultivaacute-los in vitro

Apresentam crescimento lento mesmo utilizando-se o meio de cultivo adequado

(RAZIN 1994) A temperatura de aproximadamente 37 ordmC eacute indicativa do ldquohabitatrdquo

natural dos molicutes que corresponde agrave dos mamiacuteferos reacutepteis peixes artroacutepodes

e plantas O crescimento e sobrevivecircncia dos molicutes em meio de cultura satildeo

dependentes do pH Para espeacutecies originaacuterias de plantas e vertebrados o pH oacutetimo

55

eacute de 74 e o crescimento ocorre entre pH 65 a 80 (RAZIN et al 1978) A inibiccedilatildeo

do crescimento pode ocorrer pela excessiva produccedilatildeo de aacutecidos ou aacutelcalis gerados

pelo metabolismo microbiano primaacuterio

Esses micro-organismos apresentam colocircnias de 50 ndash 500 μm de diacircmetro

usualmente em forma de ldquoovo fritordquo quando cultivados em meio soacutelido visualizadas

com o auxiacutelio de microscoacutepio estereoscoacutepio (Figura 4) Em meio liacutequido o

crescimento geralmente natildeo causa turvaccedilatildeo provocando somente alteraccedilatildeo no pH

revelado por um indicador presente no meio de cultura (MILES 1992 RAZIN 1998)

A complexidade dos requerimentos nutricionais a variaccedilatildeo na forma celular e a

fragilidade osmoacutetica fazem com que os Mollicutes estejam sob constantes

investigaccedilotildees quanto a sua fisiologia para relatar seu crescimento e ecologia As

condiccedilotildees sob as quais eles crescem podem influenciar na estrutura e

funcionamento das ceacutelulas hospedeiras sendo importante natildeo somente para os

fisiologistas como tambeacutem para todos micoplasmologistas envolvidos em estudos

quantitativos (BALABANOV et al 2006 MILLES 1992 RAZIN et al 1978

RODWELL 1983 TULLY 1985)

Figura 4 ndash Crescimento de M hominis em meio SP4 com a produccedilatildeo de colocircnia em forma de ldquoovo fritordquo (aumento 40X)

Fonte Arquivo pessoal

56

232 Mollicutes Microbiota Intestinal e Obesidade

A ocorrecircncia e participaccedilatildeo da classe Mollicutes na microbiota intestinal e sua

relaccedilatildeo com a obesidade ainda eacute praticamente desconhecida No entanto

Turnbaugh et al (2008) investigaram a relaccedilatildeo dieta ecologia microbiana intestinal e

o balanccedilo energeacutetico a partir de um modelo murino de obesidade induzido por meio

do consumo de uma dieta ocidental Observou-se que a dieta ocidental estimulou o

crescimento de organismos da classe Mollicutes que posteriormente foram

reduzidos por subsequentes manipulaccedilotildees dieteacuteticas para limitar o ganho de peso

O transplante de microbiota de ratos com obesidade induzida por dieta para

destinataacuterios germ-free promoveu uma maior deposiccedilatildeo de gordura do que em

animais que receberam o transplante a partir de doadores eutroacuteficos Metagenocircmica

e anaacutelises bioquiacutemicas do microbioma intestinal em conjunto com sequenciamento e

reconstruccedilotildees metaboacutelicas associadas ao intestino humano revelaram que a

bacteacuteria Eubacterium dolichum) (um membro da classe Mollicutes) apresenta

caracteriacutesticas que podem fornecer uma vantagem competitiva aos membros desse

ramo em relaccedilatildeo aos nutrientes da dieta ocidental Essas vantagens relacionam-se

com a importaccedilatildeo e transformaccedilatildeo de accediluacutecares simples atraveacutes do Sistema

fosfotransferase (PTS)

Sistemas fosfotransferase (PTS) satildeo uma classe de sistemas de transporte

envolvidas na absorccedilatildeo e na fosforilaccedilatildeo de uma grande variedade de hidratos de

carbono (DEUTSCHER et al 2006) Cada transportador envolve trecircs enzimas de

ligaccedilatildeo que atuam como receptores e doadores de grupos fosforil duas enzimas

citoplasmaacuteticas que atuam em todos os hidratos de carbono PTS importados (HPR e

EI) e o outro eacute um complexo de hidratos de carbono especiacutefico (EII)

compreendendo um ou dois domiacutenios integrais de membrana hidrofoacutebicos (EIIC D)

e dois domiacutenios hidrofiacutelicos (EIIA B) (DEUTSCHER et al 2006) Fosfoenolpiruvato

embora produzidos atraveacutes da glicoacutelise pode ser usado para gerar ATP (atraveacutes da

piruvatoquinase) ou usado para conduzir a importaccedilatildeo de accediluacutecares adicionais

atraveacutes da transferecircncia de um grupo fosfato para EI do PTS

Genes PTS satildeo encontrados em vaacuterias divisotildees de bacteacuterias incluindo

Proteobacterias tais como E coli bem como vaacuterios Firmicutes e Mollicutes

sequenciados (Por exemplo Mycoplasma genitalium M pneumoniae M pulmonis

M penetrans M gallisepticum M mycoides M mobile M hyopneumoniae M

57

synoviae e M capricolum) (KANEHISA et al 2004) O PTS tambeacutem desempenha

um papel na regulaccedilatildeo da expressatildeo do gene microbiano atraveacutes da repressatildeo

cataboacutelica permitindo que a ceacutelula passe a importar preferencialmente accediluacutecares

simples em relaccedilatildeo a outros hidratos de carbono (DEUTSCHER et al 2006)

Muacuteltiplos componentes do PTS estatildeo presentes no microbioma da dieta ocidental (EI

e HPr mais EII) o que poderia permitir a importaccedilatildeo de accediluacutecares simples (por

exemplo glicose e frutose que juntos formam sacarose um componente abundante

da dieta ocidental) bem como accediluacutecares associados com a mucosa do intestino do

hospedeiro (N-acetil-galactosamina) O microbioma da dieta ocidental tambeacutem

conteacutem genes que suportam o metabolismo destes accediluacutecares fosforilados para vaacuterios

produtos finais de fermentaccedilatildeo anaeroacutebia (por exemplo lactato e a cadeia curta de

aacutecidos graxos butirato e acetato (DEUTSCHER et al 2006)

58

3 OBJETIVOS

31 Objetivo geral

Analisar a participaccedilatildeo da Classe Mollicutes e dos Filos Firmicutes e Bacteroidetes

na microbiota intestinal de mulheres obesas e eutroacuteficas

32 Objetivos especiacuteficos

Determinar o estado nutricional das mulheres obesas do grupo caso e

eutroacuteficas do grupo controle

Determinar o consumo alimentar das mulheres obesas do grupo caso e


Desenvolver um ensaio quantitativo por meio de TaqMan PCR para a

detecccedilatildeo de Mollicutes na microbiota intestinal de mulheres obesas e

eutroacuteficas

Quantificar os micro-organismos da Classe Mollicutes e dos Filos Firmicutes e

Bacteroidetes aleacutem de Bacteacuterias Totais por meio da PCR em tempo real em

amostras de fezes de mulheres obesas e eutroacuteficas

Analisar a liberaccedilatildeo de citocinas proacute-inflamatoacuterias IL-1 IL6 IL17-A e TNF-α

em amostras de sangue coletadas de mulheres obesas e eutroacuteficas

59

4 MATERIAL E MEacuteTODOS

41 Protocolo do estudo

O presente estudo foi desenvolvido no laboratoacuterio de Micoplasmas do

Departamento de Microbiologia do Instituto de Ciecircncias Biomeacutedicas da Universidade

de Satildeo Paulo (ICB IIUSP) com o Ambulatoacuterio de Obesidade e Siacutendrome Metaboacutelica

do Serviccedilo de Endocrinologia do Hospital das Cliacutenicas da Universidade de Satildeo

Paulo (HC-FMUSP) O estudo foi aprovado pela Comissatildeo de Eacutetica em Pesquisa

Envolvendo Seres Humanos (CEPSH) do Instituto de Ciecircncias Biomeacutedicas da

Universidade de Satildeo Paulo (ICBUSP) (protocolo de pesquisa ndeg 110713) e pela

Comissatildeo de Eacutetica da Instituiccedilatildeo HC-FMUSP Todas as mulheres foram recrutadas a

partir da demanda espontacircnea do serviccedilo tendo sido inseridas no protocolo apoacutes

explicaccedilatildeo sucinta e individual do mesmo e assinatura do Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (TCLE) conforme preconiza a resoluccedilatildeo 19606 do Conselho

Nacional de Sauacutede

42 Casuiacutestica

As coletas foram realizadas entre os meses de Outubro de 2013 agrave Dezembro

de 2014 Para obtenccedilatildeo de resultados pela metodologia proposta para este estudo

a casuiacutestica foi de 40 mulheres sendo 20 diagnosticadas com obesidade

apresentando Iacutendice de massa corporal (IMCgt 30 kgm2) e 20 mulheres em eutrofia

(IMC entre 185 e 249 kgm2) As mulheres diagnosticadas com obesidade foram

recrutadas no grupo de Obesidade e Siacutendrome Metaboacutelica do serviccedilo de

Endocrinologia do Hospital das Cliacutenicas da Universidade de Satildeo Paulo (HC-

FMUSP)

Foram utilizados como criteacuterios de exclusatildeo para esse grupo a presenccedila de

quadros infecciosos com sinais cliacutenicos uso de antibioacuteticos (3 meses antes do

estudo) quimioterapia radioterapia gravidez uso de probioacuteticos cirurgias preacutevias

no Trato Gastrointestinal doenccedilas do Trato Gastrointestinal como Doenccedila de Crohn

e Siacutendrome do Coacutelon Irritaacutevel Devido ao fato de haver dificuldade para distinccedilatildeo de

alimentos classificados como prebioacuteticos a ingestatildeo destes natildeo foi incluiacuteda como

criteacuterio de exclusatildeo do estudo O grupo controle foi composto por mulheres adultas

60

eutroacuteficas recrutadas na comunidade sem nenhuma enfermidade aparente tendo

sido fixados os mesmos criteacuterios de exclusatildeo adotados para o grupo controle

43 Delineamento experimental

As mulheres foram submetidas agrave coleta de material fecal e de sangue aleacutem de

questionaacuterio semiestruturado como instrumento de coleta Tal instrumento foi

construiacutedo atraveacutes de consulta em perioacutedicos cientiacuteficos e livros acadecircmicos que

descrevem preditores importantes em relaccedilatildeo a fatores etioloacutegicos predisponentes e

mantedenores da obesidade e possiacutevel associaccedilatildeo com microbiota intestinal e

ambiente Foram consideradas questotildees que avaliavam histoacuteria familiar cliacutenica

obsteacutetrica ginecoloacutegica consumo de aacutelcool e tabaco aleacutem de questotildees que

avaliavam os haacutebitos alimentares como a praacutetica de dietas para emagrecer e

nuacutemero de refeiccedilotildees realizadas Foi utilizado para esse estudo o IPAQ (International

Physical Activity Questionnaire) versatildeo curta originalmente desenvolvido com

finalidade de estimar o niacutevel de praacutetica habitual de atividade fiacutesica de populaccedilotildees de

diferentes paiacuteses (BARROS NAHAS 2000) O questionaacuterio foi elaborado de modo a

facilitar a obtenccedilatildeo de informaccedilotildees durante a consulta com os pacientes e realizadas

por indiviacuteduos previamente instruiacutedos para o desenvolvimento do estudo tendo as

variaacuteveis sido agrupadas em 9 Seccedilotildees que representam a subcategorizaccedilatildeo das

variaacuteveis independentes para determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada (Anexo

B)

44 Determinaccedilatildeo do estado nutricional

441 Avaliaccedilatildeo qualitativa do consumo alimentar

Para investigar possiacuteveis relaccedilotildees entre alimentos e nutrientes da dieta e

microbiota intestinal utilizou-se o questionaacuterio de frequecircncia alimentar semi-quantitativo

(QFA) composto por 62 itens alimentares proposto por Fisberg et al (2008) que

desenvolveram um QFA para utilizaccedilatildeo em estudos epidemioloacutegicos com indiviacuteduos

adultos desenhados para testar hipoacuteteses epidemioloacutegicas e nutricionais em estudos

conduzidos primariamente em Satildeo Paulo para estimar o teor de nutrientes da dieta

61

habitual o que eacute de fundamental importacircncia para estimar a medida de exposiccedilatildeo aos

fatores dieteacuteticos e investigar as possiacuteveis associaccedilotildees com desfechos de interesse

Representou-se a frequecircncia de consumo alimentar em 8 categorias a saber

diaacuterio (mais de trecircs vezes por dia duas a trecircs vezes por dia uma vez por dia) semanal

(cinco a seis vezes por semana duas a quatro vezes por semana uma vez por

semana) mensal (uma a trecircs vezes por mecircs) e nunca ou quase nunca Os dados sobre

o consumo alimentar foram inseridos em planilha eletrocircnica com auxiacutelio do estudo de

Giacomello et al (2008) Inicialmente converteu-se a frequecircncia de consumo de cada

alimento em frequecircncia diaacuteria como proposto por Coelho et al (2011) Para tanto

atribuiu-se ao alimento valor 1 (um) quando consumido 1 vez ao dia Caso o alimento

fosse consumido mais de uma vez ao dia multiplicava-se o valor 1 pelo intervalo da

frequecircncia diaacuteria relatada Para as opccedilotildees que contemplaram intervalos de tempo

semanal e mensal utilizou-se a meacutedia do intervalo das frequecircncias dividido pelo

periacuteodo se semanal (7) e mensal (30) conforme descritos no Quadro 01

Quadro 01ndash Criteacuterios utilizados na estimativa da frequecircncia diaacuteria de consumo dos alimentos incluiacutedos no Questionaacuterio de Frequecircncia Alimentar

Frequecircncia Relatada Frequecircncia diaacuteria

3 ou mais vezesdia 31=3

2 a 3 vezesdia 251= 25

1 vezdia 11= 1

5 a 6 vezessemana 557= 079


1vezsemana 17= 014

1 a 3 vezesmecircs 230= 007

1 vezmecircs 130= 003

NuncaQuase nunca 0

COELHO et al 2011

62

Posteriormente foram construiacutedos os grupos dos alimentos segundo o registro do

QFA Adotou-se como criteacuterio para a inclusatildeo do alimento no respectivo grupo o

consumo igual ou maior a 10 e as caracteriacutesticas nutricionais (HAIR et al 2005)

Considerando este criteacuterio foram construiacutedos 16 grupos de alimentos (1) massas (2)

preparaccedilotildees (3) carne vermelha e ovos (4) embutidos (5) carne branca (6) leite e

derivados (7) leguminosas (8) cereais raiacutezes e tubeacuterculos (9) hortaliccedilas (10) frutas

(11) industrializados (12) infusatildeo (13) bebida alcooacutelica (14) oacuteleos e gorduras (15)

lanches (16) accediluacutecares e doces

Os dados referentes ao QFA tambeacutem foram utilizados para calcular o consumo

energeacutetico e de nutrientes Primeiramente estes foram transformados em gramas

utilizando-se uma tabela para avaliaccedilatildeo de consumo alimentar em medidas caseiras

(PINHEIRO et al 2002) e em seguida lanccedilados no Software Excel para digitaccedilatildeo dos

dados do consumo alimentar e para o caacutelculo de consumo de macro e micronutrientes

Para preencher o banco de dados do Software com alimentos e preparaccedilotildees

consumidas pelas participantes foram utilizadas as Tabelas de composiccedilatildeo de

alimentos PHILIPPI (2002) e TACO (2006) com a Tabela de medidas caseiras

(PINHEIRO et al 2005) aleacutem de dados adicionais de Composiccedilatildeo quiacutemica de alimentos

compilados da Tabela de Composiccedilatildeo de Alimentos da Fundaccedilatildeo Instituto brasileiro de

Geografia e Estatiacutestica (IBGE) Os valores obtidos foram comparados com os valores de

recomendaccedilatildeo propostos pelo United States Departament of Agriculture (USDA) em

seus documentos Dietary References Intakes (DRI) referentes aos valores de Estimated

Average Requirements (EAR) e para os nutrientes que ainda natildeo possuem esse valor

definido utilizou-se como paracircmetro valores de Adequate Intake (AI)

442 Avaliaccedilatildeo antropomeacutetrica do estado nutricional

A mensuraccedilatildeo do peso corporal em quilogramas (kg) foi realizada em

duplicata considerando-se o peso meacutedio Para tal foi utilizada uma balanccedila digital

Filizolareg com capacidade maacutexima para 150 kg e precisatildeo de 100 g estando as

participantes da pesquisa descalccedilas e com roupas leves A estatura em centiacutemetros

(cm) foi realizada em duplicata considerando-se a estatura meacutedia As medidas

foram determinadas por meio de um estadiocircmetro graduado em centiacutemetros com

precisatildeo de 10 mm apresentando barra de madeira vertical e fixa com esquadro

moacutevel para posicionamento sobre a cabeccedila do indiviacuteduo quando os mesmos

63

estavam descalccedilos em posiccedilatildeo ereta com os peacutes paralelos calcanhares

panturrilhas gluacuteteos ombros e cabeccedila encostados no estadiocircmetro olhando-se

para frente

O Iacutendice de Massa Corpoacuterea (IMC) foi calculado pelo peso e estatura a partir

das quais foi determinada a relaccedilatildeo entre o peso e altura em metros ao quadrado e

avaliado segundo os pontos de corte preconizados pela OMS assim designados

baixo peso (IMC lt 185 Kgaltura2) eutrofia (IMC= 185 a 249 kgaltura2) sobrepeso

(IMC= 25 a 299 Kgaltura2) e obesidade (IMC gt30 Kg altura2) (WHO 1998)

4421 Anaacutelise da Composiccedilatildeo Corporal pelo Meacutetodo de Bioimpedacircncia

O aparelho de bioimpedacircncia eleacutetrica utilizado para a avaliaccedilatildeo da composiccedilatildeo

corporal foi o InBody 720 (Biospace Coreia) que consiste em bioimpedacircncia

octopolar atraveacutes de oito pontos de contato pelos quais passa a corrente eleacutetrica na

extremidade dos quatro membros determinando a porcentagem de gordura e massa

magra em cada membro assim como no tronco

A avaliaccedilatildeo foi realizada respeitando os procedimentos apresentados no

respectivo manual de uso do aparelho atendendo as seguintes condiccedilotildees de preacute-

teste (1) estar em jejum (2) natildeo consumir aacutelcool 48 horas antes do teste (3) natildeo

realizar exerciacutecio de intensidade moderada a elevada nas 12 horas antes da

avaliaccedilatildeo (4) natildeo efetuar o exame perante em estado febril ou de desidrataccedilatildeo (5)

natildeo utilizar bijuterias metaacutelicas ou implantes dentaacuterios com metal (6) natildeo ingerir cafeacute

e (7) realizar a avaliaccedilatildeo com roupa de banho ou roupas iacutentimas

O relatoacuterio da bioimpedacircncia Octopolar eacute dividido em quatro partes

informativas de dados obtidos

1 Anaacutelise da Composiccedilatildeo Corporal identifica como estaacute distribuiacuteda a aacutegua

corporal total percentual de massa magra e massa de gordura livre

2 Anaacutelise Muacutesculo-gordura mostra em kg o peso a massa de muacutesculo

esqueleacutetico e a massa de gordura

3 Diagnoacutestico da obesidade discrimina o IMC PGC (porcentagem de

gordura corporal) e RCQ (relaccedilatildeo cintura-quadril)

4 Aacuterea de Gordura Visceral informa a aacuterea de gordura visceral em cm2

64

45 Coleta das amostras cliacutenicas

Para a obtenccedilatildeo das amostras de fezes as mulheres foram previamente

instruiacutedas de acordo com o National Committee for Clinical Laboratory Standards

NCCCLS (2007) evacuando diretamente no coletor plaacutestico esteacuteril fornecido

juntamente com luvas espaacutetula coletora e etiqueta de identificaccedilatildeo O material foi

acondicionado em caixa isoteacutermica resfriada com gelo e transportado

imediatamente ao Laboratoacuterio de Micoplasmas ICBUSP As amostras de fezes

foram distribuiacutedas em aliquotas (180-200 ug) em microtubos e acondicionadas -80oC

ateacute a anaacutelise laboratorial

Para a realizaccedilatildeo da coleta do material sanguiacuteneo o operador munido de EPIs

realizou punccedilatildeo venosa perifeacuterica preferencialmente em membro superior natildeo

dominante Foram coletados cerca de 5 mL de sangue por tubopaciente tendo sido

utilizados tubos natildeo-heparinizados que foram conservados de forma similar aos

coletores em caixa isoteacutermica refrigerada O material obtido foi levado ateacute o

Laboratoacuterio de Micoplasmas ICBUSP onde as amostras foram centrifugadas a

3500 rpm para obtenccedilatildeo do soro seguido de sua distribuiccedilatildeo em aliacutequotas de cerca

de 1 mL e estocados a -80 degC ateacute o uso

65

46 Determinaccedilatildeo da microbiota intestinal

461 Padronizaccedilatildeo de reaccedilatildeo de PCR quantitativo (qPCR) por meio de TaqMan para a detecccedilatildeo de Mollicutes

4611 Cepas bacterianas e condiccedilotildees de cultura

Como controle positivo utilizou-se a cepa ATCC 23114 (PG-21) de M hominis

Tambeacutem foram utilizados como controle os seguintes micro-organismos obtidos da

coleccedilatildeo do Laboratoacuterio de Micoplasmas ICBUSP Mycoplasma bovis Donetta M

arginini G230 M dispar M2979 M pneumoniae M pulmonis PG34 M

gallisepticum PG31 M synoviae WUU1853 M penetrans ATCC 55252 (GTU 54)

M fermentans PG18 M pulmonis PG34 M hyorhinis M genitalium ATCC 33530

(G37) M buccale M edwardii PG24 M gateae M faucium M felis CO M bovis

Spiroplasma mirum (SMCA) Acholeplasma laidlawii PG38 Ureaplasma diversum

ATCC 449782 U urealyticum T960 Escherichia coli ATCC 25922 Klebsiella

pneumoniae ATCC 13883 Streptococcus pyogenes ATCC 12345 Salmonella

typhimurium C5 CIP Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 Staphylococcus

aureus ATCC 25293 e Bacillus cereus As cepas referentes aos micro-organismos

Bacteroides fragilis C45A AUS 00306 e Clostridium perfringens foram cedidas pelo

Professor Dr Jorge Luiz Melo Sampaio pesquisador associado do Instituto Fleury

As espeacutecies de Ureaplasmas foram cultivadas em meio UB especiacutefico para

ureaplasma com 5 de CMRL-1066 (com glutamina e sem bicarbonato) enquanto

as espeacutecies de Micoplasmas foram cultivadas em meio de cultura SP4 como

descrito por Tully et al (1995) As bacteacuterias com parede celular incluiacutedas como

controles foram cultivadas em meio de infusatildeo de ceacuterebro-coraccedilatildeo (BHI) Destas

cepas o DNA foi extraiacutedo a partir de culturas em fase logariacutetmica por meio do kit

Pure Linktrade Genomic DNA da Invitrogenreg

4612 Desenvolvimento de primers e sonda para a detecccedilatildeo de Mollicutes pela PCR quantitativa

Os oligonucleotiacutedeos iniciadores e as sondas foram selecionadas com base no

fragmento conservado do gene 16S rRNA especiacutefico para a classe Mollicutes As

sequecircncias do gene 16S rRNA de micoplasmas foram alinhadas utilizando o

algoritmo ClustalW do Software MEGA4 As regiotildees variaacuteveis foram selecionadas

66

manualmente para o sequencionamento dos iniciadores e sondas utilizadas neste

ensaio Propriedades dos oligonucleotiacutedeos foram tambeacutem analisadas pelo Software

Primer Express ver 30 (Applied Biosystems Life Technologies Corporation

Carlsbad CA EUA) A especificidade dos iniciadores e da sonda foi testada ldquoin

silicordquo utilizando algoritmos BLAST

O quadro 02 mostra as sequecircncias forward e reverse selecionadas para

amplificar um fragmento conservado do gene 16S rRNA especiacutefico de Mollicutes A

sonda TaqMan especiacutefica para o fragmento amplificado foi desenvolvida por uma

fonte comercial (Applied Biosystems Life Technologies Corporation)

Quadro 2 - Sequecircncias dos iniciadores utilizados para amplificaccedilatildeo do gene 16S rRNA para Mollicutes

Iniciadores Sequecircncia

Molli1 5 GCA TTA GAT GAT CCG CCT GAG T 3

Molli2 5 GTC CCC GTC AAT TCC TTT AAG TT 3

Sonda 5 GTC CCC GTC AAT TCC TTT AAG TT 3

4613 PCR quantitativa

Ensaios de quantificaccedilatildeo absoluta do DNA alvo foram realizados com sistema

de PCR em tempo real (qPCR) StepOne (Applied Biosystems Life Technologies

Corporation) Diferentes concentraccedilotildees de cada primer iniciador e sonda foram

testados para aprimorar a reaccedilatildeo de qPCR Considerou-se ideal as seguintes

caracteriacutesticas r2 ge 0950 eficiecircncia entre 95 a 105 e slope proacuteximo de -332

A melhor reaccedilatildeo obtida foi a partir de 625 microl de Universal PCR Master Mix

(Applied Biosystems) 1 microM de cada iniciador 05 microM de sonda TaqMan MGB

marcada com corante fluorescente 25 microl de DNA extraiacutedo e aacutegua sem RNase para

o volume final de 125 microl As condiccedilotildees de amplificaccedilatildeo foram 50 degC por 10 min 95

degC por 10 min e 45 ciclos de desnaturaccedilatildeo a 95 degC durante 15 s anelamento a 59

degC durante 1 min Todas as reaccedilotildees foram realizadas em duplicata no aparelho

PCR em tempo real StepOnePlus (Applied Biosystems)

67

Para a construccedilatildeo de padrotildees de DNA para a quantificaccedilatildeo absoluta utilizou-

se como controle positivo a cepa de referecircncia ndash M hominis ATCC 23114 (PG-21)

que foi inicialmente cultivada em 1 ml de caldo SP4 a 37 degC e expandidos ateacute 100

ml Na fase de crescimento logariacutetmico (com base em alteraccedilotildees colorimeacutetricas) a

cultura foi centrifugada a 20600 rpm durante 30 minutos a 25 degC O DNA foi extraiacutedo

usando o kit PureLinktrade Genomic DNA Mini O nuacutemero de coacutepias de DNA genocircmico

foi calculado por espectrofotometria (NanoDrop ND -1000 WITec Ag Littau Suiacuteccedila)

Diluiccedilotildees decimais (107- 1 coacutepiasl) do DNA de M hominis para curva padratildeo foram

preparadas e analisadas

Os dados foram obtidos durante a etapa de anelamento e analisados pelo

Software StepOne 21 (Applied Biosystems Life Technologies Corporation) O limiar

foi ajustado manualmente dentro da curva logariacutetmica acima do niacutevel de detecccedilatildeo

basal e abaixo da fase linear e do platocirc O ciclo limiar (Ct-threshold cycle) das

diluiccedilotildees do genoma foi plotado contra o nuacutemero de log de coacutepias do genoma e

utilizado como entrada para criar a curva padratildeo Anaacutelises de regressatildeo linear foram

aplicadas para calcular os valores de r2 e do slope Assumindo a eficiecircncia de 100

se o molde de DNA eacute duplicado em cada ciclo a eficiecircncia da PCR foi calculada

como E= 10 (-1slope) - 1 onde E eacute a eficiecircncia da PCR

4614 Especificidade da qPCR e repetibilidade intra e inter-ensaios

O DNA dos micro-organismos utilizados como controles foi testado para

verificar a especificidade dos ensaios de qPCR (descrito em cepas bacterianas) A

repetibilidade intra-ensaio foi determinada executando cinco repeticcedilotildees das diluiccedilotildees

do genoma de M hominis (107 a 1 coacutepia do genoma bacterianoreaccedilatildeo) na mesma

reaccedilatildeo A curva padratildeo foi gerada utilizando o software StepOne 21 (Applied

Biosystems Life Technologies Corporation) A repetibilidade inter-ensaio foi obtida

por reaccedilotildees em triplicatas com a mesma diluiccedilatildeo do genoma em trecircs ensaios

diferentes em dias separados e consecutivos Estas repeticcedilotildees foram aplicadas

para determinar a meacutedia o desvio padratildeo e o coeficiente de variaccedilatildeo em valores de

Ct para cada diluiccedilatildeo do genoma

68

462 Reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) convencional

As amostras cliacutenicas tambeacutem foram submetidas a PCR convencional para a

detecccedilatildeo da Classe Mollicutes utilizando-se dos os iniciadores descritos por Van

Kuppeveld et al (1992) Aacutegua livre de nuclease foi utilizada como controle negativo

em ambos os ensaios Os produtos amplificados foram analisados em gel de

agarose a 15 com brometo de etiacutedio 05 mmmL e tampatildeo TAE (Trisacetate 40

mM EDTA 2 mM pH 80) Os produtos foram visualizados e foto documentados sob

luz ultravioleta utilizando um sistema foto documentador (Vilber Lourmat Marne-la-

Vallee Franccedila)

463 Detecccedilatildeo de micro-organismos dos filos Firmicutes e Bacteroidetes e bacteacuterias totais (Eubacterias) por PCR em tempo Real (qPCR)

Para a construccedilatildeo de padrotildees de DNA para a quantificaccedilatildeo absoluta de

Firmicutes e Bacteroidetes utilizou-se como controles positivos as cepas de

referecircncias ndash Clostridium perfringens e Bacteroides fragilis respectivamente Para a

quantificaccedilatildeo de Bacteacuterias Totais (Eubacteacuterias) foi utilizado como controle positivo

Clostridium perfringens Os controles foram submetidos agrave extraccedilatildeo de DNA por meio

do kit QIAamp DNA stool ndash QIAGEN baseado no protocolo de extraccedilatildeo sugerido

pelo fabricante Para os filos Firmicutes Bacteroidetes assim como Bacteacuterias totais

foram utilizadas sequencias de iniciadores descritos por Guo et al (2008)

apresentadas no quadro 3

69

Quadro 3 ndash Sequecircncias dos iniciadores utilizados para amplificaccedilatildeo do gene 16S rRNA para Firmicutes Bacteroidetes e Bacteacuterias Totais (Eubacteacuterias)

Iniciadores Sequecircncia Referecircncia

Firm934F 5 GGA GYA TGT GGT TTA ATT CGA AGC A 3 GUO et al 2008

Firm1060R 5 AGC TGA CGA CAA CCA TGC AC 3

Bact934F 5 GGA RCA TGT GGT TTA ATT CGA TGA T 3 GUO et al 2008

Bact1060R 5 AGC TGA CGA CAA CCA TGC AG 3

Eub338F 5 ACT CCT ACG GGA GGC AGC AG 3 FIERER et al 2005

Eub518R 5 ATT ACC GCG GCT GCT GG 3

Os micro-organismos foram quantificados de modo absoluto baseando-se em

curva padratildeo previamente estabelecida Para cada reaccedilatildeo finalizada uma nova

curva padratildeo foi adicionada e paracircmetros de qualidade foram adotados na anaacutelise

sendo estes r2 ge 0950 eficiecircncia da reaccedilatildeo variando de 95 a 105 e slope

proacuteximo de -332

As reaccedilotildees de qPCR foram realizadas em volume final de 125 μL com 625

μL da mistura universal SYBR Green (Applied Biosystems Satildeo Paulo SP Brasil)

0 25 μM de cada primer especiacutefico 45μL de aacutegua e 125 μl de DNA extraiacutedo com

volume final de 125 μL As quantificaccedilotildees foram realizadas utilizando-se a

plataforma Applied Biosystems (Life Technologies Corporation) com os seguintes

paracircmetros 50 degC por 10 minutos 95 degC por 10 minutos seguidos de 45 ciclos de

95 degC por 15 segundos e 60degC por 1 minuto seguidas da curva de melting (15

segundos a 95 degC 1 minuto a 60 degC 15 segundos a 95 degC e 15 segundos e 60 degC)

47 Dosagem de citocinas do soro sanguiacuteneo

A dosagem das citocinas IL-1β TNF-α IL-10 e IL17-A foram realizadas

utilizando-se kit de ELISA de captura (eBioscience San Diego C A Estados

Unidos) em placas de poliestireno com 96 orifiacutecios e alta absorccedilatildeo de acordo com

protocolo indicado pelo fabricante Apoacutes padronizaccedilatildeo da curva padratildeo a aliacutequota

de 100 microL do sobrenadante das ceacutelulas foi utilizada para dosar as citocinas IL-1β

TNF-α IL-10 e IL17-A A leitura foi realizada com instrumento leitor de ELISA Vivid

70

Vision com comprimento de onda de 450 nm Os dados obtidos em absorbacircncia

foram transformados em picomols por meio de foacutermula matemaacutetica

48 Anaacutelises Estatiacutesticas

As anaacutelises estatiacutesticas da presenccedila dos microrganismos da classe Mollicutes

detectados nas amostras cliacutenicas e dos dados obtidos dos questionaacuterios foram

avaliados por meio do software SPSS 200 (SPSSreg Inc Chicago Estados Unidos)

Para comparar variaacuteveis de consumo alimentar e as variaacuteveis relacionadas ao perfil

da populaccedilatildeo estudada entre os grupos caso e controle foi aplicado Teste de qui-

quadrado de Pearson ou Teste Exato de Fisher tendo sido considerado plt005 e IC

95 O teste t que compara meacutedia entre grupos foi utilizado para verificar a

existecircncia de associaccedilatildeo entre as variaacuteveis desfecho (mulheres obesas x mulheres

eutroacuteficas) e as variaacuteveis Mollicutes (presenccedila x ausecircncia) com o consumo

alimentar dos macronutrientes carboidratos proteiacutenas lipiacutedeos e fibras (p le 005)

Unidos) Aleacutem disso para verificaccedilatildeo de associaccedilatildeo entre as variaacuteveis desfecho e a

presenccedila de Mollicutes foi aplicado Teste de qui-quadrado de Pearson ou Teste

Exato de Fisher tendo sido calculada a razatildeo de chances (odds ratio) (IC 95)

com o objetivo de verificar o poder da associaccedilatildeo entre as variaacuteveis supracitadas

Para verificar as distribuiccedilotildees de cargas dos micro-organismos estudados em

ambos os grupos avaliados inicialmente foi utilizado o teste de normalidade de

Shapiro-Wilk que demonstrou natildeo satisfazer a preacute-suposiccedilatildeo para utilizaccedilatildeo de um

teste parameacutetrico A partir desse resultado foi utilizado o teste natildeo-parameacutetrico de

Mann-Whitney amplamente utilizado para amostras pareadas que natildeo seguem

distribuiccedilatildeo normal As anaacutelises foram realizadas utilizando o programa estatiacutestico

GraphPad Prism versatildeo 500 (GraphPad Software San Diego California USA)

sendo estabelecida a existecircncia de significacircncia estatiacutestica quando o valor de p le

005 em todas as anaacutelises

Para anaacutelise dos dados de quantificaccedilatildeo das citocinas tambeacutem foi utilizado o

programa GraphPad Prism versatildeo 500 (GraphPad Software San Diego California

USA) tendo sido realizado o teste natildeo-parameacutetrico de Mann-Whitney

71

5 RESULTADOS

51 Perfil da populaccedilatildeo estudada

A amostragem do estudo envolveu 40 mulheres sendo 20 classificadas com

obesidade (IMC gt30 Kgm2) e 20 em eutrofia (IMC 185 - 249 Kgm2) com meacutedia de

idade de 38 anos para todas as mulheres 44 anos (DP 93 Amplitude 28-57) para

as mulheres obesas do grupo caso e 33 anos (DP 1204 Amplitude22-66) para as

mulheres eutroacuteficas do grupo controle

No presente estudo as variaacuteveis foram agrupadas em 9 Seccedilotildees com

resultados descritivos representados nas tabelas de 1 a 9 que representam a

subcategorizaccedilatildeo das variaacuteveis independentes para determinaccedilatildeo do perfil da

populaccedilatildeo estudada

O grupo das mulheres obesas foi caracterizado pela maioria de cor preta

parda ou indiacutegena (70) onde as moleacutestias atuais associadas mais frequentes

foram hipertensatildeo (30) dispneia (35) constipaccedilatildeo (35) refluxo (35) e

alteraccedilatildeo menstrual (55) A maioria das mulheres nasceram de parto normal

(75) foram amamentadas (90) jaacute tiveram filhos (70) e foram classificadas

como fisicamente ativas (60) Aleacutem disso 13 (65) das mulheres do grupo caso

referiram fazer trecircs ou mais refeiccedilotildees por dia Em relaccedilatildeo ao grupo das mulheres

eutroacuteficas esse foi caracterizado pela maioria de cor branca ou amarela (55) onde

as moleacutestias atuais associadas mais frequentes foram hipercolesterolemia (5)

dispneia (5) gastrite (15) e constipaccedilatildeo (20) Metade das mulheres nasceram

de parto normal (50) e foram amamentadas (85) enquanto 2 (10) tiveram

filhos e 9 (55) foram classificadas como fisicamente ativas Assim como o grupo

caso 13 (65) das mulheres do grupo controle referiram fracionar sua refeiccedilatildeo em

trecircs ou mais por dia

Aleacutem disso observa-se com base nos resultados estatiacutesticos que houve

variaccedilatildeo significativa na comparaccedilatildeo das variaacuteveis relacionadas ao perfil da

populaccedilatildeo estudada Em relaccedilatildeo agrave Seccedilatildeo 1 Histoacuteria Cliacutenica foram encontradas

variaccedilotildees significativas para as variaacuteveis associadas ao trato gastrintestinal

flatulecircncia (p=0008) refluxo (p=0018) azia (p=0008) e para as variaacuteveis

associadas agrave Moleacutestia atual hipertensatildeo (p=0008) dispneacuteia (p=0008) e alteraccedilatildeo

menstrual (p=0000) Em relaccedilatildeo agrave Seccedilatildeo 4 Histoacuteria Obsteacutetrica foi encontrada

72

variaccedilatildeo significativa para a variaacutevel gestaccedilatildeo (p=0000) Para a Seccedilatildeo 5 Histoacuteria

ginecoloacutegica observou-se variaccedilatildeo estatiacutestica para a variaacutevel menopausa (p=0038)

Tabela 1 ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 1 Dados socioeconocircmicos Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota n= 20 mulheresa ndash Considerou-se como valor de Salaacuterio Miacutenimo (R$ 67800) ndash Significacircncia estatiacutestica quando p-valor le 005

Tabela 2 ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 2 Histoacuteria Familiar Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota n= 20 mulheres a ndash Referente agrave parentes de primeiro grau paternos e maternos aleacutem de irmatildeos ndash Significacircncia estatiacutestica quando p-valor le 005

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Raccedilacor

009-128 0110 PretaPardaIndiacutegena BrancaAmarela

14 (70) 6 (30)

9 (45) 11 (55)

Escolaridade

096-128 0147 lt Ensino Meacutedio ge Ensino Meacutedio

1 (5) 19(95)

0 (0) 20 (100)

Relaccedilatildeo Estaacutevel

023-283 0752 Sim Natildeo

11 (55) 9 (45)

10 (50) 10 (50)

Renda familiar

010-155 0185 lt 2 salaacuterios miacutenimosa ge 2 salaacuterios miacutenimosa

9 (45) 11 (55)

5 (25) 15 (75 )

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Famiacutelia hipertensatildeo


17 (85) 3 (15)

12 (60) 8 (40)

Famiacutelia diabetesa


12 (60) 8 (40)

8 (40) 12 (60)

Famiacutelia obesidadea


13 (65) 7(35)

7 (35) 13 (65)

Famiacutelia hipercolesterolemiaa


11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)

Famiacutelia Doenccedilas Caacuterdio-vasculares (DCV)a


10 (50) 10 (50)

10 (50) 10 (50)

73

Tabela 3 ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 3 Histoacuteria Cliacutenica Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota n=20 mulheres a- Histoacuterico cliacutenico das pacientes em relaccedilatildeo agrave alteraccedilotildees gastrintestinais moleacutestia atual e uso de laxantes- Diferenccedila estatiacutestica natildeo computada pois a variaacutevel eacute uma constante

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

TGI constipaccedilatildeoa


7 (35) 13 (65)

2 (10) 18 (90)

TGI flatulecircnciaa


6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI refluxoa


7 (35) 13 (65)

1 (5) 19 (95)

TGI aziaa


6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI uacutelceraa


1 (5) 19 (95)

0 00) 20 (100)

TGI gastritea Sim Natildeo

2 (10)

18 (90)

3 (15)

17 (85) 023-107 0633

TGI naacuteuseasa Sim Natildeo

3 (15)

17(85)

1 (5)

19 (95) 002-314 0292

TGI vocircmitosa Sim Natildeo

1 (5)

19 (95)

0 (0)

20 (100) 095-116 0311

TGI diarreacuteiaa Sim Natildeo

0 (0)

20(100)

0 (0)

20 (100)

Moleacutestia atual hipertensatildeoa Sim Natildeo

6 (30)

14 (70)

0 (0)

20 (100) 107-190 0008

Moleacutestia atual diabetesa Sim Natildeo

0 (0)

20 (100)

0 (0)

20 (100)

Moleacutestia atual hipercolesterolemiaa Sim Natildeo

5 (25)

15 (75)

1 (5)

19 (95) 001-150 0077

Moleacutestia atual DCVa Sim Natildeo

2 (10)

18 (90)

0 (0)

20 (100) 096-128 0147

Moleacutestia atual Dispneacuteiaa Sim Natildeo

7 (35)

13 (65)

1 (5)

19 (95) 001-089 0018

Moleacutestia atual alteraccedilatildeo menstruala Sim Natildeo

11 (55)

9 (45)

0 (0)

20 (100) 136-360 0000

Uso de laxantesa Sim Natildeo

3 (15)

17 (85)

0 (0)

20 (100) 097-141 0072

74

Tabela 4 ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 4 Histoacuteria Obsteacutetrica Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota n= 20 mulheres andash Foram considerados aspectos relacionados as pacientes em seu nascimento e na maternidade ndash Significacircncia estatiacutestica quando p-valor le 005

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo controle n ()

IC 95 P

Nascimento por parto cesaacutereaa


5 (25) 15(75)

10 (50) 10 (50)

Nascimento por parto normala


15 (75) 5 (25)

10 (50) 10 (50)

Foi amamentadaa


18 (90) 2 (30)

17 (85) 3 (15)

Teve alguma gestaccedilatildeoa


14 (70) 6 (30)

2 (10) 18 (90)

Sofreu algum abortoa Sim Natildeo

2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 096-128 0147

75

Tabela 5 ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 5 Histoacuteria Ginecoloacutegica Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota n= 20 mulheres andash Idade meacutedia em que todas as mulheres estudadas comeccedilaram a ingerir

contraceptivo 22 anos ndash Significacircncia estatiacutestica quando p-valor le 0005

Tabela 6 ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 6 Consumo atual de tabaco Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota n= 20 mulheres ndash Significacircncia estatiacutestica quando p-valor le 005

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Menopausa


9 (45) 11(55)

3 (15) 17 (85)

Usou ou estaacute usando contraceptivo


16 (80) 4 (20)

16 (80) 14 (20)

Contraceptivo hormonal


13 (65) 7 (35)

15 (75) 5 (25)

Contraceptivo natildeo hormonal


3 (15) 17(85)

1 (5) 19 (95)

Idade que comeccedilou a ingerir ge 22 anosa


10 (50) 10 (50)

6 (30) 14 (70)

Idade que comeccedilou a ingerir lt 22 anosa Sim Natildeo

2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 063-853 0197

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Consumo atual de tabaco


4 (20) 16 (80)

1 (5) 19 (95)

Jaacute consumiu tabaco


5 (25) 15 (75)

5 (25) 15 (75)

76

Tabela 7 ndash Determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 7 Consumo atual de aacutelcool Satildeo Paulo SP 2013-2014


Tabela 8 ndash Tabela de determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 8 Atividade Fiacutesica (IPAQ versatildeo curta) Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota n= 20 mulheres andash Para a classificaccedilatildeo foi utilizado o IPAQ (International Physical Activity Questionnaire) versatildeo curta Irregularmente ativa Irregularmente ativa A e B ndash Significacircncia estatiacutestica quando p-valor le 005

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Consumo atual de aacutelcool


8 (40) 12 (60)

11 (55) 9 (45)

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

IC 95 P

Niacutevel de atividade fiacutesica

015-191 0342 Ativaa Irregularmente ativaa

12 (60) 8 (40)

9 (45) 11 (55)

77

Tabela 9 ndash Tabela de determinaccedilatildeo do perfil da populaccedilatildeo estudada referente agrave Seccedilatildeo 9 Mudanccedilas recentes nos haacutebitos alimentares Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota n= 20 mulheres andash Meacutedia de refeiccedilotildees diaacuterias 3 refeiccedilotildees - Diferenccedila estatiacutestica natildeo

computada pois a variaacutevel eacute uma constante ndash Significacircncia estatiacutestica quando p-valor le 005

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

n ()

IC 95 P

Mudou haacutebitos alimentares recentemente


7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)

Mudou haacutebitos alimentares recentemente para perda de peso


7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)

Mudou haacutebitos alimentares recentemente para dieta vegetariana ou restriccedilatildeo de consumo carne

Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)

Mudou haacutebitos alimentares recentemente restriccedilatildeo de consumo sal

Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)

Mudou haacutebitos alimentares recentemente para reduccedilatildeo do colesterol

Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)

ge refeiccedilotildeesdiaa

Sim Natildeo

13(65) 7(35)

14(70) 6(30)

033-473 0736

lt refeiccedilotildeesdiaa

Sim Natildeo

7(35)

13(65) 7(35)

13(65) 027-366 1000

Desjejum diariamente


13 (35) 7(65)

16 (80) 4 (20)

Costuma beliscar entre as refeiccedilotildees


11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)

Costuma ingerir liacutequidos durante as refeiccedilotildees


16 (80) 4 (20)

12 (60) 8 (40)

Costuma fazer refeiccedilotildees fora de casa


12 (60) 8 (40)

19 (95) 1 (5)

78



Na Tabela 10 (apecircndice) encontra-se a participaccedilatildeo dos alimentos nos grupos

e meacutedias de consumo diaacuterio dos alimentos pela populaccedilatildeo estudada Os alimentos

mais consumidos e que apresentaram frequecircncia diaacuteria de uma vez ao dia ou mais

em relaccedilatildeo ao grupo caso foram feijatildeo arroz alface tomate e oacuteleo azeite ou

vinagre para tempero de salada Em relaccedilatildeo ao grupo controle os que apresentaram

consumo diaacuterio de uma vez ou mais foram arroz e patildeo francecircs patildeo de forma

integral patildeo doce ou torrada

O percentual de consumo dos 16 grupos alimentares identificados derivados

do QFA (Tabela 11) em relaccedilatildeo ao grupo caso que foram consumidos por 80 ou

mais da populaccedilatildeo foram massas carne vermelha e ovos embutidos carne branca

cereais raiacutezes e tubeacuterculos hortaliccedilas e frutas No mesmo grupo populacional os

grupos alimentares de menor consumo foram bebida alcooacutelica leite e derivados e

preparaccedilotildees com percentuais de consumo de 30 493 e 525

respectivamente Os grupos que apresentaram consumo intermediaacuterio foram

Infusatildeo Oacuteleos e gorduras accediluacutecar e doces lanches leguminosas e alimentos

industrializados com percentuais de consumo de 60 616 65 783 783 e

79 respectivamente No grupo controle os grupos alimentares que apresentaram

consumo de 80 ou mais da populaccedilatildeo foram massa carne vermelha e ovos carne

branca cereais raiacutezes e tubeacuterculos hortaliccedilas lanches e accediluacutecar e doces Ainda

nesse grupo populacional os grupos alimentares de menor consumo assim como no

grupo caso foram bebida alcooacutelica preparaccedilotildees e leite e derivados com

percentuais de consumo de 45 45 e 486 respectivamente Os grupos que

apresentaram consumo intermediaacuterio foram oacuteleos e gorduras Infusatildeo alimentos

embutidos leguminosas alimentos industrializados e frutas com percentuais de

consumo de 616 65 65 65 657 731 respectivamente

79

Tabela 11 ndash Definiccedilatildeo dos grupos alimentares derivados do Questionaacuterio de Frequecircncia Alimentar (QFA) e percentual de consumo da populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014

Grupo Alimentar

Grupo Consumo Alimentos

Massas

Caso 90 Macarratildeo com molho sem carne macarratildeo com molho com

carne lasanha nhoque pizza e panqueca Controle 916

Preparaccedilatildeo Caso

525 Sopas polenta cozida ou frita

Controle 45

Carne vermelha e ovos

Caso 888 Carne bovina Carne de porco carne de sol bacon e ovo

Controle 813

Embutidos Caso 825 Linguiccedila e embutidos (presunto mortadela salsicha)

Controle 65

Carne branca Caso 975 Frango peixe e frutos do mar

Controle 95

Leite e derivados

Caso 493 Leite integral leite desnatado leite semi-desnatado iogurte

natural iogurte com frutas queijo mussarela queijo prato

parmesatildeo provolone queijo minas e ricota

Controle 486

Leguminosas

Caso 783 Feijatildeo lentilha ervilha seca gratildeo de bico soja feijoada feijatildeo tropeiro

Controle 65

Cereais raiacutezes e tubeacuterculos

Caso

813

Arroz branco integral cozido com oacuteleo e temperos batata frita

mandioca frita batata cozida mandioca cozida inhame purecirc

de batatas ou mandioca farinha de mandioca farofa cuscuz

tapioca aveia patildeo francecircs patildeo de forma torrada biscoito

sem recheio doce e salgado biscoito recheado biscoito

amanteigado waffer bolo simples bolo recheado

Controle

887

Hortaliccedilas

Caso 964 Alface tomate cenoura outros legumes (abobrinha berinjela chuchu pepino) outras verduras cruas (acelga ruacutecula agriatildeo) outras verduras cozidas (acelga espinafre escarola couve) broacutecolis couve-flor e repolho

Controle 926

Frutas Caso 825 Laranja mexerica abacaxi banana maccedila pecircra melatildeo

melancia mamatildeo goiaba abacate suco natural Controle 731

Industrializados

Caso

79

Maionese condimentos molho para salada patecirc chantilly suco industrializado refrigerante comum diet e light hambuacuterguer nuggets almondegas Controle 657

Infusatildeo Caso 60 Chaacute e cafeacute sem accediluacutecar chaacute e cafeacute com accediluacutecar

Controle 65

Bebida alcooacutelica Caso 30 Cerveja

Controle 45

Oacuteleos e gorduras Caso 616 Oacuteleo azeite vinagre manteiga ou margarina comum

manteiga ou margarina light Controle 616

Lanches Caso 783 Salgados fritos salgados assados sanduiacuteche

Controle 833

Aacutecuacutecar e doces Caso 65 Chocolate bombom brigadeiro chocolate em poacute sobremesas doces tortas e pudins accediluacutecar mel geleacuteia Controle 888

80

Todos os indiviacuteduos da pesquisa foram avaliados quanto a ingestatildeo dieteacutetica

Os dados dieteacuteticos obtidos foram traduzidos em energia macro e micronutrientes

(Tabela 12) Observa-se com base nos resultados estatiacutesticos que natildeo houve

variaccedilatildeo significativa no consumo alimentar das mulheres estudadas tendo sido

semelhante entre os grupos caso e controle Aleacutem disso ao realizar-se o teste t

comparando as meacutedias de consumo dos macronutrientes carboidratos proteiacutenas

lipiacutedios e fibras com as variaacuteveis desfecho (mulheres obesas x mulheres eutroacuteficas)

tambeacutem natildeo foram observadas associaccedilotildees estatisticamente significantes

Analisando a razatildeo de ingestatildeo quilocaloriasquilograma de peso corporal

tem-se que o grupo caso teve meacutedia de ingestatildeo energeacutetica de 199 kcalkgdia e o

grupo controle 279 kcalkgdia (Tabela 13) O grupo controle evidenciou consumo

compatiacutevel para a manutenccedilatildeo do seu peso (faixa de recomendaccedilatildeo 25-30

kcalkgdia) enquanto o grupo caso apresentou um niacutevel meacutedio de ingestatildeo abaixo

do valor de manutenccedilatildeo a ingestatildeo energeacutetica foi 204 menor do que a

recomendaccedilatildeo considerando-se o limite inferior de 25 kcalkgdia

Outra razatildeo de ingestatildeo gramas de proteiacutenasquilograma de peso corporal eacute

utilizada para caacutelculo e recomendaccedilatildeo de consumo proteacuteico sem prejuiacutezo da funccedilatildeo

renal (recomendaccedilatildeo de ingestatildeo 06 a 08 g de proteiacutenaskg de pesodia) O grupo

controle apresentou ingestatildeo proteacuteica acima do recomendado 12 g de proteiacutenaskg

de pesodia enquanto o grupo caso apresentou um niacutevel meacutedio de consumo

compatiacutevel com a recomendaccedilatildeo 078 g de proteiacutenaskg de pesodia apresentando-

se no limite maacuteximo preconizado (Tabela 13)

81

Tabela 12 ndash Anaacutelise de consumo de energia e nutrientes da populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014

Variaacuteveis Grupo Meacutedia de consumo

Desvio Padratildeo

IC 95 P

Energiadia (kcal)

Caso 18571 93622 (137401 ndash 205869) 093

Controle 1692 98334 (120438 ndash 217822)

Carboidratodia (g)

Caso 24345 16826 (16706 ndash 25787)

090 Controle 20785

10997 (15402 ndash 26294)

Gordura totaldia (g)

Caso

658

276

(5205 ndash 7926) 086

Controle

627

4714 (3998 ndash 8673)

Gordura polinsaturadadia

(g)

Caso 795 416 (617 ndash 937) 048

Controle 85 675 (575 ndash 1237)

Gordura monoinsaturadadia

(g)

Caso 206 925 (1640 ndash 2553)

059 Controle 182 1598

(1077 ndash 2651)

Gordura saturadadia (g)

Caso 2185 1149 (1670 ndash 2808)

075 Controle 204 1698 (1239 ndash 2924)

Proteiacutenadia (g) Caso 7355 3508 (5531 ndash 8905)

091 Controle 7285 4985 (4914 ndash 9849)

Fibra totaldia (g) Caso 168 902 (1247 ndash 1953)

027 Controle 1265 765 (944 ndash1699)

Fibra soluacuteveldia (g) Caso 4 332 (273 ndash 563)

029 Controle 285 23 (215 ndash 437)

Fibra insoluacuteveldia (g)

Caso 56 391 (404 ndash 703) 025


Colesteroldia (g) Caso 23635 13965 (17127 ndash 30877)

077 Controle 26105 26790 (12780 ndash 39313)

Vitamina Adia (UI) Caso 95885 55538 (70451 ndash 124904)

055 Controle 872 47033 (64231 ndash 110801)

Vitamina Cdia (mg) Caso 2105 18857 (11025 ndash 29152)

011 Controle 12035 8752 (7936 ndash 16565)

Vitamina B1dia (mg)

Caso 13 117 (131 ndash 204) 072


Vitamina B2dia (mg)

Caso 08 083 (107 ndash 174) 079


82


(Continuaccedilatildeo)

Variaacuteveis Grupo Meacutedia

de consumo Desvio Padratildeo

IC 95 P

Vitamina B6dia (ug)

Caso 110 102 (121 ndash 197)

085 Controle 105 088 (110 ndash 197)

Vitamina B12dia (ug)

Caso 38 253 (309 ndash 562) 096


Vitamina Ddia (mg)

Caso 915 1620 (211 ndash 1803) 012

Controle 23 3357 (733 ndash 4061)

Niacinadia (mg)

Caso 19 1005 (1402 ndash 2191)

059 Controle 193

1303 (1339 ndash 2641)

Folatodia (mg)

Caso

24010

11621

(17758 ndash 28351) 054

Controle 20495 12117 (14708 ndash 26684)

Aacutecido pantotecircnicodia

(mg)

Caso 35 216 (292 ndash 443) 074


VitaminaEdia (mg)

Caso 1155 651 (894 ndash 1309) 079


Iododia (mg) Caso 547 4984 (3206 ndash 8098)

049 Controle 4515 3674 (2814 ndash 6439)

Soacutediodia (mg) Caso 230285 159724 (155816 ndash 246261)

099 Controle 201715 148254 (127647 ndash 274446)

Caacutelciodia (mg) Caso 69045 42353 (47627 ndash 89502)

068 Controle 62645 33992 (46373 ndash 79973)

Magneacutesiodia (mg)

Caso 2325 10339 (17818 ndash 25995) 044

Controle 1947 9452 (14888 ndash 24255)

Zincodia (mg) Caso 85 523 (617 ndash 1115)

086 Controle 78 476 (603 ndash 1068)

Manganecircsdia (mg)

Caso 6 85 (206 ndash 1045) 064

Controle 1095 2019 (148 ndash 1446)

Potaacutessiodia (mg)

Caso 271955 117073 (208408 ndash 3131423) 029

Controle 220685 115874 (164415 ndash 279085)

Foacutesforodia (mg)

Caso 9754 44188 (73698 ndash 1151535) 086

Controle 9085 56939 (63379 ndash 119689)

83





IC 95 P

Ferrodia (mg) Caso 137 859

(996 ndash 1538)

069

Controle 1145 616 (885 ndash 1492)

Cobredia (mg) Caso 1 0 917 (1 ndash 167)

090 Controle 085 109 (094 ndash 167)

Selecircniodia (ug) Caso 33475 21854 (23251 ndash 44777)

068 Controle 400 5844 (11179 ndash 69057)

Nota significacircncia estatiacutestica quando p-valor le 005

Tabela 13 ndash Comparaccedilatildeo das variaacuteveis dieteacuteticas relacionadas agraves razotildees de ingestatildeo e Valor Energeacutetico Total (VET) da populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014

Variaacuteveis Grupo Caso

Grupo controle

Energia (Kcal) 18571

1692

Kcalkgdia 199

279

Carboidrato (g) 24345

20785

Carboidrato (VET) 5241

4913

Proteiacutena (g) 7355

7285

Grama de proteiacutenakgdia

078

12

Proteiacutena (VET) 1584

1722

Lipiacutedeo (g) 658

627

Lipiacutedeo ( VET) 3188

3335

84

A partir de dados de meacutedia de ingestatildeo de macronutrientes comparou-se a

porcentagem que cada um deles carboidratos proteiacutenas e lipiacutedeos (Tabela 13)

representa no Valor Energeacutetico total (VET) ingerido com o intervalo de

balanceamento dieteacutetico proposto pelas Dietary References Intake (DRI) Assim

tem-se que os grupos caso e controle balancearam suas dietas conforme o intervalo

de distribuiccedilatildeo energeacutetica recomendado visualizado na figura 5 Em relaccedilatildeo ao

consumo de fibras foi observado que ambos os grupos apresentaram um consumo

inferior ao Adequate Intake (AI) com consumo de 168 e 1265 para os grupos

caso e controle respectivamente Em relaccedilatildeo ao consumo de lipiacutedios o consumo de

gordura saturada mostrou-se maior que os 7 recomendado pela Sociedade

Brasileira de Cardiologia (2007) em consonacircncia com a National Heart Lung e Blood

Institute dos Estados Unidos tanto no grupo caso quanto no grupo controle de

1058 e 1085 respectivamente

Figura 5 ndash Comparaccedilatildeo entre as meacutedias de consumo de macronutrientes dos Grupos Caso e Controle com a Faixa de Distribuiccedilatildeo Aceitaacutevel de macronutrientes (AMDRDRI) e AI (Adequate Intake) para a faixa etaacuteria de 20 a 70 anos Satildeo Paulo SP 2013-2014

Legenda ndash A recomendaccedilatildeo de consumo de macronutrientes para tal faixa etaacuteria eacute

para Carboidratos 45 a 65 do VET (Valor Energeacutetico Total) Proteiacutenas 10 a 35 do VET Lipiacutedeos 20 a 35 do VET e Fibras 21 a 26 gramasdia

85

A comparaccedilatildeo da meacutedia da ingestatildeo das vitaminas A C E e folato dos

grupos caso e controle com as recomendaccedilotildees de ingestatildeo mostrou que a meacutedia de

consumo dos grupos foi semelhante e de acordo com a recomendaccedilatildeo exceto para

folato e vitamina E em que ambos os grupos mostraram meacutedias de ingestatildeo abaixo

do recomendado (Figura 6)

Figura 6 ndash Comparaccedilatildeo entre as meacutedias de consumo das Vitaminas A C E e folato dos Grupos Caso e Controle com a Faixa de Distribuiccedilatildeo Aceitaacutevel de macronutrientes (AMDRDRI) e AI (Adequate Intake) para a faixa etaacuteria de 20 a 70 anos Satildeo Paulo SP 2013-2014

A comparaccedilatildeo da meacutedia das ingestotildees das Vitaminas B1 B2 B6 B12 D

Niacina e Aacutecido pantotecircnico dos grupos caso e controle com as recomendaccedilotildees de

ingestatildeo demonstrou que a meacutedia de consumo em relaccedilatildeo agraves vitaminas B1 e B12

estavam acima do recomendado nos dois grupos As vitaminas B6 e aacutecido

pantotecircnico apresentaram ingestatildeo inferior ao preconizado nos grupos caso e

controle Ambos os grupos estudados apresentaram consumo em concordacircncia com

as recomendaccedilotildees em relaccedilatildeo agrave niacina No entanto as vitaminas B2 e D

apresentaram consumo pelo grupo caso inferior enquanto o grupo controle

apresentou-se de acordo com a recomendaccedilatildeo (Figura 7)

86

Figura 7 ndash Comparaccedilatildeo entre as meacutedias de consumo das Vitaminas B1 B2 B6 B12 D Niacina e Aacutecido pantotecircnico dos Grupos Caso e Controle com a Faixa de Distribuiccedilatildeo Aceitaacutevel de macronutrientes (AMDRDRI)e AI (Adequate Intake) para a faixa etaacuteria de 20 a 70 anos Satildeo Paulo SP 2013-2014

Para os minerais foacutesforo e selecircnio a ingestatildeo dos grupos Caso e Controle

tambeacutem foi adequada Exceto para iodo caacutelcio e magneacutesio que tiveram a ingestatildeo

menor que a recomendaccedilatildeo e o cobre que apresentou uma ingestatildeo inferior ao

preconizado no grupo controle enquanto o grupo caso demonstrou uma ingestatildeo

adequada dentro dos limites de recomendaccedilatildeo (Figura 8)

87

Figura 8 ndash Comparaccedilatildeo entre as meacutedias de consumo de Sais Minerais dos Grupos Caso e Controle com a Faixa de Distribuiccedilatildeo Aceitaacutevel de macronutrientes (AMDRDRI)e AI (Adequate Intake) para a faixa etaacuteria de 20 a 70 anos Satildeo Paulo SP 2013-2014

Para os minerais e nutrientes soacutedio manganecircs e potaacutessio a ingestatildeo dos

grupos Caso e Controle foi adequada Exceto para ferro que apresentou ingestatildeo

menor que a recomendaccedilatildeo e o zinco que apresentou ingestatildeo um pouco inferior ao

preconizado no grupo controle enquanto o grupo caso demonstrou ingestatildeo


Figura 9 ndash Comparaccedilatildeo entre as meacutedias de consumo de Sais Minerais e outros nutrientes dos Grupos Caso e Controle com a Faixa de Distribuiccedilatildeo Aceitaacutevel de macronutrientes (AMDRDRI)e AI (Adequate Intake) para a faixa etaacuteria de 20 a 70 anos Satildeo Paulo SP 2013-2014

88


Os resultados da avaliaccedilatildeo antropomeacutetrica estatildeo apresentados na tabela 14

Foi observado que as mulheres estudadas do grupo caso apresentaram meacutedia de

IMC (Iacutendice de massa corporal) de 365 kgm2 (DP 441 Amplitude 306-449) Ao

classificar as pacientes em classes de obesidade de acordo com os criteacuterios

determinados pela OMS (Organizaccedilatildeo Mundial de Sauacutede) (1995) verificou-se que

nove (45) das mulheres apresentam obesidade grau I (IMC 30-3499 kgm2) sete

(35) apresentam obesidade grau II (IMC 35-3999 kgm2) e quatro (20) das

mulheres apresentam obesidade grau III (IMC ge 40 kgm2) As mulheres do grupo

controle apresentaram IMC meacutedio de 224 kgm2 (DP 204 Amplitude 188-249)

Em relaccedilatildeo ao percentual de gordura observou-se a meacutedia de 4535 (DP

518 Amplitude 354-534) de gordura corporal no grupo caso e 3004 (DP 671

Amplitude 113-404) no grupo controle indicando um excesso de gordura corporal

em ambos os grupos de acordo com LOHMAN (1992) Em relaccedilatildeo agrave essa

classificaccedilatildeo no grupo caso todas as mulheres apresentam riscos de doenccedilas

associadas agrave obesidade apresentando um percentual de gordura corporal maior que

32 Das mulheres do grupo controle 2 (10) apresentaram-se abaixo da meacutedia 1

(5) na meacutedia 8 (40) acima da meacutedia e 9 (45) apresentaram risco de

desenvolvimento de doenccedilas relacionadas com a obesidade

A avaliaccedilatildeo da Razatildeo cintura-quadril (RCQ) importante indicador de

obesidade central Comparando-se os resultados obtidos com o ponto de corte

recomendado pela OMS (Organizaccedilatildeo Mundial de Sauacutede 1995) de 085 para

mulheres observou-se que todas as pacientes avaliadas do grupo caso apresentam-

se acima do recomendado com a meacutedia de RCQ de 099 (DP 0074 Amplitude

087-119) enquanto as mulheres do grupo controle apresentaram uma razatildeo meacutedia

de 083 (DP 0047 Amplitude 077-096) onde sete (35) mulheres apresentaram

a RCQ acima do valor referecircncia preconizado pela OMS No entanto ao avaliar a

Razatildeo cintura quadril de acordo com os pontos de corte propostos por LOHMAN et

al (1988) em relaccedilatildeo ao risco de desenvolvimento de doenccedilas associadas agrave

Siacutendrome Metaboacutelica (Doenccedilas cardiovasculares hipertensatildeo dislipidemia e

alteraccedilatildeo no metabolismo de carboidratos) os resultados demonstraram que em

relaccedilatildeo ao grupo caso 18 (90) das mulheres apresentaram alto risco para o

desenvolvimento dessas doenccedilas enquanto 2 (10) apresentaram risco moderado

89

Em relaccedilatildeo ao grupo controle foi observado que 3 (15) natildeo apresentaram riscos

13 (65) apresentaram baixo risco 1(5) apresentou risco moderado e 3 (15)

apresentaram alto risco para o desenvolvimento dessas doenccedilas

Tabela 14 ndash Comparaccedilatildeo de variaacuteveis antropomeacutetricas da populaccedilatildeo estudada


Desvio Padratildeo

Miacutenimo Maacuteximo

Peso (kg) Caso 9329 105 7574 1075

Controle 6054 787 4575 7422

Estatura (m2) Caso 160 007 149 172

Controle 164 007 151 18

IMC (Kgm2) Caso 3645 452 306 449

Controle 2241 204 188 249

Razatildeo cintura-quadril (RCQ)

Caso 099 007 088 119

Controle 083 005 077 096

Gordura corporal total

()

Caso

4535

519

354

531

Controle

30035

671

113 404

90



Pela qPCR quantificou-se carga de Mollicutes representadas por unidades

formadoras de colocircnias (UFCmicrol) nas amostras de fezes O ensaio de qPCR

demonstrou eficiecircncia de reaccedilatildeo de E= 1033 (r2= 095) A sensibilidade do teste

foi de detecccedilatildeo de no miacutenimo dez coacutepias de genomareaccedilatildeo quando utilizados os

padrotildees de nuacutemero de coacutepias de DNA genocircmico diluiacutedo (Figura 10)

Figura 10 ndash Curva-padratildeo gerada a partir dos pontos de Ct obtidos com o graacutefico de amplificaccedilatildeo de diluiccedilotildees seriadas do controle positivo Mycoplasma hominis calculado pelo software StepOne 21 (Applied Biosystems Life Technologies Corporation) Satildeo Paulo SP 2013-2014

A repetibilidade testada por meio dos testes intra-ensaio e inter-ensaio da

qPCR estaacute apresentada na tabela 15 O ensaio foi especiacutefico para Mollicutes natildeo

tendo sido visualizada amplificaccedilatildeo dos controles microbianos de outros micro-

organismos utilizados

91

Tabela 15 ndash Repetibilidade intra-ensaio e inter-ensaio da qPCR para Mollicutes Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nordm de coacutepias do Genoma

Repetibilidade intra-ensaio Repetibilidade inter-ensaio

Genoma bacteriano diluiacutedo

em 1times TE Genoma bacteriano diluiacutedo

em 1times TE

Ponto meacutedio de corte

(Ct plusmn SD) CV ()

Ponto meacutedio de corte (Ct plusmn SD)

CV ()

10 3537 plusmn 015 045 3494 plusmn 045 129

102 3425 plusmn 017 050 3379plusmn 029 087

103 3099 plusmn 021 070 3074 plusmn 039 128

104 2739 plusmn 023 084 2739 plusmn 038 142

105 2356 plusmn 012 054 2291plusmn 025 110

106 1874 plusmn 066 352 1915 plusmn 077 403

CV coeficiente de variaccedilatildeo

A PCR geneacuterica para Mollicutes foi positiva em 17 (85) das amostras

cliacutenicas do grupo caso e 8 (40) das amostras do grupo controle obtidas No

entanto nem todas as amostras positivas em cPCR para Mollicutes foram positivas

em qPCR 13 (65) das amostras do grupo caso e trecircs (15) do grupo controle

foram positivas em qPCR (Tabela 16)

Tabela 16 ndash Comparaccedilatildeo entre os resultados obtidos no teste de sensibilidade pelas teacutecnicas de PCR convencional e qPCR para detecccedilatildeo de Mollicutes Satildeo Paulo SP 2013-2014

Amostra

Grupo PCR convencional qPCR

n () n ()

Positivaa Caso 17 (85) 13 (65) Negativab 3 (15) 7 (35)

Positivaa

Negativab Controle 8 (40)

12 (60) 3 (15) 17 (85)

Nota n= 20 mulheres aPositiva - Detecccedilatildeo de produto de DNA esperado bNegativa - Ausecircncia de produto de DNA esperado

92

Por meio da PCR em tempo real foi possiacutevel quantificar o DNA e

consequentemente a carga do microrganismo representada por unidades

formadoras de colocircnias - ufcmicrol nas amostras de fezes coletadas Os resultados da

qPCR demonstraram uma carga meacutedia de Mollicutes nas amostras de fezes

analisadas referentes ao grupo caso de 584 x 103 ufcmicrol e de 156 ufcmicrol referentes

ao grupo controle Observa-se na figura 11 graacutefico de dispersatildeo referente agraves

cargas meacutedias das amostras positivas com detecccedilotildees de aproximadamente 101 a

103 UFCml de Mollicutes Contudo as meacutedias das dosagens foram maiores nas

mulheres do grupo caso E apoacutes anaacutelise estatiacutestica por Mann-Whitney foi possiacutevel

observar diferenccedila estatisticamente significante para a espeacutecie Mollicutes (p =

00023) Em seguida foi testada atraveacutes do teste de Odds Ratio a associaccedilatildeo

epidemioloacutegica entre as variaacuteveis desfecho (mulheres obesas x mulheres eutroacuteficas)

e as variaacuteveis Mollicutes (presenccedila x ausecircncia) tendo sido detectada uma

associaccedilatildeo positiva estatisticamente significante entre a presenccedila de Mollicutes e

mulheres obesas (OR= 115 IC= 242-554) Aleacutem disso ao realizar-se o teste t


lipiacutedios e fibras com as variaacuteveis Mollicutes (presenccedila x ausecircncia) natildeo foram

observadas associaccedilotildees estatisticamente significantes

Figura 11 - Quantificaccedilatildeo por qPCR de Mollicutes (UFCmicrol) a partir das amostras de fezes nos grupos caso e controle Satildeo Paulo SP 2013-2014

Legenda ndash Concentraccedilatildeo meacutedia de Mollicutes entre as mulheres do grupo caso (~584 x 103 UFC

microL) e controle (~156 UFC microL) estudadas e positivas para Mollicutes pelo qPCR (p-valor=00023)

Mediana e desvio padratildeo indicadas por linhas soacutelidas no graacutefico Anaacutelise estatiacutestica realizada por

Mann Whitney assumindo p-valor le 005

93

532 Detecccedilatildeo de micro-organismos dos filos Firmicutes e Bacteroidetes aleacutem de bacteacuterias totais (Eubacterias) por PCR em tempo Real (qPCR)

Todas as amostras 40 (100) foram positivas para Firmicutes e Bacteroidetes

na qPCR tanto para o grupo caso como para o controle Natildeo foram observadas

diferenccedilas estatisticamente significantes para as cargas de Firmicutes Bacteroidetes

e Bacteacuterias totais entre as mulheres do grupo caso e controle No entanto as cargas

meacutedias de Firmicutes e Eubacteacuterias no grupo caso foram maiores que no grupo

controle enquanto Bacteroidetes apresentou uma maior carga no grupo controle A

figura 12 representa os graacuteficos de dispersatildeo referentes agraves cargas meacutedias das

amostras de fezes para esses micro-organismos

Figura 12 - Quantificaccedilatildeo por qPCR de Firmicutes Bacteroidetes e Eubacterias (UFCmicrol) a partir das amostras de fezes nos grupos caso e controle Satildeo Paulo SP 2013-2014

Legenda ndash (a) Concentraccedilatildeo de Firmicutes (UFCmicroL) entre as mulheres do grupo caso (~869 x 1018 UFCmicrol) e controle (~504 x 1014 UFCmicrol) (b) Concentraccedilatildeo de Bacteroidetes (UFCmicroL) entre as mulheres do grupo caso (~879 x 108 UFCmicrol) e controle (~146 x 109 UFCmicrol) (c) Concentraccedilatildeo de Eubacterias (UFCmicroL) entre as mulheres do grupo caso (~731 x 1024 UFCmicrol) e controle (~619 x 1021 UFCmicrol) Mediana e amplitude interquartiacutelica indicadas por linhas soacutelidas no graacutefico Anaacutelise estatiacutestica realizada por Mann Whitney assumindo p-valor le 005

94

Com o intuito de verificar o percentual de micro-organismos da classe

Mollicutes frente agrave carga meacutedia de Firmicutes foi realizada a anaacutelise do percentual

meacutedio dos referidos micro-organismos onde verificou-se que Mollicutes representam

424 do nuacutemero meacutedio de Firmicutes detectados na qPCR especiacutefica para o

mesmo nas amostras analisadas no grupo caso e 25 x 10-4 no grupo controle

(Tabela 17)

Tabela 17 ndash Nuacutemero meacutedio de coacutepias e percentual dos grupos Mollicutes estudados frente ao Filo Firmicutes na populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota Meacutedia de coacutepiasgrama de fezes Percentual de coacutepias de Mollicutes em relaccedilatildeo ao Filo Firmicutes

Os resultados da qPCR demonstraram carga meacutedia de Bacteacuterias totais

(Eubacteacuterias) nas amostras de fezes analisadas do grupo caso (~731 x 1024 UFCmicrol)

e controle (~619 x 1021 UFCmicrol) As anaacutelises de percentual entre a carga meacutedia de

Bacteroidetes Firmicutes e Mollicutes e a carga meacutedia de bacteacuterias totais estatildeo

representadas na Tabela 18

Grupo Firmicutes Mollicutes

Meacutedia coacutepias g de fezes


Caso 869x1018

584x103

424

Controle 504x1014

16

25x10-4

95

Tabela 18 ndash Nuacutemero meacutedio de coacutepias e percentual dos grupos de bacterianos estudados frente agraves bacteacuterias totais na populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota Meacutedia de coacutepiasgrama de fezes Percentual de coacutepias de cada bacteacuteria em relaccedilatildeo agraves bacteacuterias totais

Foi calculada a proporccedilatildeo de Firmicutes em relaccedilatildeo aos Bacteroidetes na

microbiota intestinal das mulheres estudadas tendo sido observada maior proporccedilatildeo

na microbiota intestinal das mulheres obesas em relaccedilatildeo agraves eutroacuteficas do grupo

controle (Tabela 19) A relaccedilatildeo entre o percentual de Firmicutes e Bacteroidetes na

microbiota intestinal das mulheres do grupo caso foi cerca de 29 x 107 maior entre

as mulheres obesas do grupo caso em comparaccedilatildeo com o grupo controle

Tabela 19 ndash Proporccedilatildeo de Firmicutes em relaccedilatildeo agrave Bacteroidetes na populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014

Nota Meacutedia de coacutepiasgrama de fezes

Grupo Bacteacuterias totais

Firmicutes Bacteroidetes Mollicutes


Meacutedia coacutepias g de

fezes


fezes


Caso 731x 1024

869x1018

442x105

879x108

718x10-2

584x103

28x 10-2

Controle 619x 1021

504x1014

171x105

146x109

624x102 16

22x10-11

Grupo Firmicutes Bacteroidetes Proporccedilatildeo FirmicutesBacteroidetes




Caso 869x1018 879x108

134x1013

Controle 504x1014

146x109

45x 105

96


Ao serem quantificadas as citocinas IL-1β IL-10 IL17-A e TNF-α pela

teacutecnica de ELISA no plasma sanguiacuteneo das mulheres natildeo foi observada diferenccedila

estatisticamente significante entre os grupos caso e controle para nenhuma das

citocinas avaliadas IL-1β (p= 02249) IL-10 (p=1) IL17-A (p=03169) e TNF-α

(p=02235) (Figura 13)

Figura 13 ndash Quantificaccedilatildeo de IL-1β IL-10 IL17-A e TNF-α (pgmL) no plasma sanguiacuteneo por meio do ELISA nos grupos caso e controle da populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014

Legenda- (a) Concentraccedilatildeo de IL-1β (pgml) no plasma sanguiacuteneo das mulheres casos e controles (b) Concentraccedilatildeo de IL-10 (pgml) no plasma sanguiacuteneo das mulheres casos e controles (c) Concentraccedilatildeo de TNF-α (pgml) no plasma sanguiacuteneo das mulheres casos e controles (d) Concentraccedilatildeo de IL17-A (pgml) no plasma sanguiacuteneo das mulheres casos e controles Desvio padratildeo e meacutedia indicados por linhas soacutelidas no graacutefico Anaacutelise estatiacutestica por Mann Whitney p lt 005

97

6 DISCUSSAtildeO

A microbiota intestinal eacute um ecossistema complexo que desempenha um

importante papel na gecircnese da obesidade associada com o desenvolvimento das

respostas imunoloacutegicas aleacutem do estado nutricional do hospedeiro Projetos

mundiais de pesquisa estatildeo em desenvolvimento para compreender esta

complexidade microbiana na sauacutede humana (SHETTY et al 2013) O presente

estudo avaliou a participaccedilatildeo dos micro-organismos da Classe Mollicutes e dos Filos

Firmicutes e Bacteroidetes na microbiota intestinal de mulheres obesas e eutroacuteficas

Na diversidade das populaccedilotildees humanas e a ocorrecircncia da obesidade eacute

importante estudar a distribuiccedilatildeo da microbiota intestinal fazendo-se necessaacuterio e

imprescindiacutevel a caracterizaccedilatildeo da populaccedilatildeo estudada em relaccedilatildeo agrave preditores

importantes associados com a obesidade microbiota intestinal e ambiente

(KALLIOMAKI et al 2008 PENDERS et al 2006) No presente estudo observou-

se variaccedilatildeo estatiacutestica em relaccedilatildeo agrave variaacutevel gestaccedilatildeo onde 14 (70) das mulheres

do grupo caso e 2 (10) do controle relataram jaacute terem tido filhos Aagaard et al

(2012) verificaram que o microbioma era semelhante em mulheres gravidas ou natildeo

No entanto as mulheres graacutevidas apresentaram microbioma menos diversificado

Sugeriu-se que entre as mulheres em idade reprodutiva o microbioma permanece

como uma comunidade dinacircmica na vida reprodutiva do adulto e que a estrutura da

comunidade natildeo-graacutevida pode retornar em alguma medida nas uacuteltimas semanas de

gestaccedilatildeo Aleacutem disso alguns autores tecircm sugerido que o acuacutemulo de gordura

corporal na obesidade pode acarretar vaacuterias consequecircncias agrave sauacutede como diabetes

mellitus tipo 2 hipertensatildeo arterial dispneacuteia cacircncer dislipidemia doenccedilas

cardiacuteacas doenccedilas hepatobiliares osteoartrite alteraccedilotildees gastrintestinais e

distuacuterbios psicossociais o que corrobora com os achados em relaccedilatildeo agrave histoacuteria

cliacutenica das mulheres estudadas (FRANCISCHI et al 2000 PEREIRA et al 2003

SILVA 2005)

Para as mulheres em especial a menopausa tem sido associada como

colaboradora para o desenvolvimento de obesidade e acuacutemulo de gordura corporal

(SOWERS et al 2007) No presente estudo encontraram-se diferenccedilas estatiacutesticas

em relaccedilatildeo agrave variaacutevel menopausa onde 9 (45) das mulheres obesas do grupo

caso e 3 (15) das mulheres do grupo controle relataram ter entrado na

98

menopausa Entretanto Sternfeld et al (2004) em estudo de coorte feminina entre

42-52 anos de idade nos EUA natildeo encontraram associaccedilatildeo entre a menopausa e o

aumento de circunferecircncia da cintura bem como aumento do peso dessa forma

sugerindo que somente um fator pode natildeo ser o responsaacutevel pelo desenvolvimento

de obesidade No presente trabalho observou-se que 75 das mulheres do grupo

caso e 50 do grupo controle nasceram de parto normal Tem sido evidenciado na

literatura que o tipo de parto pode interferir na composiccedilatildeo da microbiota pela forma

de colonizaccedilatildeo do receacutem-nascido O parto via cesariana aumentaria o risco de

obesidade em relaccedilatildeo ao parto normal (HUH et al 2012 PEI et al 2014) Nesse

sentido Ajslev et al (2011) em estudo longitudinal prospectivo na infacircncia com

acompanhamento ateacute os sete anos observaram que uma combinaccedilatildeo de

exposiccedilotildees precoces que inclui o tipo de parto o IMC maternal preacute-gestacional e

uso de antibioacuteticos na primeira infacircncia (lt6 meses) influenciaram o risco de excesso

de peso

Existem diversos estudos em relaccedilatildeo aos fatores dieteacuteticos e a gecircnese da

obesidade (DAILEY 2014 ISOMAA et al 2001 MORENO-INDIAS et al 2014

PEREIRA et al 2002 ROMERO ZANESCO 2006 SANTOS et al 2006) No

entanto no presente estudo o valor energeacutetico encontrado em relaccedilatildeo ao grupo

caso ao analisar-se a razatildeo quilocaloriasquilograma de peso corporal foi inferior agrave

recomendaccedilatildeo caracterizando alimentaccedilatildeo insuficiente em energia (WHO 2003)

Da mesma maneira que no presente estudo Pereira et al (2012) natildeo encontraram

diferenccedilas significativas entre o consumo energeacutetico entre indiviacuteduos eutroacuteficos e

obesos Souza et al (2010) estudaram a ingestatildeo alimentar e balanccedilo energeacutetico da

populaccedilatildeo adulta de Niteroacutei- RJ e encontraram que a ingestatildeo energeacutetica mostrou-

se decrescente com o aumento do IMC para as mulheres A ingestatildeo energeacutetica em

menor quantidade parece indicar que embora o corpo esteja obeso os tecidos vitais

satildeo inadequadamente nutridos pois a alimentaccedilatildeo insuficiente fornece poucos

nutrientes (HUTSON et al 1965) Sawaya et al (2003) em estudo com mulheres

realizado em Maceioacute tambeacutem observaram que a ingestatildeo energeacutetica entre os

grupos eutroacutefico e obesos natildeo apresentou diferenccedila significativa Em outro estudo

com mulheres no Rio Grande do Sul tambeacutem foi verificado que o consumo alimentar

energeacutetico natildeo apresentou diferenccedila significativa (p=0157) entre os grupos (baixo

peso eutroacutefico e excesso de pesoobesidade) (FRANKE et al 2007) Com isto

99

provavelmente a ingestatildeo energeacutetica natildeo seja a causa da obesidade nas mulheres

estudadas sendo que a baixa ingestatildeo aliada a algumas deficiecircncias nutricionais e

predisposiccedilatildeo geneacutetica possa criar mecanismos de adaptaccedilatildeo levando a um ciclo

metaboacutelico cujo o desfecho seja o armazenamento de gordura na regiatildeo abdominal

(BALAMURUGAN et al 2010 CANI DELZENNE 2009 DAVID et al 2014

HANSON et al 2009 JIMENEZ MARTIN-MORENO 1995) Nesse contexto

devem ser considerados outros fatores de economia energeacutetica tais como o

desequiliacutebrio na microbiota intestinal aleacutem da adaptaccedilatildeo dos mecanismos de

consumo energeacutetico acarretando maior rendimento das calorias absorvidas

BALAMURUGAN et al 2010 CANI DELZENNE 2009 DAVID et al 2014

DEWULF et al 2013 DIBAISE FRANK MATHUR 2012 FRANKE 2007 GRAF et

al 2015 KOENIGA et al 2011 LE CHATELIER et al 2013 LEY et al 2006

PATIL et al 2012 RAOULT 2008 SAWAYA et al 2003 WICHMANN et al

2013)

Analisando a contribuiccedilatildeo do consumo dos macronutrientes e das fibras os

resultados do presente estudo demonstraram que este consumo estaacute dentro dos

criteacuterios exceto para o consumo de fibras que foi abaixo da recomendaccedilatildeo em

ambos os grupos Aleacutem disso comparando-se as meacutedias de consumo dos

macronutrientes e das fibras com as variaacuteveis desfecho (obesas x eutroacuteficas)

tambeacutem natildeo houve associaccedilotildees estatisticamente significantes Em Satildeo Paulo

observou-se que 295 dos indiviacuteduos entrevistados relataram ingestatildeo inferior agraves

necessidades fisioloacutegicas dos quais 58 eram indiviacuteduos obesos (SALVO

GIMENO 2002) Em outro estudo realizado com trabalhadores adultos de ambos os

sexos tambeacutem no Estado de Satildeo Paulo para avaliaccedilatildeo da ingestatildeo alimentar e

consumo de fibras dieteacuteticas foi encontrado que o consumo individual de fibras

dieteacuteticas diaacuteria variou 587 g a 2957 g sendo o consumo meacutedio da populaccedilatildeo

1461 g (PASSOS SHEID 2008) Fisberg et al (2009) em estudo realizado sobre

iacutendice de qualidade da dieta observaram padratildeo dieteacutetico com alto conteuacutedo de

gorduras totais colesterol e accediluacutecar refinado e com baixo teor de fibra alimentar

Estes resultados diferem em parte do padratildeo alimentar da populaccedilatildeo estudada no

entanto demonstra a necessidade de estiacutemulo ao maior consumo de alimentos ricos

em fibra

100

A partir dos resultados do estudo evidencia-se a adequaccedilatildeo comprometida

na alimentaccedilatildeo devido agrave elevada ingestatildeo de lipiacutedios (gordura saturada) e ingestatildeo

reduzida de fibras em ambos os grupos estudados contribuindo tanto para a

obesidade quanto em relaccedilatildeo ao acuacutemulo de tecido adiposo nas mulheres obesas e

eutroacuteficas Esses dados estatildeo em conformidade com o presente estudo em relaccedilatildeo

agraves variaacuteveis antropomeacutetricas analisadas Percentual de gordura corporal e Razatildeo

cintura-quadril onde ambos os grupos se apresentaram acima da meacutedia referecircncia

indicando excesso de gordura corporal Assim como no presente estudo outros

trabalhos tecircm demonstrado limitaccedilotildees e evidenciado que natildeo existe correlaccedilatildeo

precisa entre o IMC e o porcentual de gordura corpoacuterea Isso explica o fato de

indiviacuteduos que apresentam IMC dentro do padratildeo de normalidade mas possuem

uma quantidade de gordura corporal acima do ideal confirmando relatos de que o

IMC natildeo eacute um bom indicador quantitativo de adiposidade corporal e que pode

subestimar o percentual de gordura e classificando de forma errocircnea indiviacuteduos com

excesso de adiposidade (COSTA et al 2007 GLANER 2005) Dessa forma o

aumento de gordura corporal principalmente na regiatildeo abdominal pode tornar a

utilizaccedilatildeo do IMC cada vez mais limitada na avaliaccedilatildeo do estado nutricional jaacute que

indiviacuteduos com sobrepeso ou ateacute mesmo eutroacuteficos podem apresentar risco de

alteraccedilotildees metaboacutelicas devido a valores elevados de circunferecircncia da cintura

(REZENDE 2010) Aleacutem disso nossos resultados evidenciaram valores elevados

para RCQ o que pode explicar a porcentagem de algumas moleacutestias atuais

associadas agrave obesidade encontradas em ambos os grupos no presente trabalho

(OMS 2002 DAcircMASO BERNARDES 2003 OCHS-BALCOM et al 2006)

Diversos estudos tambeacutem contribuiacuteram na melhor compreensatildeo entre as

influecircncias da nutriccedilatildeo e da composiccedilatildeo corporal na composiccedilatildeo da microbiota

intestinal (BALAMURUGAN et al 2010 DAVID et al 2014 DEWULF et al 2013

GRAF et al 2015 WICHMANN et al 2013) No entanto pouco se conhece sobre a

participaccedilatildeo dos micro-organismos da classe Mollicutes na microbiota

principalmente quando associadas com fatores dieteacuteticos e antropomeacutetricos

Constatou-se no presente estudo diferenccedila estatisticamente significante para micro-

organismos da classe dos Mollicutes (p = 00023) Foi detectada associaccedilatildeo

estatisticamente significante entre a presenccedila de Mollicutes e mulheres obesas

(OR= 115 IC= 242-554) Nesse contexto Turnbaugh et al (2008) avaliaram a

101

microbiota de modelos experimentais de ratos geneticamente idecircnticos de

obesidade induzida pelo consumo de dieta ocidentalizada caracterizada por alto teor

de gordura e accediluacutecar Todos os animais herdaram uma microbiota semelhante e no

estado de obesidade observou-se maior crescimento da bacteacuteria Eubacterium

dolichum (membro da classe Mollicutes) que foram posteriormente reduzidos por

subsequentes manipulaccedilotildees dieteacuteticas para limitar o ganho de peso Ainda neste

estudo observou-se que a abundacircncia da classe dos Mollicutes foi acompanhada

pela supressatildeo de toda a divisatildeo de Bacteroidetes indicando que a classe

Mollicutes teve aptidatildeo aumentada em relaccedilatildeo a Firmicutes e todos os outros

Bacteroidetes identificados na populaccedilatildeo estudada Os autores observaram que os

molicutes evoluiacuteram a capacidade para importar o tipo de hidratos de carbono

encontradas na dieta ocidental administrada nos modelos experimentais estando

essas vantagens principalmente relacionadas com o Sistema fosfotransferase (PTS)

De acordo com Deutscher et al (2006) o PTS desempenha um papel na regulaccedilatildeo

da expressatildeo do gene microbiano atraveacutes da repressatildeo cataboacutelica permitindo que a

ceacutelula passe a utilizar preferencialmente accediluacutecares simples em relaccedilatildeo a outros

hidratos de carbono Anaacutelises de fragmentos do gene 16S rRNA dos dados de

metagenocircmica confirmaram a presenccedila dos molicutes no microbioma cecal quando

associados agrave uma dieta ocidental Em contrapartida Hildebrandt et al (2009) por

meio de metagenocircmica de fezes de camundongos magros inicialmente submetidos

a dieta de raccedilatildeo padratildeo com posterior mudanccedila para dieta rica em gordura natildeo

relataram encontrar molicutes em dieta de alto teor de gordura

No presente estudo ao se comparar as meacutedias de consumo dos

macronutrientes carboidratos proteiacutenas lipiacutedios e fibras com as variaacuteveis Mollicutes

(presenccedila x ausecircncia) natildeo foram observadas associaccedilotildees estatisticamente

significantes No entanto foi observado alto consumo de gorduras saturadas nas

mulheres estudadas com diferenccedila estatisticamente significante entre a quantidade

de molicutes na microbiota intestinal Esses resultados associados com as

evidecircncias encontradas na literatura acerca da participaccedilatildeo desses micro-

organismos na microbiota de pessoas obesas fornecem importantes evidecircncias de

que natildeo apenas o consumo alimentar e o percentual de gordura ingerida possam

influenciar o aumento de molicutes na microbiota intestinal Mas que esse aumento

tambeacutem pode estar associado ao possiacutevel enriquecimento de rotas metaboacutelicas

102

envolvidas na utilizaccedilatildeo de accediluacutecares simples relacionadas ao sistema PTS Aleacutem

disso tem sido evidenciado na literatura que em experimentos com animais germ-

free o consumo de uma dieta obesogecircnica parece natildeo estimular o desenvolvimento

da obesidade e que sucessivas manipulaccedilotildees dieteacuteticas para limitar o ganho de

peso possivelmente promovam subsequentes variaccedilotildees em relaccedilatildeo agrave populaccedilatildeo

microbiana na microbiota intestinal (GOODMAN et al 2011 TURNBAUGH et al

2009 WALKER et al 2011 YI LI 2012) Este achado foi sustentado por um estudo

recente em camundongos que mostrou que a composiccedilatildeo microbiana do intestino

natildeo eacute determinada apenas pela dieta atual mas tambeacutem em parte pela histoacuteria

dieteacutetica Aleacutem disso um estudo em seres humanos concluiu que a mudanccedila no

padratildeo de consumo de fibras pode produzir fortes mudanccedilas na microbiota

intestinal mas que estas dependem da composiccedilatildeo inicial da microbiota intestinal do

indiviacuteduo (AAFKE et al 2015 CARMODY et al 2015)

Estudos recentes tecircm demonstrado que a microbiota intestinal humana pode

estar alterada em indiviacuteduos obesos Nesse contexto tem sido amplamente

discutida a participaccedilatildeo dos filos Firmicutes e Bacteroidetes na microbiota desses

indiviacuteduos Aleacutem disso tem sido evidenciado que o filo Firmicutes representam mais

de 90 das categorias filogeneacuteticas conhecidas dominando a microbiota distal

Nesse sentido a obesidade estaacute associada com as diferenccedilas da microbiota

intestinal em niacutevel filo com menor diversidade geral e maior proporccedilatildeo relativa de

Firmicutes em relaccedilatildeo agrave Bacteroidetes em indiviacuteduos obesos em comparaccedilatildeo com

indiviacuteduos eutroacuteficos (ECKBURG et al 2005 LEY et al 2006 MORAN

SHANAHAN 2014 TURNBAUGH et al 2009) Nesse contexto os resultados do

presente estudo demonstraram que a relaccedilatildeo entre o percentual de Firmicutes e

Bacteroidetes na microbiota intestinal das mulheres do grupo caso foi cerca de 29x

107 maior entre as mulheres obesas em comparaccedilatildeo com o grupo controle

Estudos demonstraram que a relaccedilatildeo entre percentual de Firmicutes e Bacteroidetes

na microbiota intestinal eacute de cerca de 7020 para os natildeo obesos e ateacute 855 para os

obesos O que significa cerca de cinco vezes maior em obesos em comparaccedilatildeo com

natildeo obesos (BALAMURUGAN et al 2010 ECKBURG et al 2005 KOENIGA et al

2011 LE CHATELIER et al 2013 PATIL et al 2012) Os nossos achados estatildeo

em conformidade com alguns resultados da literatura Em estudo realizado por

Ridaura et al (2013) transplantaram-se micro-organismos intestinais de humanos

103

obesos e eutroacuteficos em intestinos de ratos com peso meacutedio Aqueles que receberam

a microbiota de humanos obesos tornaram-se ratos obesos e aqueles que

receberam microbiota de humanos magros permaneceram magros Outro estudo

realizado por Remely et al (2015) que tambeacutem investigaram atraveacutes de qPCR a

microbiota de humanos obesos durante a intervenccedilatildeo dieteacutetica para perda de peso

induzida observaram diminuiccedilatildeo na proporccedilatildeo de FirmicutesBacteroidetes nos

obesos apoacutes a intervenccedilatildeo dieteacutetica

A proporccedilatildeo FirmicutesBacteroidetes tem sido associada como um marcador

de sauacutede para um indiviacuteduo e um desequiliacutebrio nesta proporccedilatildeo estaacute associada com

diferentes doenccedilas (MARIAT et al 2009) A mudanccedila na abundacircncia relativa destes

filos resulta no aumento da capacidade de captaccedilatildeo de energia a partir dos

alimentos aleacutem de induzir a inflamaccedilatildeo de baixo grau A reduccedilatildeo de Bacteroidetes

tem sido relacionada com dieta rica em gordura que pode resultar em aumento dos

niacuteveis plasmaacuteticos de LPS (CANI et al 2007 EVERARD CANI 2013) enquanto o

aumento Firmicutes tem sido associado com o consumo de carnes (EVERARD

CANI 2013) Aleacutem disso vaacuterios estudos tecircm mostrado mudanccedila da relaccedilatildeo de

FirmicutesBacteroidetes em pessoas obesas durante intervenccedilotildees dieteacuteticas para

perda de peso corporal sugerindo que as mudanccedilas na concentraccedilatildeo de bacteacuterias

nos indiviacuteduos obesos podem ser revertidas depois da perda de peso induzida por

dieta fazendo com que a microbiota do indiviacuteduo obeso se assemelhe ao indiviacuteduo

eutroacutefico (CLEMENTE et al 2012 DEWULF et al 2013 DIBAISE et al 2012

REMELY et al 2013 2015) Em contrapartida estes resultados natildeo satildeo universais

outros estudos demonstraram padrotildees variaacuteveis em mudanccedilas de niacutevel de filo

medidos na composiccedilatildeo da microbiota de indiviacuteduos obesos (MORAN SHANAHAN

2014 SCHWIERTZ et al 2010 ZHANG et al 2009) Duncan et al (2008) avaliaram

a relaccedilatildeo entre IMC perda de peso e a predominacircncia de grupos de bacteacuterias em

amostras fecais de pessoas obesas e natildeo obesas Estes indiviacuteduos foram

submetidos a duas dietas para perda de peso por quatro semanas Natildeo foi

encontrada diferenccedila entre Bacteroidetes nas amostras entre indiviacuteduos obesos e

natildeo obesos No entanto houve reduccedilotildees no grupo de Firmicutes em obesos

submetidos a dietas hipocaloacutericas Em outro estudo realizado por Schwiertz et al

(2010) tambeacutem natildeo foram observadas diferenccedilas nas contagens de Bacteroidetes e

Firmicutes entre os grupos de estudo Xiao et al (2014) em estudo com intervenccedilatildeo

104

dieteacutetica baseada em gratildeos integrais onde analisaram a microbiota intestinal de 123

voluntaacuterios obesos antes e depois da intervenccedilatildeo de 9 semanas seguida por um

periacuteodo de manutenccedilatildeo de 14 semanas tambeacutem natildeo observaram alteraccedilotildees

significativas na abundacircncia de Bacteroidetes e Firmicutes ou na proporccedilatildeo destes

dois filos durante a intervenccedilatildeo dieteacutetica mesmo quando os voluntaacuterios perderam

uma quantidade significativa de peso Estudos recentes do Projeto Microbioma

Humano natildeo encontraram associaccedilatildeo entre a proporccedilatildeo FirmicutesBacteroidetes e

obesidade ou Iacutendice de Massa Corporal (IMC) Nesse sentido tem sido sugerido por

alguns autores que a utilizaccedilatildeo dessa relaccedilatildeo como um biomarcador para a

obesidade permanece incerto devido a variabilidade dos dados na literatura

(FINUCANE et al 2014 MURPHY et al 2010)

Recentemente tem sido proposta uma nova hipoacutetese que associa a

microbiota intestinal com a homeostase metaboacutelica demonstrando-a como uma das

fontes potenciais de inflamaccedilatildeo de baixo grau (ARAKI et al 2005 OKAYASU et al

1990 RAKOFF-NAHOUM 2004 XIAO et al 2014 ZHAO 2013) Nesse contexto

tem sido demonstrado que dietas com alto teor de gordura tambeacutem podem aumentar

as concentraccedilotildees de LPS no plasma de humanos Estudo realizado por Cani et al

(2007) mostrou em camundongos que o maior consumo de gordura levou ao maior

aumento nas concentraccedilotildees de LPS no plasma A absorccedilatildeo de LPS reforccedilada pela

alta ingestatildeo de gordura pode estimular a secreccedilatildeo das citocinas TNF-α e IL-6

resultando em inflamaccedilatildeo sistecircmica de baixo grau dessa forma a microbiota

intestinal pode ter papel ativo na promoccedilatildeo eou inibiccedilatildeo da inflamaccedilatildeo e portanto

um efeito no metabolismo lipiacutedico (FLOCK GREEN KRIS-ETHERTON 2011) Os

resultados do presente estudo natildeo demonstraram diferenccedilas estatisticamente

significantes entre os grupos caso e controle para nenhuma das citocinas avaliadas

No entanto estudos in vitro mostraram que o consumo de aacutecidos graxos saturados

tambeacutem observado no presente estudo em ambos os grupos promovem processo

inflamatoacuterio com aumento da expressatildeo de IL-6 e TNF-α de TLR- 4 e consequente

aumento da ativaccedilatildeo da via NF-kβ (AJUWON SPURLOCK 2005 CALDER et al

2011 WEATHERILL et al 2005) Em estudos experimentais a dieta hiperlipiacutedica

rica em gordura saturada demonstrou promover obesidade com consequente

aumento de peso corporal adiposidade e marcadores inflamatoacuterios (FERNANDEZ-

REAL et al 2003 PEREIRA et al 2012) Esses achados podem explicar o fato de

105

que no presente estudo natildeo foram observadas diferenccedilas estatisticamente

significantes em relaccedilatildeo a liberaccedilatildeo de TNF-α e IL1-β entre os grupos estudados

Em relaccedilatildeo agrave liberaccedilatildeo da citocina IL-17 tambeacutem natildeo foram observadas diferenccedilas

estatisticamente significantes no entanto os achados da literatura teumlm sugerido

que no contexto de disbiose a presenccedila de agentes patogecircnicos pode perturbar a

regulaccedilatildeo do ambiente anti-inflamatoacuterio e que quando patoacutegenos enteacutericos superam

as bacteacuterias comensais o desequiliacutebrio entre comensais e bacteacuterias patogecircnicas

provocam liberaccedilatildeo significativa de MAMPs Este aumento pode induzir IECs DCs e

macroacutefagos ativados a secretar citocinas inflamatoacuterias como a IL-1β IL-6 IL-12 e

IL-23 Estas citocinas estimulam o desenvolvimento de ceacutelulas CD4+ T auxiliares

(T helper-TH1) e ceacutelulas TH17 (produzem IL-17A IL-17F e IL-22) resultando na

inflamaccedilatildeo crocircnica (MAYNARD et al 2012)

O estudo da influecircncia de diferentes elementos da dieta e composiccedilatildeo

corporal sobre a variaccedilatildeo da composiccedilatildeo da microbiota tornou-se uma aacuterea de

crescente interesse cientiacutefico Com efeito a relaccedilatildeo entre a microbiota intestinal e a

obesidade estaacute bastante reconhecida No entanto a participaccedilatildeo dos micro-

organismos da classe dos Mollicutes e alguns mecanismos subjacentes a essas

interaccedilotildees permanecem pouco estudados Em relaccedilatildeo agraves limitaccedilotildees do estudo

deve-se considerar o desenho transversal natildeo sendo possiacutevel estabelecer relaccedilatildeo

de causa e efeito No entanto o estudo mostra-se relevante destacando como

ponto forte o cuidado metodoloacutegico e a relevacircncia dos resultados encontrados

contribuindo para o avanccedilo dos estudos da relaccedilatildeo entre os molicutes microbiota

intestinal e obesidade Nesse contexto a importacircncia e validade de estudos como

este eacute apontar os possiacuteveis fatores de risco que contribuam para obesidade sendo

que a cuidadosa interpretaccedilatildeo dos resultados eacute importante para a geraccedilatildeo de

hipoacuteteses

Nesse contexto uma pesquisa acerca da relaccedilatildeo causa-efeito entre a

microbiota intestinal e a obesidade eacute altamente justificaacutevel uma vez que diferentes

espeacutecies de bacteacuterias podem desempenhar um papel significativo na safra de

energia humana e regulaccedilatildeo do peso corporal Aleacutem disso a consideraccedilatildeo de

fatores de estilo de vida em estudos da microbiota intestinal eacute altamente

recomendada uma vez que mudanccedilas no padratildeo alimentar e atividade fiacutesica podem

influenciar a composiccedilatildeo da microbiota intestinal para o desenvolvimento da

106

obesidade A partir disso o presente estudo fornece evidecircncias de que alteraccedilotildees e

interaccedilotildees na microbiota intestinal possam definir subconjuntos de indiviacuteduos com

diferentes perfis de risco metaboacutelico e assim contribuir para a investigaccedilatildeo da

heterogeneidade associada a fenoacutetipos relacionados com a adiposidade

especialmente em sociedades que estatildeo passando por transformaccedilotildees

socioeconocircmicas tecnoloacutegicas e culturais para um estilo de vida moderno

107

7 CONCLUSOtildeES

Os grupos caso e controle balancearam suas dietas conforme o intervalo de

distribuiccedilatildeo energeacutetica recomendado no entanto foi observado um consumo

de fibras inferior e de gorduras saturadas superior ao recomendado em

ambos os grupos

As mulheres de ambos os grupos apresentaram excesso de gordura corporal

Foi desenvolvido um ensaio de PCR em tempo real especiacutefico sensiacutevel

reprodutiacutevel e quantitativo para a detecccedilatildeo de Mollicutes nas fezes humanas

Foram encontradas associaccedilotildees estatisticamente significantes entre a

presenccedila de Mollicutes e mulheres obesas

Natildeo foram observadas associaccedilotildees estatisticamente significantes em relaccedilatildeo

as meacutedias de consumo dos macronutrientes carboidratos proteiacutenas lipiacutedios e

fibras com a presenccedila de Mollicutes

Natildeo foram observadas diferenccedilas estatisticamente significantes para as

cargas de Firmicutes Bacteroidetes e Bacteacuterias totais entre as mulheres do

grupo caso e controle

A proporccedilatildeo de Firmicutes em relaccedilatildeo aos Bacteroidetes foi maior na

microbiota intestinal das mulheres obesas em relaccedilatildeo agraves eutroacuteficas

Natildeo foi observada diferenccedila estatisticamente significante entre os grupos

caso e controle para nenhuma das citocinas avaliadas

108

De acordo com ASSOCIACcedilAcircO BRASILEIRA DE NORMAS TEacuteCNICAS NBR 6023 informaccedilatildeo e documentaccedilatildeo referecircncias elaboraccedilatildeo Rio de Janeiro 2002

REFEREcircNCIAS

AAGAARD K RIEHLE R MA J SEGATA N MISTRETTA T COARFA C RAZA S ROSENBAUM S VAN DEN VEYVER I MILOSAVLJEVIC A GEVERS D HUTTENHOWER C PETROSINO J VERSALOVIC J A Metagenomic Approach to Characterization of the Vaginal Microbiome Signature in Pregnancy Plos one v7 n6 p364-366 2012

ABDALLAH I N RAGAB S H ABD E A SHOEIB A R ALHOSARY Y FEKRY D Frequency of Firmicutes and Bacteroidetes in gut microbiota in obese and normal weight Egyptian children and adults Arch Med Sci v7 p501ndash507 2011

ADLERBERTH I WOLD A E Establishment of the gut microbiota in Western infants Acta Paediatr v98 p229-238 2009

AJUWON K M SPURLOCK M E Palmitate activates the nf-kappab transcription factor and induces il-6 and tnf alpha expression in 3t3-l1 adipocytes J Nutr v135 n69 p1841-1846 2005 ALMEIDA L B MARINHO C B SOUZA C S CHEIB V B P Disbiose intestinal revisatildeo Rev Bras Nutr cliacuten v24 n1 p58-65 2009

AMUNA P ZOTOR F B Epidemiological and nutrition transition in developing countries impacto n human health and development Proc Nutr Soc v67 n1 p82-89 2008

ARAI J A LI S HARTLEY D M FEIG L A Transgenerational rescue of a genetic defect in long-term potentiation and memory formation by juvenile enrichment J Neurosci v 29 p 1946-1503 2009

ARAKI A KANAI T ISHIKURA T MAKITA S URAUSHIHARA K IIYAMA R TOTSUKA T TAKEDA K AKIRA S WATANABE M Myd88-deficient mice develop severe intestinal inflammation in dextran sodium sulfate colitis J Gastroenterol v40 n32 p16-23 2005

ARORA T SHARMA R Fermentation potential of the gut microbiome implications for energy homeostasis and weight management Nutri Rev v69 n 2 p 99-106 2011 ARUMUGAM M RAES J PELLETIER E LE PASLIER D YAMADA T MENDE D R et al Enterotypes of the human gut microbiome Nature v473 n7346 p174-80 2011 AURELI P CAPURSO L CASTELLAZZI A M et al Probiotics and health an evidence-based review Pharmacol Res v63 p366ndash76 2011 AZAD B M KONYA T MAUGHAN H GUTTMAN D S FIELD C J CHARI R S SEARS M R BECKER A B SCOTT J A KOZYRSKYJ A L CHILD Study Investigators Gut microbiota of healthy Canadian infants profiles by mode of delivary and infant diet at 4 months CMAJ v 185 n 5 p 385-94 2013

BAumlCKHED F DING H WANG T HOOPER L V KOH G Y NAGY A SEMENKOVICH C F GORDON J I The gut microbiota as an environmental factor that regulates fat storage Proc Natl Acad Sci USA v101 n 44 p1571-1578 2004

BACKHED F LEY R E SONNENBURG J L PETERSON D A GORDON J I Host-bacterial mutualism in the human intestine Science v307 n 5717 p1915ndash1920 2005

109

BACKHED F MANCHESTER J K SEMENKOVICH C F GORDON J I Mechanisms underlying the resistance to diet-induced obesity in germ-free mice Proc Natl Acad Sci U S A v104 n3 p979ndash984 2007

BACON L APHRAMOR L Weight Science Evaluating the Evidence for a Paradigm Shift Nutr J v 10 n 9 p 1186 -1190 2011

BAHIA L COUTINHO E S F BARUFALDI L A ABREU G A MALHAtildeO T A SOUZA C P R ARAUJO D V The costs of overweight and obesity-related diseases in the Brazilian public health system cross-sectional study BMC Public Health v 18 n12 p440 2012

BAJZER M SEELEY R J Obesity and gut flora Nature v 444 n6 p 1009-1010 2006

BALABANOV D N RAKOVSKAIA I V GORINA L G GONCHAROVA S A GAMOVA N A BARKHATOVA O I The comparison of mycoplasma detection methods in the urogenital tract infection Microbiol Epidemiol Immunobiol v 4 n2 p 82-85 2006

BARROS M V G NAHAS M V Reprodutibilidade (teste- reteste) do Questionaacuterio Internacional de Atividades Fiacutesicas (QIAF-Versatildeo 6) um estudo-piloto com adultos no Brasil Rev Bras Ciecircnc Mov v8 n1 p23-6 2000

BASEMAN J B TULLY J G Mycoplasmas sophisticaded reemerging and burdened by their notoriety Emerg Infect Dis v3 n1 p21-32 1997

BELLAHCENE M ODOWD J F WARGENT E T ZAIBI M S HISLOP D C NGALA R A SMITH D M CAWTHORNE M A STOCKER C J ARCH J R Male mice that lack the G-protein-coupled receptor GPR41 have low energy expenditure and increased body fat content Br J Nutr v 109 n10 p1755ndash1764 2013

BERG A H SCHERER P E Adipose tissue inflammation and cardiovascular disease Circ Res v96 n34 p 939-949 2005

BERGEYacuteS Manual of determinative bacteriology Michigan Michigan State University 2001 Disponiacutevel em lthttpwwwcmemsuedubergeysgt Acesso em 14 Mar 2015

BERGEYrsquoS The Bacteroidetes Spirochaetes Tenericutes (Mollicutes) Acidobacteria Fibrobacteres Fusobacteria Dictyoglomi Gemmatimonadetes Lentisphaerae Verrucomicrobia Chlamydiae and Planctomycetes In ______ Manual of Systematic Bacteriology 2 ed New York Springer-Verlag 2010 v4 p721

BERGEYrsquoS The Firmicutes In ______ Manual of Systematic Bacteriology 2 ed New York Springer-Verlag 2009 v3 p531

BEYER P L Digestatildeo absorccedilatildeo transporte e excreccedilatildeo de nutrientes In MAHAN LK ESCOTT-STUMPS (eds) Krause ndash alimentos nutriccedilatildeo e dietoterapia 10 ed Satildeo PauloRoca 2002 p 3-17

BIASUCCI G BENENATI B MORELLI L BESSI E BOEHM G Cesarean delivery may affect the early biodiversity of intestinal bacteria J Nutr v138 n9 p 1796-1800 2008

BINDELS L B DEWULF E M DELZENNE N M GPR43FFA2 physiopathological relevance and therapeutic prospects Trends Pharmacol Sci v34 n4 p 226ndash232 2013

BLUMBERG R S SAUBERMANN L J STROBER W Animal models of mucosal inflammation and their relation to human inflammatory bowel disease Curr Opin Immunol v11 n 31 p648-656 1999

BOUCHARD C Introduction In PHYSICAL Activity and Obesity Champaign IL Human Kinetcs Publishers 2000 p17

110

BOVEacute J M The one-hundredth anniversary of the first culture of a mollicute the contagious bovine peripneumonia microbe by Nocard and Roux with the collaboration of Borrel Salimbeni and Dujardin-Baumetz Res Microbiol v 150 n67 p 239-245 1999

BRASIL Ministeacuterio da Sauacutede Secretaria de Vigilacircncia em Sauacutede Secretaria de Gestatildeo Estrateacutegica e Participativa Vigitel Brasil 2010 vigilacircncia de fatores de risco e proteccedilatildeo para doenccedilas crocircnicas por inqueacuterito telefocircnico Ministeacuterio da Sauacutede Secretaria de Vigilacircncia em Sauacutede Secretaria de Gestatildeo Estrateacutegica e Participativa ndash Brasiacutelia Ministeacuterio da Sauacutede 2011

BRENCHLEY J M DOUEK D C Microbial translocation across the GI tract Annu Rev Immunol v30 n5 p149ndash173 2012

BROWN D R WHITCOMB R F BRADBURY J M Revised minimal standards for description of new species of the class Mollicutes (division Tenericutes) Int J Syst Evol Microbiol v 57 n11 p 2703-2719 2007

BRY L FALK P G MIDTVEDT T GORDON J I A model of host-microbial interactions in an open mammalian ecosystem Science v273 n5280 p1380-1383 1996

BYGREN L O TINGHOumlG P CARSTENSEN J EDVINSSON S KAATI G PEMBREY ME et al Change in paternal grandmothers early food supply influenced cardiovascular mortality of the female grandchildren BMC Genet v 20 n12 p15-12 2014

CAESAR R REIGSTAD C S BACKHED H K REINHARDT C KETONEN M LUNDEN G O CANI P D BACKHED F Gut-derived lipopolysaccharide augments adipose macrophage accumulation but is not essential for impaired glucose or insulin tolerance in mice Gut v61 n50 p1701ndash1707 2012

CALDER P C AHLUWALIA N BROUNS F BUETLER T CLEMENT K CUNNINGHAM K ESPOSITO K JONSSON L S KOLB H LANSINK M MARCOS A MARGIORIS A MATUSHESKI N NORDMANN H OBRIEN J PUGLIESE G RIZKALLA S SCHALKWIJK C TUOMILEHTO J WARNBERG J WATZL B WINKLHOFER-ROOB BM Dietary factors and low-grade inflammation in relation to overweight and obesity Br J Nutr v106 n 68 p65-78 2011 CANI P D DELZENNE N M The role of the gut microbiota in energy metabolism and metabolic disease Curr Pharm Des v15 n13 p1546-1558 2009

CANI P D AMAR J IGLESIAS M A POGGI M KNAUF C BASTELICA D NEYRINCK A M FAVA F TUOHY K M CHABO C WAGET A DELMEE E COUSIN B SULPICE T CHAMONTIN B FERRIERES J TANTI J F GIBSON G R CASTEILLA L DELZENNE N M ALESSI M C BURCELIN R Metabolic endotoxemia initiates obesity and insulin resistance Diabetes v56 n7 p1761-1772 2007

CANI P D BIBILONI R KNAUF C WAGET A NEYRINCK A M DELZENNE N M BURCELIN R Changes in gut microbiota control metabolic endotoxemia-induced inflammation in high-fat diet-induced obesity and diabetes in mice Diabetes v57 n6 p 1470ndash1481 2008

CARDWELL C R STENE L C JONER G CINEK O SVENSSON J GOLDACRE M J PARSLOW R C POZZILLI P BRIGIS G STOYANOV D URBONAITE B SIPETIĆ S SCHOBER E IONESCU-TIRGOVISTE C DEVOTI G DE BEAUFORT C E BUSCHARD K PATTERSON C C Caesarean section is associated with an increased risk of childhood-onset type 1 diabetes mellitus a meta-analysis of observational studies Diabetologia v51 n5 p726-35 2008

111

CARMODY R N GERBER G K LUEVANO J M J GATTI D M SOMES L SVENSON K L TURNBAUGH P J Diet dominates host genotypein shaping themurine gut microbiota Cell Host Microbe v17 n1 p 72ndash84 2015

CERVANTO A M MAZZILI R N MARTINS I S MARUCCI M F N Dieta habitual e fatores de risco para doenccedilas cardiovasculares Rev Sauacutede Puacuteblica v31 n3 p227-235 1997

CLEMENTE J C URSELL L K PARFREY L W KNIGHT R The impact of the gut microbiota on human health an integrative view Cell v148 n6 p1258-1270 2012

CLUNY N L ELLER L K KEENAN C M REIMER R A KEITH A SHARKEY K A Interactive Effects of Oligofructose and Obesity Predisposition on Gut Hormones and Microbiota in Diet-Induced Obese Rats Obesity v23 n4 p 769-778 2015

COELHO N L P Associaccedilatildeo entre padrotildees de consumo alimentar gestacional e peso ao nascer 2011105f [Dissertaccedilatildeo de mestrado] Rio de Janeiro Escola Nacional de Sauacutede Puacuteblica Sergio Arouca 2011

CUMMINS A G THOMPSON F M Postnatal changes in mucosal immune response a physiological perspective of breast feeding and weaning Immunol Cell Biol v75 n5 p419-429 1997

DAILEY M J Nutrient-induced intestinal adaption and its effect in obesity Physiology Behavior v136 p74ndash78 2014

DAVID L A MAURICE C F CARMODY R N GOOTENBERG D B BUTTON J E WOLFE B E LING A V DEVLIN A S VARMA Y FISCHBACH M A BIDDINGER S B DUTTON R J TURNBAUGH P J Diet rapidly and reproducibly alters the human gut microbiome Nature v505 p559-563 2014 DE FILIPPO C CAVALIERI D DI PAOLA M RAMAZZOTTI M POULLET J B MASSART S et al Impact of diet in shaping gut microbiota revealed by a comparative study in children from Europe and rural Africa Proc Natl Acad Sci USA v107 n33 p14691-14696 2010 DE LA SERRE C B ELLIS C L LEE J HARTMAN A L RUTLEDGE J C RAYBOULD H E Propensity to high-fat diet-induced obesity in rats is associated with changes in the gut microbiota and gut inflammation Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol v299 p440ndash448 2010 DE SANTA BARBARA P VAN DEN BRINK G R ROBERTS D J Development and differentiation of the intestinal epithelium Cell Mol Life Sci v60 p 1322-1332 2003

DERAM S VILLARES S M F Genetic variants influencing effectiveness of weight loss strategies Arq Bras Endocrinol Metab v 53 n2 p 129-138 2009

DETHLEFSEN L MCFALL-NGAI M RELMAN D A An ecological and evolutionary perspective on human-microbe mutualism and disease Nature v449 n 7164 p811-818 2007

DETHLEFSEN L HUSE S SOGIN M L RELMAN D A The pervasive effects of an antibiotic on the human gut microbiota as revealed by deep 16S rRNA sequencing PLoS Biol v18 n6 p11-28 2008

DEUTSCHER J FRANCKE C POSTMA P W How phosphotransferase system-related protein phosphorylation regulates carbohydrate metabolism in bacteria Microbiol Mol Biol Rev v70 p 939ndash1031 2006

112

DEWULF E M CANI P D CLAUS S P FUENTES S PUYLAERT P G B NEYRINCK A M BINDELS L B DE VOS W M GIBSON G R THISSEN J P DELZENNE N M Insight into the prebiotic concept lessons from an exploratory double blind intervention study with inulin-type fructans in obese women Gut v62 p1112-1121 2013

DIBAISE J K FRANK D N MATHUR R Impact of the Gut Microbiota on the Development of Obesity Current Concepts Am J Gastroenterol Suppl v1 p22ndash27 2012

DIELEMAN L A PALMEN M J AKOL H BLOEMENA E PENA A S MEUWISSEN SG VAN REES E P Chronic experimental colitis induced by dextran sulphate sodium (dss) is characterized by th1 and th2 cytokines Clin Exp Immunol v114 p 385-391 1998

DING S CHI M M SCULL B P RIGBY R SCHWERBROCK N M MAGNESS S JOBIN C LUND P K High-fat diet bacteria interactions promote intestinal inflammation which precedes and correlates with obesity and insulin resistance in mouse Plos one v5 p 121-191 2010

DOMINGUEZ-BELLO M G COSTELLO E K CONTRERAS M MAGRIS M HIDALGO G FIERER N KNIGHT R Delivery mode shapes the acquisition and structure of the initial microbiota across multiple body habitats in newborns Proc Natl Acad Sci USA v107 n11971ndash11975 2010

DONOVAN SM Role of human milk components in gastrointestinal development Current knowledge and future needs J Pediatr v149 p49-61 2006

DONOVAN SM ODLE J Growth factors in milk as mediators of infant development Annu Ver Nutr v14 p147-167 1994

DUNCAN B B SCHMIDT M I POLANCZYK C A HOMRICH C S ROSA R S ACHUTTI A C Fatores de risco para doenccedilas natildeo-transmissiacuteveis em aacutereas metropolitanas na regiatildeo sul do Brasil prevalecircncia e simultaneidade Rev Sauacutede Puacuteblica v27 p143-148 1993

DUNCAN S H LOBLEY G E HOLTROP G INCE J JOHNSTONE A M LOUIS P FLINT H J Human colonic microbiota associated with diet obesity and weight loss Int J Obes v 32 p 1720ndash1724 2008

DYBVIG K Mycoplasmal genetics Annual Review of Microbiology v 44 p 81-104 1990

ECKBURG P B BIK E M BERNSTEIN C N PURDOM E DETHLEFSEN L SARGENT M et al Diversity of the human intestinal microbial flora Science v308 n5728 p 1635ndash1638 2005

ERICKSON B Z ROSS R F BOVE J M Isolation of Mycoplasma salivarium from swine Vet Microbiol v 16 n 4 p 385-390 1988

EVANS C C LEPARD K J KWAK J W STANCUKAS M C LASKOWSKI S DOUGHERTY J MOULTON L GLAWE A WANG Y LEONE V ANTONOPOULOS D A SMITH D CHANG E B CIANCIO M J Exercise prevents weight gain and alters the gut microbiota in a mouse model of high fat diet-induced obesity PLoS One v9 p921-993 2014

EVERARD A BELZER C GEURTS L OUWERKERK J P DRUART C BINDELS L B GUIOT Y DERRIEN M MUCCIOLI G G DELZENNE N M YOS W M CANI P D Cross-talk between Akkermansia muciniphila and intestinal epithelium controls diet-induced obesity Proc Natl Acad Sci v110 n22 p9066-9071 2013

113

EVERARD A CANI P D Diabetes obesity and gut microbiota Best Pract Res Clin Gastroenterol v27 n1 p73-83 2013

EVERARD A GEURTS L CAESAR R VAN HUL M MATAMOROS S DUPARC T DENIS R G COCHEZ P PIERARD F CASTEL J BINDELS L B PLOVIER H ROBINE S MUCCIOLI G G RENAULD J C DUMOUTIER L DELZENNE N M LUQUET S BACKHED F CANI P D Intestinal epithelial MyD88 is a sensor switching host metabolism towards obesity according to nutritional status Nat Commun v5 n 5648 2014

EVERARD A LAZAREVIC V DERRIEN M GIRARD M MUCCIOLI GG NEYRINCK A M POSSEMIERS S VAN HOLLE A FRANCOIS P DE VOS W M DELZENNE N M SCHRENZEL J CANI P D Responses of gut microbiota and glucose and lipid metabolism to prebiotics in genetic obese and diet-induced leptin-resistant mice Diabetes v60 p2775ndash2786 2011

FAGARASAN S KAWAMOTO S KANAGAWA O SUZUKI K Adaptive immune regulation in the gut T cell-dependent and Tcell-independent IgA synthesis Annual Review of Immunology v 28 n1 p243ndash273 2010

FARIAS F A B Prevalecircncia de osteoporose fraturas vertebrais ingestatildeo de caacutelcio e deficiecircncia de vitamina D em mulheres na poacutes- menopausa 2003 164f (Tese de Doutorado) FioCruz Rio de Janeiro Escola Nacional de Sauacutede Puacuteblica 2003

FERNANDEZ-REAL J M BROCH M VENDRELL J RICART W Insulin resistance inflammation and serum fatty acid composition Diabetes Care v26 p1362-1368 2003 FERREIRA V A Magalhatildees R Obesidade entre os pobres a vulnerabilidade feminina Ciecircncia e Sauacutede v16 n4 p2279-2289 2011

FERREIRA V A Obesidade e pobreza o aparente paradoxo Um estudo com mulheres da Favela da Rocinha Rio de Janeiro Brasil Cad Sauacutede Puacuteblica v21 n6 p1792-1800 2005

FIERER N JACKSON J A VILGALYS R JACKSON R B Assessment of soil microbial community structure by use of taxon-specific quantitative PCR assays Appl Environ Microbiol v71 p 4117ndash4120 2005

FINUCANE M M SHARPTON T J LAURENT T J POLLARD KS A taxonomic signature of obesity in the microbiome Getting to the guts of the matter PloS One v9 n1 p 846-889 2014

FISBERG R M COLUCCI A C A MORIMOTO J M MARCHIONI D M L Questionaacuterio de frequumlecircncia alimentar para adultos com base em estudo populacional Rev Sauacutede Puacuteblica v 42 p 550-554 2008

FLEISSNER C K HUEBEL N ABD EL-BARY M M LOH G KLAUS S BLAUT M Absence of intestinal microbiota does not protect mice from diet-induced obesity Br J Nutr v104 n6 p 919-929 2010

FLINT H J SCOTT K P LOUIS P DUNCAN S H The role of the gut microbiota in nutrition and health Nat Rev Gastroenterol Hepatol v9 p577ndash89 2012 FRANCHI L WARNER N VIANI K NUNtildeEZ G Function of Nod-like receptors in microbial recognition and host defense Immunol Rev v227 n1 p106-28 2009

FRANCISCHI R P P et al Obesidade atualizaccedilatildeo sobre sua etiologia morbidade e tratamento Revista de Nutriccedilatildeo Campinas v13 n1 p 17-28 2000

114

FRANCOIS-PIERRE J M SPRENGER N YAP I K S WANG Y BIBILONI R ROCHAT F REZZI S CHERBUT C KOCHHAR S LINDON J C HOLMES E NICHOLSON J K Panorganismal Gut Microbiome-Host Metabolic Crosstalk Journal of Proteome Research v8 p2090ndash2105 2009

FRANK D N ST AMAND A L FELDMAN R A BOEDEKER E C HARPAZ N PACE N R Molecular-phylogenetic characterization of microbial community imbalances in human inflammatory bowel diseases Proc Natl Acad Sci v104 n34 p13780ndash13785 2007

FRANKE D FRANCISCA M A W DANIEL P R Aacute Estilo de vida e fatores de risco para o sobrepeso e obesidade em mulheres de baixa renda Cinergis v8 n1 p40-49 2007

GABRIDGE M G CHANDLER D K F DANIELS M J Pathogenicity factors in Mycoplasmas and Spiroplasmas In RAZIN S BARILE M F The mycoplasmas IV mycoplasma pathogenecity Londres Academic Press 1985 p 313-351

GAREAU M G SHERMAN P M WALKER W A Probiotics and the gut microbiota in intestinal health and disease Nat Rev Gastroenterol Hepatol v7 p503ndash514 2010

GIACOMELLO A SCHMIDT M I NUNES M A A DUNCAN B B SOARES R M MANZOLL I P CAMEY S Validaccedilatildeo relativa de Questionaacuterio de Frequecircncia Alimentar em gestantes usuaacuterias de serviccedilos 35 do Sistema Uacutenico de Sauacutede em dois municiacutepios no Rio Grande do Sul Brasil Rev Bras Saude Mater v8 n4 p 445-454 2008

GIGANTE D P BARROS F C POST C L A OLINTO M T A Prevalecircncia de obesidade em adultos e seus fatores de risco Rev Sauacutede Puacutebl v31 n3 p236-46 1997

GILL S R POP M DEBOY R T ECKBURG P B TURNBAUGH P J SAMUEL B S GORDON J I RELMAN D A FRASER-LIGGETT C M NELSON K E Metagenomic Analysis of the Human Distal Gut Microbiome Science v312 n5778 p1355-1359 2006

GOODRICK G K POSTON W S FOREYT J P Methods for voluntary weight loss and control update 1996 Nutrition v 12 n 10 p 672-676 1996

GORAN M I Energy metabolism and Obesity Meacuted Clin North Am v84 n2 p347-362 2000

GORDON J I HOOPER L V Commensal host-bacterial relationships in the gut Science v292 n5519 p1115-1118 2001

GOTO Y IVANOV I I Intestinal epithelial cells as mediators of the commensal-host immune crosstalk Immunology and Cell Biology v91 n3 p204ndash214 2013

GOULET M DULAR R TULLY J G BILLOWES G KASATIYA S Isolation of Mycoplasma pneumoniae from the human urogenital tract J Clin Microbiol v 33n 11 p 2823-5 1995

GRAF D CAGNO R D FAK F FLINT H J NYMAN M SAARELA M WATZL B Diet rapidly and reproducibly alters the human gut microbiome Microb Ecol Health Dis v26 p 261-264 2015

GUARNER F MALAGELADA J Gut flora in health and disease Lancet v 361 n9356 p512-519 2003

GUILLOTEAU P MARTIN L EECKHAUT V DUCATELLE R ZABIELSKI R VAN IMMERSEEL F From the gut to the peripheral tissues the multiple effects of butyrate Nutr Res Rev v23 p366ndash384 2010

115

GUO X XIA X TANG R ZHOU J ZHAO H WANG K Development of a real-time PCR method for Firmicutes and Bacteroidetes in faeces and its application to quantify intestinal population of obese and lean pigs Lett Appl Microbiol v47 n5 p367-73 2008

HAJELA N RAMAKRISHNA B S NAIR G B ABRAHAM P GOPALAN S GANGULY N K Gut microbiome gut function and probiotics Implications for health Indian J Gastroenterol v34 n2 p93-107 2015

HAMER H M JONKERS D VENEMA K VANHOUTVIN S TROOST FJ BRUMMER R J Review article the role of butyrate on colonic function Aliment Pharmacol Ther v15 n2 p 104-119 2008

HANSON M FALL C ROBINSON S et al Early life nutrition and lifelong health BMA Board of Science 2009 [Acesso em 2015] Disponiacutevel em httpwwwbmaorgukhealth_promotion_ethicschild_healthearlylifenutritionjsp

HARDIE D G SAKAMOTO K AMPK a key sensor of fuel and energy status in skeletal muscle Physiology V21 p48-60 2006

HARRIS K KASSIS A MAJOR G CHOU C J Is the gut microbiota a new factor contributing to obesity and its metabolic disorders J Obes v2012 2012

HATTORI M TAYLOR T D The human Intestinal Microbiome A New Frontier of Human Biology Oxford Journals v16 n1 p1-12 2008

HAWRELAK J A MYERS S P The causes of intestinal dysbiosis a review Altern Med Rev v9 n2 p180-97 2004

HILDEBRANDT M A HOFFMANN C SHERRILL-MIX S A KEILBAUGH S A HAMADY M CHEN Y Y KNIGHT R AHIMA R S BUSHMAN F WU G D High-fat diet determines the composition of the murine gut microbiome independently of obesity Gastroenterology v137 n5 p1716-24 2009

HORNOK S HAJTOacuteS I MELI M L FARKAS I GOumlNCZI E MEILI T HOFMANN LEHMANN R First molecular identification of Mycoplasma ovis and lsquocandidatus M haemoovisrsquo from goat with lack of haemoplasma pcr-positivity in lice Acta Veterinaria Hungarica v 3 n60 p 355ndash360 2012

HOTAMISLIGIL G S Endoplasmic Reticulum Stress and the Inflammatory Basis of Metabolic Disease Cell v140 n6 p900ndash917 2010

HU FB Obesity epidemiology Oxford University Press 2008

HU F B VAN DAM R M LIU S Diet and risk of Type II diabetes the role of types of fat and carbohydrate Diabetology v44 p805-817 2001

HUTSON E M N L COHEN N D KUNKELL R C Measures of body fat and related factors in normal adults Journal American Diet Association v47 p176-86 1965

HUTTENHOWER C GEVERS D KNIGHT R ABUBUCKER S BADGER J H CHINWALLA AT et al Structure function and diversity of the healthy human microbiome Nature v486 n7402 p207-214 2012

INOUE D TSUJIMOTO G KIMURA I Regulation of energy homeostasis by GPR41 Front Endocrinol v5 n81 2014

INSTITUTO BRASILEIRO DE GEOGRAFIA E ESTATIacuteSTICA (IBGE) Pesquisa de Orccedilamentos Familiares 2002-2003 anaacutelise da disponibilidade domiciliar de alimentos e do estado nutricional no Brasil Rio de Janeiro IBGE 2004 110 p

116

INSTITUTO BRASILEIRO DE GEOGRAFIA E ESTATIacuteSTICA (IBGE) Pesquisa de Orccedilamentos Familiares 2008-2009 Antropometria e estado nutricional de crianccedilas adolescentes e adultos no Brasil Rio de Janeiro IBGE 2010 155 p

INSTITUTO BRASILEIRO DE GEOGRAFIA E ESTATIacuteSTICA Pesquisa de Orccedilamentos Familiares 2008-2009 Despesas Rendimento e Condiccedilotildees de Vida Rio de Janeiro 2010 [acesso em 08 maio 2015] Disponiacutevel em httpwwwibgegovbrhomeestatisticapopulacaocondicaodevidapof2008_2009POFpublicacaopdf

INSTITUTO BRASILEIRO DE GEOGRAFIA E ESTATIacuteSTICA-IBGE Pesquisa de orccedilamentos familiar 2002-2003 anaacutelise da disponibilidade domiciliar de alimentos do estado nutricional no Brasil Rio de Janeiro IBGE 2004 185 p

ISO T SUZUKI J SASAOKA F SASHIDA H WATANABE Y FUJIHARA M NAGAI K HARASAWA R Hemotropic mycoplasma infection in wild black bears (Ursus thibetanus japonicas) Vet Microbiol v 1-2 n163 p 184-189 2013

ISOMAA B ALMGREN P TUOMI T FORSEacuteN B LAHTI K NISSEacuteN M et al Cardiovascular morbidity and mortality associated with the metabolic syndrome Diabetes Care v24 n4 p683-688 2001

JERNBERG C LOumlFMARK S EDLUND C JANSSON J K Long-term impacts of antibiotic exposure on the human intestinal microbiota Microbiology v156 n11 p3216-3223 2010

JIMEacuteNEZ E FERNAacuteNDEZ L MARIacuteN M L MARTIacuteN R ODRIOZOLA J M NUENO-PALOP C NARBAD A OLIVARES M XAUS J RODRIacuteGUEZ J M Isolation of commensal bacteria from umbilical cord blood of healthy neonates born by cesarean section Curr Microbiol v51 n4 p270-274 2005

JIMEacuteNEZ E MARIacuteN M L MARTIacuteN R ODRIOZOLA J M OLIVARES M XAUS J FERNAacuteNDEZ L RODRIacuteGUEZ J M Is meconium from healthy newborns actually sterile Res Microbiol v159 n3 p187-193 2008

JIMENEZ L G MARTIN-MORENO J M Cuestionario de frecuencia de consumo alimentario In MAJEM LS BARTINA JAacute MATAIX-VERDUJ Nutricioacuten y Salud Puacuteblica Barcelona Masson p 120-125 1995

JIRTLE R L SKINNER M K Environmental epigenomics and disease susceptibility Nat Rev Genet v 8 p 253-262 2007

JOHANSSON K E PETTERSSON B Taxonomy of Mollicutes In Molecular Biology and Pathogenicity of Mycoplasmas In RAZIN S R HERRMANN R New York Kluwer AcademicPlenum Publishers 2002 p1ndash31

JUacuteNIOR J F Biblioteca de doenccedilas ndash colite retrocolite ulcerativa doenccedila de Crohn Satildeo Paulo Associaccedilatildeo Brasileira de Medicina Complementar 2004

KAC G VELAacuteSQUEZ-MELEacuteNDEZ G A transiccedilatildeo nutricional e a epidemiologia da obesidade na Ameacuterica Latina Cad Sauacutede Puacuteblica v19 sup1 s4-5 2003

KAMADA N CHEN G Y INOHARA N NUNEZ G Control of pathogens and pathobionts by the gut microbiota Nat Immunol v14 p685ndash690 2013

KARAMI N MARTNER A ENNE V I SWERKERSSON S ADLERBERTH I WOLD A E Transfer of an ampicillin resistance gene between two Escherichia coli strains in the

117

bowel microbiota of an infant treated with antibiotics J Antimicrob Chemother v60 n5 p1142-1145 2007

KIM D H JUNG E A SOHNG I S HAN J A KIM T H HAN M J Intestinal bacterial metabolism of flavonoids and its relation to some biological activities Arch Pharm Res v21 p17ndash23 1998

KINROSS J M DARZI A W NICHOLSON J K Gut microbiome-host interactions in health and disease Genome Medicine v3 n14 2011

KLEEREBEZEM M VAUGHAN E E Probiotic and gut lactobacilli and bifidobacteria molecular approaches to study diversity and activity Annu Rev Microbiol v 63 p269-290 2009

KOENIG J E SPOR A SCALFONE N FRICKER A D STOMBAUGH J KNIGHT R ANGENENT LT LEY R E Succession of microbial consortia in the developing infant gut microbiome Proc Natl Acad Sci USA v 108 p4578ndash4585 2011

KONTUREK S J KONTUREK J W PAWLIK T BRZOZOWSKI T Brain-gut axis and its role in the control of food intake J Physiol Pharmacol v55 p137-154 2004

KORKEILA M RISSANEN A KAPRIO J SORENSEN T I A KOSKENVUO M Weight-loss attempts and risk of major weight gain a prospective study in Finnish adults Am J Clin Nutr v 70 p 965-975 1999

LAM Y Y HA C W CAMPBELL C R MITCHELL A J DINUDOM A OSCARSSON J COOK D I HUNT N H CATERSON I D HOLMES A J STORLIEN L H Increased gut permeability andmicrobiota change associate with mesenteric fat inflammation and metabolic dysfunction in diet-induced obese mice Plos one v7 n3 p342-353 2012

LANGA S Interacciones entre Bacterias laacutecticas ceacutelulas del epitelio intestinal y ceacutelulas del sistema inmunitario Desarrollo de um modelo in vitro 2006 125 f (Tese de doutorado) Faculdade de Veterinaacuteria Madri Universidade Complutense de Madrid 2006

LESSA I Os programas nacionais de educaccedilatildeo e controle para DCNT In LESSA I Adulto brasileiro e as doenccedilas da modernidade Epidemiologia das doenccedilas crocircnicas natildeo transmissiacuteveis no Brasil Hucitec Satildeo Paulo p 241-250 1998

LEVY-COSTA R B SCHIERE R PONTES N S D MONTEIRO C A Disponibilidade domiciliar de alimentos no Brasil distribuiccedilatildeo e evoluccedilatildeo (1974-2003) Rev Sauacutede Puacuteblica v39 n4 p 530-540 2005

LEY R E BAumlCKHED F TURNBAUGH P LOZUPONE C A KNIGHT R D GORDON J I Obesity alters gut microbial ecology Proc Natl Acad Sci USA v102 p11070ndash11075 2005

LEY R E HAMADY M LOZUPONE C TURNBAUGH P J RAMEY R R BIRCHER J S SCHLEGEL M L TUCKER T A SCHRENZEL M D KNIGHT R GORDON J I Evolution of Mammals and their gut microbes Science v320 n5883 p1647-1651 2008

LEY R E TURNBAUGH P J KLEIN S GORDON J I Microbial ecology human gut microbes associated with obesity Nature v444 n7122 p 1022ndash1023 2006

LO S C HAYES M M TULLY J G WANG R Y H KOTAN H PIERCE P F ROSE D D L SHIH J W K Mycoplasma penetrans sp nov from the Urogenital Tract of Patients with AIDS International Journal of Systematic Bacteriology v 42 n 3 p 357-364 1992

LUDWIG W KLENK H P Overview a phylogenetic backbone and taxonomic framework for procaryotic systematics In BOONE D R CASTENHOLZ R W GARRITY G M

118

(eds) Bergeys Manual of Systematic Bacteriology 2 ed New York Springer-Verlag 2001 p 49-65

LYRA A LAHTINEN S TIIHONEN K OUWEHAND A C Intestinal microbiota and overweight Benef Microbes v1 n4 p407-21 2010

MACCARTHY M C Dietary and activity patterns of obese women in Trinidad Journal American Dietetic Association v48 n1 p33-37 1966

MACKIE R I SGHIR A GASKINS H R Developmental microbial ecology of the neonatal gastrointestinal tract Am J Clin Nutr v69 p1035ndash1045 1999

MACPHERSON A J GEUKING MB MCCOY D Homeland Security IgA immunity at the frontiers of the body Trends in Immunology v 33 n4 p160ndash166 2012

MANACH C DONOVAN J L Pharmacokinetics and metabolism of dietary flavonoids in humans Free Radic Res v38 p771ndash785 2004

MANILOFF J Phylogeny and evolution In Molecular Biology and Pathogenicity of Mycoplasmas p31ndash45 In RAZIN S R HERRMANN R New York Kluwer AcademicPlenum Publishers 2002

MARANDUBA C M C CASTRO S B R SOUZA G T ROSSATO C GUIA FC VALENTE M A S RETTORE J V P MARANDUBA C P SOUZA C M CARMO A M R MACEDO G C SILVA F S Intestinal Microbiota as Modulators of the Immune System and Neuroimmune System Impact on the Host Health and Homeostasis Journal of Immunology v2015 n1 p 12-22 2015

MARIAT D FIRMESSE O LEVENEZ F GUIMARAES V SOKOL H DORE J CORTHIER G FURET J P The FirmicutesBacteroidetes ratio of the human microbiota changes with age BMC Microbiology v 9 n123 2009

MARIE N G FLEMING T ROBINSON M THOMSON B GRAETZ N MARGONO C MULLANY E C BIRYUKOV S ABBAFATI C ABERA S F ABRAHAM J P ABU9RMEILEH N M ACHOKI T Global regional and national prevalence of overweight and obesity in children and adults during 1980-2013 a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2013 The Lancet v384 n9945 p766-781 2014

MARQUES A P O ARRUDA I K G LEAL M C C SANTO A C G E Envelhecimento obesidade e consumo alimentar em idosos Rev Bras Geriatr Gerontol v10 n2 p231-242 2007

MARQUES T M WALL R ROSS R P FITZGERALD G F RYAN C A STANTON C Programming infant gut microbiota influence of dietary and environmental factorsCurr Opin Biotechnol v21 p149-156 2010

MARRA M SCALFI L CONTALDO F PASANISI F Fasting respiratory quotient as a predictor of long-term weight changes in non-obese women Ann Nutr Metab v48 n3 p189-192 2004

MARTINEZ I WALLACE G ZHANG C LEGGE R BENSON A K CARR T P MORIYAMA E N WALTER J Diet-induced metabolic improvements in a hamster model of hypercholesterolemia are strongly linked to alterations of the gut microbiota Appl Environ Microbiol v75 p4175ndash4184 2009

MAXFIELD E KONISH F Patterns of food intake and physical activity in obesity J Am Diet Assoc p 49-406 1966

MAYNARD C L ELSON C O HATTON R D WEAVER C T Reciprocal interactions of the intestinal microbiota and immune system Nature v489 n 7415 p231ndash241 2012

119

MCCRACKEN V J LORENZ R G The gastrointestinal ecosystem a precarious alliance among epithelium immunity and microbiota Cell Microbiol v3 n1 p1-11 2001

MCLAREN L Socioeconomic status and obesity Rev Epidemiol v29 n1 p29-48 2007

MENDONCcedilA C P ANJOS L A Aspectos das praacuteticas alimentares e da atividade fiacutesica como determinantes do crescimento do sobrepesoobesidade no Brasil Cad Sauacutede Puacuteblica v20 n3 p698-709 2004

MILES R J NICHOLAS R A J Methods in molecular biology Mycoplasma protocolsTotowa NJ Humana Press 1998 p5

MINISTEacuteRIO DA SAUacuteDE Caderno de atenccedilatildeo baacutesica Obesidade Ndeg12 Brasiacutelia 2006

MONDINI L MONTEIRO C A Relevacircncia epidemioloacutegica da desnutriccedilatildeo e da obesidade em distintas classes sociais meacutetodos de estudo e aplicaccedilatildeo agrave populaccedilatildeo brasileira Rev Bras Epidemiol v1 n1 p28-39 1998

MONTALTO M DONOFRIO F GALLO A CAZZATO A GASBARRINI G Intestinal microbiota and its functions Dig Liver Dis v3 n2 p30-34 2009

MONTEIRO C A CONDE W L A tendecircncia secular da obesidade segundo os estratos sociais Nordeste e Sudeste do Brasil 1975-1989-1995 Arq Bras Endocrinol Metab v43 p186-194 1999

MONTEIRO C A CONDE WL POPKIN B M The burden of disease from undernutrition and overnutrition in countries undergoing rapid nutrition transition a view from Brazil Am J of Public Health v94 p433-434 2004

MORAN C P SHANAHAN F Gut microbiota and obesity Role in etiology and potential therapeutic target Gastroenterology v28 n4 p585ndash597 2014

MORELLI L Postnatal development of intestinal microflora as influenced by infant nutrition J Nutr v 138 p1791ndash1795 2008

MORENO-INDIAS I FERNANDO CARDONA F FRANCISCO J TINAHONES F J QUEIPO M I Impact of the gut microbiota on the development of obesity and type 2 diabetes mellitus Front Microbiol v5 n190 2014

MOROWITZ H J Foreword from the enigmatic pleuropneumonia-like organisms to the paradigmatic mycoplasma IN RAZIN S HERRMANN R (Eds) Molecular biology and pathogenicity of mycoplasmas New York Kluwer AcademicPlenum Publishers 2002 p 210

MUCCIOLI G G NASLAIN D BACKHED F REIGSTAD C S LAMBERT D M DELZENNE N M CANI P D The endocannabinoid system links gut microbiota to adipogenesis Mol Syst Biol v6 n392 2010

MURPHY E F COTTER P D HEALY S MARQUES T M OSULLIVAN O FOUHY F CLARKE S F OTOOLE P W QUIGLEY E M STANTON C ROSS P R ODOHERTY R M SHANAHAN F Composition and energy harvesting capacity of the gut microbiota relationship to diet obesity and time in mouse models Gut v 59 n12 p 1635ndash1642 2010

MUSSO G GAMBINO R CASSADER M Interactions between gut microbiota and host metabolism predisposing to obesity and diabetes Annu Rev Med v62 p361-80 2011

NADAL I SANTACRUZ A MARCOS A WARNBERG J GARAGORRI J M MORENO L A MARTIN-MATILLAS M CAMPOY C MARTI A MOLERES A DELGADO M VEIGA O L GARCIA-FUENTES M REDONDO CG SANZ Y Shifts in

120

clostridia bacteroides and immunoglobulin-coating fecal bacteria associated with weight loss in obese adolescents Int J Obes v33 p758ndash767 2009

National Commitee for Clinical Laboratory Standards-USA (NCCCLS 2007)-Disponiacutevel em wwwclsiorggt Acessado em 25042015

NEIMARK H C Origins and evolution of wall-less prokaryotes In MADOFF S (Ed) The bacterial L- forms New York Marcel Dekker p 21-42 1986 NEUMARK-SZTAINER D WALL M GUO J STORY M HAINES J EISENBERG M Obesity Disordered Eating and Eating Disorders in a Longitudinal Study of Adolescents How Do Dieters Fare 5 Years Later J Am Diet Assoc v 106 p 559-569 2006

NEUMARK-SZTAINER D WALL M STORY M HAINES J EISENBERG M Why does dieting predict weight gain in adolescents Findings from project EAT-II a 5-year longitudinal study J Am Diet Assoc v 107 p 448-455 2007

NICHOLSON J K Global systems biology personalized medicine and molecular epidemiology Molecular Systems Biology v2 n52 2006

OKAYASU I HATAKEYAMA S YAMADA M OHKUSA T INAGAKI Y NAKAYA R A novel method in the induction of reliable experimental acute and chronic ulcerative colitis in mice Gastroenterology v98 n 30 p694-702 1990

OLSHANSKY S J PASSARO D J HERSHOW RC LAYDEN J CARNES B A BRODY J et al A Potential Decline in Life Expectancy in the United States in the 21st Century N Engl J Med v 352 n 11 p 1138-1145 2005

OLSON L D et al Arginine utilization by Mycoplasma fermentans is not regulated by glucose metabolism a 13C-NMR study FEMS Microbiol Lett v 108 n 1 p 47-52 1993

OTTMAN N SMIDT H DE VOS WM BELZER C The function of our microbiota who is out there and what do they do Front Cell Infect Microbiol v2 n104 2012 PALMER C BIK EM DIGIULIO D B RELMAN D A BROWN P O Development of the human infant intestinal microbiota PLoS Biol v5 p177 2007 PENDERS J THIJS C VINK C STELMA FF SNIJDERS B KUMMELING I et al Factors influencing the composition of the intestinal microbiota in early infancy Pediatrics v118 n2 p511-21 2006 PEREIRA LO FRANCISCHI R P LANCHA JUacuteNIOR A H Obesidade Haacutebitos Nutricionais Sedentarismo e Resistecircncia agrave Insulina Arq Bras Endocrinol Metab v47 n2 p111-127 2003 PEREIRA LSS PINTO RCP AZEVEDO V MUZI V R QUINTAtildeO D F Relaccedilatildeo entre perfil antropomeacutetrico e a ingestatildeo dieteacutetica em pacientes atendidos na cliacutenica escola da faculdade pitaacutegoras campus Ipatinga-mg RBONE v6 n31 p4-12 2012

PEREIRA M A JACOBS D R J VAN HORN L SLATTERY M L KARTASHOV A I LUDWIG D S Dairy consumption obesity and the insulin resistance syndrome in young adults the CARDIA Study JAMA v287 n16 p2081-9 2002

PEREIRA S S TEIXEIRA LG AGUILAR EC MATOSO RO SOARES FL FERREIRA AV ALVAREZ-LEITE J I Differences in adipose tissue inflammation and oxidative status in c57bl6 and apoe-- mice fed high fat diet Anim Sci J v83 p549-555 2012

121

PINHEIRO A B V LACERDA E M BENZECRY E H GOMES M C S COSTA V M Tabela para Avaliaccedilatildeo de Consumo Alimentar em Medidas Caseiras 5 ed Satildeo Paulo Atheneu 2005

POPKIN B M Global nutritional dynamics the world is shifting rapidly toward a diet linked with noncommunicable diseases Am J Clinical Nutrition v54 n2 p289-298 2006

POROYKO V WHITE J R WANG M DONOVAN S ALVERDY J LIU D C MOROWITZ M J Gut microbial gene expression in mother-fed and formula-fed piglets PLoS One v5 p124-159 2010

PRINCE A L ANTONY K M MA J AAGAARD K M The microbiome and development a motherrsquos perspective Semin Reprod Med v32 n1 p14-22 2014

PUIGSERVER P SPIEGELMAN B M Peroxisome proliferatoractivated receptor-gamma coactivator 1 alpha (PGC-1 alpha) transcriptional coactivator and metabolic regulator Endocr Rev v24 p78ndash90 2003

PURCHIARONI F TORTORA A GABRIELLI M BERTUCCI F GIGANTE G IANIRO G OJETTI V SCARPELLINI E GASBARRINI AThe role of intestinal microbiota and the immune system Eur Rev Med Pharmacol Sci v17p323-33 2013

QIN J LI R RAES J ARUMUGAM M BURGDORF K S MANICHANH CNIELSEN T PONS N LEVENEZ F YAMADA T MENDE D R LI J XU J LI S LI D CAO J WANG B LIANG H ZHENG H XIE Y TAP J LEPAGE P BERTALAN M BATTO J M HANSEN T LE PASLIER D LINNEBERG A NIELSEN H B PELLETIER E RENAULT P SICHERITZ-PONTEN T TURNER K ZHU H YU C LI S JIAN M ZHOU Y YINGRUI LI Y ZHANG X LI S QIN N YANG H WANG J BRUNAK S DOREacute J GUARNER F KRISTIANSEN K PEDERSEN O PARKHILL J WEISSENBACH J CONSORTIUM M BORK P EHRLICH SD WANG J A human gut microbial gene catalogue established by metagenomics sequencing Nature v464 p59-65 2010

QUIGLEY E M Gut bacteria in health and disease Gastroenterol Hepatol v9 n9 p 560ndash569 2013

RABEN A ASTRUP A Leptin is influenced body by predisposition to obesity and diet composition Int J Obes v24 n4 p450-459 2000

RABOT S MEMBREZ M BRUNEAU A GERARD P HARACH T MOSER M RAYMOND F MANSOURIAN R CHOU C J Germ-free C57BL6J mice are resistant to high-fat-diet-induced insulin resistance and have altered cholesterol metabolism FASEB J v24 p4948ndash4959 2010

RAJILIĆ-STOJANOVIĆ M SMIDT H DE VOS W M Diversity of the human gastrointestinal tract microbiota revisited Environ Microbiol v9 n9 p2125-2136 2007

RAKOFF-NAHOUM S PAGLINO J ESLAMI-VARZANEH F EDBERG S MEDZHITOV R Recognition of commensal microflora by toll-like receptors is required for intestinal homeostasis Cell v118 n33 p229-241 33 2004

RAMALHO R GUIMARAES C The role of adipose tissue and macrophages in chronic inflammation associated with obesity Clinical implications Acta Med Port v21 n 76 p 489-496 2008

RAOULT D Obesity pandemics and the modification of digestive bacterial flora Eur J Clin Microbiol Infect Dis v27 n8 p631-634 2008

122

RAUTAVA S LUOTO R SALMINEN S ISOLAURI E Microbial contact during pregnancy intestinal colonization and human disease Nat Rev Gastroenterol Hepatol v9 p 565ndash576 2012

RAZIN S Molecular properties of Mollicutes a synopsis In RAZIN S TULLY J G (Ed) Molecular and diagnostic procedures in mycoplasmology Academic Press INC v 1 p 1-25 1995

RAZIN S Mycoplasma Taxonomy and Ecology In MANILOFF J MCELHANEY R N FINCH L R BASEMAN J B Mycoplasmas Molecular Biology and Pathogenesis Washington American Society For Microbiology 1992 p 3-22

RAZIN S JACOBS E Mycoplasma adhesion J Gen Microbiol v138 n3 p407-422 1992

RAZIN S TULLY J G Mycoplasma characterization In RAZIN S TULLY J G (Eds)Methods in Mycoplasmology New York Academic Press p 150-176 1983

RAZIN S YOGEV D NAOT Y Molecular biology and pathogenicity of mycoplasmas Microbiology and Molecular Biology Reviews v 52 n 4 p 1094-1156 1998

REGIDOR E GUITIERREZ-FISAC J L BANEGAS J R LOPES-GARCIA E RODRIGUES-ARTALEJO F Obesity and socioeconomic position measured at three stages of the life course in eldery Eur J Clin Microbiol v58 p488-494 2004

REMELY M DWORZAK S HIPPE B ZWIELEHNER J AUMUumlLLER E BRATH H HASLBERGER AG Abundance and diversity of microbiota in type 2 diabetes and obesity Diabetes metab res v 4 p1-8 2013

REMELY M TESAR I HIPPE B GNAUER S RUST P HASLBERGER AG Gut microbiota composition correlates with changes in body fat content due to weight loss Beneficial Microbes v6 n4 p431-439 2015

RENZ-POLSTER H DAVID M R BUIST A S VOLLMER W M OCONNOR E A FRAZIER E A WALL M A Caesarean section delivery and the risk of allergic disorders in childhood Clin Exp Allergy v35 n11 p1466-1472 2005

RESTA S C Effects of probiotics and commensals on intestinal epithelial physiology implications for nutrient handling J Physiol v 587 p 4169ndash4174 2009

RODWELL A W MITCHELL A Nutrition growth and reproduction In The Mycoplasmas v1 p103-139 BARILE S RAZIN (eds) New YorkAcademic Press 1983

ROGERS M J et al Construction of the mycoplasma evolutionary tree from 5S rRNA sequence data Proc Natl Acad Sci U S A v 82 n 4 p 1160-1164 1985

ROMERO C E M ZANESCO A O papel dos hormocircnios leptina e grelina na gecircnese da obesidade Revista de Nutriccedilatildeo v 19 n 1 p 85-91 2006 Disponiacutevel em lthttphdlhandlenet1144930522gt

RUHNKE H L ROSENDAL S Useful protocols for diagnosis of animal mycoplasmas In WHITFORD HW ROSENBUSCH RF LAUERMAN LH (Eds) Mycoplasmosis in animals Laboratory Diagnosis Ames Iowa State University p141-144 1994

SANTACRUZ A MARCOS A WARNBERG J MARTI A MARTIN-MATILLAS M CAMPOY C MORENO L A VEIGA O REDONDO-FIGUERO C GARAGORRI J M AZCONA C DELGADO M GARCIA-FUENTES M COLLADO M C SANZ Y Interplay between weight loss and gut microbiota composition in overweight adolescents Obesity v17 p1906ndash1915 2009

123

SANTOS C R B PORTELLA E S AVILA S S SOARES E A Fatores dieteacuteticos na prevenccedilatildeo e tratamento de comorbidades associadas agrave siacutendrome metaboacutelica Rev Nutr v19 n3 2006

SANZ Y SANTACRUZ A DE PALMA G Insights into the role of gut microbes in obesity Interdiscip Perspect Infect Dis v2008 2008

SATOKARI R GRONROOS T LAITINEN K SALMINEN SISOLAURI E Bifidobacterium and Lactobacillus DNA in the human placenta Lett Appl Microbiol v48 n1 2009

SAWAYA A L SOLYMOS G M B FLOREcircNCIO T M M T MARTINS P A Os dois Brasis quem satildeo onde estatildeo e como vivem os pobres brasileiros Estudos Avanccedilados v17 n48 p21-44 2003

SCALBERT A WILLIAMSON G Dietary intake and bioavailability of polyphenols J Nutr v130 p2073-2085 2000

SCARPELLINI E CAMPANALE M LEONE D PURCHIARONI F VITALE G LAURITANO E C GASBARRINI A Gut microbiota and obesity Intern Emerg Med v5 sup l pS53-S56 2010

SCHEacuteLE E GRAHNEMO L ANESTEN F HALLEacuteN A BAumlCKHED F JANSSON JO The Gut Microbiota Reduces Leptin Sensitivity and the Expression of the Obesity-Suppressing Neuropeptides Proglucagon (Gcg) and Brain-Derived Neurotrophic Factor (Bdnf) in the Central Nervous System Endocrinology v154 n10 p 3643ndash3651 2013 SCHWIERTZ A TARAS D SCHAumlFER K BEIJER S BOS N A DONUS C HARDT P D Microbiota and SCFA in lean and overweight healthy subjects Obesity v18 n1 p 190ndash195 2010

SEARS M E GENUIS S J Review Article Environmental Determinants of Chronic Disease and Medical Approaches Recognition Avoidance Supportive Therapy and Detoxification J Environ Public Health v2012 2012

SEKIROV I RUSSELL S L ANTUNES LC FINLAY B B Gut microbiota in health and disease Physiol Rev v90 n3 p859-904 2010

SHEN J OBIN M S ZHAO L The gut microbiota obesity and insulin resistance Mol Aspects Med v34 p39ndash58 2013

SHERIDAN P O BINDELS L B SAULNIER D M et al Can prebiotics and probiotics improve therapeutic outcomes for undernourished individuals Gut Microbes v5 p74ndash82 2014

SILVA L FG Disbiose intestinal conheccedila as causas e os tratamentos 2001

SILVA R S Indicaccedilotildees ciruacutergicas no tratamento da obesidade In SILVA R S KAWAHARA N T Cuidados preacute e poacutes-operatoacuterio na cirurgia da obesidade AGE p 60-64 2005

SMITH M I YATSUNENKO T MANARY M J et al Gut microbiomes of Malawian twin pairs discordant for kwashiorkor Science v339 n13 p548ndash54 2013

Sociedade Brasileira de Cardiologia Departamento de Aterosclerose IV Diretriz Brasileira de Dislipidemias e Prevenccedilatildeo da Aterosclerose Arq Bras Cardiol v88 n1 2007

SOUZA D R ANJOS L A WAHRLICH V VASCONCELLOS M T L MACHADO J M Ingestatildeo alimentar e balanccedilo energeacutetico da populaccedilatildeo adulta de Niteroacutei Rio de Janeiro

124

Brasil resultados da Pesquisa de Nutriccedilatildeo Atividade Fiacutesica e Sauacutede (PNAFS) Cad Sauacutede Puacuteblica v 26 n5 p879-890 2010

SOWERS M F ZHENG H TOMEY K KARVONEN-GUTIERREZ C JANNAUSCH M LI X YOSEF M SYMONS J Changes in body composition in women over six years at middle life ovarian and chronological aging J Clin Endocrinol Metab v92 p895- 901 2007 SPOSITO AC CARAMELLI B FONSECA FA BERTOLAMI MC AFIUNE NETO A SOUZA AD et al Sociedade Brasileira de Cardiologia IV Brazilian Guideline for dyslipidemia and atherosclerosis prevention Department of Atherosclerosis of Brazilian Society of Cardiology Arq Bras Cardiol v88 n1 p12-19 2007

STERNFELD B WANG H QUEENSBERRY CP J R ABRAMS B EVERSON-ROSE S A GREENDALE G A MATTHEWS K A TORRENS J I SOWERS M Physical activity and changes in weight and waist circumference in midlife women findings from the study of womenacutes Health across the nation Am J Epidemiol v160 p912-222 2004 STEWART ST CUTLER DM ROSEN AB Forecasting the Effects of Obesity and Smoking on US Life Expectancy N Engl J Med v361 p2252-2260 2009

SULLIVAN A EDLUND C NORD C E The effects of antibiotic use on gastrointestinal function Am J Gastroenterol v95 p 8-10 2000

TACO- Tabela Brasileira de composiccedilatildeo de alimentos Versatildeo II 2 ed Campinas Sp Nepa- Unicamp 2006

TENNYSON C A FRIEDMAN G Microecology Obesity and Probiotics Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes v 15 p 422-427 2008

TREMAROLI V BACKHED F Functional interactions between the gut microbiota and host metabolism Nature v489 p242ndash249 2012

TSUKUMO D M CARVALHO B M CARVALHO-FILHO M A SAAD M J Translational research into gut microbiota new horizons in obesity treatment Arq Bras Endocrinol Metabol v53 p139ndash144 2009

TULLY J G Culture medium formulation for primary isolation and maintenance of Mollicutes In RAZIN S TULLY J G (Ed) Molecular and diagnostic procedures in mycoplasmology Academic Press v1 p 33ndash39 1995

TURNBAUGH P J BACKHED F FULTON L GORDON J Diet-Induced Obesity Is Linked to Marked but Reversible Alterations in the Mouse Distal Gut Microbiome Cell Host amp Microbe v3 p213ndash223 2008

TURNBAUGH P J HAMADY M YATSUNENKO T CANTAREL B L DUNCAN A LEY R E SOGIN M L JONES W J ROE B A AFFOURTIT J P EGHOLM M HENRISSAT B HEATH AC KNIGHT R GORDON J I A core gut microbiome in obese and lean twins Nature v 457 n7228 p 480-485 2009

TURNBAUGH P J LEY R E MAHOWALD M A MAGRINI V MARDIS E R GORDON J I An obesity-associated gut microbiome with increased capacity for energy harvest Nature v 444 p1027ndash1031 2006

VAN KUPPEVELD F J M VAN DER LOGT J T M ANGULO A F VAN ZOEST M J QUINT W G V NIESTERS J M GALAMA J M D MELCHERS W J G Genus and Species-Specific Identification of Mycoplasmas by 16S rRNA Amplification Appl Environ Microbiol v 58 p 2606-2615 1992

125

VAN VLIET M J HARMSEN H J M DE BONT ES J M TISSING W J E The Role of Intestinal Microbiota in the Development and Severity of Chemotherapy-Induced Mucositis PLoS Pathog v6 n5 2010

VEIGA G V SICHIERI R Correlation in food intake between parents and adolescents depends on socioeconomic level Rev Nutr Res v26 p 517-523 2006

VENTURA M OrsquoFLAHERTY S CLAESSON M J TURRONI F KLAENHAMMER T R VAN SINDEREN D OrsquoTOOLE P W Genome-scale analyses of health-promoting bacteria probiogenomics Nat Rev Microbiol v7 n1 p61-71 2008

VERDAM F J FUENTES S JONGE C ZOETENDAL E G ERBIL R GREVE J W BUURMAN W A DE VOS W M RENSEN S Human intestinal microbiota composition is associated with local and systemic inflammation in obesity Obesity v21 n12 p 607ndash615 2013

VILLANUEVA-MILLAacuteN M J PEacuteREZ-MATUTE P OTEO J A Gut microbiota a key player in health and disease A review focused on obesity J Physiol Biochem v22 n15 p 507ndash515 2015

VOELKER L L DYBVIG K Gene transfer in Mycoplasma arthritidis transformation conjugal transfer of Tn916 and evidence for a restriction system recognizing AGCT J Bacteriol v178 n20 p6078-6081 1996

VRIEZE A HOLLEMAN F ZOETENDAL EG DE VOS WM HOEKSTRA JB NIEUWDORP M The environment within how gut microbiota may influence metabolism and body composition Diabetologia v53 n4 p 606-613 2010

WAITES K B TULLY J G ROSE D L MARRIOTT P A DAVIS R O CASSELL G H Current Microbiology v 15 p 325-327 1987

WALKER A W INCE J DUNCAN S H WEBSTER L M HOLTROP G ZE X BROWN D STARES M D SCOTT P BERGERAT A LOUIS P MCINTOSH F JOHNSTONE A M LOBLEY G E PARKHILL J FLINT H J Dominant and diet-responsive groups of bacteria within the human colonic microbiota ISME J v 5 p 220ndash230 2011

WALTER J Ecological role of lactobacilli in the gastrointestinal tract implications for fundamental and biomedical research Appl Environ Microbiol v74 n16 p4985-4986 2008

WEATHERILL AR LEE J Y ZHAO L LEMAY DG YOUN H S HWANG DH Saturated and polyunsaturated fatty acids reciprocally modulate dendritic cell functions mediated through tlr4 J Immunol v 174 n 70 p5390-5397 2005 WEISBURG W G et al A phylogenetic analysis of the mycoplasmas basis for their classification J Bacteriol v 171 n 12 p 6455-6467 1989

WHO-WORLD HEALTH ORGANIZATION Obesity situation and trends Geneva (CH) World Health Organization 2014

WICHMANN A ALLAHYAR A GREINER TU PLOVIER H LUNDEacuteN GO ARSSON T DRUCKER DJ DELZENNE NM CANI PD BAumlCKHED F Microbial Modulation of Energy Availability in the Colon Regulates Intestinal Transit Cell Host Microbe v14 n5 p582-590 2013

WIESLANDER A BOYER M WRDBLEWSKI H Membrane protein structure In Mycoplasmas Molecular Biology and Pathogenesis pp 93-112 Edited by J Maniloff

126

R N McElhaney L R Finch amp J B Baseman Washington DC American Society for Microbiology 1992

WILSON ID NICHOLSON JKThe role of gut microbiota in drug response Curr Pharm Des v15 p1519ndash1523 2009

WILSON P W DrsquoAGOSTINO R B SULLIVAN L PARISE H KANNEL W B Overweight and obesity as determinants of cardiovascular risk the Framingham experience Arch Intern Med v9 n16 p1867-1872 2002

WOLEVER T M SPADAFORA P ESHUIS H Interaction between colonic acetate and propionate in humans Am J Clin Nutr v53 n3 681-6871991

WONG J M ESFAHANI A SINGH N VILLA C R MIRRAHIMI A JENKINS D J KENDALL C W Gut microbiota diet and heart disease J AOAC Int v95 p24ndash30 2012

WORD HEALTH ORGANIZATION (WHO) Diet Nutrition and the prevention of chronic Diseases Report of a join WHOFAO expert consultation GENEVA 2003- WHO Technical Report Series ndeg916 2003

WORLD HEALTH ORGANIZATION Obesity preventing and managing the global epidemic Geneva World Health Organization 2002

WU G D CHEN J HOFFMANN C BITTINGER K CHEN Y Y KEILBAUGH S A BEWTRA M KNIGHTS D WALTERS W A KNIGHT R SINHA R GILROY E GUPTA K BALDASSANO R NESSEL L LI H BUSHMAN F D LEWIS JD Linking long-term dietary patterns with gut microbial enterotypes Science v 334 n33 p105ndash108 2011

XIAO S FEI N PANG X SHEN J WANG L ZHANG B ZHANG M ZHANG X ZHANG C LI M SUN L XUE Z WANG J FENG J YAN F ZHAO N LIU J LONG W ZHAO L A gut microbiota-targeted dietary intervention for amelioration of chronic inflammation underlying metabolic syndrome FEMS Microbiol Ecol v87 n2 p357ndash367 2014

XU J GORDON J I Honor thy symbionts Proc Natl Acad Sci U S A v100 n18 p10452-10459 2003

YANG L LU X NOSSA C W FRANCOIS F PEEK R M PEI Z Inflammation and intestinal metaplasia of the distal esophagus are associated with alterations in the microbiome Gastroenterology v 137 n2 p588ndash597 2009

ZAIBI M S STOCKER C J ODOWD J DAVIES A BELLAHCENE M CAWTHORNE M A BROWN A J SMITH D M ARCH J R Roles of GPR41 and GPR43 in leptin secretory responses of murine adipocytes to short chain fatty acids FEBS v584 p2381ndash2386 2010

ZHANG H DIBIASE J K ZUCCOLO A KUDRNA D BRAIDOTTI M YU Y PARAMESWARAN P CROWELL M D WING R RITTMANN B E KRAJMALNIK-BROWNA R Human gut microbiota in obesity and after gastric bypass Proc Natl Acad Sci U S A v106 n7 p 2365ndash2370 2009

ZOETENDAL E G VAUGHAN E E DE VOS W M A microbial world within us Mol Microbiol v59 n6 p1636-1650 2006

127

APEcircNDICE A ndash TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO

128

Universidade de Satildeo Paulo

Instituto de Ciecircncias Biomeacutedicas

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO

ESTUDO Avaliaccedilatildeo da participaccedilatildeo dos microrganismos da Classe Mollicutes na microbiota intestinal de mulheres eutroacuteficas e obesas

Vocecirc estaacute sendo convidado (a) a participar do projeto de pesquisa acima citado O documento

abaixo conteacutem todas as informaccedilotildees necessaacuterias sobre a pesquisa que estamos fazendo Sua

colaboraccedilatildeo neste estudo seraacute de muita importacircncia para noacutes mas se desistir a qualquer momento

isso natildeo causaraacute nenhum prejuiacutezo a vocecirc

Eu _________________________________________________________________ profissatildeo ____________________________

residente e domiciliado na

_______________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________ portador da Ceacutedula de identidade RG

___________________________ e inscrito no CPFMF______________________________ nascido(a) em _____

_____ _______ abaixo assinado(a) concordo de livre e espontacircnea vontade em participar como

voluntaacuterio(a) do estudo ldquoAvaliaccedilatildeo da participaccedilatildeo dos microrganismos da Classe Mollicutes

na microbiota intestinal de mulheres eutroacuteficas e obesasrdquo Declaro que obtive todas as

informaccedilotildees necessaacuterias bem como todos os eventuais esclarecimentos quanto agraves duacutevidas por

mim apresentadas

Estou ciente que

I) O estudo se faz necessaacuterio para que se possam descobrir as possiacuteveis causas da doenccedila

denominada vaginoses bacterianas a ser estudada no projeto ldquoAvaliaccedilatildeo da

participaccedilatildeo dos microrganismos da Classe Mollicutes na microbiota intestinal de

mulheres eutroacuteficas e obesasrdquo

II) Seratildeo feitas uma coleta de 5ml de sangue e fezes em periacuteodo uacutenico

III) A participaccedilatildeo neste projeto natildeo tem objetivo de me submeter a um tratamento bem

como natildeo me acarretaraacute qualquer despesa financeira com relaccedilatildeo aos procedimentos

meacutedico-cliacutenico-terapecircuticos efetuados no estudo

129

IV) Tenho a liberdade de desistir ou de interromper a colaboraccedilatildeo neste estudo no momento

em que desejar sem necessidade de qualquer explicaccedilatildeo

V) A desistecircncia natildeo causaraacute nenhum prejuiacutezo agrave minha sauacutede ou bem estar fiacutesico Natildeo viraacute

interferir no atendimento ou tratamento meacutedico

VI) Os resultados obtidos durante este ensaio seratildeo mantidos em sigilo mas concordo que

sejam divulgados em publicaccedilotildees cientiacuteficas desde que meus dados pessoais natildeo sejam

mencionados

VII) Caso eu desejar poderei pessoalmente tomar conhecimento dos resultados ao final

desta pesquisa

( ) Desejo conhecer os resultados desta pesquisa

( ) Natildeo desejo conhecer os resultados desta pesquisa

VIII) Concordo que o material possa ser utilizado em outros projetos desde que autorizado

pela Comissatildeo de Eacutetica deste Instituto e pelo responsaacutevel por esta pesquisa Caso minha

manifestaccedilatildeo seja positiva poderei retirar essa autorizaccedilatildeo a qualquer momento sem

qualquer prejuiacutezo para mim

( ) Sim ou ( ) Natildeo

IX ) Poderei contatar a Secretaria da Comissatildeo de Eacutetica em Pesquisa com Seres Humanos ndash

ICBUSP - no Fone 30917733 (e-mail cepicbuspbr) ou (11 3091-7297 jotiuspbr)

para recursos ou reclamaccedilotildees em relaccedilatildeo ao presente estudo

X) O sujeito de pesquisa ou seu representante quando for o caso deveraacute rubricar todas as

folhas do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido ndash TCLE - apondo sua assinatura na uacuteltima

paacutegina do referido Termo

XI) O pesquisador responsaacutevel deveraacute da mesma forma rubricar todas as folhas do Termo de

Consentimento Livre e Esclarecido ndash TCLEndash apondo sua assinatura na uacuteltima paacutegina do

referido Termo

XII) Resoluccedilatildeo 19696 - Estou recebendo uma coacutepia deste Termo de Consentimento Livre e

Esclarecido

Satildeo Paulo___________de________________de 20_____ ( ) Paciente ( ) Responsaacutevel

Testemunha 1 _______________________________________________

Nome RG Telefone

130

Testemunha 2 ___________________________________________________

Nome RG Telefone

Responsaacutevel pelo Projeto _____________________________________________________

PROF DR JORGE TIMENETSKY

131

APEcircNDICE B ndash QUESTIONAacuteRIO

132


INSTITUTO DE CIEcircNCIAS BIOMEacuteDICAS

MESTRADO EM MICROBIOLOGIA

Seccedilatildeo 1 IDENTIFICACcedilAtildeO E DADOS PESSOAIS

Nome Idade ID

Telefone Data

Profissatildeo

Estado civil 1 Casada 2 Solteira 3 Mora com companheiro 4 Viuacuteva 5 Divorciada

Raccedilacor 1 Branca 2 Preta 3 Amarela 4 Parda 5 Indiacutegena

Escolaridade 1 Analfabeto 2 1ordm grau incompleto 3 1ordm grau Completo

4 2ordm grau incompleto 5 2ordm grau completo 6 Superior incompleto 7 superior completo

Condiccedilatildeo Socioeconocircmica Indicar aproximadamente a renda domiciliarfamiliar mensal (soma de todos os ganhos

das pessoas que dividem as despesas) (valor SM R$ 67800)

ateacute 1 salaacuterio miacutenimo (ateacute R$ 61800)

1 a 2 salaacuterios miacutenimos (mais de R$ 61800 a R$ 123600)



mais de 10 salaacuterios miacutenimos (mais de R$ 618000)

Seccedilatildeo 2 HISTOacuteRIA FAMILIAR (parentes de 1ordm grau paternos e maternos e irmatildeos)

1 HAS 2 Diabetes 3 Obesidade 4 Hipercolesterolemia 5 DCV

Seccedilatildeo 3 HISTOacuteRIA CLIacuteNICA

133

Alteraccedilotildees gastrointestinais 1 Constipaccedilatildeo Flatulecircncia 3 Refluxo 4 Azia

5 Ulcera 6 Gastrite 7 Naacuteuseas 8 Vocircmitos

Como o intestino se comporta habitualmente 1 Normal 2 Constipaccedilatildeo 3 Diarreacuteia

Moleacutestia atual 1 HAS 2 Diabetes 3 Obesidade 4 Hipercolesterolemia

5 DCV 6 Dispneacuteia 7 Alteraccedilatildeo Menstrual

Uso de laxantes 1 Sim 2 Natildeo

Seccedilatildeo 4 HISTOacuteRIA OBSTEacuteTRICA

Tipo de parto 1 Normal 2 Cesaacuterea

Foi amamentada 1 Natildeo 2 1 a 3 meses 3 4 a 6 meses 4 7 a 9 meses

5 10 a 12 meses 6 gt12 meses

Teve alguma gestaccedilatildeo 1 Sim 2 Natildeo

Quantos filhos 1 1 a 2 2 3 a 4 3 ge5

Quantos partos foram normais 1 1 a 2 2 3 a 4 3 ge5

Quantos partos foram cesaacuterea 1 1 a 2 2 3 a 4 3 ge5

Tempo de amamentaccedilatildeo dos filhos 1 Natildeo 2 1 a 3 meses 3 4 a 6 meses 4 7 a 9 meses


Seccedilatildeo 5 HISTOacuteRIA GINECOLOacuteGICA

Usou ou estaacute usando algum anticoncepcional (adesivo piacutelula anel vaginal DIU de hormocircnio injetaacutevel ou

bastatildeo subcutacircneo) 1 Sim 2 Natildeo

Com que idade comeccedilou a tomar

Parou de usar por algum tempo

Por quanto tempo parou

Seccedilatildeo 6 CONSUMO DE TABACO

134

Jaacute fumou mais de 20 maccedilos de cigarro (cachimbo ou charuto) em toda sua vida

1 Natildeo 2 Sim e fumo atualmente 3 Sim mas parei de fumar 4 Natildeo sabe natildeo informa

Se fumafumou o faz haacute quanto tempo

Quantos cigarros em meacutedia fumafumava por dia

____cigarros

____cachimbos

____charutos

Se parou de fumar haacute quanto tempo ocorreu

Seccedilatildeo 7 CONSUMO DE AacuteLCOOL

Etilista 1 Sim 2 Natildeo

Frequencia de ingestatildeo

Tipo de bebida ingerida

Haacute quanto tempo ingere

Seccedilatildeo 8 ATIVIDADE FIacuteSICA (IPAQ versatildeo curta)

As perguntas estatildeo relacionadas ao tempo que vocecirc gasta fazendo atividade fiacutesica na UacuteLTIMA

semana As perguntas incluem as atividades que vocecirc faz no trabalho para ir de um lugar a outro

por lazer por esporte por exerciacutecio ou como parte das suas atividades em casa ou no jardim

Para responder as questotildees lembre que

atividades fiacutesicas VIGOROSAS satildeo aquelas que precisam de um grande esforccedilo fiacutesico e que fazem respirar MUITO mais forte que o normal

atividades fiacutesicas MODERADAS satildeo aquelas que precisam de algum esforccedilo fiacutesico e que fazem respirar UM POUCO mais forte que o normal

Para responder as perguntas pense somente nas atividades que vocecirc realiza por pelo menos 10

minutos contiacutenuos de cada vez

135

1a Em quantos dias da uacuteltima semana vocecirc caminhou por pelo menos 10 minutos contiacutenuos em casa

ou no trabalho como forma de transporte para ir de um lugar para outro por lazer por prazer ou

como forma de exerciacutecio dias _____ por SEMANA ( ) Nenhum

1b Nos dias em que vocecirc caminhou por pelo menos 10 minutos contiacutenuos quanto tempo no total

vocecirc gastou caminhando por dia horas ______ Minutos _____

2a Em quantos dias da uacuteltima semana vocecirc realizou atividades MODERADAS por pelo menos 10

minutos contiacutenuos como por exemplo pedalar leve na bicicleta nadar danccedilar fazer ginaacutestica

aeroacutebica leve jogar volei recreativo carregar pesos leves fazer serviccedilos domeacutesticos na casa no

quintal ou no jardim como varrer aspirar cuidar do jardim ou qualquer atividade que fez aumentar

moderadamente sua respiraccedilatildeo ou batimentos do coraccedilatildeo (POR FAVOR NAtildeO INCLUA CAMINHADA)

dias _____ por SEMANA ( ) Nenhum

2b Nos dias em que vocecirc fez essas atividades moderadas por pelo menos 10 minutos contiacutenuos

quanto tempo no total vocecirc gastou fazendo essas atividades por dia

horas ______ Minutos _____

3a Em quantos dias da uacuteltima semana vocecirc realizou atividades VIGOROSAS por pelo menos 10

minutos contiacutenuos como por exemplo correr fazer ginaacutestica aeroacutebica jogar futebol pedalar raacutepido

na bicicleta jogar basquete fazer serviccedilos domeacutesticos pesados em casa no quintal ou cavoucar no

jardim carregar pesos elevados ou qualquer atividade que fez aumentar MUITO sua respiraccedilatildeo ou

batimentos do coraccedilatildeo dias _____ por SEMANA ( ) Nenhum

3b Nos dias em que vocecirc fez essas atividades vigorosas por pelo menos 10 minutos contiacutenuos quanto

tempo no total vocecirc gastou fazendo essas atividades por dia


Seccedilatildeo 9 HAacuteBITOS ALIMENTARES

Vocecirc mudou seus haacutebitos alimentares recentemente ou estaacute fazendo dieta para emagrecer ou por qualquer

outro motivo

1 Natildeo 5 Sim para reduccedilatildeo de sal

2 Sim para perda de peso 6 Sim para reduccedilatildeo de colesterol

3 Sim por orientaccedilatildeo meacutedica

136

4 Sim para dieta vegetariana ou reduccedilatildeo do consumo de carne

Vocecirc estaacute tomando algo para suplementar sua dieta (vitaminas minerais e outros produtos)

1 Natildeo 2 Sim regularmente 3 Sim mas natildeo regularmente

Se a resposta da pergunta anterior for sim favor preencher o quadro abaixo

Suplemento

Nome comercial Dose

Frequencia

Nuacutemero de refeiccedilotildees que costuma fazer por dia

Costuma fazer desjejum diariamente 1 Sim 2 Natildeo

Costuma beliscar entre as refeiccedilotildees 1 Sim 2 Natildeo

Costuma ingerir liacutequidos durante as refeiccedilotildees 1 Sim 2 Natildeo

Quantas refeiccedilotildees costuma fazer fora de casa por semana

Em que local costuma fazer as refeiccedilotildees fora de casa

1 Restaurantes 5 Natildeo faz

2 Lanches raacutepidos 6 Outro

3 Marmita

4 No trabalho

137

As questotildees seguintes relacionam-se ao seu haacutebito alimentar usual no PERIacuteODO DE UM ANO Para cada quadro responda por favor a frequecircncia que melhor descreva QUANTAS VEZES vocecirc costuma comer cada item e a respectiva UNIDADE DE TEMPO (se por dia por semana por mecircs ou no ano) Depois responda qual a sua PORCcedilAtildeO INDIVIDUAL USUAL em relaccedilatildeo agrave porccedilatildeo meacutedia indicada ESCOLHA SOMENTE UM CIacuteRCULO PARA CADA COLUNA Muitos grupos de alimentos incluem exemplos Eles satildeo sugestotildees e vocecirc pode pode consumir todos os itens indicados Se vocecirc natildeo come ou raramente come um determinado iacutetem preeencha o ciacuterculo da primeira coluna (N=nunca come) NAtildeO DEIXE ITENS EM BRANCO

138

139

140

141

Por favor liste qualquer outro alimento ou preparaccedilatildeo importante que vocecirc costuma comer ou beber pelo menos UMA VEZ POR SEMANA que natildeo foram citados aqui (por exemplo leite-de-coco outros tipos de carnes receitas caseiras creme de leite leite condensado gelatina e outros doces etc )

Alimento Frequecircncia por semana Quantidade Consumida

Quando vocecirc come carne bovina ou suiacutena vocecirc costuma comer a gordura visiacutevel 1 nunca ou raramente 2 algumas vezes 3 sempre 4 natildeo sabe Quando vocecirc come frango ou peru vocecirc costuma comer a pele 1 nunca ou raramente 2 algumas vezes 3 sempre 4 natildeo sabe

142

Seccedilatildeo 10 DADOS ANTROPOMEacuteTRICOS

Peso

_____________Kg

_____________Kg

Estatura

_____________m

_____________m

IMC

__________Calcular IMC= peso em Kg altura em m2

Circunferecircncia Abdominal

_____________cm

_____________cm

Reactacircncia

Resistecircncia ___________MG

_____________MLG

Peso MG_________kg

Peso MGL_________kg

TMB __________

aacutegua de massa magra

143

APEcircNDICE C- TABELA 10

144

Tabela 10 Participaccedilatildeo dos alimentos nos grupos meacutedias de consumo por dia dos alimentos consumidos pela populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014

Grupo Alimentar

Alimentos Grupo Frequecircncia diaacuteria (dp)

Frequecircncia diaacuteria (amplitude)

Massas

Macarratildeo com molho sem carne

Caso

02 (05)

(0-25)

Controle

02 (02) (0-043)

Macarratildeo com molho com carne lasanha nhoque

Caso 01 (012) (0-043)

Controle

02 (02) (0-079)

Pizza panqueca

Caso 015 (022) (0-1)

Controle 02 (01) (003-043)

Preparaccedilatildeo

Sopas

Caso 015 (018) (0-043)

Controle 014 (02) (0-043)

Polenta cozida ou frita

Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0008 (003) (0-014)

Carne vermelha e

ovos

Carne bovina

Caso 06 (06) (008-25)

Controle 05 (018) (014-079)

Carne de porco Caso 008 (009) (0-043)

Controle 02 (05) (0-25)

Carne seca carne do sol bacon

Caso 006 (005) (0-014)

Controle 004 (006) (0-014)

Ovos Caso 02 (02) (0-1)

Controle 03 (05) (0-25)

Embutidos

Linguiccedila

Caso 011 (009) (0-043)

Controle 02 (05) (0-25)

Embutidos (presunto mortadela salsicha)

Caso 015 (023) (0-1)

Controle 02 (02) (0-043)

Carne branca

Frango Caso 06 (09) (003-3)

Controle 05 (05) (014-25)

Peixe e frutos do mar Caso 01 (01) (0-043)

Controle 01 (02) (0-043)

Leite e derivados

Leite integral Caso 07 (09) (0-3)

Controle 04 (06) (0-25)

Leite desnatado Caso 04 (09) (0-3)

Controle 002 (005) (0-014)

Leite semi-desnatado Caso 03 (08) (0-25)

Controle 0004 (002) (0-008)

Iogurte natural Caso 05 (09) (0-25)

Controle 03 (03) (0-079)

Iogurte com frutas Caso 03 (08) (0-25)

Controle 02 (02) (0-079)

145

Tabela 10 Participaccedilatildeo dos alimentos nos grupos meacutedias de consumo ao dia dos alimentos consumidos pela populaccedilatildeo estudada Satildeo Paulo SP 2013-2014


Grupo Alimentar


Frequecircncia diaacuteria

(amplitude)

Leite e derivados

Queijo mussarela prato parmesatildeo e provolone

Caso 05 (07) (0-25)

Controle 05 (06) (003-25)

Queijo minas e ricota Caso 04 (08) (0-25)

Controle 04 (06) (0-25)

Leguminosas

Feijatildeo Caso 12 (09) (014-25)

Controle 06 (05) (008-25)

Lentilha ervilha seca gratildeo de bico soja

Caso 005 (009) (0-043)

Controle 006 (01) (0-043)

Feijatildeo tropeiro e feijoada

Caso 003 (003) (0-014)

Controle 002 (004) (0-014)

Cereais raiacutezes e

tubeacuterculos

Arroz branco ou integral cozido com

oacuteleo e temperos

Caso 15 (09) (043-25)

Controle 14 (07) (043-25)

Batata frita ou mandioca frita

Caso 007 (01) (0-043)

Controle 02 (01) (003-043)

Batata mandioca inhame (cozida ou assada) purecirc

Caso 01 (012) (0-043)

Controle 02 (02) (0-043)

Farinha de mandioca farofa cuscuz aveia tapioca

Caso 02 (03) (0-1)

Controle 01 (02) (0-1)

Patildeo francecircs patildeo de forma integral patildeo doce torrada

Caso 07 (06) (014-3)

Controle 17 (08) (0-25)

Biscoito sem recheio (doce salgado) Caso 04 (06) (0-25)

Controle 05 (06) (0-25)

Biscoito recheado waffer amanteigado

Caso 01 (03) (0-1)

Controle 009 (02) (0-043)

Bolo (simples recheado) Caso 01 (013) (0-043)

Controle 01 (013) (0-043)

Hortaliccedilas

Alface

Caso 12 (09) (008-3)

Controle 08 (06) (014-25)

Tomate Caso 14 (107) (008-3)

Controle 08 (06) (003-25)

Cenoura Caso 06 (07) (008-25)

Controle 04 (02) (0-1)

Outros legumes (abobrinha berinjela chuchu pepino)

Caso 04 (03) (008-1)

Controle 05 (07) (0-25)

Outras verduras cruas (acelga ruacutecula agriatildeo)

Caso 04 (03) (008-1)

Controle 04 (02) (0-1)

146



Grupo Alimentar Alimentos Grupo Frequecircncia diaacuteria (dp)


(amplitude)

Hortaliccedilas

Outras verduras cozidas (acelga espinafre escarola couve)

Caso 03 (02) (0-1)

Controle 03 (02) (0-079)

Broacutecolis couve-flor repolho Caso 02 (015) (0-043)

Controle 03 (03) (0-1)

Frutas

Laranja mexerica abacaxi Caso 08 (09) (0-3)

Controle 04 (05) (003-25)

Banana Caso 08 (09) (0-3)

Controle 04 (02) (008-1)

Maccedilatilde pecircra Caso 05 (07) (0-3)

Controle 03 (03) (0-1)

Melatildeo melancia Caso 03 (07) (0-1)

Controle 01 (01) (0-043)

Mamatildeo Caso 03 (03) (0-1)

Controle 008 (006) (0-014)

Goiaba Caso 01 (02) (0-1)

Controle 0008 (002) (0-008)

Abacate Caso 08 (02) (0-1)

Controle 007 (001) (0-003)

Suco natural Caso 07 (09) (0-3)

Controle 03 (02) (0-1)

Industrializados

Maionese molho para salada patecirc chantily

Caso 01 (016) (0-043)

Controle 01 (02) (0-1)

Condimentos

Caso 04 (06) (0-25)

Controle 02 (03) (0-079)

Hamburguer nuggets almocircndega Caso 006 (009) (0-043)

Controle 005 (009) (0-043)

Suco industrializado Caso 08 (105) (0-3)

Controle 05 (03) (0-1)

Refrigerante comum Caso 02 (02) (0-079)

Controle 02 (02) (0-043)

Refrigerante light diet Caso 0 0

Controle 007 (02) (0-043)

147





(amplitude)

Infusatildeo

Chaacute e cafeacute sem accediluacutecar Caso 09 (1) (0-25)

Controle 06 (07) (0-25)

Chaacute e cafeacute com accediluacutecar Caso 08 (08) (0-25)

Controle 07 (08) (0-3)

Bebida alcooacutelica

Cerveja

Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0074 (01) (0-043)

Oacuteleos e gorduras

Oacuteleo azeite ou vinagre para tempero de salada

Caso 1 (09) (0-25)

Controle 03 (03) (0-1)

Manteiga ou margarina comum Caso 09 (09) (0-25)

Controle 07 (07) (0-25)

Manteiga ou margarina light Caso 02 (06) (0-25)

Controle 007 (003) (0-014)

Lanches

Salgado frito Caso 02 (03) (0-1)

Controle 01 (01) (0-043)

Salgado assado Caso 014 (02) (0-1)

Controle 02 (02) (0-043)

Sanduiche Caso 006 (009) (0-043)

Controle 005 (004) (0-014)

Accediluacutecar e doces

Chocolate bombom brigadeiro Caso 04 (04) (0-1)

Controle 06 (04) (003-2)

Achocolatado em poacute (adicionado ao leite)

Caso 013 (03) (0-1)

Controle 02 (03) (0-1)

Sobremesas doces tortas e pudins

Caso 02 (03) (0-1)

Controle 03 (03) (003-1)

Accediluacutecar mel e geleacuteia Caso 05 (07) (0-3)

Controle 08 (1) (0-3)





Graduaccedilatildeo em Microbiologia do Instituto de Ciecircncias

Biomeacutedicas da Universidade de Satildeo Paulo para

obtenccedilatildeo do Tiacutetulo de Mestre em Ciecircncias

Aacuterea de concentraccedilatildeo Microbiologia

Orientador Prof Dr Jorge Timenetsky

Versatildeo original

Satildeo Paulo 2015











Nome



Nome



Nome




Chico Buarque







AGRADECIMENTOS




























propoacutesito



no trabalho




coleta



alimentar










e carinho








obrigada








Jorge Amado

18

RESUMO





































ABSTRACT





A ndash Adenina












atm ndash Atmosfera


C ndash Citosina




CH4ndash Metano






detectado)


















g ndash Gramas

G ndash Guanina























kgndash Quilogramas








mg ndash Miligramas

min ndash Minuto

mL ndash Mililitro


mM ndash Milimolar








nucleotiacutedeos




OR ndash Odds Ratio





coactivator 1 alpha



pmol ndash Picomol










r2 ndash R da curva








s ndash Segundo





T ndash Timina












U ndash Unidade





X ndash Vezes


α ndash Alfa

β ndash Beta


ndash Por cento







vida 37


imunoloacutegico 42


intestinal46






201484




SP 2013-201485








2013-2014 87








Paulo SP 2013-201490





2013-201493








para Mollicutes 66


























2013-201479


Paulo SP 2013-2014 81





Paulo SP 2013-2014 91



2013-201491





201495



SUMAacuteRIO



21 Obesidade 29









2235 Dieta 36













23 MOLLICUTES 52



3 OBJETIVOS 58














Mollicutes 65










5 RESULTADOS 71







Mollicutes 90




6 DISCUSSAtildeO 97


REFEREcircNCIAS 108




26


























SICHIERI 2006)






27


































28


















YOGEV NAOT 1998)

29


21 Obesidade






























30














(BAHIA et al 2012)




















31
































32














(NICHOLSON 2006)



















33
































34






2231 Fases da vida










SMITH et al 2013)

2232 Tipo de parto















35
































36












2007 YANG et al 2009)

2235 Dieta




















37







da vida


38

































39




et al 2009)




























40




SEKIROV et al 2010)










2013)



















41












VLIET et al 2010)

42


imunoloacutegico




43











al 2008)





















44








2004)

























45













46




47

































48















2009)










2009)









49
































50






























2010)

51








(HOTAMISLIGIL 2010)












2008 LAM et al 2012)










52

23 MOLLICUTES







1992)

















1998)








53


































54


























RAZIN 2004)








55



















56


































57













58

3 OBJETIVOS

31 Objetivo geral










eutroacuteficas






59















42 Casuiacutestica








FMUSP)








60




















B)









61



















1 vezdia 11= 1



1vezsemana 17= 014



NuncaQuase nunca 0

COELHO et al 2011

62

































63



para frente




























64


















65






























66




























67






























68









Vallee Franccedila)











69





























70






























71

5 RESULTADOS
































72







Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Raccedilacor


14 (70) 6 (30)

9 (45) 11 (55)

Escolaridade


1 (5) 19(95)

0 (0) 20 (100)



11 (55) 9 (45)

10 (50) 10 (50)

Renda familiar


9 (45) 11 (55)

5 (25) 15 (75 )

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



17 (85) 3 (15)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

8 (40) 12 (60)



13 (65) 7(35)

7 (35) 13 (65)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



10 (50) 10 (50)

10 (50) 10 (50)

73



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

2 (10) 18 (90)



6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI refluxoa


7 (35) 13 (65)

1 (5) 19 (95)

TGI aziaa


6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI uacutelceraa


1 (5) 19 (95)

0 00) 20 (100)


2 (10)

18 (90)

3 (15)

17 (85) 023-107 0633


3 (15)

17(85)

1 (5)

19 (95) 002-314 0292


1 (5)

19 (95)

0 (0)

20 (100) 095-116 0311


0 (0)

20(100)

0 (0)

20 (100)


6 (30)

14 (70)

0 (0)

20 (100) 107-190 0008


0 (0)

20 (100)

0 (0)

20 (100)


5 (25)

15 (75)

1 (5)

19 (95) 001-150 0077


2 (10)

18 (90)

0 (0)

20 (100) 096-128 0147


7 (35)

13 (65)

1 (5)

19 (95) 001-089 0018


11 (55)

9 (45)

0 (0)

20 (100) 136-360 0000


3 (15)

17 (85)

0 (0)

20 (100) 097-141 0072

74



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo controle n ()

IC 95 P



5 (25) 15(75)

10 (50) 10 (50)



15 (75) 5 (25)

10 (50) 10 (50)

Foi amamentadaa


18 (90) 2 (30)

17 (85) 3 (15)



14 (70) 6 (30)

2 (10) 18 (90)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 096-128 0147

75






Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Menopausa


9 (45) 11(55)

3 (15) 17 (85)



16 (80) 4 (20)

16 (80) 14 (20)



13 (65) 7 (35)

15 (75) 5 (25)



3 (15) 17(85)

1 (5) 19 (95)



10 (50) 10 (50)

6 (30) 14 (70)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 063-853 0197

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



4 (20) 16 (80)

1 (5) 19 (95)



5 (25) 15 (75)

5 (25) 15 (75)

76





Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



8 (40) 12 (60)

11 (55) 9 (45)

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

IC 95 P



12 (60) 8 (40)

9 (45) 11 (55)

77




Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

13(65) 7(35)

14(70) 6(30)

033-473 0736


Sim Natildeo

7(35)

13(65) 7(35)

13(65) 027-366 1000



13 (35) 7(65)

16 (80) 4 (20)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



16 (80) 4 (20)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

19 (95) 1 (5)

78




























79


Grupo Alimentar


Massas





Controle 45



Controle 813


Controle 65


Controle 95

Leite e derivados




Controle 486

Leguminosas


Controle 65


Caso

813







Controle

887

Hortaliccedilas


Controle 926



Industrializados

Caso

79



Controle 65


Controle 45




Controle 833


80























81



Desvio Padratildeo

IC 95 P

Energiadia (kcal)

Caso 18571 93622 (137401 ndash 205869) 093

Controle 1692 98334 (120438 ndash 217822)

Carboidratodia (g)

Caso 24345 16826 (16706 ndash 25787)

090 Controle 20785

10997 (15402 ndash 26294)


Caso

658

276

(5205 ndash 7926) 086

Controle

627

4714 (3998 ndash 8673)


(g)

Caso 795 416 (617 ndash 937) 048



(g)

Caso 206 925 (1640 ndash 2553)

059 Controle 182 1598

(1077 ndash 2651)


Caso 2185 1149 (1670 ndash 2808)

075 Controle 204 1698 (1239 ndash 2924)


091 Controle 7285 4985 (4914 ndash 9849)


027 Controle 1265 765 (944 ndash1699)


029 Controle 285 23 (215 ndash 437)


Caso 56 391 (404 ndash 703) 025



077 Controle 26105 26790 (12780 ndash 39313)


055 Controle 872 47033 (64231 ndash 110801)


011 Controle 12035 8752 (7936 ndash 16565)

Vitamina B1dia (mg)

Caso 13 117 (131 ndash 204) 072


Vitamina B2dia (mg)

Caso 08 083 (107 ndash 174) 079


82





IC 95 P

Vitamina B6dia (ug)

Caso 110 102 (121 ndash 197)

085 Controle 105 088 (110 ndash 197)


Caso 38 253 (309 ndash 562) 096


Vitamina Ddia (mg)

Caso 915 1620 (211 ndash 1803) 012

Controle 23 3357 (733 ndash 4061)

Niacinadia (mg)

Caso 19 1005 (1402 ndash 2191)

059 Controle 193

1303 (1339 ndash 2641)

Folatodia (mg)

Caso

24010

11621

(17758 ndash 28351) 054

Controle 20495 12117 (14708 ndash 26684)


(mg)

Caso 35 216 (292 ndash 443) 074


VitaminaEdia (mg)

Caso 1155 651 (894 ndash 1309) 079



049 Controle 4515 3674 (2814 ndash 6439)


099 Controle 201715 148254 (127647 ndash 274446)


068 Controle 62645 33992 (46373 ndash 79973)


Caso 2325 10339 (17818 ndash 25995) 044

Controle 1947 9452 (14888 ndash 24255)


086 Controle 78 476 (603 ndash 1068)


Caso 6 85 (206 ndash 1045) 064

Controle 1095 2019 (148 ndash 1446)


Caso 271955 117073 (208408 ndash 3131423) 029

Controle 220685 115874 (164415 ndash 279085)


Caso 9754 44188 (73698 ndash 1151535) 086

Controle 9085 56939 (63379 ndash 119689)

83





IC 95 P


(996 ndash 1538)

069

Controle 1145 616 (885 ndash 1492)


090 Controle 085 109 (094 ndash 167)


068 Controle 400 5844 (11179 ndash 69057)




Grupo controle


1692

Kcalkgdia 199

279


20785


4913


7285


078

12


1722


627


3335

84

















85
















86







87








88


































89






Desvio Padratildeo


Peso (kg) Caso 9329 105 7574 1075

Controle 6054 787 4575 7422

Estatura (m2) Caso 160 007 149 172

Controle 164 007 151 18

IMC (Kgm2) Caso 3645 452 306 449

Controle 2241 204 188 249


Caso 099 007 088 119

Controle 083 005 077 096


()

Caso

4535

519

354

531

Controle

30035

671

113 404

90













91






em 1times TE




CV ()

10 3537 plusmn 015 045 3494 plusmn 045 129

102 3425 plusmn 017 050 3379plusmn 029 087

103 3099 plusmn 021 070 3074 plusmn 039 128

104 2739 plusmn 023 084 2739 plusmn 038 142

105 2356 plusmn 012 054 2291plusmn 025 110

106 1874 plusmn 066 352 1915 plusmn 077 403








Amostra


n () n ()


Positivaa


12 (60) 3 (15) 17 (85)


92
























93












94






(Tabela 17)











Caso 869x1018

584x103

424

Controle 504x1014

16

25x10-4

95















fezes


fezes


Caso 731x 1024

869x1018

442x105

879x108

718x10-2

584x103

28x 10-2

Controle 619x 1021

504x1014

171x105

146x109

624x102 16

22x10-11





Caso 869x1018 879x108

134x1013

Controle 504x1014

146x109

45x 105

96






(p=02235) (Figura 13)



97

6 DISCUSSAtildeO


























SILVA 2005)






98














de peso




















99














2013)


















em fibra

100


































101


































102


































103


































104


































105


























hipoacuteteses








106







107

7 CONCLUSOtildeES




ambos os grupos
















108


REFEREcircNCIAS











109


















110












111













112















113














114

















115


















116
















117

















118

















119


















120












121















122

















123

















124














125















126















127


128











_______________________________________________________________________________________________________________







mim apresentadas

Estou ciente que









129







mencionados


desta pesquisa
















referido Termo


Esclarecido


Testemunha 1 _______________________________________________

Nome RG Telefone

130

Testemunha 2 ___________________________________________________

Nome RG Telefone



131


132





Nome Idade ID

Telefone Data

Profissatildeo















133
























134





____cigarros

____cachimbos

____charutos
















135

























outro motivo




136





Suplemento

Nome comercial Dose

Frequencia









3 Marmita

4 No trabalho

137


138

139

140

141




142


Peso

_____________Kg

_____________Kg

Estatura

_____________m

_____________m

IMC



_____________cm

_____________cm

Reactacircncia


_____________MLG

Peso MG_________kg

Peso MGL_________kg

TMB __________


143


144


Grupo Alimentar



Massas


Caso

02 (05)

(0-25)

Controle

02 (02) (0-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle

02 (02) (0-079)

Pizza panqueca

Caso 015 (022) (0-1)

Controle 02 (01) (003-043)


Sopas

Caso 015 (018) (0-043)

Controle 014 (02) (0-043)


Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0008 (003) (0-014)

Carne vermelha e

ovos

Carne bovina

Caso 06 (06) (008-25)

Controle 05 (018) (014-079)


Controle 02 (05) (0-25)


Caso 006 (005) (0-014)

Controle 004 (006) (0-014)

Ovos Caso 02 (02) (0-1)

Controle 03 (05) (0-25)

Embutidos

Linguiccedila

Caso 011 (009) (0-043)

Controle 02 (05) (0-25)


Caso 015 (023) (0-1)

Controle 02 (02) (0-043)

Carne branca

Frango Caso 06 (09) (003-3)

Controle 05 (05) (014-25)


Controle 01 (02) (0-043)

Leite e derivados


Controle 04 (06) (0-25)


Controle 002 (005) (0-014)


Controle 0004 (002) (0-008)


Controle 03 (03) (0-079)


Controle 02 (02) (0-079)

145



Grupo Alimentar



(amplitude)

Leite e derivados


Caso 05 (07) (0-25)

Controle 05 (06) (003-25)


Controle 04 (06) (0-25)

Leguminosas


Controle 06 (05) (008-25)


Caso 005 (009) (0-043)

Controle 006 (01) (0-043)


Caso 003 (003) (0-014)

Controle 002 (004) (0-014)


tubeacuterculos



Caso 15 (09) (043-25)

Controle 14 (07) (043-25)


Caso 007 (01) (0-043)

Controle 02 (01) (003-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle 02 (02) (0-043)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 01 (02) (0-1)


Caso 07 (06) (014-3)

Controle 17 (08) (0-25)


Controle 05 (06) (0-25)


Caso 01 (03) (0-1)

Controle 009 (02) (0-043)


Controle 01 (013) (0-043)

Hortaliccedilas

Alface

Caso 12 (09) (008-3)

Controle 08 (06) (014-25)

Tomate Caso 14 (107) (008-3)

Controle 08 (06) (003-25)

Cenoura Caso 06 (07) (008-25)

Controle 04 (02) (0-1)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 05 (07) (0-25)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 04 (02) (0-1)

146





(amplitude)

Hortaliccedilas


Caso 03 (02) (0-1)

Controle 03 (02) (0-079)


Controle 03 (03) (0-1)

Frutas


Controle 04 (05) (003-25)


Controle 04 (02) (008-1)


Controle 03 (03) (0-1)


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 008 (006) (0-014)


Controle 0008 (002) (0-008)


Controle 007 (001) (0-003)


Controle 03 (02) (0-1)

Industrializados


Caso 01 (016) (0-043)

Controle 01 (02) (0-1)

Condimentos

Caso 04 (06) (0-25)

Controle 02 (03) (0-079)


Controle 005 (009) (0-043)


Controle 05 (03) (0-1)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 007 (02) (0-043)

147





(amplitude)

Infusatildeo


Controle 06 (07) (0-25)


Controle 07 (08) (0-3)


Cerveja

Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0074 (01) (0-043)



Caso 1 (09) (0-25)

Controle 03 (03) (0-1)


Controle 07 (07) (0-25)


Controle 007 (003) (0-014)

Lanches


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 005 (004) (0-014)



Controle 06 (04) (003-2)


Caso 013 (03) (0-1)

Controle 02 (03) (0-1)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 03 (03) (003-1)


Controle 08 (1) (0-3)











Nome



Nome



Nome




Chico Buarque







AGRADECIMENTOS




























propoacutesito



no trabalho




coleta



alimentar










e carinho








obrigada








Jorge Amado

18

RESUMO





































ABSTRACT





A ndash Adenina












atm ndash Atmosfera


C ndash Citosina




CH4ndash Metano






detectado)


















g ndash Gramas

G ndash Guanina























kgndash Quilogramas








mg ndash Miligramas

min ndash Minuto

mL ndash Mililitro


mM ndash Milimolar








nucleotiacutedeos




OR ndash Odds Ratio





coactivator 1 alpha



pmol ndash Picomol










r2 ndash R da curva








s ndash Segundo





T ndash Timina












U ndash Unidade





X ndash Vezes


α ndash Alfa

β ndash Beta


ndash Por cento







vida 37


imunoloacutegico 42


intestinal46






201484




SP 2013-201485








2013-2014 87








Paulo SP 2013-201490





2013-201493








para Mollicutes 66


























2013-201479


Paulo SP 2013-2014 81





Paulo SP 2013-2014 91



2013-201491





201495



SUMAacuteRIO



21 Obesidade 29









2235 Dieta 36













23 MOLLICUTES 52



3 OBJETIVOS 58














Mollicutes 65










5 RESULTADOS 71







Mollicutes 90




6 DISCUSSAtildeO 97


REFEREcircNCIAS 108




26


























SICHIERI 2006)






27


































28


















YOGEV NAOT 1998)

29


21 Obesidade






























30














(BAHIA et al 2012)




















31
































32














(NICHOLSON 2006)



















33
































34






2231 Fases da vida










SMITH et al 2013)

2232 Tipo de parto















35
































36












2007 YANG et al 2009)

2235 Dieta




















37







da vida


38

































39




et al 2009)




























40




SEKIROV et al 2010)










2013)



















41












VLIET et al 2010)

42


imunoloacutegico




43











al 2008)





















44








2004)

























45













46




47

































48















2009)










2009)









49
































50






























2010)

51








(HOTAMISLIGIL 2010)












2008 LAM et al 2012)










52

23 MOLLICUTES







1992)

















1998)








53


































54


























RAZIN 2004)








55



















56


































57













58

3 OBJETIVOS

31 Objetivo geral










eutroacuteficas






59















42 Casuiacutestica








FMUSP)








60




















B)









61



















1 vezdia 11= 1



1vezsemana 17= 014



NuncaQuase nunca 0

COELHO et al 2011

62

































63



para frente




























64


















65






























66




























67






























68









Vallee Franccedila)











69





























70






























71

5 RESULTADOS
































72







Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Raccedilacor


14 (70) 6 (30)

9 (45) 11 (55)

Escolaridade


1 (5) 19(95)

0 (0) 20 (100)



11 (55) 9 (45)

10 (50) 10 (50)

Renda familiar


9 (45) 11 (55)

5 (25) 15 (75 )

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



17 (85) 3 (15)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

8 (40) 12 (60)



13 (65) 7(35)

7 (35) 13 (65)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



10 (50) 10 (50)

10 (50) 10 (50)

73



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

2 (10) 18 (90)



6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI refluxoa


7 (35) 13 (65)

1 (5) 19 (95)

TGI aziaa


6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI uacutelceraa


1 (5) 19 (95)

0 00) 20 (100)


2 (10)

18 (90)

3 (15)

17 (85) 023-107 0633


3 (15)

17(85)

1 (5)

19 (95) 002-314 0292


1 (5)

19 (95)

0 (0)

20 (100) 095-116 0311


0 (0)

20(100)

0 (0)

20 (100)


6 (30)

14 (70)

0 (0)

20 (100) 107-190 0008


0 (0)

20 (100)

0 (0)

20 (100)


5 (25)

15 (75)

1 (5)

19 (95) 001-150 0077


2 (10)

18 (90)

0 (0)

20 (100) 096-128 0147


7 (35)

13 (65)

1 (5)

19 (95) 001-089 0018


11 (55)

9 (45)

0 (0)

20 (100) 136-360 0000


3 (15)

17 (85)

0 (0)

20 (100) 097-141 0072

74



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo controle n ()

IC 95 P



5 (25) 15(75)

10 (50) 10 (50)



15 (75) 5 (25)

10 (50) 10 (50)

Foi amamentadaa


18 (90) 2 (30)

17 (85) 3 (15)



14 (70) 6 (30)

2 (10) 18 (90)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 096-128 0147

75






Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Menopausa


9 (45) 11(55)

3 (15) 17 (85)



16 (80) 4 (20)

16 (80) 14 (20)



13 (65) 7 (35)

15 (75) 5 (25)



3 (15) 17(85)

1 (5) 19 (95)



10 (50) 10 (50)

6 (30) 14 (70)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 063-853 0197

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



4 (20) 16 (80)

1 (5) 19 (95)



5 (25) 15 (75)

5 (25) 15 (75)

76





Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



8 (40) 12 (60)

11 (55) 9 (45)

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

IC 95 P



12 (60) 8 (40)

9 (45) 11 (55)

77




Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

13(65) 7(35)

14(70) 6(30)

033-473 0736


Sim Natildeo

7(35)

13(65) 7(35)

13(65) 027-366 1000



13 (35) 7(65)

16 (80) 4 (20)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



16 (80) 4 (20)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

19 (95) 1 (5)

78




























79


Grupo Alimentar


Massas





Controle 45



Controle 813


Controle 65


Controle 95

Leite e derivados




Controle 486

Leguminosas


Controle 65


Caso

813







Controle

887

Hortaliccedilas


Controle 926



Industrializados

Caso

79



Controle 65


Controle 45




Controle 833


80























81



Desvio Padratildeo

IC 95 P

Energiadia (kcal)

Caso 18571 93622 (137401 ndash 205869) 093

Controle 1692 98334 (120438 ndash 217822)

Carboidratodia (g)

Caso 24345 16826 (16706 ndash 25787)

090 Controle 20785

10997 (15402 ndash 26294)


Caso

658

276

(5205 ndash 7926) 086

Controle

627

4714 (3998 ndash 8673)


(g)

Caso 795 416 (617 ndash 937) 048



(g)

Caso 206 925 (1640 ndash 2553)

059 Controle 182 1598

(1077 ndash 2651)


Caso 2185 1149 (1670 ndash 2808)

075 Controle 204 1698 (1239 ndash 2924)


091 Controle 7285 4985 (4914 ndash 9849)


027 Controle 1265 765 (944 ndash1699)


029 Controle 285 23 (215 ndash 437)


Caso 56 391 (404 ndash 703) 025



077 Controle 26105 26790 (12780 ndash 39313)


055 Controle 872 47033 (64231 ndash 110801)


011 Controle 12035 8752 (7936 ndash 16565)

Vitamina B1dia (mg)

Caso 13 117 (131 ndash 204) 072


Vitamina B2dia (mg)

Caso 08 083 (107 ndash 174) 079


82





IC 95 P

Vitamina B6dia (ug)

Caso 110 102 (121 ndash 197)

085 Controle 105 088 (110 ndash 197)


Caso 38 253 (309 ndash 562) 096


Vitamina Ddia (mg)

Caso 915 1620 (211 ndash 1803) 012

Controle 23 3357 (733 ndash 4061)

Niacinadia (mg)

Caso 19 1005 (1402 ndash 2191)

059 Controle 193

1303 (1339 ndash 2641)

Folatodia (mg)

Caso

24010

11621

(17758 ndash 28351) 054

Controle 20495 12117 (14708 ndash 26684)


(mg)

Caso 35 216 (292 ndash 443) 074


VitaminaEdia (mg)

Caso 1155 651 (894 ndash 1309) 079



049 Controle 4515 3674 (2814 ndash 6439)


099 Controle 201715 148254 (127647 ndash 274446)


068 Controle 62645 33992 (46373 ndash 79973)


Caso 2325 10339 (17818 ndash 25995) 044

Controle 1947 9452 (14888 ndash 24255)


086 Controle 78 476 (603 ndash 1068)


Caso 6 85 (206 ndash 1045) 064

Controle 1095 2019 (148 ndash 1446)


Caso 271955 117073 (208408 ndash 3131423) 029

Controle 220685 115874 (164415 ndash 279085)


Caso 9754 44188 (73698 ndash 1151535) 086

Controle 9085 56939 (63379 ndash 119689)

83





IC 95 P


(996 ndash 1538)

069

Controle 1145 616 (885 ndash 1492)


090 Controle 085 109 (094 ndash 167)


068 Controle 400 5844 (11179 ndash 69057)




Grupo controle


1692

Kcalkgdia 199

279


20785


4913


7285


078

12


1722


627


3335

84

















85
















86







87








88


































89






Desvio Padratildeo


Peso (kg) Caso 9329 105 7574 1075

Controle 6054 787 4575 7422

Estatura (m2) Caso 160 007 149 172

Controle 164 007 151 18

IMC (Kgm2) Caso 3645 452 306 449

Controle 2241 204 188 249


Caso 099 007 088 119

Controle 083 005 077 096


()

Caso

4535

519

354

531

Controle

30035

671

113 404

90













91






em 1times TE




CV ()

10 3537 plusmn 015 045 3494 plusmn 045 129

102 3425 plusmn 017 050 3379plusmn 029 087

103 3099 plusmn 021 070 3074 plusmn 039 128

104 2739 plusmn 023 084 2739 plusmn 038 142

105 2356 plusmn 012 054 2291plusmn 025 110

106 1874 plusmn 066 352 1915 plusmn 077 403








Amostra


n () n ()


Positivaa


12 (60) 3 (15) 17 (85)


92
























93












94






(Tabela 17)











Caso 869x1018

584x103

424

Controle 504x1014

16

25x10-4

95















fezes


fezes


Caso 731x 1024

869x1018

442x105

879x108

718x10-2

584x103

28x 10-2

Controle 619x 1021

504x1014

171x105

146x109

624x102 16

22x10-11





Caso 869x1018 879x108

134x1013

Controle 504x1014

146x109

45x 105

96






(p=02235) (Figura 13)



97

6 DISCUSSAtildeO


























SILVA 2005)






98














de peso




















99














2013)


















em fibra

100


































101


































102


































103


































104


































105


























hipoacuteteses








106







107

7 CONCLUSOtildeES




ambos os grupos
















108


REFEREcircNCIAS











109


















110












111













112















113














114

















115


















116
















117

















118

















119


















120












121















122

















123

















124














125















126















127


128











_______________________________________________________________________________________________________________







mim apresentadas

Estou ciente que









129







mencionados


desta pesquisa
















referido Termo


Esclarecido


Testemunha 1 _______________________________________________

Nome RG Telefone

130

Testemunha 2 ___________________________________________________

Nome RG Telefone



131


132





Nome Idade ID

Telefone Data

Profissatildeo















133
























134





____cigarros

____cachimbos

____charutos
















135

























outro motivo




136





Suplemento

Nome comercial Dose

Frequencia









3 Marmita

4 No trabalho

137


138

139

140

141




142


Peso

_____________Kg

_____________Kg

Estatura

_____________m

_____________m

IMC



_____________cm

_____________cm

Reactacircncia


_____________MLG

Peso MG_________kg

Peso MGL_________kg

TMB __________


143


144


Grupo Alimentar



Massas


Caso

02 (05)

(0-25)

Controle

02 (02) (0-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle

02 (02) (0-079)

Pizza panqueca

Caso 015 (022) (0-1)

Controle 02 (01) (003-043)


Sopas

Caso 015 (018) (0-043)

Controle 014 (02) (0-043)


Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0008 (003) (0-014)

Carne vermelha e

ovos

Carne bovina

Caso 06 (06) (008-25)

Controle 05 (018) (014-079)


Controle 02 (05) (0-25)


Caso 006 (005) (0-014)

Controle 004 (006) (0-014)

Ovos Caso 02 (02) (0-1)

Controle 03 (05) (0-25)

Embutidos

Linguiccedila

Caso 011 (009) (0-043)

Controle 02 (05) (0-25)


Caso 015 (023) (0-1)

Controle 02 (02) (0-043)

Carne branca

Frango Caso 06 (09) (003-3)

Controle 05 (05) (014-25)


Controle 01 (02) (0-043)

Leite e derivados


Controle 04 (06) (0-25)


Controle 002 (005) (0-014)


Controle 0004 (002) (0-008)


Controle 03 (03) (0-079)


Controle 02 (02) (0-079)

145



Grupo Alimentar



(amplitude)

Leite e derivados


Caso 05 (07) (0-25)

Controle 05 (06) (003-25)


Controle 04 (06) (0-25)

Leguminosas


Controle 06 (05) (008-25)


Caso 005 (009) (0-043)

Controle 006 (01) (0-043)


Caso 003 (003) (0-014)

Controle 002 (004) (0-014)


tubeacuterculos



Caso 15 (09) (043-25)

Controle 14 (07) (043-25)


Caso 007 (01) (0-043)

Controle 02 (01) (003-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle 02 (02) (0-043)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 01 (02) (0-1)


Caso 07 (06) (014-3)

Controle 17 (08) (0-25)


Controle 05 (06) (0-25)


Caso 01 (03) (0-1)

Controle 009 (02) (0-043)


Controle 01 (013) (0-043)

Hortaliccedilas

Alface

Caso 12 (09) (008-3)

Controle 08 (06) (014-25)

Tomate Caso 14 (107) (008-3)

Controle 08 (06) (003-25)

Cenoura Caso 06 (07) (008-25)

Controle 04 (02) (0-1)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 05 (07) (0-25)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 04 (02) (0-1)

146





(amplitude)

Hortaliccedilas


Caso 03 (02) (0-1)

Controle 03 (02) (0-079)


Controle 03 (03) (0-1)

Frutas


Controle 04 (05) (003-25)


Controle 04 (02) (008-1)


Controle 03 (03) (0-1)


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 008 (006) (0-014)


Controle 0008 (002) (0-008)


Controle 007 (001) (0-003)


Controle 03 (02) (0-1)

Industrializados


Caso 01 (016) (0-043)

Controle 01 (02) (0-1)

Condimentos

Caso 04 (06) (0-25)

Controle 02 (03) (0-079)


Controle 005 (009) (0-043)


Controle 05 (03) (0-1)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 007 (02) (0-043)

147





(amplitude)

Infusatildeo


Controle 06 (07) (0-25)


Controle 07 (08) (0-3)


Cerveja

Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0074 (01) (0-043)



Caso 1 (09) (0-25)

Controle 03 (03) (0-1)


Controle 07 (07) (0-25)


Controle 007 (003) (0-014)

Lanches


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 005 (004) (0-014)



Controle 06 (04) (003-2)


Caso 013 (03) (0-1)

Controle 02 (03) (0-1)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 03 (03) (003-1)


Controle 08 (1) (0-3)



Chico Buarque







AGRADECIMENTOS




























propoacutesito



no trabalho




coleta



alimentar










e carinho








obrigada








Jorge Amado

18

RESUMO





































ABSTRACT





A ndash Adenina












atm ndash Atmosfera


C ndash Citosina




CH4ndash Metano






detectado)


















g ndash Gramas

G ndash Guanina























kgndash Quilogramas








mg ndash Miligramas

min ndash Minuto

mL ndash Mililitro


mM ndash Milimolar








nucleotiacutedeos




OR ndash Odds Ratio





coactivator 1 alpha



pmol ndash Picomol










r2 ndash R da curva








s ndash Segundo





T ndash Timina












U ndash Unidade





X ndash Vezes


α ndash Alfa

β ndash Beta


ndash Por cento







vida 37


imunoloacutegico 42


intestinal46






201484




SP 2013-201485








2013-2014 87








Paulo SP 2013-201490





2013-201493








para Mollicutes 66


























2013-201479


Paulo SP 2013-2014 81





Paulo SP 2013-2014 91



2013-201491





201495



SUMAacuteRIO



21 Obesidade 29









2235 Dieta 36













23 MOLLICUTES 52



3 OBJETIVOS 58














Mollicutes 65










5 RESULTADOS 71







Mollicutes 90




6 DISCUSSAtildeO 97


REFEREcircNCIAS 108




26


























SICHIERI 2006)






27


































28


















YOGEV NAOT 1998)

29


21 Obesidade






























30














(BAHIA et al 2012)




















31
































32














(NICHOLSON 2006)



















33
































34






2231 Fases da vida










SMITH et al 2013)

2232 Tipo de parto















35
































36












2007 YANG et al 2009)

2235 Dieta




















37







da vida


38

































39




et al 2009)




























40




SEKIROV et al 2010)










2013)



















41












VLIET et al 2010)

42


imunoloacutegico




43











al 2008)





















44








2004)

























45













46




47

































48















2009)










2009)









49
































50






























2010)

51








(HOTAMISLIGIL 2010)












2008 LAM et al 2012)










52

23 MOLLICUTES







1992)

















1998)








53


































54


























RAZIN 2004)








55



















56


































57













58

3 OBJETIVOS

31 Objetivo geral










eutroacuteficas






59















42 Casuiacutestica








FMUSP)








60




















B)









61



















1 vezdia 11= 1



1vezsemana 17= 014



NuncaQuase nunca 0

COELHO et al 2011

62

































63



para frente




























64


















65






























66




























67






























68









Vallee Franccedila)











69





























70






























71

5 RESULTADOS
































72







Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Raccedilacor


14 (70) 6 (30)

9 (45) 11 (55)

Escolaridade


1 (5) 19(95)

0 (0) 20 (100)



11 (55) 9 (45)

10 (50) 10 (50)

Renda familiar


9 (45) 11 (55)

5 (25) 15 (75 )

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



17 (85) 3 (15)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

8 (40) 12 (60)



13 (65) 7(35)

7 (35) 13 (65)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



10 (50) 10 (50)

10 (50) 10 (50)

73



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

2 (10) 18 (90)



6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI refluxoa


7 (35) 13 (65)

1 (5) 19 (95)

TGI aziaa


6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI uacutelceraa


1 (5) 19 (95)

0 00) 20 (100)


2 (10)

18 (90)

3 (15)

17 (85) 023-107 0633


3 (15)

17(85)

1 (5)

19 (95) 002-314 0292


1 (5)

19 (95)

0 (0)

20 (100) 095-116 0311


0 (0)

20(100)

0 (0)

20 (100)


6 (30)

14 (70)

0 (0)

20 (100) 107-190 0008


0 (0)

20 (100)

0 (0)

20 (100)


5 (25)

15 (75)

1 (5)

19 (95) 001-150 0077


2 (10)

18 (90)

0 (0)

20 (100) 096-128 0147


7 (35)

13 (65)

1 (5)

19 (95) 001-089 0018


11 (55)

9 (45)

0 (0)

20 (100) 136-360 0000


3 (15)

17 (85)

0 (0)

20 (100) 097-141 0072

74



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo controle n ()

IC 95 P



5 (25) 15(75)

10 (50) 10 (50)



15 (75) 5 (25)

10 (50) 10 (50)

Foi amamentadaa


18 (90) 2 (30)

17 (85) 3 (15)



14 (70) 6 (30)

2 (10) 18 (90)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 096-128 0147

75






Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Menopausa


9 (45) 11(55)

3 (15) 17 (85)



16 (80) 4 (20)

16 (80) 14 (20)



13 (65) 7 (35)

15 (75) 5 (25)



3 (15) 17(85)

1 (5) 19 (95)



10 (50) 10 (50)

6 (30) 14 (70)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 063-853 0197

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



4 (20) 16 (80)

1 (5) 19 (95)



5 (25) 15 (75)

5 (25) 15 (75)

76





Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



8 (40) 12 (60)

11 (55) 9 (45)

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

IC 95 P



12 (60) 8 (40)

9 (45) 11 (55)

77




Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

13(65) 7(35)

14(70) 6(30)

033-473 0736


Sim Natildeo

7(35)

13(65) 7(35)

13(65) 027-366 1000



13 (35) 7(65)

16 (80) 4 (20)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



16 (80) 4 (20)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

19 (95) 1 (5)

78




























79


Grupo Alimentar


Massas





Controle 45



Controle 813


Controle 65


Controle 95

Leite e derivados




Controle 486

Leguminosas


Controle 65


Caso

813







Controle

887

Hortaliccedilas


Controle 926



Industrializados

Caso

79



Controle 65


Controle 45




Controle 833


80























81



Desvio Padratildeo

IC 95 P

Energiadia (kcal)

Caso 18571 93622 (137401 ndash 205869) 093

Controle 1692 98334 (120438 ndash 217822)

Carboidratodia (g)

Caso 24345 16826 (16706 ndash 25787)

090 Controle 20785

10997 (15402 ndash 26294)


Caso

658

276

(5205 ndash 7926) 086

Controle

627

4714 (3998 ndash 8673)


(g)

Caso 795 416 (617 ndash 937) 048



(g)

Caso 206 925 (1640 ndash 2553)

059 Controle 182 1598

(1077 ndash 2651)


Caso 2185 1149 (1670 ndash 2808)

075 Controle 204 1698 (1239 ndash 2924)


091 Controle 7285 4985 (4914 ndash 9849)


027 Controle 1265 765 (944 ndash1699)


029 Controle 285 23 (215 ndash 437)


Caso 56 391 (404 ndash 703) 025



077 Controle 26105 26790 (12780 ndash 39313)


055 Controle 872 47033 (64231 ndash 110801)


011 Controle 12035 8752 (7936 ndash 16565)

Vitamina B1dia (mg)

Caso 13 117 (131 ndash 204) 072


Vitamina B2dia (mg)

Caso 08 083 (107 ndash 174) 079


82





IC 95 P

Vitamina B6dia (ug)

Caso 110 102 (121 ndash 197)

085 Controle 105 088 (110 ndash 197)


Caso 38 253 (309 ndash 562) 096


Vitamina Ddia (mg)

Caso 915 1620 (211 ndash 1803) 012

Controle 23 3357 (733 ndash 4061)

Niacinadia (mg)

Caso 19 1005 (1402 ndash 2191)

059 Controle 193

1303 (1339 ndash 2641)

Folatodia (mg)

Caso

24010

11621

(17758 ndash 28351) 054

Controle 20495 12117 (14708 ndash 26684)


(mg)

Caso 35 216 (292 ndash 443) 074


VitaminaEdia (mg)

Caso 1155 651 (894 ndash 1309) 079



049 Controle 4515 3674 (2814 ndash 6439)


099 Controle 201715 148254 (127647 ndash 274446)


068 Controle 62645 33992 (46373 ndash 79973)


Caso 2325 10339 (17818 ndash 25995) 044

Controle 1947 9452 (14888 ndash 24255)


086 Controle 78 476 (603 ndash 1068)


Caso 6 85 (206 ndash 1045) 064

Controle 1095 2019 (148 ndash 1446)


Caso 271955 117073 (208408 ndash 3131423) 029

Controle 220685 115874 (164415 ndash 279085)


Caso 9754 44188 (73698 ndash 1151535) 086

Controle 9085 56939 (63379 ndash 119689)

83





IC 95 P


(996 ndash 1538)

069

Controle 1145 616 (885 ndash 1492)


090 Controle 085 109 (094 ndash 167)


068 Controle 400 5844 (11179 ndash 69057)




Grupo controle


1692

Kcalkgdia 199

279


20785


4913


7285


078

12


1722


627


3335

84

















85
















86







87








88


































89






Desvio Padratildeo


Peso (kg) Caso 9329 105 7574 1075

Controle 6054 787 4575 7422

Estatura (m2) Caso 160 007 149 172

Controle 164 007 151 18

IMC (Kgm2) Caso 3645 452 306 449

Controle 2241 204 188 249


Caso 099 007 088 119

Controle 083 005 077 096


()

Caso

4535

519

354

531

Controle

30035

671

113 404

90













91






em 1times TE




CV ()

10 3537 plusmn 015 045 3494 plusmn 045 129

102 3425 plusmn 017 050 3379plusmn 029 087

103 3099 plusmn 021 070 3074 plusmn 039 128

104 2739 plusmn 023 084 2739 plusmn 038 142

105 2356 plusmn 012 054 2291plusmn 025 110

106 1874 plusmn 066 352 1915 plusmn 077 403








Amostra


n () n ()


Positivaa


12 (60) 3 (15) 17 (85)


92
























93












94






(Tabela 17)











Caso 869x1018

584x103

424

Controle 504x1014

16

25x10-4

95















fezes


fezes


Caso 731x 1024

869x1018

442x105

879x108

718x10-2

584x103

28x 10-2

Controle 619x 1021

504x1014

171x105

146x109

624x102 16

22x10-11





Caso 869x1018 879x108

134x1013

Controle 504x1014

146x109

45x 105

96






(p=02235) (Figura 13)



97

6 DISCUSSAtildeO


























SILVA 2005)






98














de peso




















99














2013)


















em fibra

100


































101


































102


































103


































104


































105


























hipoacuteteses








106







107

7 CONCLUSOtildeES




ambos os grupos
















108


REFEREcircNCIAS











109


















110












111













112















113














114

















115


















116
















117

















118

















119


















120












121















122

















123

















124














125















126















127


128











_______________________________________________________________________________________________________________







mim apresentadas

Estou ciente que









129







mencionados


desta pesquisa
















referido Termo


Esclarecido


Testemunha 1 _______________________________________________

Nome RG Telefone

130

Testemunha 2 ___________________________________________________

Nome RG Telefone



131


132





Nome Idade ID

Telefone Data

Profissatildeo















133
























134





____cigarros

____cachimbos

____charutos
















135

























outro motivo




136





Suplemento

Nome comercial Dose

Frequencia









3 Marmita

4 No trabalho

137


138

139

140

141




142


Peso

_____________Kg

_____________Kg

Estatura

_____________m

_____________m

IMC



_____________cm

_____________cm

Reactacircncia


_____________MLG

Peso MG_________kg

Peso MGL_________kg

TMB __________


143


144


Grupo Alimentar



Massas


Caso

02 (05)

(0-25)

Controle

02 (02) (0-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle

02 (02) (0-079)

Pizza panqueca

Caso 015 (022) (0-1)

Controle 02 (01) (003-043)


Sopas

Caso 015 (018) (0-043)

Controle 014 (02) (0-043)


Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0008 (003) (0-014)

Carne vermelha e

ovos

Carne bovina

Caso 06 (06) (008-25)

Controle 05 (018) (014-079)


Controle 02 (05) (0-25)


Caso 006 (005) (0-014)

Controle 004 (006) (0-014)

Ovos Caso 02 (02) (0-1)

Controle 03 (05) (0-25)

Embutidos

Linguiccedila

Caso 011 (009) (0-043)

Controle 02 (05) (0-25)


Caso 015 (023) (0-1)

Controle 02 (02) (0-043)

Carne branca

Frango Caso 06 (09) (003-3)

Controle 05 (05) (014-25)


Controle 01 (02) (0-043)

Leite e derivados


Controle 04 (06) (0-25)


Controle 002 (005) (0-014)


Controle 0004 (002) (0-008)


Controle 03 (03) (0-079)


Controle 02 (02) (0-079)

145



Grupo Alimentar



(amplitude)

Leite e derivados


Caso 05 (07) (0-25)

Controle 05 (06) (003-25)


Controle 04 (06) (0-25)

Leguminosas


Controle 06 (05) (008-25)


Caso 005 (009) (0-043)

Controle 006 (01) (0-043)


Caso 003 (003) (0-014)

Controle 002 (004) (0-014)


tubeacuterculos



Caso 15 (09) (043-25)

Controle 14 (07) (043-25)


Caso 007 (01) (0-043)

Controle 02 (01) (003-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle 02 (02) (0-043)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 01 (02) (0-1)


Caso 07 (06) (014-3)

Controle 17 (08) (0-25)


Controle 05 (06) (0-25)


Caso 01 (03) (0-1)

Controle 009 (02) (0-043)


Controle 01 (013) (0-043)

Hortaliccedilas

Alface

Caso 12 (09) (008-3)

Controle 08 (06) (014-25)

Tomate Caso 14 (107) (008-3)

Controle 08 (06) (003-25)

Cenoura Caso 06 (07) (008-25)

Controle 04 (02) (0-1)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 05 (07) (0-25)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 04 (02) (0-1)

146





(amplitude)

Hortaliccedilas


Caso 03 (02) (0-1)

Controle 03 (02) (0-079)


Controle 03 (03) (0-1)

Frutas


Controle 04 (05) (003-25)


Controle 04 (02) (008-1)


Controle 03 (03) (0-1)


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 008 (006) (0-014)


Controle 0008 (002) (0-008)


Controle 007 (001) (0-003)


Controle 03 (02) (0-1)

Industrializados


Caso 01 (016) (0-043)

Controle 01 (02) (0-1)

Condimentos

Caso 04 (06) (0-25)

Controle 02 (03) (0-079)


Controle 005 (009) (0-043)


Controle 05 (03) (0-1)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 007 (02) (0-043)

147





(amplitude)

Infusatildeo


Controle 06 (07) (0-25)


Controle 07 (08) (0-3)


Cerveja

Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0074 (01) (0-043)



Caso 1 (09) (0-25)

Controle 03 (03) (0-1)


Controle 07 (07) (0-25)


Controle 007 (003) (0-014)

Lanches


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 005 (004) (0-014)



Controle 06 (04) (003-2)


Caso 013 (03) (0-1)

Controle 02 (03) (0-1)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 03 (03) (003-1)


Controle 08 (1) (0-3)






AGRADECIMENTOS




























propoacutesito



no trabalho




coleta



alimentar










e carinho








obrigada








Jorge Amado

18

RESUMO





































ABSTRACT





A ndash Adenina












atm ndash Atmosfera


C ndash Citosina




CH4ndash Metano






detectado)


















g ndash Gramas

G ndash Guanina























kgndash Quilogramas








mg ndash Miligramas

min ndash Minuto

mL ndash Mililitro


mM ndash Milimolar








nucleotiacutedeos




OR ndash Odds Ratio





coactivator 1 alpha



pmol ndash Picomol










r2 ndash R da curva








s ndash Segundo





T ndash Timina












U ndash Unidade





X ndash Vezes


α ndash Alfa

β ndash Beta


ndash Por cento







vida 37


imunoloacutegico 42


intestinal46






201484




SP 2013-201485








2013-2014 87








Paulo SP 2013-201490





2013-201493








para Mollicutes 66


























2013-201479


Paulo SP 2013-2014 81





Paulo SP 2013-2014 91



2013-201491





201495



SUMAacuteRIO



21 Obesidade 29









2235 Dieta 36













23 MOLLICUTES 52



3 OBJETIVOS 58














Mollicutes 65










5 RESULTADOS 71







Mollicutes 90




6 DISCUSSAtildeO 97


REFEREcircNCIAS 108




26


























SICHIERI 2006)






27


































28


















YOGEV NAOT 1998)

29


21 Obesidade






























30














(BAHIA et al 2012)




















31
































32














(NICHOLSON 2006)



















33
































34






2231 Fases da vida










SMITH et al 2013)

2232 Tipo de parto















35
































36












2007 YANG et al 2009)

2235 Dieta




















37







da vida


38

































39




et al 2009)




























40




SEKIROV et al 2010)










2013)



















41












VLIET et al 2010)

42


imunoloacutegico




43











al 2008)





















44








2004)

























45













46




47

































48















2009)










2009)









49
































50






























2010)

51








(HOTAMISLIGIL 2010)












2008 LAM et al 2012)










52

23 MOLLICUTES







1992)

















1998)








53


































54


























RAZIN 2004)








55



















56


































57













58

3 OBJETIVOS

31 Objetivo geral










eutroacuteficas






59















42 Casuiacutestica








FMUSP)








60




















B)









61



















1 vezdia 11= 1



1vezsemana 17= 014



NuncaQuase nunca 0

COELHO et al 2011

62

































63



para frente




























64


















65






























66




























67






























68









Vallee Franccedila)











69





























70






























71

5 RESULTADOS
































72







Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Raccedilacor


14 (70) 6 (30)

9 (45) 11 (55)

Escolaridade


1 (5) 19(95)

0 (0) 20 (100)



11 (55) 9 (45)

10 (50) 10 (50)

Renda familiar


9 (45) 11 (55)

5 (25) 15 (75 )

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



17 (85) 3 (15)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

8 (40) 12 (60)



13 (65) 7(35)

7 (35) 13 (65)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



10 (50) 10 (50)

10 (50) 10 (50)

73



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

2 (10) 18 (90)



6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI refluxoa


7 (35) 13 (65)

1 (5) 19 (95)

TGI aziaa


6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI uacutelceraa


1 (5) 19 (95)

0 00) 20 (100)


2 (10)

18 (90)

3 (15)

17 (85) 023-107 0633


3 (15)

17(85)

1 (5)

19 (95) 002-314 0292


1 (5)

19 (95)

0 (0)

20 (100) 095-116 0311


0 (0)

20(100)

0 (0)

20 (100)


6 (30)

14 (70)

0 (0)

20 (100) 107-190 0008


0 (0)

20 (100)

0 (0)

20 (100)


5 (25)

15 (75)

1 (5)

19 (95) 001-150 0077


2 (10)

18 (90)

0 (0)

20 (100) 096-128 0147


7 (35)

13 (65)

1 (5)

19 (95) 001-089 0018


11 (55)

9 (45)

0 (0)

20 (100) 136-360 0000


3 (15)

17 (85)

0 (0)

20 (100) 097-141 0072

74



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo controle n ()

IC 95 P



5 (25) 15(75)

10 (50) 10 (50)



15 (75) 5 (25)

10 (50) 10 (50)

Foi amamentadaa


18 (90) 2 (30)

17 (85) 3 (15)



14 (70) 6 (30)

2 (10) 18 (90)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 096-128 0147

75






Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Menopausa


9 (45) 11(55)

3 (15) 17 (85)



16 (80) 4 (20)

16 (80) 14 (20)



13 (65) 7 (35)

15 (75) 5 (25)



3 (15) 17(85)

1 (5) 19 (95)



10 (50) 10 (50)

6 (30) 14 (70)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 063-853 0197

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



4 (20) 16 (80)

1 (5) 19 (95)



5 (25) 15 (75)

5 (25) 15 (75)

76





Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



8 (40) 12 (60)

11 (55) 9 (45)

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

IC 95 P



12 (60) 8 (40)

9 (45) 11 (55)

77




Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

13(65) 7(35)

14(70) 6(30)

033-473 0736


Sim Natildeo

7(35)

13(65) 7(35)

13(65) 027-366 1000



13 (35) 7(65)

16 (80) 4 (20)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



16 (80) 4 (20)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

19 (95) 1 (5)

78




























79


Grupo Alimentar


Massas





Controle 45



Controle 813


Controle 65


Controle 95

Leite e derivados




Controle 486

Leguminosas


Controle 65


Caso

813







Controle

887

Hortaliccedilas


Controle 926



Industrializados

Caso

79



Controle 65


Controle 45




Controle 833


80























81



Desvio Padratildeo

IC 95 P

Energiadia (kcal)

Caso 18571 93622 (137401 ndash 205869) 093

Controle 1692 98334 (120438 ndash 217822)

Carboidratodia (g)

Caso 24345 16826 (16706 ndash 25787)

090 Controle 20785

10997 (15402 ndash 26294)


Caso

658

276

(5205 ndash 7926) 086

Controle

627

4714 (3998 ndash 8673)


(g)

Caso 795 416 (617 ndash 937) 048



(g)

Caso 206 925 (1640 ndash 2553)

059 Controle 182 1598

(1077 ndash 2651)


Caso 2185 1149 (1670 ndash 2808)

075 Controle 204 1698 (1239 ndash 2924)


091 Controle 7285 4985 (4914 ndash 9849)


027 Controle 1265 765 (944 ndash1699)


029 Controle 285 23 (215 ndash 437)


Caso 56 391 (404 ndash 703) 025



077 Controle 26105 26790 (12780 ndash 39313)


055 Controle 872 47033 (64231 ndash 110801)


011 Controle 12035 8752 (7936 ndash 16565)

Vitamina B1dia (mg)

Caso 13 117 (131 ndash 204) 072


Vitamina B2dia (mg)

Caso 08 083 (107 ndash 174) 079


82





IC 95 P

Vitamina B6dia (ug)

Caso 110 102 (121 ndash 197)

085 Controle 105 088 (110 ndash 197)


Caso 38 253 (309 ndash 562) 096


Vitamina Ddia (mg)

Caso 915 1620 (211 ndash 1803) 012

Controle 23 3357 (733 ndash 4061)

Niacinadia (mg)

Caso 19 1005 (1402 ndash 2191)

059 Controle 193

1303 (1339 ndash 2641)

Folatodia (mg)

Caso

24010

11621

(17758 ndash 28351) 054

Controle 20495 12117 (14708 ndash 26684)


(mg)

Caso 35 216 (292 ndash 443) 074


VitaminaEdia (mg)

Caso 1155 651 (894 ndash 1309) 079



049 Controle 4515 3674 (2814 ndash 6439)


099 Controle 201715 148254 (127647 ndash 274446)


068 Controle 62645 33992 (46373 ndash 79973)


Caso 2325 10339 (17818 ndash 25995) 044

Controle 1947 9452 (14888 ndash 24255)


086 Controle 78 476 (603 ndash 1068)


Caso 6 85 (206 ndash 1045) 064

Controle 1095 2019 (148 ndash 1446)


Caso 271955 117073 (208408 ndash 3131423) 029

Controle 220685 115874 (164415 ndash 279085)


Caso 9754 44188 (73698 ndash 1151535) 086

Controle 9085 56939 (63379 ndash 119689)

83





IC 95 P


(996 ndash 1538)

069

Controle 1145 616 (885 ndash 1492)


090 Controle 085 109 (094 ndash 167)


068 Controle 400 5844 (11179 ndash 69057)




Grupo controle


1692

Kcalkgdia 199

279


20785


4913


7285


078

12


1722


627


3335

84

















85
















86







87








88


































89






Desvio Padratildeo


Peso (kg) Caso 9329 105 7574 1075

Controle 6054 787 4575 7422

Estatura (m2) Caso 160 007 149 172

Controle 164 007 151 18

IMC (Kgm2) Caso 3645 452 306 449

Controle 2241 204 188 249


Caso 099 007 088 119

Controle 083 005 077 096


()

Caso

4535

519

354

531

Controle

30035

671

113 404

90













91






em 1times TE




CV ()

10 3537 plusmn 015 045 3494 plusmn 045 129

102 3425 plusmn 017 050 3379plusmn 029 087

103 3099 plusmn 021 070 3074 plusmn 039 128

104 2739 plusmn 023 084 2739 plusmn 038 142

105 2356 plusmn 012 054 2291plusmn 025 110

106 1874 plusmn 066 352 1915 plusmn 077 403








Amostra


n () n ()


Positivaa


12 (60) 3 (15) 17 (85)


92
























93












94






(Tabela 17)











Caso 869x1018

584x103

424

Controle 504x1014

16

25x10-4

95















fezes


fezes


Caso 731x 1024

869x1018

442x105

879x108

718x10-2

584x103

28x 10-2

Controle 619x 1021

504x1014

171x105

146x109

624x102 16

22x10-11





Caso 869x1018 879x108

134x1013

Controle 504x1014

146x109

45x 105

96






(p=02235) (Figura 13)



97

6 DISCUSSAtildeO


























SILVA 2005)






98














de peso




















99














2013)


















em fibra

100


































101


































102


































103


































104


































105


























hipoacuteteses








106







107

7 CONCLUSOtildeES




ambos os grupos
















108


REFEREcircNCIAS











109


















110












111













112















113














114

















115


















116
















117

















118

















119


















120












121















122

















123

















124














125















126















127


128











_______________________________________________________________________________________________________________







mim apresentadas

Estou ciente que









129







mencionados


desta pesquisa
















referido Termo


Esclarecido


Testemunha 1 _______________________________________________

Nome RG Telefone

130

Testemunha 2 ___________________________________________________

Nome RG Telefone



131


132





Nome Idade ID

Telefone Data

Profissatildeo















133
























134





____cigarros

____cachimbos

____charutos
















135

























outro motivo




136





Suplemento

Nome comercial Dose

Frequencia









3 Marmita

4 No trabalho

137


138

139

140

141




142


Peso

_____________Kg

_____________Kg

Estatura

_____________m

_____________m

IMC



_____________cm

_____________cm

Reactacircncia


_____________MLG

Peso MG_________kg

Peso MGL_________kg

TMB __________


143


144


Grupo Alimentar



Massas


Caso

02 (05)

(0-25)

Controle

02 (02) (0-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle

02 (02) (0-079)

Pizza panqueca

Caso 015 (022) (0-1)

Controle 02 (01) (003-043)


Sopas

Caso 015 (018) (0-043)

Controle 014 (02) (0-043)


Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0008 (003) (0-014)

Carne vermelha e

ovos

Carne bovina

Caso 06 (06) (008-25)

Controle 05 (018) (014-079)


Controle 02 (05) (0-25)


Caso 006 (005) (0-014)

Controle 004 (006) (0-014)

Ovos Caso 02 (02) (0-1)

Controle 03 (05) (0-25)

Embutidos

Linguiccedila

Caso 011 (009) (0-043)

Controle 02 (05) (0-25)


Caso 015 (023) (0-1)

Controle 02 (02) (0-043)

Carne branca

Frango Caso 06 (09) (003-3)

Controle 05 (05) (014-25)


Controle 01 (02) (0-043)

Leite e derivados


Controle 04 (06) (0-25)


Controle 002 (005) (0-014)


Controle 0004 (002) (0-008)


Controle 03 (03) (0-079)


Controle 02 (02) (0-079)

145



Grupo Alimentar



(amplitude)

Leite e derivados


Caso 05 (07) (0-25)

Controle 05 (06) (003-25)


Controle 04 (06) (0-25)

Leguminosas


Controle 06 (05) (008-25)


Caso 005 (009) (0-043)

Controle 006 (01) (0-043)


Caso 003 (003) (0-014)

Controle 002 (004) (0-014)


tubeacuterculos



Caso 15 (09) (043-25)

Controle 14 (07) (043-25)


Caso 007 (01) (0-043)

Controle 02 (01) (003-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle 02 (02) (0-043)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 01 (02) (0-1)


Caso 07 (06) (014-3)

Controle 17 (08) (0-25)


Controle 05 (06) (0-25)


Caso 01 (03) (0-1)

Controle 009 (02) (0-043)


Controle 01 (013) (0-043)

Hortaliccedilas

Alface

Caso 12 (09) (008-3)

Controle 08 (06) (014-25)

Tomate Caso 14 (107) (008-3)

Controle 08 (06) (003-25)

Cenoura Caso 06 (07) (008-25)

Controle 04 (02) (0-1)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 05 (07) (0-25)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 04 (02) (0-1)

146





(amplitude)

Hortaliccedilas


Caso 03 (02) (0-1)

Controle 03 (02) (0-079)


Controle 03 (03) (0-1)

Frutas


Controle 04 (05) (003-25)


Controle 04 (02) (008-1)


Controle 03 (03) (0-1)


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 008 (006) (0-014)


Controle 0008 (002) (0-008)


Controle 007 (001) (0-003)


Controle 03 (02) (0-1)

Industrializados


Caso 01 (016) (0-043)

Controle 01 (02) (0-1)

Condimentos

Caso 04 (06) (0-25)

Controle 02 (03) (0-079)


Controle 005 (009) (0-043)


Controle 05 (03) (0-1)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 007 (02) (0-043)

147





(amplitude)

Infusatildeo


Controle 06 (07) (0-25)


Controle 07 (08) (0-3)


Cerveja

Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0074 (01) (0-043)



Caso 1 (09) (0-25)

Controle 03 (03) (0-1)


Controle 07 (07) (0-25)


Controle 007 (003) (0-014)

Lanches


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 005 (004) (0-014)



Controle 06 (04) (003-2)


Caso 013 (03) (0-1)

Controle 02 (03) (0-1)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 03 (03) (003-1)


Controle 08 (1) (0-3)

AGRADECIMENTOS




























propoacutesito



no trabalho




coleta



alimentar










e carinho








obrigada








Jorge Amado

18

RESUMO





































ABSTRACT





A ndash Adenina












atm ndash Atmosfera


C ndash Citosina




CH4ndash Metano






detectado)


















g ndash Gramas

G ndash Guanina























kgndash Quilogramas








mg ndash Miligramas

min ndash Minuto

mL ndash Mililitro


mM ndash Milimolar








nucleotiacutedeos




OR ndash Odds Ratio





coactivator 1 alpha



pmol ndash Picomol










r2 ndash R da curva








s ndash Segundo





T ndash Timina












U ndash Unidade





X ndash Vezes


α ndash Alfa

β ndash Beta


ndash Por cento







vida 37


imunoloacutegico 42


intestinal46






201484




SP 2013-201485








2013-2014 87








Paulo SP 2013-201490





2013-201493








para Mollicutes 66


























2013-201479


Paulo SP 2013-2014 81





Paulo SP 2013-2014 91



2013-201491





201495



SUMAacuteRIO



21 Obesidade 29









2235 Dieta 36













23 MOLLICUTES 52



3 OBJETIVOS 58














Mollicutes 65










5 RESULTADOS 71







Mollicutes 90




6 DISCUSSAtildeO 97


REFEREcircNCIAS 108




26


























SICHIERI 2006)






27


































28


















YOGEV NAOT 1998)

29


21 Obesidade






























30














(BAHIA et al 2012)




















31
































32














(NICHOLSON 2006)



















33
































34






2231 Fases da vida










SMITH et al 2013)

2232 Tipo de parto















35
































36












2007 YANG et al 2009)

2235 Dieta




















37







da vida


38

































39




et al 2009)




























40




SEKIROV et al 2010)










2013)



















41












VLIET et al 2010)

42


imunoloacutegico




43











al 2008)





















44








2004)

























45













46




47

































48















2009)










2009)









49
































50






























2010)

51








(HOTAMISLIGIL 2010)












2008 LAM et al 2012)










52

23 MOLLICUTES







1992)

















1998)








53


































54


























RAZIN 2004)








55



















56


































57













58

3 OBJETIVOS

31 Objetivo geral










eutroacuteficas






59















42 Casuiacutestica








FMUSP)








60




















B)









61



















1 vezdia 11= 1



1vezsemana 17= 014



NuncaQuase nunca 0

COELHO et al 2011

62

































63



para frente




























64


















65






























66




























67






























68









Vallee Franccedila)











69





























70






























71

5 RESULTADOS
































72







Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Raccedilacor


14 (70) 6 (30)

9 (45) 11 (55)

Escolaridade


1 (5) 19(95)

0 (0) 20 (100)



11 (55) 9 (45)

10 (50) 10 (50)

Renda familiar


9 (45) 11 (55)

5 (25) 15 (75 )

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



17 (85) 3 (15)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

8 (40) 12 (60)



13 (65) 7(35)

7 (35) 13 (65)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



10 (50) 10 (50)

10 (50) 10 (50)

73



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

2 (10) 18 (90)



6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI refluxoa


7 (35) 13 (65)

1 (5) 19 (95)

TGI aziaa


6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI uacutelceraa


1 (5) 19 (95)

0 00) 20 (100)


2 (10)

18 (90)

3 (15)

17 (85) 023-107 0633


3 (15)

17(85)

1 (5)

19 (95) 002-314 0292


1 (5)

19 (95)

0 (0)

20 (100) 095-116 0311


0 (0)

20(100)

0 (0)

20 (100)


6 (30)

14 (70)

0 (0)

20 (100) 107-190 0008


0 (0)

20 (100)

0 (0)

20 (100)


5 (25)

15 (75)

1 (5)

19 (95) 001-150 0077


2 (10)

18 (90)

0 (0)

20 (100) 096-128 0147


7 (35)

13 (65)

1 (5)

19 (95) 001-089 0018


11 (55)

9 (45)

0 (0)

20 (100) 136-360 0000


3 (15)

17 (85)

0 (0)

20 (100) 097-141 0072

74



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo controle n ()

IC 95 P



5 (25) 15(75)

10 (50) 10 (50)



15 (75) 5 (25)

10 (50) 10 (50)

Foi amamentadaa


18 (90) 2 (30)

17 (85) 3 (15)



14 (70) 6 (30)

2 (10) 18 (90)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 096-128 0147

75






Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Menopausa


9 (45) 11(55)

3 (15) 17 (85)



16 (80) 4 (20)

16 (80) 14 (20)



13 (65) 7 (35)

15 (75) 5 (25)



3 (15) 17(85)

1 (5) 19 (95)



10 (50) 10 (50)

6 (30) 14 (70)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 063-853 0197

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



4 (20) 16 (80)

1 (5) 19 (95)



5 (25) 15 (75)

5 (25) 15 (75)

76





Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



8 (40) 12 (60)

11 (55) 9 (45)

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

IC 95 P



12 (60) 8 (40)

9 (45) 11 (55)

77




Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

13(65) 7(35)

14(70) 6(30)

033-473 0736


Sim Natildeo

7(35)

13(65) 7(35)

13(65) 027-366 1000



13 (35) 7(65)

16 (80) 4 (20)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



16 (80) 4 (20)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

19 (95) 1 (5)

78




























79


Grupo Alimentar


Massas





Controle 45



Controle 813


Controle 65


Controle 95

Leite e derivados




Controle 486

Leguminosas


Controle 65


Caso

813







Controle

887

Hortaliccedilas


Controle 926



Industrializados

Caso

79



Controle 65


Controle 45




Controle 833


80























81



Desvio Padratildeo

IC 95 P

Energiadia (kcal)

Caso 18571 93622 (137401 ndash 205869) 093

Controle 1692 98334 (120438 ndash 217822)

Carboidratodia (g)

Caso 24345 16826 (16706 ndash 25787)

090 Controle 20785

10997 (15402 ndash 26294)


Caso

658

276

(5205 ndash 7926) 086

Controle

627

4714 (3998 ndash 8673)


(g)

Caso 795 416 (617 ndash 937) 048



(g)

Caso 206 925 (1640 ndash 2553)

059 Controle 182 1598

(1077 ndash 2651)


Caso 2185 1149 (1670 ndash 2808)

075 Controle 204 1698 (1239 ndash 2924)


091 Controle 7285 4985 (4914 ndash 9849)


027 Controle 1265 765 (944 ndash1699)


029 Controle 285 23 (215 ndash 437)


Caso 56 391 (404 ndash 703) 025



077 Controle 26105 26790 (12780 ndash 39313)


055 Controle 872 47033 (64231 ndash 110801)


011 Controle 12035 8752 (7936 ndash 16565)

Vitamina B1dia (mg)

Caso 13 117 (131 ndash 204) 072


Vitamina B2dia (mg)

Caso 08 083 (107 ndash 174) 079


82





IC 95 P

Vitamina B6dia (ug)

Caso 110 102 (121 ndash 197)

085 Controle 105 088 (110 ndash 197)


Caso 38 253 (309 ndash 562) 096


Vitamina Ddia (mg)

Caso 915 1620 (211 ndash 1803) 012

Controle 23 3357 (733 ndash 4061)

Niacinadia (mg)

Caso 19 1005 (1402 ndash 2191)

059 Controle 193

1303 (1339 ndash 2641)

Folatodia (mg)

Caso

24010

11621

(17758 ndash 28351) 054

Controle 20495 12117 (14708 ndash 26684)


(mg)

Caso 35 216 (292 ndash 443) 074


VitaminaEdia (mg)

Caso 1155 651 (894 ndash 1309) 079



049 Controle 4515 3674 (2814 ndash 6439)


099 Controle 201715 148254 (127647 ndash 274446)


068 Controle 62645 33992 (46373 ndash 79973)


Caso 2325 10339 (17818 ndash 25995) 044

Controle 1947 9452 (14888 ndash 24255)


086 Controle 78 476 (603 ndash 1068)


Caso 6 85 (206 ndash 1045) 064

Controle 1095 2019 (148 ndash 1446)


Caso 271955 117073 (208408 ndash 3131423) 029

Controle 220685 115874 (164415 ndash 279085)


Caso 9754 44188 (73698 ndash 1151535) 086

Controle 9085 56939 (63379 ndash 119689)

83





IC 95 P


(996 ndash 1538)

069

Controle 1145 616 (885 ndash 1492)


090 Controle 085 109 (094 ndash 167)


068 Controle 400 5844 (11179 ndash 69057)




Grupo controle


1692

Kcalkgdia 199

279


20785


4913


7285


078

12


1722


627


3335

84

















85
















86







87








88


































89






Desvio Padratildeo


Peso (kg) Caso 9329 105 7574 1075

Controle 6054 787 4575 7422

Estatura (m2) Caso 160 007 149 172

Controle 164 007 151 18

IMC (Kgm2) Caso 3645 452 306 449

Controle 2241 204 188 249


Caso 099 007 088 119

Controle 083 005 077 096


()

Caso

4535

519

354

531

Controle

30035

671

113 404

90













91






em 1times TE




CV ()

10 3537 plusmn 015 045 3494 plusmn 045 129

102 3425 plusmn 017 050 3379plusmn 029 087

103 3099 plusmn 021 070 3074 plusmn 039 128

104 2739 plusmn 023 084 2739 plusmn 038 142

105 2356 plusmn 012 054 2291plusmn 025 110

106 1874 plusmn 066 352 1915 plusmn 077 403








Amostra


n () n ()


Positivaa


12 (60) 3 (15) 17 (85)


92
























93












94






(Tabela 17)











Caso 869x1018

584x103

424

Controle 504x1014

16

25x10-4

95















fezes


fezes


Caso 731x 1024

869x1018

442x105

879x108

718x10-2

584x103

28x 10-2

Controle 619x 1021

504x1014

171x105

146x109

624x102 16

22x10-11





Caso 869x1018 879x108

134x1013

Controle 504x1014

146x109

45x 105

96






(p=02235) (Figura 13)



97

6 DISCUSSAtildeO


























SILVA 2005)






98














de peso




















99














2013)


















em fibra

100


































101


































102


































103


































104


































105


























hipoacuteteses








106







107

7 CONCLUSOtildeES




ambos os grupos
















108


REFEREcircNCIAS











109


















110












111













112















113














114

















115


















116
















117

















118

















119


















120












121















122

















123

















124














125















126















127


128











_______________________________________________________________________________________________________________







mim apresentadas

Estou ciente que









129







mencionados


desta pesquisa
















referido Termo


Esclarecido


Testemunha 1 _______________________________________________

Nome RG Telefone

130

Testemunha 2 ___________________________________________________

Nome RG Telefone



131


132





Nome Idade ID

Telefone Data

Profissatildeo















133
























134





____cigarros

____cachimbos

____charutos
















135

























outro motivo




136





Suplemento

Nome comercial Dose

Frequencia









3 Marmita

4 No trabalho

137


138

139

140

141




142


Peso

_____________Kg

_____________Kg

Estatura

_____________m

_____________m

IMC



_____________cm

_____________cm

Reactacircncia


_____________MLG

Peso MG_________kg

Peso MGL_________kg

TMB __________


143


144


Grupo Alimentar



Massas


Caso

02 (05)

(0-25)

Controle

02 (02) (0-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle

02 (02) (0-079)

Pizza panqueca

Caso 015 (022) (0-1)

Controle 02 (01) (003-043)


Sopas

Caso 015 (018) (0-043)

Controle 014 (02) (0-043)


Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0008 (003) (0-014)

Carne vermelha e

ovos

Carne bovina

Caso 06 (06) (008-25)

Controle 05 (018) (014-079)


Controle 02 (05) (0-25)


Caso 006 (005) (0-014)

Controle 004 (006) (0-014)

Ovos Caso 02 (02) (0-1)

Controle 03 (05) (0-25)

Embutidos

Linguiccedila

Caso 011 (009) (0-043)

Controle 02 (05) (0-25)


Caso 015 (023) (0-1)

Controle 02 (02) (0-043)

Carne branca

Frango Caso 06 (09) (003-3)

Controle 05 (05) (014-25)


Controle 01 (02) (0-043)

Leite e derivados


Controle 04 (06) (0-25)


Controle 002 (005) (0-014)


Controle 0004 (002) (0-008)


Controle 03 (03) (0-079)


Controle 02 (02) (0-079)

145



Grupo Alimentar



(amplitude)

Leite e derivados


Caso 05 (07) (0-25)

Controle 05 (06) (003-25)


Controle 04 (06) (0-25)

Leguminosas


Controle 06 (05) (008-25)


Caso 005 (009) (0-043)

Controle 006 (01) (0-043)


Caso 003 (003) (0-014)

Controle 002 (004) (0-014)


tubeacuterculos



Caso 15 (09) (043-25)

Controle 14 (07) (043-25)


Caso 007 (01) (0-043)

Controle 02 (01) (003-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle 02 (02) (0-043)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 01 (02) (0-1)


Caso 07 (06) (014-3)

Controle 17 (08) (0-25)


Controle 05 (06) (0-25)


Caso 01 (03) (0-1)

Controle 009 (02) (0-043)


Controle 01 (013) (0-043)

Hortaliccedilas

Alface

Caso 12 (09) (008-3)

Controle 08 (06) (014-25)

Tomate Caso 14 (107) (008-3)

Controle 08 (06) (003-25)

Cenoura Caso 06 (07) (008-25)

Controle 04 (02) (0-1)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 05 (07) (0-25)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 04 (02) (0-1)

146





(amplitude)

Hortaliccedilas


Caso 03 (02) (0-1)

Controle 03 (02) (0-079)


Controle 03 (03) (0-1)

Frutas


Controle 04 (05) (003-25)


Controle 04 (02) (008-1)


Controle 03 (03) (0-1)


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 008 (006) (0-014)


Controle 0008 (002) (0-008)


Controle 007 (001) (0-003)


Controle 03 (02) (0-1)

Industrializados


Caso 01 (016) (0-043)

Controle 01 (02) (0-1)

Condimentos

Caso 04 (06) (0-25)

Controle 02 (03) (0-079)


Controle 005 (009) (0-043)


Controle 05 (03) (0-1)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 007 (02) (0-043)

147





(amplitude)

Infusatildeo


Controle 06 (07) (0-25)


Controle 07 (08) (0-3)


Cerveja

Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0074 (01) (0-043)



Caso 1 (09) (0-25)

Controle 03 (03) (0-1)


Controle 07 (07) (0-25)


Controle 007 (003) (0-014)

Lanches


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 005 (004) (0-014)



Controle 06 (04) (003-2)


Caso 013 (03) (0-1)

Controle 02 (03) (0-1)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 03 (03) (003-1)


Controle 08 (1) (0-3)



propoacutesito



no trabalho




coleta



alimentar










e carinho








obrigada








Jorge Amado

18

RESUMO





































ABSTRACT





A ndash Adenina












atm ndash Atmosfera


C ndash Citosina




CH4ndash Metano






detectado)


















g ndash Gramas

G ndash Guanina























kgndash Quilogramas








mg ndash Miligramas

min ndash Minuto

mL ndash Mililitro


mM ndash Milimolar








nucleotiacutedeos




OR ndash Odds Ratio





coactivator 1 alpha



pmol ndash Picomol










r2 ndash R da curva








s ndash Segundo





T ndash Timina












U ndash Unidade





X ndash Vezes


α ndash Alfa

β ndash Beta


ndash Por cento







vida 37


imunoloacutegico 42


intestinal46






201484




SP 2013-201485








2013-2014 87








Paulo SP 2013-201490





2013-201493








para Mollicutes 66


























2013-201479


Paulo SP 2013-2014 81





Paulo SP 2013-2014 91



2013-201491





201495



SUMAacuteRIO



21 Obesidade 29









2235 Dieta 36













23 MOLLICUTES 52



3 OBJETIVOS 58














Mollicutes 65










5 RESULTADOS 71







Mollicutes 90




6 DISCUSSAtildeO 97


REFEREcircNCIAS 108




26


























SICHIERI 2006)






27


































28


















YOGEV NAOT 1998)

29


21 Obesidade






























30














(BAHIA et al 2012)




















31
































32














(NICHOLSON 2006)



















33
































34






2231 Fases da vida










SMITH et al 2013)

2232 Tipo de parto















35
































36












2007 YANG et al 2009)

2235 Dieta




















37







da vida


38

































39




et al 2009)




























40




SEKIROV et al 2010)










2013)



















41












VLIET et al 2010)

42


imunoloacutegico




43











al 2008)





















44








2004)

























45













46




47

































48















2009)










2009)









49
































50






























2010)

51








(HOTAMISLIGIL 2010)












2008 LAM et al 2012)










52

23 MOLLICUTES







1992)

















1998)








53


































54


























RAZIN 2004)








55



















56


































57













58

3 OBJETIVOS

31 Objetivo geral










eutroacuteficas






59















42 Casuiacutestica








FMUSP)








60




















B)









61



















1 vezdia 11= 1



1vezsemana 17= 014



NuncaQuase nunca 0

COELHO et al 2011

62

































63



para frente




























64


















65






























66




























67






























68









Vallee Franccedila)











69





























70






























71

5 RESULTADOS
































72







Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Raccedilacor


14 (70) 6 (30)

9 (45) 11 (55)

Escolaridade


1 (5) 19(95)

0 (0) 20 (100)



11 (55) 9 (45)

10 (50) 10 (50)

Renda familiar


9 (45) 11 (55)

5 (25) 15 (75 )

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



17 (85) 3 (15)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

8 (40) 12 (60)



13 (65) 7(35)

7 (35) 13 (65)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



10 (50) 10 (50)

10 (50) 10 (50)

73



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

2 (10) 18 (90)



6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI refluxoa


7 (35) 13 (65)

1 (5) 19 (95)

TGI aziaa


6 (30) 14 (70)

0 (0) 20 (100)

TGI uacutelceraa


1 (5) 19 (95)

0 00) 20 (100)


2 (10)

18 (90)

3 (15)

17 (85) 023-107 0633


3 (15)

17(85)

1 (5)

19 (95) 002-314 0292


1 (5)

19 (95)

0 (0)

20 (100) 095-116 0311


0 (0)

20(100)

0 (0)

20 (100)


6 (30)

14 (70)

0 (0)

20 (100) 107-190 0008


0 (0)

20 (100)

0 (0)

20 (100)


5 (25)

15 (75)

1 (5)

19 (95) 001-150 0077


2 (10)

18 (90)

0 (0)

20 (100) 096-128 0147


7 (35)

13 (65)

1 (5)

19 (95) 001-089 0018


11 (55)

9 (45)

0 (0)

20 (100) 136-360 0000


3 (15)

17 (85)

0 (0)

20 (100) 097-141 0072

74



Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo controle n ()

IC 95 P



5 (25) 15(75)

10 (50) 10 (50)



15 (75) 5 (25)

10 (50) 10 (50)

Foi amamentadaa


18 (90) 2 (30)

17 (85) 3 (15)



14 (70) 6 (30)

2 (10) 18 (90)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 096-128 0147

75






Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P

Menopausa


9 (45) 11(55)

3 (15) 17 (85)



16 (80) 4 (20)

16 (80) 14 (20)



13 (65) 7 (35)

15 (75) 5 (25)



3 (15) 17(85)

1 (5) 19 (95)



10 (50) 10 (50)

6 (30) 14 (70)


2 (10)

18 (90)

2 (10)

18 (90) 063-853 0197

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



4 (20) 16 (80)

1 (5) 19 (95)



5 (25) 15 (75)

5 (25) 15 (75)

76





Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle n ()

IC 95 P



8 (40) 12 (60)

11 (55) 9 (45)

Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

IC 95 P



12 (60) 8 (40)

9 (45) 11 (55)

77




Variaacuteveis

Grupo Caso n ()

Grupo Controle

n ()

IC 95 P



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)



7 (35) 13 (65)

3 (15) 17 (85)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

0(0) 20(100)

0(0) 20(100)


Sim Natildeo

13(65) 7(35)

14(70) 6(30)

033-473 0736


Sim Natildeo

7(35)

13(65) 7(35)

13(65) 027-366 1000



13 (35) 7(65)

16 (80) 4 (20)



11 (55) 9 (45)

12 (60) 8 (40)



16 (80) 4 (20)

12 (60) 8 (40)



12 (60) 8 (40)

19 (95) 1 (5)

78




























79


Grupo Alimentar


Massas





Controle 45



Controle 813


Controle 65


Controle 95

Leite e derivados




Controle 486

Leguminosas


Controle 65


Caso

813







Controle

887

Hortaliccedilas


Controle 926



Industrializados

Caso

79



Controle 65


Controle 45




Controle 833


80























81



Desvio Padratildeo

IC 95 P

Energiadia (kcal)

Caso 18571 93622 (137401 ndash 205869) 093

Controle 1692 98334 (120438 ndash 217822)

Carboidratodia (g)

Caso 24345 16826 (16706 ndash 25787)

090 Controle 20785

10997 (15402 ndash 26294)


Caso

658

276

(5205 ndash 7926) 086

Controle

627

4714 (3998 ndash 8673)


(g)

Caso 795 416 (617 ndash 937) 048



(g)

Caso 206 925 (1640 ndash 2553)

059 Controle 182 1598

(1077 ndash 2651)


Caso 2185 1149 (1670 ndash 2808)

075 Controle 204 1698 (1239 ndash 2924)


091 Controle 7285 4985 (4914 ndash 9849)


027 Controle 1265 765 (944 ndash1699)


029 Controle 285 23 (215 ndash 437)


Caso 56 391 (404 ndash 703) 025



077 Controle 26105 26790 (12780 ndash 39313)


055 Controle 872 47033 (64231 ndash 110801)


011 Controle 12035 8752 (7936 ndash 16565)

Vitamina B1dia (mg)

Caso 13 117 (131 ndash 204) 072


Vitamina B2dia (mg)

Caso 08 083 (107 ndash 174) 079


82





IC 95 P

Vitamina B6dia (ug)

Caso 110 102 (121 ndash 197)

085 Controle 105 088 (110 ndash 197)


Caso 38 253 (309 ndash 562) 096


Vitamina Ddia (mg)

Caso 915 1620 (211 ndash 1803) 012

Controle 23 3357 (733 ndash 4061)

Niacinadia (mg)

Caso 19 1005 (1402 ndash 2191)

059 Controle 193

1303 (1339 ndash 2641)

Folatodia (mg)

Caso

24010

11621

(17758 ndash 28351) 054

Controle 20495 12117 (14708 ndash 26684)


(mg)

Caso 35 216 (292 ndash 443) 074


VitaminaEdia (mg)

Caso 1155 651 (894 ndash 1309) 079



049 Controle 4515 3674 (2814 ndash 6439)


099 Controle 201715 148254 (127647 ndash 274446)


068 Controle 62645 33992 (46373 ndash 79973)


Caso 2325 10339 (17818 ndash 25995) 044

Controle 1947 9452 (14888 ndash 24255)


086 Controle 78 476 (603 ndash 1068)


Caso 6 85 (206 ndash 1045) 064

Controle 1095 2019 (148 ndash 1446)


Caso 271955 117073 (208408 ndash 3131423) 029

Controle 220685 115874 (164415 ndash 279085)


Caso 9754 44188 (73698 ndash 1151535) 086

Controle 9085 56939 (63379 ndash 119689)

83





IC 95 P


(996 ndash 1538)

069

Controle 1145 616 (885 ndash 1492)


090 Controle 085 109 (094 ndash 167)


068 Controle 400 5844 (11179 ndash 69057)




Grupo controle


1692

Kcalkgdia 199

279


20785


4913


7285


078

12


1722


627


3335

84

















85
















86







87








88


































89






Desvio Padratildeo


Peso (kg) Caso 9329 105 7574 1075

Controle 6054 787 4575 7422

Estatura (m2) Caso 160 007 149 172

Controle 164 007 151 18

IMC (Kgm2) Caso 3645 452 306 449

Controle 2241 204 188 249


Caso 099 007 088 119

Controle 083 005 077 096


()

Caso

4535

519

354

531

Controle

30035

671

113 404

90













91






em 1times TE




CV ()

10 3537 plusmn 015 045 3494 plusmn 045 129

102 3425 plusmn 017 050 3379plusmn 029 087

103 3099 plusmn 021 070 3074 plusmn 039 128

104 2739 plusmn 023 084 2739 plusmn 038 142

105 2356 plusmn 012 054 2291plusmn 025 110

106 1874 plusmn 066 352 1915 plusmn 077 403








Amostra


n () n ()


Positivaa


12 (60) 3 (15) 17 (85)


92
























93












94






(Tabela 17)











Caso 869x1018

584x103

424

Controle 504x1014

16

25x10-4

95















fezes


fezes


Caso 731x 1024

869x1018

442x105

879x108

718x10-2

584x103

28x 10-2

Controle 619x 1021

504x1014

171x105

146x109

624x102 16

22x10-11





Caso 869x1018 879x108

134x1013

Controle 504x1014

146x109

45x 105

96






(p=02235) (Figura 13)



97

6 DISCUSSAtildeO


























SILVA 2005)






98














de peso




















99














2013)


















em fibra

100


































101


































102


































103


































104


































105


























hipoacuteteses








106







107

7 CONCLUSOtildeES




ambos os grupos
















108


REFEREcircNCIAS











109


















110












111













112















113














114

















115


















116
















117

















118

















119


















120












121















122

















123

















124














125















126















127


128











_______________________________________________________________________________________________________________







mim apresentadas

Estou ciente que









129







mencionados


desta pesquisa
















referido Termo


Esclarecido


Testemunha 1 _______________________________________________

Nome RG Telefone

130

Testemunha 2 ___________________________________________________

Nome RG Telefone



131


132





Nome Idade ID

Telefone Data

Profissatildeo















133
























134





____cigarros

____cachimbos

____charutos
















135

























outro motivo




136





Suplemento

Nome comercial Dose

Frequencia









3 Marmita

4 No trabalho

137


138

139

140

141




142


Peso

_____________Kg

_____________Kg

Estatura

_____________m

_____________m

IMC



_____________cm

_____________cm

Reactacircncia


_____________MLG

Peso MG_________kg

Peso MGL_________kg

TMB __________


143


144


Grupo Alimentar



Massas


Caso

02 (05)

(0-25)

Controle

02 (02) (0-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle

02 (02) (0-079)

Pizza panqueca

Caso 015 (022) (0-1)

Controle 02 (01) (003-043)


Sopas

Caso 015 (018) (0-043)

Controle 014 (02) (0-043)


Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0008 (003) (0-014)

Carne vermelha e

ovos

Carne bovina

Caso 06 (06) (008-25)

Controle 05 (018) (014-079)


Controle 02 (05) (0-25)


Caso 006 (005) (0-014)

Controle 004 (006) (0-014)

Ovos Caso 02 (02) (0-1)

Controle 03 (05) (0-25)

Embutidos

Linguiccedila

Caso 011 (009) (0-043)

Controle 02 (05) (0-25)


Caso 015 (023) (0-1)

Controle 02 (02) (0-043)

Carne branca

Frango Caso 06 (09) (003-3)

Controle 05 (05) (014-25)


Controle 01 (02) (0-043)

Leite e derivados


Controle 04 (06) (0-25)


Controle 002 (005) (0-014)


Controle 0004 (002) (0-008)


Controle 03 (03) (0-079)


Controle 02 (02) (0-079)

145



Grupo Alimentar



(amplitude)

Leite e derivados


Caso 05 (07) (0-25)

Controle 05 (06) (003-25)


Controle 04 (06) (0-25)

Leguminosas


Controle 06 (05) (008-25)


Caso 005 (009) (0-043)

Controle 006 (01) (0-043)


Caso 003 (003) (0-014)

Controle 002 (004) (0-014)


tubeacuterculos



Caso 15 (09) (043-25)

Controle 14 (07) (043-25)


Caso 007 (01) (0-043)

Controle 02 (01) (003-043)


Caso 01 (012) (0-043)

Controle 02 (02) (0-043)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 01 (02) (0-1)


Caso 07 (06) (014-3)

Controle 17 (08) (0-25)


Controle 05 (06) (0-25)


Caso 01 (03) (0-1)

Controle 009 (02) (0-043)


Controle 01 (013) (0-043)

Hortaliccedilas

Alface

Caso 12 (09) (008-3)

Controle 08 (06) (014-25)

Tomate Caso 14 (107) (008-3)

Controle 08 (06) (003-25)

Cenoura Caso 06 (07) (008-25)

Controle 04 (02) (0-1)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 05 (07) (0-25)


Caso 04 (03) (008-1)

Controle 04 (02) (0-1)

146





(amplitude)

Hortaliccedilas


Caso 03 (02) (0-1)

Controle 03 (02) (0-079)


Controle 03 (03) (0-1)

Frutas


Controle 04 (05) (003-25)


Controle 04 (02) (008-1)


Controle 03 (03) (0-1)


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 008 (006) (0-014)


Controle 0008 (002) (0-008)


Controle 007 (001) (0-003)


Controle 03 (02) (0-1)

Industrializados


Caso 01 (016) (0-043)

Controle 01 (02) (0-1)

Condimentos

Caso 04 (06) (0-25)

Controle 02 (03) (0-079)


Controle 005 (009) (0-043)


Controle 05 (03) (0-1)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 007 (02) (0-043)

147





(amplitude)

Infusatildeo


Controle 06 (07) (0-25)


Controle 07 (08) (0-3)


Cerveja

Caso 003 (005) (0-014)

Controle 0074 (01) (0-043)



Caso 1 (09) (0-25)

Controle 03 (03) (0-1)


Controle 07 (07) (0-25)


Controle 007 (003) (0-014)

Lanches


Controle 01 (01) (0-043)


Controle 02 (02) (0-043)


Controle 005 (004) (0-014)



Controle 06 (04) (003-2)


Caso 013 (03) (0-1)

Controle 02 (03) (0-1)


Caso 02 (03) (0-1)

Controle 03 (03) (003-1)


Controle 08 (1) (0-3)

Documents

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP ......da microbiota intestinal facilita a extração de calorias da dieta, ajudam a estocá-las no tecido adiposo, além de prover