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7/17/2019 colutorioooo
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i
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
UNIDAD DE INVESTIGACIÓN,
TITULACIÓN Y GRADUACIÓN
ESTUDIO IN VITRO DE LA EFICACIA
ANTIBACTERIANA ENTRE EL EXTRACTO
ALCOHÓLICO DE CAESALPINIA SPINOSA (TARA) AL
100% E HIPOCLORITO DE SODIO AL 5,25% SOBRE EL
ENTEROCOCCUS FAECALIS
Proyecto previo a la obtención del título de Odontólogo
Autora: Adriana Belén Haro Valencia
Tutora: Dra. Raquel Esmeralda Guillén Guillén
Quito
Abril, 2015
7/17/2019 colutorioooo
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ii
DEDICATORIA
A Dios, que sin él no soy nada, por iluminarme y colmarme de fe,
paciencia y fuerzas para seguir adelante a pesar de los obstáculos que se
interpusieron en el desarrollo de esta investigación y a lo largo de mi vida.
A mis padres, tíos, tías, abuelitos, tutora y amigos cercanos quienes me
han sabido guiar, aconsejar y motivar para seguir por el camino correcto
en toda mi vida y carrera, colaborando con palabras de aliento y su
ejemplo para no desmayar en el camino y sobre todo por toda su confianzadepositada en mí.
Y a mi querido Dr. Asdrúbal Cadena (+) quien me motivó, enseñó e hizo
apasionarme y luchar por la Endodoncia desde las aulas y alentarme hasta
darme seguridad, confianza y perseverancia en mis trabajos y prácticas en
clínicas.
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iii
AGRADECIMIENTO
A mi tutora de tesis Dra. Raquel Guillén, por su apoyo, conocimientos y
colaboración otorgada para la realización de esta investigación.
A la Fundación “CHANKUAP” de la ciudad de Macas, en especial al Sr.
Paul Arévalo, quien facilito la ayuda para la preparación del extracto en
las instalaciones.
Al Laboratorio Clínico “Cabrera” de la ciudad de Macas y a la Dra.
Adriana Cabrera que proporcionó su ayuda incondicional en el desarrollo
de la parte experimental de la presente investigación, brindando su tiempo
para la realización de los estudios antibacterianos de las soluciones
comparadas en el presente trabajo.
Por último, pero no menos importante; agradezco a mis padres quienes
han sido mi mayor apoyo para la culminación de esta tesis y a Dios quien
me ha dado la fortaleza para seguir siempre adelante.
Adriana Haro V.
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UNIVERSIDAD
C E N T R A L D E L
ECUADOR
FACULTAD
DE ODONTOLOGÍ
INSTITUTO SUPERIOR DE INV ESTIGACIÓN Y
POSGRADO
UNIDAD D E INVESTIG CIÓN G R A D U A C IÓ N Y TITUL CIÓN
AUTO RIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTU L
Yo, Adriana Belén Haro Valencia en calidad de autor del trabajo de investigación o
tesis realizada sobre ESTU DIO
IN
VITR O
DE LA
EFIC AC IA ANTIB AC TER IANA
ENTRE
EL
EXTR AC TO ALC OHÓLIC O
DE CAESALPINIA SPINOSA
(TARA)
AL
100%
E
HIPOC LOR ITO
DE
SODIO
A L
5,25% SOBRE
EL
ENTER OC OC C US
FAECALIS ,
hacer
uso de
todos
lo s
contenidos
que me
pertenecen
o de
parte
de los que
contienen esta obra, con fines estrictamente académ icos o de investigación.
Los
derechos
que
como autor
me
corresponden,
con
excepción
de la
presente
autorización, seguirán vigentes
a m i
favor,
de
conformidad
con lo
establecido
en los
artículos 5, 6, 8; 19 y demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y su
Reglamento.
Quito, 23 de abril
de
2015
Adriana
Belén Haro V alencia
C.I:
140049854-7
odontoharoadry@hotmail .com
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UNIVERSIDAD CENTR L D E L ECUADOR
F CULT D
D E
ODONTOLOGÍA
INSTITUTO SUPERIOR D E INVESTIGACIÓN Y POSGRADO
UNIDAD
D E
INVESTIGACIÓN GRADU ACIÓN
Y
TITULACIÓN
INFORME D E APROBA CIÓN D E L TUTOR
En mi
carácter
de
Tutora
del
trabajo
de
Grado, presentado
por la
señorita A driana Belén
Haro Valencia, para optar el Título de Odontólogo, cuyo título es sobre ESTU DIO IN
VITRO DE LA EFICACIA ANTIBACTERIANA ENTRE EL EXTRACTO
ALC OHÓLIC O
D E
CAESALPINIA SPINOSA (TARA)
A L
100%
E
HIPOCLORITO
D E
SODIO AL 5 ,25% SOBRE EL ENTEROCOCCUS FAECALIS . Considero que
dicho Trabajo reúne
lo s
requisitos
y
méritos suficientes para
se r
sometido
a la
presentación pública
y
evaluación
por
parte
del
jurado examinador
que se
designe.
En la
ciudad
d e
Quito
a los 23
días
del mes de
abril
d el
2015.
Dra. Raquel Esmeralda Guillen Guil len
C.I: 171446597-6
Directora del Proyecto
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UNIVERSIDAD CENTR L DEL ECUADOR
FACULTAD D E ODONTOLOGÍA
INSTITUTO SUPERIOR D E INV ESTIGACIÓN Y POSGRADO
UNIDAD
D E
INVESTIGACIÓN GRAD UA CIÓN
Y
TITULACIÓN
CERTIFICADO D E APRO BACIÓN D E L TRIBUNAL
T E M A : ESTUDIO IN VITRO DE LA EFICACIA ANTIBACTERIAN A EN TRE
EL EXTRACTO ALCOHÓLICO DE CAESALPINIA SPINOSA (TARA) AL
100%
E
HIPOCLORITO
D E
SODIO
A L
5,25% SOBRE
EL
ENTEROCOCCUS
FAECALIS
AU TOR A: Adr iana Belén Haro Valencia
El presente Trabajo de Invest igación, luego de cumplir con todos los requerimientos
normat ivos , en nombre de l a UN IVERS IDAD CEN TRAL DEL ECUADOR,
F A C U L T A D
D E
O D O N T O L O G ÍA
es
aprobado;
por lo
tanto
el
jurado
que se
detalla
a
continuación, autoriza a la postulante presentación a efectos de la sustentación púb lica.
Quito, 23 de abril del
2015
P R E S ID E N T E D E L T R I B U N A L
Dr
Berio Ro ldan Chuqu imarca
Paucar
P R IM E R M I E M B R O D E L T R I B U N A L S E G U N D O M I E M B R O D E L T R I B U N A L
Dr
Osear
P lutarco S a las Bedón Dr Rober to Xav ier Romero Cazares
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vii
ÍNDICE DE CONTENIDOS
DEDICATORIA ............................................................................................................... iiAGRADECIMIENTO ..................................................................................................... iii
AUTORIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTUAL ............................................... iv
INFORME DE APROBACIÓN DEL TUTOR ................................................................ v
CERTIFICADO DE APROBACIÓN DEL TRIBUNAL ............................................... vi
ÍNDICE DE CONTENIDOS .......................................................................................... vii
RESUMEN ..................................................................................................................... xii
Palabras clave: IRRIGANTES, ENDODONCIA, EFECTO ANTIBACTERIANO,CAESALPINIA SPINOSA, TARA, HIPOCLORITO DE SODIO, ENTEROCOCCUSFAECALIS. .................................................................................................................... xii
"STUDY IN VITRO ANTIBACTERIAL BETWEEN THE EFFECTIVENESS OFALCOHOLIC EXTRACT CAESALPINIA SPINOSA (TARA) TO 100% E SODIUMHYPOCHLORITE 5.25% ON ENTEROCOCCUS FAECALIS" ................................ xiii
ABSTRACT .................................................................................................................. xiii
Keywords: IRRIGATING, ENDODONTIC, ANTIBACTERIAL EFFECT,CAESALPINIA SPINOSA, TARA, SODIUM HYPOCHLORITE, ENTEROCOCCUS
FAECALIS. ................................................................................................................... xiiiINTRODUCCIÓN ......................................................................................................... xiv
CAPÍTULO I .................................................................................................................... 1
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ................................................................... 1
1.2 OBJETIVOS: .............................................................................................................. 2
1.2.1 GENERAL: ............................................................................................................. 2
1.2.2 ESPECÍFICOS: ....................................................................................................... 2
1.3 Hipótesis: .................................................................................................................... 31.4 Justificación: ............................................................................................................... 3
CAPÍTULO II ................................................................................................................... 5
MARCO TEÓRICO ......................................................................................................... 5
2. Microbiota endodóncica ............................................................................................... 5
2.1 Vías de invasión microbiana ...................................................................................... 5
2.1.1Túbulos dentinarios .................................................................................................. 6
2.1.2 Defectos en el sellado marginal ............................................................................... 62.1.3 Infección periodontal ............................................................................................... 7
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2.1.4 Traumatismos .......................................................................................................... 7
2.1.5 Anacoresis ............................................................................................................... 7
2.2 Agresión microbiana................................................................................................... 8
2.2.1 Factores que afectan la colonización: ...................................................................... 8
2.2.2 Factores que afectan a la capacidad de producir daño............................................. 9
2.2.3 Respuesta del hospedador ........................................................................................ 9
2.3 Tipos de infecciones endodónticas ........................................................................... 10
2.3.1 Infecciones intraradiculares primarias ................................................................... 10
2.3.2 Composición de la microbiota endodóncica primaria ........................................... 10
2.3.3 Infecciones intraradiculares secundarias ............................................................... 11
2.3.4 Infecciones extraradiculares .................................................................................. 13
2.4 Fracaso en el tratamiento endodóncico .................................................................... 14
2.4.1 Enterococcus .......................................................................................................... 15
2.4.2 Enterococcus faecalis ............................................................................................ 16
2.5 Irrigantes en endodoncia ........................................................................................... 21
2.5.1 Irrigación e importancia en Endodoncia ................................................................ 22
2.5.2 Reseña histórica ..................................................................................................... 23
2.5.3 Requisitos de un irrigante ...................................................................................... 24
2.5.4 Soluciones para irrigación del conducto radicular ................................................ 25
CAPÍTULO III ............................................................................................................... 35
3. METODOLOGÍA ....................................................................................................... 35
3.1 Diseño de la investigación ........................................................................................ 35
3.2 Muestra ..................................................................................................................... 36
3.3 Criterios de inclusión ................................................................................................ 36
3.4 Criterios de exclusión ............................................................................................... 37
3.5 Definición de variables e indicadores (Tabla#2) ...................................................... 37
3.6 Procedimiento ........................................................................................................... 38
3.6.1 Soluciones de estudio: ........................................................................................... 38
3.6.2 Obtención de la muestra: ....................................................................................... 41
3.6.3 Preparación del inoculo estandarizado y siembra de las muestras: ....................... 42
3.6.2 Evaluación de la susceptibilidad del Enterococcus faecalis frente al extractoalcohólico de C. spinosa (Tara) al 100% mediante halos de inhibición. ........................ 43
3.6.3 Evaluación del efecto de sustantividad del extracto alcohólico de C. spinosa (Tara)al 100% sobre el Enterococcus faecalis en determinado tiempo: 48hrs y 72 hrs. ......... 45
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3.6.4 Recolección de datos ............................................................................................. 48
CAPÍTULO IV ............................................................................................................... 49
RESULTADOS .............................................................................................................. 49
4.1 Compilación de resultados........................................................................................ 49
4.2 Análisis estadísticos descriptivos ANOVA .............................................................. 50
4.3 Prueba T Student: comparación de medias por solución en cada tiempo deincubación. ...................................................................................................................... 51
4.4 Prueba T Student: comparación de medias por tiempo de incubación en cadasolución ........................................................................................................................... 53
4.5 Discusión .................................................................................................................. 57
CAPÍTULO V ................................................................................................................ 61
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ............................................................. 615.1 Conclusiones ............................................................................................................. 61
5.2 Recomendaciones ..................................................................................................... 61
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ........................................................................... 62
ANEXOS ........................................................................................................................ 66
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ÍNDICE DE IMAGENES
Imagen 1: Soluciones de estudio .................................................................................... 38
Imagen 2: Vainas maduras de C. spinosa ....................................................................... 39Imagen 3 Extracto de tara 100% .................................................................................... 39
Imagen 4: NaOCl 100% ................................................................................................. 40
Imagen 5: Solución estéril (control negativo) ................................................................ 41
Imagen 6: Incubación a 37°C por 48hrs(a) Toma de colonias puras de E. faecalis (b)
Hisopo con suspensión de E. faecalis (c) Concentración de bacterias ajustada a escala
Mc Farland N°0,5 mediante densidad óptica de la solución (d) Inoculación de la cepa
estandarizada en agar Mueller Hinton (e)....................................................................... 43
Imagen 7: Discos de papel filtro (a) Soluciones de estudio y micropipeta con 25 µl de
medida (b) Disco de papel filtro empapado en 25 µl de extracto de tara 100% (c)
Colocación de los discos en las placas inoculadas con E. faecalis (d) Placas con discos
impregnados en las diferentes sustancias de estudio listas para incubación(e) .............. 45
Imagen 8: Halos de inhibición de cada sustancia a las 24 hrs (a) Medición del halo de
inhibición obtenido por el extracto de C. spinosa 100% con regla milimétrica (b) ....... 45
Imagen 9: Discos de papel filtro con 25 µl de extracto de C. spinosa 100% (a) Discos
colocados con cada sustancia en la caja Petri con medio de crecimiento agar Mueller
Hinton (b) Cajas Petri listas con sus discos y sustancias de estudio para incubarse (c) . 46
Imagen 10: Halos de inhibición obtenidos transcurrido 48 hrs (a) Medición de halos con
regla milimétrica (b) ....................................................................................................... 47
Imagen 11: Medias de las soluciones en 24, 48 y 72 horas ............................................ 56
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ÍNDICE DE TABLAS
Tabla 1: Recolección de datos ........................................................................................ 35
Tabla 2: Variables e indicadores .................................................................................... 37Tabla 3: Datos recopilados de los halos de inhibición obtenidos con cada sustancia
estudiada ......................................................................................................................... 50
Tabla 4: Estadísticos descriptivos ANOVA ................................................................... 51
Tabla 5: Comparación de medias obtenidas por cada solución en los diferentes tiempos
de incubación .................................................................................................................. 52
Tabla 6: T Student para igualdad de medias por solucion .............................................. 53
Tabla 7: Comparación de medias obtenidas por cada solución en diferentes tiempos .. 55
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
Autora: Adriana Belén Haro Valencia
“ESTUDIO IN VITRO DE LA EFICACIA ANTIBACTERIANA ENTRE ELEXTRACTO ALCOHÓLICO DE CAESALPINIA SPINOSA (TARA) AL 100% E
HIPOCLORITO DE SODIO AL 5,25% SOBRE EL ENTEROCOCCUSFAECALIS”
RESUMEN
Se realizó un estudio in vitro de la eficacia antibacteriana entre el extracto alcohólico de
Tara 100% e hipoclorito de sodio 5,25% sobre el E. faecalis. Embebiendo sensidiscos
con 50uL de cada solución y colocándolos en medios de cultivo Mueller Hilton
previamente preparados con colonias jóvenes de E. faecalis ATCC 29212, incubando
las muestras a 37°C de 24 a 72 horas. Resultados obtenidos en halos inhibitorios
demostraron que ambas soluciones fueron capaces de producir inhibición del
crecimiento bacteriano; siendo durante las primeras 24 h el NaOCl 5,25% más efectivo
en comparación con el extracto de Tara 100%. Adicional a esto, se investigó el efecto
de sustantividad de las soluciones en el transcurso de 48 y 72 h; encontrando que el
extracto de Tara 100% posee un efecto antimicrobiano mayor y prolongado en contraste
con el NaOCl 5,25%, el cual presentó un efecto antibacteriano menor.
Palabras clave: IRRIGANTES, ENDODONCIA, EFECTO ANTIBACTERIANO,
CAESALPINIA SPINOSA, TARA, HIPOCLORITO DE SODIO, ENTEROCOCCUS
FAECALIS.
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
SCHOOL OF DENTISTRY
Author: Adriana Belén Haro Valencia
"STUDY IN VITRO ANTIBACTERIAL BETWEEN THE EFFECTIVENESS OF
ALCOHOLIC EXTRACT CAESALPINIA SPINOSA (TARA) TO 100% E
SODIUM HYPOCHLORITE 5.25% ON ENTEROCOCCUS FAECALIS"
ABSTRACT
An in vitro study of the antibacterial efficacy between the alcoholic 100% Tara extract
and 5.25% sodium hypochlorite on E. faecalis was performed. Embedding sensidiscs
with 50uL of each solution and placing in culture media prepared with Mueller Hilton
previously young colonies of E. faecalis ATCC 29212, incubating the samples at 37 ° C
for 24 to 72 hours. Results obtained in inhibitory halos showed that both solutions were
able to produce inhibition of bacterial growth; still during the first 24 h 5.25% NaOCl
more effective compared to 100% Tara extract. In addition to this, the effect of
substantivity of the solutions during 48 and 72 h was investigated; finding that the
extract of Tara has 100% more prolonged antimicrobial effect in contrast to the 5.25%
NaOCl, which showed a lower antibacterial effect
Keywords: IRRIGATING, ENDODONTIC, ANTIBACTERIAL EFFECT,
CAESALPINIA SPINOSA, TARA, SODIUM HYPOCHLORITE, ENTEROCOCCUS
FAECALIS.
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xiv
INTRODUCCIÓN
El éxito en el tratamiento de conductos se encuentra asociado con la reducción de la
carga bacteriana endodóncica. Para asegurar dicho éxito, estudios in vitro y la prácticaclínica han demostrado que únicamente la instrumentación mecánica no es suficiente
para eliminar los microorganismos presentes en los conductos de manera completa y
definitiva. Debido a esto es necesario emplear irrigantes químicos los cuales han sido
usados a lo largo de los años para obtener una desinfección del conducto radicular (Rico
Romano, Córdoba del Moral, Mena Alvarez, Vera Morós, Garrido Lapeña, &
Rodríguez Arrevola, 2012).
(Miliani, Lobo, & Morales, 2012), refieren que una adecuada irrigación
intraconducto consiste en la aplicación de una o más soluciones intraconducto antes,
durante y después de la preparación biomecánica para lograr una reducción de la carga
bacteriana, limpieza del sistema de conductos y así garantizar un tratamiento exitoso.
Estudios realizados por (Pérez Alfayate, Díaz-Flores García, Algar Pinilla, Valencia
de Pablo, Estévez Luaña, & Cisneros Cabello, 2013) demostraron que las diversas
formas de presentación de las patologías pulpares pueden tener etiologías microbianas
variadas; debido a que identificaron de 15 a 30 especies en el conducto infectado, de
más de 500 especies que se encuentran en la cavidad oral y probablemente sean las
causantes de la mayoría de lesiones periradiculares en humanos.
Existen microorganismos que de una u otra forma persisten y resisten a la
desinfección intraconducto, a causa de que no se efectúa una minuciosa limpieza y
preparación de la pieza dentaria, empleando un irrigante que proporcione una completa
desinfección y así evitar que se provoque una infección periapical crónica. Uno de estos
microorganismos que están relacionados con esta infección de conducto debido a su
capacidad de supervivencia luego de la terapia endodóncica es el Enterococcus faecalis,
especie encontrada en mayor prevalencia en el 90% de casos en dientes endodonciados
relacionados con el fracaso del tratamiento (Pérez Alfayate, et al., 2013).
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xv
(Wang, Zhang, Chu, & Zhu, 2012), demostraron que el E. faecalis es la especie más
común en dientes con periodontitis apical crónica en un 38% de las muestras analizadas.
De igual manera (Pardi, Guilarte , Cardozo, & Briceño, 2009), indicaron que de 20
dientes con fracaso del tratamiento endodóncico el 60% evidenciaron la prevalencia de
esta especie.
Por otro lado, (Espinel Pinzón, García Romero, Olarte Collazos, Barajas
Villamizar, & Barrientos Sánchez, 2009) indicaron en su estudio que la remoción del E.
faecalis luego de la preparación rotatoria e irrigación con hipoclorito de sodio 5%
complementándolo con EDTA 1,7% fue poco favorable, ya que determinaron que
ninguna de estas soluciones empleadas erradican totalmente esta bacteria.
La capacidad de supervivencia que posee el E. faecalis se le atribuye a la difícil
erradicación del sistema de conducto radicular; esto se debe a que es capaz de
permanecer dentro de los túbulos dentinarios invadiendo y colonizando zonas profundas
por lo cual, dicha bacteria resiste a la acción quimio mecánica endodóncica, formando
biopelículas en los conductos dentinarios, logrando permanecer viva sin necesidad de
obtener nutrientes a diferencia de otras especies. Incluso, sobrevive luego de la acción
antimicrobiana de medicamentos intraconducto como el hidróxido de calcio,
permaneciendo intacta en un pH altamente alcalino que normalmente inhibe a otras
bacterias; persiste a condiciones ambientales adversas y variables como la falta de
nutrientes entrando en un estado de inanición y de supervivencia por tiempo prolongado
luego de culminado el tratamiento de conducto. Responsabilizando así a esta bacteria al
restablecimiento de la infección o por ende fracaso endodóncico a futuro (Cohen &
Hargreaves, 2011).
Hoy en día varios trabajos de investigación son realizados en todo el mundo, con la
finalidad de encontrar una alternativa a los diversos tratamientos de patologías en el ser
humano y por ende patologías estomatológicas no son la excepción; debido a ello se
está otorgando mucha prioridad al estudio de las plantas medicinales y la infinidad de
beneficios que estas nos pueden brindar.
Por esto, investigaciones realizadas por (Escobar Bobadilla & Chávez Castillo,2008) demuestran que el extracto alcohólico del fruto de Caesalpinia spinosa “Taya” a
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xvi
diversas concentraciones posee actividad antibacteriana sobre el Corynebacterium
diphtheriae, obteniendo mayor inhibición de dicha bacteria a una concentración del
100%, incluso mayor inhibición que los halos obtenidos con penicilina y eritromicina.
Huarino Acho & Ramos Perfecto (2012), también demostraron el efecto
antibacteriano que posee la Caesalpinia spinosa sobre la flora salival mixta,
concluyendo que su mayor efecto inhibitorio es directamente proporcional a la
concentración que posea dicho extracto.
De igual manera otra investigación indicó el efecto del extracto de Caesalpinia
spinosa al 60% sobre el Enterococcus faecalis, el cual indicó efectividad antibacteriana
mayor comparándolo con el hipoclorito de sodio al 5,25% (Bornaz Acosta, Bornaz
Arenas, & Bornaz Arenas, 2013).
En consecuencia a estas investigaciones, el objetivo de este estudio es encontrar
una opción a las soluciones irrigantes químicas usadas hoy en día por el profesional
odontólogo; una solución irrigante, la cual cuente con propiedades antibacterianas y
menores o nulos efectos adversos para nuestros pacientes por ser una sustancia natural,
como es la Caesalpinia spinosa “tara”, planta que está siendo analizada en diversas
especialidades médicas y odontológicas debido a que sus propiedades van desde ser una
sustancia antibacteriana y coadyuvante para lograr una mejor cicatrización en el ámbito
médico y de mucho uso en el ámbito textil (Araujo Díaz & Salas Asencios, 2009).
(Escobar Bobadilla & Chávez Castillo, 2008) Por todos estos principios activos que
presenta la Caesal pinia spinosa “tara” es necesario realizar un estudio el cual nos ayude
a demostrar si puede existir efectividad antibacteriana sobre el Enterococcus faecalis,
bacteria a la cual se le atribuye como principal agente infeccioso del fracaso de lostratamientos de conducto.
Razón por la cual esta investigación se enfoca en estudiar in vitro la eficacia
antibacteriana entre el extracto alcohólico de Caesalpinia spinosa (Tara) 100% y el
hipoclorito de sodio 5,25% sobre el Enterococcus faecalis ATCC 29212; con el objetivo
de determinar mediante halos de inhibición la capacidad antibacteriana y efecto de
sustantividad que posee el extracto alcohólico de tara 100% e hipoclorito de sodio
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5,25% sobre el E. faecalis evaluando su actividad inhibitoria en determinados tiempos;
24h, 48h y 72h. Este estudio se llevará a cabo en la ciudad de Macas en el laboratorio
clínico Cabrera.
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CAPÍTULO I
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Según (Hilú & Balandrano Pinal, 2009), el éxito en Endodoncia depende de varios
factores, de entre ellos; el biomecánico se encuentra relacionado con el acceso, la
preparación y la obturación radicular, sin embargo dichos pasos no son suficientes para
conseguir un tratamiento endodóncico exitoso, debido a que deben de ser
complementados con una irrigación adecuada, medicaciones intraconducto y un sellado
coronal hermético; evitando así posibles micro filtraciones, contaminación y un fracaso
de la rehabilitación integral de la pieza dentaria..
Por esto, es necesario hacer mucho hincapié a la irrigación, la cual es base para un
tratamiento endodóncico exitoso debido a que tiene por objetivo principal disminuir la
carga bacteriana presente en el conducto radicular, ya que si no se emplea un correcto
irrigante existe la posibilidad de persistencia bacteriana y sea causa del fracaso
endodóncico.
Esta carga bacteriana está conformada por el Enterococcus faecalis; ya que
evidencias científicas de los últimos cinco años indican que el E. faecalis y Actinomyces
israelii se encuentran presentes en un gran porcentaje en los fracasos endodóncicos
(Rodríguez-Varo, Pumarola, & Canalda, 2009).
Otro estudio realizado por Wang, et al.,(2012); demuestran que la especie E.
faecalis es más común en dientes con periodontitis apical crónica persistente en un 38%.
De igual manera Pardi,et al.,(2009); demostraron que el 60% de 20 dientes con fracaso
en el tratamiento endodóntico se detectó E. faecalis, por lo cual se corroboró la
prevalencia del microorganismo.
(Sundqvist & Figdor, 2003), refieren que el E. faecalis posee características de
supervivencia tras enfrentarse a condiciones que para muchas bacterias normalmente es
letal, el E. faecalis posee la capacidad de sobrevivir y crecer en temperaturas altas,
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2
resistir a cambios de pH persistiendo a la acción de diversos irrigantes y medicación
intraconducto empleados para la desinfección del conducto radicular.
Por lo tanto, para obtener un tratamiento exitoso y sin complicaciones; el presente
trabajo se enfoca en estudiar la eficacia antibacteriana del extracto alcohólico de
Caesalpinia spinosa “tara” al 100%, como solución natural empleado como irrigante en
el tratamiento de conducto sobre la bacteria E. faecalis, debido a que dicha bacteria
como se ha demostrado en estudios se encuentra en la mayoría de dientes con fracaso de
tratamiento endodóncico.
Dicho esto es necesario identificar y establecer si dicha solución puede ser
antibacteriana al momento de preparar y limpiar el conducto radicular, para que de esta
forma nos ayude en gran mayoría a prevenir un fracaso y no exista una periodontitis
periapical crónica persistente. Y de igual manera encontrar una alternativa a las
soluciones irrigantes químicas usadas hoy en día, debido a que no existe un irrigante
nuevo en el mercado odontológico que sea una alternativa al uso de los irrigantes
frecuentemente usados como lo son el hipoclorito de sodio, clorhexidina, etc.
1.2 OBJETIVOS:
1.2.1 GENERAL:
Evaluar in vitro mediante halos de inhibición la capacidad antibacteriana del
extracto alcohólico de Caesalpinia spinosa (Tara) al 100 % sobre el Enterococcus
faecalis ATCC 29212.
1.2.2 ESPECÍFICOS:
Identificar el efecto antibacteriano mediante halos de inhibición producidos por
el contacto del extracto de C. spinosa (Tara) al 100 % sobre el Enterococcus
faecalis ATCC 29212 y del Hipoclorito de sodio al 5,25%.
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Comparar el efecto antibacteriano del extracto alcohólico de C. spinosa (Tara) al
100% con relación al Hipoclorito de sodio al 5,25% sobre el Enterococcus
faecalis ATCC 29212.
Determinar si el extracto alcohólico de C. spinosa (Tara) al 100% y el
Hipoclorito de sodio al 5, 25% poseen efecto de sustantividad, evaluando su
actividad inhibitoria en determinados tiempos; 48h y 72h.
1.3 Hipótesis:
Resultados de investigaciones han demostrado la capacidad antibacteriana del
extracto de Caesalpinia spinosa (Tara) a diferentes concentraciones, por lo que es probable que esta sustancia posea similar o mayor efecto antibacteriano que el
Hipoclorito de sodio 5,25%.
1.4 Justificación:
De acuerdo con la Asociación Americana de Endodoncistas; lo que saca de un
tratamiento de conducto puede ser más importante que lo que se coloca. Por lo tanto, uncorrecto diagnóstico sumado a una buena biopreparación no va a garantizar una
reducción de la carga bacteriana, ya que el vaciamiento y ensanchamiento del conducto
y una medicación intraconducto por si solas no va a mitigar dicha carga bacteriana;
debido a esto, es necesario emplear un irrigante adecuado, el cual nos asegure una
reducción microbiana y de esta manera conseguir una terapia endodóncica exitosa y por
ende no llevarnos a un fracaso seguro (Estrela, 2005).
Hoy en día existen irrigantes y desinfectantes de conducto que cuentan con la
mayoría de propiedades para llegar probablemente a ser un irrigante ideal; pero no son
eficaces al cien por ciento, ya que estudios indican la prevalencia de microorganismos
presentes en el interior del conducto radicular durante o después del tratamiento o a su
vez resistencia bacteriana llevando de esta manera al fracaso endodóntico seguro y
prolongando así el bienestar y salud integral de los pacientes.
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Uno de estos microorganismos es el Enterococcus faecalis ya que en diversos
estudios ha sido relacionado con los fracasos endodónticos y de igual manera es la
especie encontrada con mayor frecuencia en los conductos de dientes ya tratados, con
prevalencias que rondan el 90% de los casos (Pérez Alfayate, Díaz-Flores García, Algar
Pinilla, Valencia de Pablo, Estévez Luaña, & Cisneros Cabello, 2013).
Este hecho demuestra que dicha bacteria es capaz de resistir luego de realizado un
tratamiento de conducto, como también puede permanecer ahí desde el inicio del
tratamiento y prevalecer gracias a su capacidad de sobrevivencia en relación con otras
bacterias.
Este trabajo de investigación tiene como objetivo determinar la acción
antibacteriana del extracto alcohólico de Caesalpinia spinosa “tara” al 100 % como
sustancia natural irrigante, debido a que diversos estudios han dado prioridad a esta
planta la cual ofrece propiedades antibacterianas, de la cual se podría obtener un gran
beneficio para así poder optar por una nueva alternativa terapéutica al momento de
emplear soluciones irrigantes en el tratamiento de conducto y disminuir efectos
adversos que otras sustancias químicas aportan, así como también aminorar el costo que
significa tanto al paciente como al profesional; y sobretodo evitar que el Enterococcus
faecalis colonice y se desarrolle en el hospedador conllevando a un fracaso
endodóntico.
De igual manera este estudio se enfoca en conseguir un irrigante que brinde una
seguridad de desinfección, fácil disponibilidad y uso; para realizar un tratamiento eficaz
en un tiempo adecuado.
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CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO
2.
Microbiota endodóncica
En la cavidad oral existe una gran diversidad de la microbiota endodóncica
pudiendo identificarse desde virus, hongos, arqueas y protozoos; pero en su mayor
prevalencia y predominio a las bacterias (Cohen & Hargreaves, 2011).
Desde el punto de vista microbiológico la cavidad bucal cuenta con diversas
especies de microbiota que van de 500-600 especies; de las cuales en cada ser humano
han sido identificadas entres 50 a 150 especies (Canalda Shali & Brau Aguadé, 2006).
Normalmente existen bacterias Gram positivas y negativas respectivamente, las
cuales luego de realizado el tratamiento endodóncico prevalecen; como lo son las Gram
positivas facultativas o anaerobias como estreptococos, P. micra, Actinomyces,
Propionibacterium, P. alactolyticus, E. faecalis, lactobacilos y Olcenella uli. Dicha
microbiota luego de efectuado el tratamiento endodóncico quimio mecánico poseencapacidades de supervivencia y adaptabilidad prevaleciendo de esta manera bajo
condiciones ambientales adversas; la destrucción total o parcial de estos
microorganismos determina de cierta manera la inflamación de los tejidos periapicales o
conllevando a un daño más grave como pudiera ser una cirugía periapical o la
enucleación de la pieza dentaria. (Cohen & Hargreaves, 2011).
2.1 Vías de invasión microbiana
La microbiota presente en la cavidad oral puede optar diversas vías de entrada hacia
la cavidad pulpar, al ser estéril y encontrarse aislada de contaminación bacteriana
gracias a barreras mecánicas como las propias estructuras dentarias; pero cuando esta
integridad se llega a alterar o romper por diferentes causas existe la posibilidad de que
una infección pulpar ocurra dependiendo su vía de entrada; la magnitud de la patología
que se llegue a instaurar será de manera lenta o rápida. Existen diferentes vías de
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invasión que permite a los microorganismos colonizar el sistema de conductos (Cohen
& Hargreaves, 2011).
2.1.1Túbulos dentinarios
Cuando la integridad del esmalte y dentina han sido afectados, la contaminación
bacteriana es inminente, conllevando a una exposición pulpar y por ende una infección.
Debido a la permeabilidad que poseen los túbulos dentinarios y su forma cónica que
recorre toda la dentina (Cohen & Hargreaves, 2011). Poseen un diámetro suficiente para
el paso de bacterias, que alcanzan la pulpa dentaria por multiplicación bacteriana, mas
no por desplazamiento propio, pero llega a ser facilitada su progresión debido a la
presión ejercida por los materiales de restauración o impresión utilizados y al momento
de la masticación en la cual se ejerce presión sobre las piezas dentarias, llegando a ser
de esta manera la causa más probable de la infección pulpar (Canalda Shali & Brau
Aguadé, 2006).
2.1.2 Defectos en el sellado marginal
La filtración de bacterias puede llegar a ser posible debido a la mala utilización de
materiales de restauración, facilitando el paso de bacterias al interior de la cámara
pulpar por medio de los túbulos dentinarios; debido a que no se ha empleado un método
de adhesión con un sellado óptimo, permitiendo así a las bacterias invadir los túbulos y
por ende a la pulpa dentaria. Los defectos del sellado marginal es una de las causas por
las cuales la rehabilitación integral de la pieza dentaria colapsa y de igual manera ocurreun fracaso en el tratamiento de conductos, ya que un sellado coronal inadecuado
conlleva a la filtración y contaminación total de los conductos radiculares tratados.
Dependiendo de la calidad de obturación del conducto radicular y los materiales
empleados, será perceptible la presencia de una afectación periapical (Canalda Shali &
Brau Aguadé, 2006).
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2.1.3 Infección periodontal
La comunicación que existe entre el tejido pulpar y el tejido periodontal permite el
intercambio de nutrientes y un sin número de microbiota, la cual puede llegar a causar
una lesión pulpar gracias a la relación anatómica pulpa-periodonto; las bacterias pueden
ingresar al interior de la cámara pulpar a través de los conductos laterales o accesorios
de menor tamaño que el foramen apical, resultando de esta correlación una infección
secundaria apical debido a una patología periodontal existente (Canalda Shali & Brau
Aguadé, 2006).
2.1.4 Traumatismos
Existen un sin número de causas las cuales exponen la cavidad pulpar directamente
con la cavidad oral; pudiendo ser lesiones cariosas, atrición, bruxismo, grietas, fisuras,
fracturas, iatrogenias, etc. Cuando se presentan traumatismos dentales comprometiendo
no solo esmalte incluso dentina o fractura de la corona dental y/o raíz, existe una clara y
gran vía de ingreso para los microorganismos presentes en la cavidad oral, debido a que
se encuentra en exposición túbulos dentinarios y en casos graves pulpa dentaria; en la
cual los microorganismos invaden y se manifiestan con patologías a mediano o largo
plazo dependiendo de la complejidad del traumatismo y del tipo de paciente afectado
(Liébana Ureña, 2002). Pacientes niños y jóvenes son más susceptibles a sufrir
traumatismos dentarios al estar en actividad constante y deportes de contacto y de igual
manera poseen túbulos de mayor diámetro a diferencia de pacientes adultos y edad
avanzada los cuales son más probables a sufrir de bruxismo en la cual existe una
exposición de túbulos dentarios pero estos poseen un diámetro menor debido a su
calcificación dentaria (Canalda Shali & Brau Aguadé, 2006).
2.1.5 Anacoresis
Este mecanismo de infección consiste en la invasión y colonización de
microrganismos transportados a través del torrente sanguíneo hacia la pieza dental
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(Liébana Ureña, 2002). Esta infección se da lugar cuando el diente presenta defectos en
su sistema de defensa como puede ser una pulpa necrótica o en una sobre
instrumentación durante el tratamiento de conducto, lesionando tejido periodontal
permitiendo anidar en el conducto radicular bacterias pudiendo de esta manera
multiplicarse y presentar patologías durante un tratamiento de conducto o inclusive
luego de rehabilitada integralmente la pieza dental (Cohen & Hargreaves, 2011).
2.2 Agresión microbiana
Una invasión microbiana al tejido pulpar y periodontal provoca una inflamación de
estos tejidos dependiendo de la agresión microbiana y de diferentes factores como las
características de los microorganismos relacionados con este daño, así como los factores
de virulencia que afectan a la colonización y su capacidad de producir daño (Liébana
Ureña, 2002).
2.2.1 Factores que afectan la colonización:
2.2.1.1 Puerta de entrada y dosis infecciosa
De acuerdo a la puerta de entrada disponible para los microorganismos será
proporcional a la cantidad de bacterias que colonicen la pulpa dentaria, debido a esto la
respuesta inflamatoria será aguda o crónica (Canalda Shali & Brau Aguadé, 2006). Por
lo tanto una respuesta inflamatoria aguda dependerá de una vía de acceso mayor hacia el
tejido pulpar y por ende una mayor cantidad de microorganismos en poco tiempo; al
contrario una respuesta inflamatoria crónica se presentara al existir un ingreso de menor
cantidad de microorganismos hacia el tejido pulpar por una puerta de entrada menor en
un periodo de tiempo largo (Liébana Ureña, 2002). En resumen en cuanto a mayor sea
la proliferación de bacterias en menor tiempo se obtendrá una respuesta inflamatoria
mayor.
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2.2.1.2 Adherencia y proliferación local
De acuerdo con la estructura y morfología de los microorganismos presentes en
la cavidad pulpar y sus conductos radicular, laterales las bacterias se encuentran de una
manera protegidas del sistema de defensa del hospedador y durante el tratamiento de
conducto ya que utilizan dichos conductos para de esa manera adherirse y proliferar
dentro del diente (Liébana Ureña, 2002).
2.2.2 Factores que afectan a la capacidad de producir daño
Independientemente de la capacidad que posean los microorganismos para ingresar,
adherirse y proliferar dentro de la pieza dentaria, es de suma importancia la suficiencia
con la que las bacterias dentro del conducto y cámara pulpar ejercen su actividad
metabólica; la cual demuestra el nivel de virulencia de las bacterias. Existen bacterias
las cuales ejecutan un mayor daño pulpar que otras liberando mejor o mayor cantidad de
exotoxinas, endotoxinas, un sin número de productos metabólicos los cuales ayudan a
que la lesión pulpar aguda y que sobrepase la capacidad de defensa del hospedador
pudiendo sobrepasar su efecto bactericida y bacteriostático. Gracias a la acción
metabólica de los microorganismos se determina su virulencia (Canalda Shali & Brau
Aguadé, 2006).
2.2.3 Respuesta del hospedador
Al acceder la microbiota por cualquiera de las diferentes vías de entrada hacia eltejido pulpar y posteriormente liberar productos metabólicos se presenta una respuesta
inflamatoria, la cual se denomina pulpitis; pudiendo ser una pulpitis reversible o
irreversible. El tipo de pulpitis que se manifieste dependerá de la capacidad de defensa
del hospedador, proporcionando así una aposición de dentina terciaria la cual va a servir
como barrera ante el ingreso de microorganismos hacia la pulpa dental. Otro factor es la
patogenicidad de las bacterias, esto depende en gran parte y de sobremanera el tipo de
bacterias y sus productos metabólicos liberados en el tejido pulpar lo cual va a influir enla respuesta inflamatoria (Liébana Ureña, 2002).
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2.3 Tipos de infecciones endodónticas
Según Torabinejad & Walton (2010) las infecciones endodónticas pueden
clasificarse de acuerdo a la localización anatómica que estas presenten en infecciones
extraradiculares e intraradiculares; subclasificandose las infecciones intraradiculares en
3 tipos: primarias, secundarias y persistentes.
2.3.1 Infecciones intraradiculares primarias
Este tipo de infecciones son conocidas también como infección inicial o virgen,
debido a que los microorganismos invaden y colonizan el tejido pulpar necrótico desde
el primer momento provocando una infección intraradicular, estos microorganismos
pueden ser los mismos que en el principio colaboraron con la necrosis bacteriana o son
los primeros en llegar hasta la pulpa necrótica y de esta manera aprovechan el ambiente
necrótico, liberando productos metabólicos produciendo dicha infección (Cohen &
Hargreaves, 2011).
En este tipo de infecciones se encuentra una microbiota entre 20-30 especies de las
cuales la mayoría son anaerobias, aunque puede existir especies facultativas o
microaerófilas (Torabinejad & Walton, 2010).
2.3.2 Composición de la microbiota endodóncica primaria
Torabinejad & Walton (2010) refieren que este tipo de infeccion primaria
intraradicular evidencia una microbiota variada independientemente del tipo de
periodontitis apical que se presente, la cual esta compuesta por generos de bacterias
gram negativas siendo estas las más prevalentes: Dialister, Treponema, Prevotella,
Fusobacterium, Tannarella, Porphyromonas, Haemophilus, Capnocythopaga y
Neisseria.
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Pero ademas de bacterias gram negativas se encuentra bacterias gram positivas en
esta flora endodóncica mixta, especies de bacterias las que se identifican en un mayor o
igual porcentaje que las bacterias gram negativas mas prevalentes; entre estas especies
se identifican Actinomyces, Steptococcus, Propionibacterium, Peptostreptococcus,
Enterococcus y Pseudoramibacter (Torabinejad & Walton, 2010).
Liébana (2002), refiere que dependiendo de la vía de entrada que los
microorganismos utilicen para llegar hasta la pulpa vital, varía la composición de la
microbiota, siendo de esta manera a causa de caries o traumatismos, exponiendo así la
pulpa dental a las bacterias más prevalentes que son: cualquier bacteria presente en la
cavidad oral, especialmente bacterias cariogénicas como estreptococos del grupo
viridans, Lactobacillus spp., Actynomices spp.,Propionibacterium spp. y bacterias gram
negativas. Al ingresar las bacterias a traves de un daño o patología en el tejido
periodontal las más prevalentes son: Peptostreptococcus spp., Streptococcus spp.,
Propionibacterium spp., Rothia dentocariosa, bacilos gramnegativos como especies de
Porphyromonas y Campylobacter.
En resumen los microorganismos mas frecuentemente aislados en los conductos
radiculares según Liébana (2002) son:
Staphylococcus aureus Estreptococos orales
Peptostreptococcus spp. Actimonyces spp.
Eubacterium spp. Capnocytophaga spp.
Campylobacter spp. Eikenella corrodens.
Porphyromonas spp. Prevotella spp.
Mitsuokella dentalis Selenomas spp. Lactobacillus spp. Veillonella spp.
Enterococcus spp. Treponemas orales
2.3.3 Infecciones intraradiculares secundarias
Están provocadas por el ingreso de microorganismos que no se encontraban
presentes durante la infección primaria, los cuales ingresan al conducto radicular luego
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de una intervención profesional; es decir, entre cita y cita o inclusive después de obturar
el conducto radicular. De cualquier forma los microorganismos presentes tendrán la
capacidad de adaptarse, sobrevivir y proliferar; dando así origen a la infección
secundaria pese al ambiente hostil en el cual se desarrollan (Cohen & Hargreaves,
2011).
2.3.3.1 Infecciones intraradiculares persistentes
Este tipo de infecciones como su nombre lo indica, son persistentes debido a que
los microorganismos que se encontraban en infecciones primarias o secundarias han
conseguido sobrevivir pese al empleo de medicamentos antibacterianos intraconducto y
culminado el tratamiento de conducto. Este tipo de infección intraradicular persistente
se asocia con el fracaso del tratamiento de conducto debido a dos causas; una de las
causas es que las bacterias invaden, colonizan y prolifera el interior del conducto
durante el momento de obturación del conducto radicular y otra de las causas se basa en
dientes que han sido tratados endodóncicamente mostrando un daño periapical
persistente podrá evolucionar en una infección intraradicular (Cohen & Hargreaves,
2011).
2.3.3.2 Composición de la microbiota endodóncica persistente o secundaria
Según (Cohen & Hargreaves, 2011) debido a que las infecciones intraradiculares
tanto secundarias como persistentes están íntimamente relacionadas con el fracaso del
tratamiento endodóncico, la microbiota de los conductos radiculares poseen dos
etiologías las cuales se resumen en microbiota presente en el conducto en la fase de
obturación radicular y microbiota en dientes tratados endodóncicamente.
Las bacterias que permanecen durante la fase de obturación y resultando ser las más
prevalentes y resistentes ante todo el proceso terapéutico realizado son pocas bacterias
gram negativas entre las cuales se encuentran bacilos anaerobios como Prevotella,
Campylobacter y F. nucleatum; de igual manera se encuentran especies gram positivaslas cuales son mucho más resistentes y obtenidas en mayor porcentaje luego de
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instrumentar o aplicar medicación durante el procedimiento endodóncico; siendo
frecuentes Streptococcus, Actinomyces, Propionibacterium, P. micra, E. faecalis,
lactobacilus y Olsenella (Cohen & Hargreaves, 2011).
Sin embargo, después de tratar los dientes endodóncicamente, se identifican
microorganismos en el conducto radicular y dientes tratados con enfermedad
postratamiento; al E. faecalis, Pseudoramibacter alactolyticus, Propionibacterium
propionicum, Filifactor alocis, Porphyromona gingivalis, Treponema denticola,
Prevotella intermedia, Candida albicans; resultando más prevalente el E. faecalis
identificado como el principal agente causal en los fracasos endodóncicos (Cohen &
Hargreaves, 2011).
2.3.4 Infecciones extraradiculares
Este tipo de infecciones están relacionadas con las infecciones intraradiculares
debido a la expansión del contenido bacteriano y sus microorganismos en los tejidos
periradiculares teniendo la posibilidad de manifestar una periodontitis apical la cual
puede ser controlada si el sistema de defensa del hospedador logra impedir que las
bacterias alcancen tejido óseo u otra zona anatómica; sin embargo el hospedador no
siempre va a lograr atenuar dicha microbiota debido a que se instaura una lesión
sobrepasando el área de tejido periapical ocasionando una infección extraradicular
(Cohen & Hargreaves, 2011).
Debido a que las bacterias de infección intraradicular ha invadido y ocasionado
lesiones extraradiculares la manifestación más común será un abceso apical agudo; sinembargo dependerá de la relación que tenga una infección intra y extraradicular para
establecer un método terapéutico. Si mantiene relación estos dos tipos de infecciones se
optara por un tratamiento endodóncico pero si no tiene relación alguna se procederá a
una cirugía endodóncica (Torabinejad & Walton, 2010).
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2.3.4.1 Composición de la microbiota endodóncica extraradicular
Una infección extraradicular puede ser dependiente o no de la existencia previa de
una infección intraradicular; cuando dicha infección es dependiente se manifiesta de
manera común con un abceso apical agudo. Cuando la infección intraradicular es
solucionada con tratamiento endodóncico o la extracción del diente, el sistema
defensivo del hospedero se hará cargo de la infección extraradicular; sin embargo
existen especies que logran persistir en todo este protocolo terapéutico, como el
Propionibacterium y A. israelii; esta bacteria comúnmente aislada en los tejidos
periapicales normalmente no responde a un tratamiento de conducto convencional
(Cohen & Hargreaves, 2011).
2.4 Fracaso en el tratamiento endodóncico
Cuando ocurre un fracaso en el tratamiento endodóncico, el retratamiento debe
constituirse en un trabajo completo de calidad y eficacia con el objetivo de obtener un
éxito; para lograr tal éxito es necesario un cuidado muy minucioso en la desinfección
radicular y erradicar la causa del fracaso endodóncico (Estrela, 2005).
El éxito o fracaso del retratamiento dependerá de si existe o no una lesión
periapical, de la desinfección y sellado íntegro que el profesional realice durante el
tratamiento (Estrela, 2005).
El fracaso del tratamiento se relaciona con la condición en la que la pulpa dentaria
se encontraba, la anatomía dentaria y la técnica con la que el diente fue tratado pararehabilitarlo integralmente. Cualquiera que fuera la causa del fracaso endodóncico, es
imprescindible el empleo de un irrigante; el cual nos brinde una reducción de la carga
microbiana evitando de sobremanera un posterior fracaso; ya que una de las causas
principales del fracaso endodóncico es la persistencia y resistencia de los
microorganismos presentes en el conducto radicular manifestándose con una lesión
periapical persistente (Canalda Shali & Brau Aguadé, 2006).
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Existen microorganismos que durante y después del tratamiento de conducto son
capaces de sobrevivir ante el empleo de soluciones y medicamentos intraconducto, pese
al estado de inanición en el que se encuentran; como el Enterococcus faecalis y Candida
albicans (Figdor & Gulabivala, 2011).
Siendo el E. faecalis una bacteria a la cual se le relaciona por su prevalencia y
frecuencia en las infecciones secundarias y con el fracaso del tratamiento endodóncico a
causa de su capacidad de supervivencia y viabilidad en medios hostiles; capacidad la
cual se basa en una fase de ayuno, pero sin perder su patogenicidad y posibilidad de
vida; mientras se aloja y forma biopelículas en los túbulos dentinarios evitando la
acción antibacteriana de la preparación quimio mecánica; pudiendo de esta manera
multiplicarse y manifestarse luego de un largo tiempo con una infección periapical
persistente (Cohen & Hargreaves, 2011).
2.4.1 Enterococcus
Son bacterias que pertenecían a los Streptococcus del grupo D, según la
clasificación de Lance Field en 1970; pero dicho género se aisló a partir del año 1984,
debido a estudios serológicos que determinaron diferencias genéticas entre estos
géneros. Los enterococos se dividen en 23 especies de las cuales muy pocas son
consideradas patógenas para el ser humano y de importancia clínica, debido a la
resistencia a medicamentos y su frecuencia en las infecciones nosocomiales; entre las
cuales se encuentran el E. faecalis, E. faecium, siendo estas especies las más frecuentes
en el tracto gastrointestinal, y E. gallinarum y E. casseliflavus, encontrados en menor
proporción (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009).
Estas bacterias se caracterizan por ser invasores oportunistas en pacientes por lo
general neonatos, inmunodeprimidos y de tercera edad; por lo que provocan
enfermedades sumamente graves como endocarditis y bacteriemias. Son responsables
de infecciones postoperatorias y septicemias (Díaz P, Rodríguez M, & Zhurbenko,
2010).
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2.4.2 Enterococcus faecalis
Son bacterias las cuales se las identifica normalmente en el tracto gastrointestinal,
son responsables de enfermedades mortales para el ser humano debido a sus
capacidades de supervivencia y resistencia a medicamentos y ambientes en los que se
encuentren colonizando; son capaces de sobrevivir inclusive por falta de nutrientes;
capaces de resistir temperaturas elevadas en presencia o no de oxígeno y medicamentos
de amplio espectro; de igual forma estudios moleculares indican su frecuencia en la
cavidad bucal en el surco gingival y lengua (Pérez Alfayate, Díaz-Flores García, Algar
Pinilla, Valencia de Pablo, Estévez Luaña, & Cisneros Cabello, 2013).
Por su presencia en la cavidad bucal se le atribuye como la principal causa del
fracaso del tratamiento endodóncico en un 90% de casos, manifestándose con una
infección periapical persistente luego del tratamiento de conducto y en un porcentaje
menor en infecciones periapicales primarias (Cohen & Hargreaves, 2011).
2.4.2.1 Historia
Pertenecía a los Streptococcus del grupo D según la clasificación de Lance Field y a
partir del año de 1984 debido a estudios serológicos se lo aisló y se formó el género
Enterococcus; genero al cual el E. faecalis pertenece como especie (Murray, Rosenthal,
& Pfaller, 2009).
2.4.2.2
Taxonomía
Enterococcus faecalis, se encuentra dentro de la familia Enterococcaceae del orden
Lactobacillales; es una especie perteneciente al género Enterococcus, de entre las 33
especies que presenta este género (Díaz P, Rodríguez M, & Zhurbenko, 2010) (Pérez
Alfayate, Díaz-Flores García, Algar Pinilla, Valencia de Pablo, Estévez Luaña, &
Cisneros Cabello, 2013).
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De entre todas estas especies el E. faecalis y E. faecium son las especies que más se
relacionan con la morbilidad y mortalidad del ser humano debido a su patogenicidad y
resistencia bacteriana en un 90% de los casos clínicos (Díaz P, Rodríguez M, &
Zhurbenko, 2010).
2.4.2.3 Fisiología
Los enterococos son bacterias cocos Gram positivos que se presentan aislados, en
parejas o cadenas cortas, inmóviles, no productoras de esporas, anaerobios facultativos
que fermentan la glucosa sin producir gas, por lo que resultan ser catalasa negativo
demostrando no presentar efervescencia en el momento de la identificación bacteriana,
de esta manera se puede cultivar en presencia o no de oxígeno a partir de 10-40°C,
resistiendo temperaturas altas de hasta 60°C durante 30 minutos; sobrevive en
condiciones ambientales hostiles como pH extremadamente alcalino, cloruro de sodio al
6,5%, sales biliares y detergentes (Pérez Alfayate, Díaz-Flores García, Algar Pinilla,
Valencia de Pablo, Estévez Luaña, & Cisneros Cabello, 2013).
2.4.2.4 Patogenicidad
Debido a la capacidad de resistencia y supervivencia adquirida frente a una gama
de medicamentos antimicrobianos y atravesar un estado de inanición por prevalecer en
ambientes hostiles con falta de nutrientes, el E. faecalis mantiene su patogenicidad, la
misma que aumenta dependiendo sus factores de virulencia y al tipo de pacientes que
afecte; siendo los más susceptibles pacientes neonatos, de tercera edad einmunodeprimidos debido que este microorganismo es un patógeno oportunista
(Quiñones Pérez, y otros, 2008).
El E. faecalis es responsable de varias enfermedades con un alto índice de
morbilidad y mortalidad en el ser humano; siendo de suma importancia clínica en el
ámbito odontológico debido a que se lo identifica con los fracasos de tratamientos de
conducto en un 90% y en el campo médico no es la excepción, debido a que esresponsable en un 83-90% de las infecciones nosocomiales (Pérez Alfayate, Díaz-Flores
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García, Algar Pinilla, Valencia de Pablo, Estévez Luaña, & Cisneros Cabello, 2013)
(Quiñones Pérez, y otros, 2008) (Suárez Pita, 2002).
La patogenicidad del E. faecalis asume varias enfermedades nosocomiales entre las
cuales se destacan: septicemia, infecciones de heridas quirúrgicas, infecciones del tracto
urinario, infecciones de piel y tejidos blandos, infecciones de oído medio, infecciones
relacionadas por catéter contaminado, peritonitis, vaginitis, infección del sistema
nervioso central e infección del prepucio (Quiñones Pérez, y otros, 2008).
2.4.2.5 Factores de virulencia
El E. faecalis presenta varios factores de virulencia los mismo que le permite
colonizar y desarrollarse en el hospedero, el dominio frente a otros microorganismos
presentes, la supervivencia ante el mecanismo de defensa propio del hospedador y la
presencia de patologías gracias a los productos metabólicos de la misma bacteria
(Kayaoglu & Ørstavik, 2004).
Estos factores se los resumen en los más importantes debido a que su virulencia no
es definida completamente; entre los cuales se encuentran (Kayaoglu & Ørstavik, 2004):
Sustancia de agregación: es una proteína superficial producida por el
plásmido, el cual otorga la capacidad al E. faecalis de ingresar y
adherirse a los tejidos del hospedador e internarse y sobrevivir al
sistema de defensa del hospedador.
Adhesinas y proteínas superficiales: se encuentran en la pared celular
de la bacteria en la que proteínas y adhesinas presentes permiten al
microorganismo adherirse a la matriz extracelular y de esta manera
formar biopelículas enterocócicas.
Feromonas sexuales: ayudan en la recepción de células donadoras
las cuales poseen plásmidos para inhibir una respuesta inflamatoria.
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Ácido lipoteicoico: es una sustancia la cual actúa ayudando a la
transferencia de plásmidos y formando agregados los cuales
contribuyen con la virulencia de la bacteria.
Producción de superóxido extracelular: el E. faecalis produce estos
superóxidos los cuales son radicales de oxígeno que intervienen en el
daño tisular y celular siendo responsables de las respuestas
inflamatorias.
Gelatinasa: esta metaloproteinasa interviene en la adherencia de la
bacteria en los túbulos dentinarios aunque estudios no lo manifiestan
completamente pero también ayuda en la supervivencia de la bacteria
ya que sobrevive reflejando ser una fuente de nutrientes gracias a la
acción de la gelatinasa.
Hialuronidasa: esta enzima actúa asistiendo la desintegración del
tejido tisular, aprovechando así una propagación bacteriana y de sus
productos metabólicos como toxinas; extendiendo el daño de los
tejidos del hospedador.
Citolisina: son enzimas originadas por el E. faecalis la cual interviene
como destructora de células del defensa y bacterianas, reduciendo de
igual manera la acción terapéutica antibacteriana y antinflamatoria;
repercutiendo una infección significativa.
2.4.2.6 Enterococcus faecalis y su relación con Endodoncia
Debido a que el E. faecalis resulta una gran amenaza para el tratamiento terapéutico
frente a diversos medicamentos antibióticos gracias a su resistencia bacteriana a
fármacos como la vancomicina; en el campo odontológico no es la excepción, por lo
que resulta una bacteria muy predominante y resistente al momento de erradicar un
proceso infeccioso periapical, en el cual es responsable dicha bacteria y sobre todo
resiste al tratamiento de conducto incluso con la aplicación de medicamentos
intraconducto y sustancias desinfectantes (Pérez Alfayate, Díaz-Flores García, Algar
Pinilla, Valencia de Pablo, Estévez Luaña, & Cisneros Cabello, 2013).
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La presencia de microbiota en endodoncia puede variar dependiendo del tipo de
infección intrarradicular que se presente, primaria, secundaria o persistente; pero no
obstante el E. faecalis se encuentra presente en cualquier tipo de infección intraradicular
a diferente porcentaje; identificándolo en mayor prevalencia y frecuencia en la
infecciones intrarradiculares persistentes (Cohen & Hargreaves, 2011).
Por la relación del E. faecalis con los diversos tipos de infecciones intraradiculares,
su resistencia bacteriana frente a medicamentos antibióticos y de conducto, su gran
capacidad de patogenicidad y su gran prevalencia en los fracasos de tratamientos de
conducto; es de suma importancia clínica una opción terapéutica dirigida a su
erradicación (Araujo Díaz & Salas Asencios, 2009) (Bornaz Acosta, Bornaz Arenas, &
Bornaz Arenas, 2013)
2.4.2.7 Resistencia de Enterococcus faecalis a medicamentos
Los Enterococcus al ser habituales en el tracto gastrointestinal del ser humano se
los identifica como patógenos oportunistas debido a que estudios indican que existen
especies de este género las cuales presentan resistencia a medicamentos antibióticos
como la vancomicina (Schell, y otros, 2014).
A consecuencia que este género presente una resistencia propia a varias opciones de
antibióticos como ampicilina y vancomicina, dicha firmeza se le atribuye a sus diversos
factores de virulencia entre los cuales se le atribuye a los plásmidos, sustancia de
agregación, gelatinasa, proteína superficial, citolisina, adhesinas y hialuronidasa; siendo
estos factores una gran importancia para la supervivencia del Enterococcus faecalis (Kayaoglu & Ørstavik, 2004) (Silva, y otros, 2013).
Debido a que el Enteroccocus faecalis posee una gran capacidad de virulencia y
presenta resistencia y supervivencia a medicamentos antibióticos como betalactámicos,
amino glucósidos, macrólidos, quinolonas, tetraciclinas y vancomicina (Schell, y otros,
2014). Los medicamentos intraconducto en el momento del tratamiento endodóncico no
son la excepción en el cual estudios demuestran que el hidróxido de calcio tiene una
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acción muy limitada frente a esta bacteria (Marques da Silva, Fagundes Tomazinho,
Aguiar Anele, Piotto Leonardi, & Baratto Filho, 2010).
De igual manera diversos estudios identifican que el Enterococcus faecalis es poco
o nada susceptible a la acción antimicrobiana de diversos medicamentos usados en la
terapia endodóncica tanto en la preparación biomecánica y obturación temporal o
definitiva, como: pastas antibióticas entre las cuales se encuentran Septomixine a base
dexametasona, Calcipulpe a base de hidróxido de calcio, Grinazole a base de
metronidazol y KRI-3 a base de paramonoclorofenol alcanforado (Rodríguez-Varo,
Pumarola, & Canalda, 2009).
De igual manera en el estudio realizado por (Rico Romano, Córdoba del Moral,
Mena Alvarez, Vera Morós, Garrido Lapeña, & Rodríguez Arrevola, 2012)
identificaron que no existen una acción antibacteriana fuerte en el empleo combinando
de la clorhexidina al 2% y el hipoclorito de sodio al 5,25% contra al E. faecalis.
2.5 Irrigantes en endodoncia
Durante el tratamiento de conducto el objetivo del profesional mediante la
Endodoncia es erradicar del conducto radicular bacterias las cuales llegan a causar
patologías periapicales; pero a través de la técnica mecánica no se obtiene una
eliminación completa, debido a la complejidad anatómica radicular que puede presentar
la pieza dentaria, esto impide de cierta forma no erradicar bacterias de su interior. Por lo
que se recurre al empleo de sustancias químicas, las cuales brinden el complemento al
tratamiento endodóncico para así lograr una disminución o eliminación aceptable de lacarga microbiana presente (Ballal, Kundabala, Acharya, & Ballal, 2007) (Miliani, Lobo,
& Morales, 2012).
Dichas sustancias químicas a emplear deben de contar con características que
determinen ser un irrigante ideal, siendo capaz de desinfectar la pieza dentaria de
sedimentos orgánicos e inorgánicos, no desecar las paredes dentinarias y sobre todo
contar con un resultado antimicrobiano eficaz (Balandrano Pinal, 2007) (Miliani, Lobo,& Morales, 2012).
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Hoy en día existen muchas sustancias las cuales se les considera un irrigante ideal y
es empleando en la terapia endodóncica, entre los cuales se encuentran el Hipoclorito de
sodio, clorhexidina, ácido etilendiaminotetraacético(EDTA) y MTAD una solución
compuesta por doxicicilina, ácido cítrico y un detergente tween 80. Estas soluciones son
las más comunes empleadas actualmente pero no cumplen con ser un irrigante
completamente efectivo debido a que poseen propiedades antibacterianas o actúan como
lubricante en el momento de la intervención endodóncica (Miliani, Lobo, & Morales,
2012).
2.5.1 Irrigación e importancia en Endodoncia
La irrigación consiste en la limpieza del conducto radicular con una o varias
sustancias o soluciones medicadas; teniendo como objetivo de irrigación mecánico:
buscando eliminar o disolver tejidos y desechos orgánicos e inorgánicos y lubricar el
conducto. Como objetivo biológico se pretende ejercer su efecto antimicrobiano (Cohen
& Hargreaves, 2011).
(Leonardo, 2005) refiere que es de mayor valor lo que se aísla del conducto
radicular que lo que ahí se pone; con esto se busca considerar a la preparación
biomecánica, en particular una irrigación de calidad que limpie y desinfecte las paredes
del conducto radicular sin provocar un daño en corto o largo plazo con las sustancias
que se involucren para conseguir dicho propósito (Hilú & Balandrano Pinal, 2009).
Es un hecho que los profesionales odontólogos hoy en día buscan en la terapiaendodóncica erradicar la patología periapical o evitar un fracaso futuro a través de la
desinfección y obturación ideal. Pero para conseguir este final ideal es necesario realizar
un limpieza y conformación de las paredes del sistema de conductos radiculares, con la
cual se asegura una preparación correcta de los conductos radiculares y por ende una
desinfección a través de la irrigación consiguiendo de esta manera eliminar o disminuir
la carga bacteriana y barrillo dentinario infectado (Cohen & Hargreaves, 2011).
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2.5.2 Reseña histórica
Mucho tiempo ha transcurrido desde que se empezó a emplear sustancias en el
conducto radicular buscando aislar los tejidos y residuos presentes en el interior del
conducto radicular; desde 1893 Schreir empleo potasio para eliminar tejido pulpar
necrótico; luego en 1915 Dakin uso aceites clorados y a partir desde entonces el uso del
hipoclorito de sodio al 0,5% era común en limpieza de heridas y se lo conoció como
fórmula de Dakin. Posteriormente en 1936 Walker admite que es necesario el uso de
una sustancia irrigante confiando en el requerimiento del agua clorada gracias a que
dicha sustancia desintegraba los tejidos y poseía acción bactericida (Rico Romano,
Córdoba del Moral, Mena Alvarez, Vera Morós, Garrido Lapeña, & Rodríguez
Arrevola, 2012) (Pérez Alfayate, Díaz-Flores García, Algar Pinilla, Valencia de Pablo,
Estévez Luaña, & Cisneros Cabello, 2013).
A partir de 1941, Grossman pondera al empleo de irrigantes en el tratamiento de
conducto combinando peróxido de hidrogeno e hipoclorito de sodio obteniendo de esta
forma una desinfección considerable debido a la efervescencia que se produce a cargo
del peróxido (Miliani, Lobo, & Morales, 2012).
Seidner en el año 1946, recurrió a un elemento de riego y aspiración para la
limpieza durante el tratamiento endodóncico. Posteriormente Richmann, en 1957 optó
por apostar por el ultrasonido en endodoncia, con el cual obtuvo resultados favorables
(Pérez Alfayate, Díaz-Flores García, Algar Pinilla, Valencia de Pablo, Estévez Luaña, &
Cisneros Cabello, 2013).
Rapela en 1958 observando que no tenía un acceso apto a los conductos empleódetergentes sintéticos como vehículo para los antibióticos para así lograr un mejor
acceso; en 1961, Stewart et al., añade el Glioxide, compuesto conformado por peróxido
de urea 10% el cual posee actividad antimicrobiana y glicerol como vehículo y a su vez
actúe como lubricante. En 1963, Ostby y Fehr manifestaron que la desmineralización
efectuada por el EDTA era proporcional al tiempo de aplicación, comprobando que
durante un tiempo de 5 minutos la dentina se desmineralizaba obteniendo una
profundidad de 20-30 µm (Leonardo, 2005).
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Stewart et al ., en 1969 plantearon el empleo de la técnica telese Rc-prep
conformada por EDTA 15%, peróxido de urea 10% y una base de carbowax soluble en
agua. Más tarde; Parsons en 1980, inquirió en el uso de la clorhexidina como solución
irrigante en el tratamiento de conducto, analizando la sustantividad y efecto
antibacteriano de la misma hasta por 7 días de su empleo. (Rico Romano, Córdoba del
Moral, Mena Alvarez, Vera Morós, Garrido Lapeña, & Rodríguez Arrevola, 2012)
(Miliani, Lobo, & Morales, 2012).
Goldmann et al., utilizaron el ácido cítrico en 1988 como sustancia irrigante del
conducto radicular pero se evidencio que producía una eliminación de la capa de
barrillo dentinario al igual que el empleo del EDTA. El hidróxido de calcio fue tomado
como una opción a los irrigantes en el año de 1991, pero estudios realizados por Morgan
et al., demostraron que no posee efecto alguno por si solo o ayudado con el hipoclorito
de sodio al 2,5% (Ballal, Kundabala, Acharya, & Ballal, 2007) (Rico Romano, Córdoba
del Moral, Mena Alvarez, Vera Morós, Garrido Lapeña, & Rodríguez Arrevola, 2012)
(Miliani, Lobo, & Morales, 2012).
Estudios comparativos realizados por (Torabinejad & Walton, 2010) acerca de la
capacidad del MTAD como solución irrigante nueva, el hipoclorito de sodio al 5,25% y
EDTA sobre el E. faecalis; manifestando que tanto el hipoclorito y MTAD poseen
similares efectos inhibitorios, mucho más que el EDTA (Miliani, Lobo, & Morales,
2012).
2.5.3 Requisitos de un irrigante
La elección de un irrigante no debe ser al azar, se debe basar en un sin número de
parámetros con los cuales se obtenga un efecto de barrido, limpieza y desinfección
(Estrela, 2005) (Miliani, Lobo, & Morales, 2012).
Por lo tanto el profesional debe conocer las propiedades y características de cada
solución irrigante seleccionada (Estrela, 2005).De allí que un irrigante debe contar con
los siguientes requisitos (Estrela, 2005) (Leonardo, 2005) (Cohen & Hargreaves, 2011)(Miliani, Lobo, & Morales, 2012):
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Ser biocompatible con los tejidos periapicales
Eliminar o disolver materia pulpar vital o necrótica
Poseer la capacidad antimicrobiana para disminuir o erradicar microbiota presente
Brindar lubricación y humectación para mejorar la acción de
instrumentos
Efecto de sustantividad o efecto antibacteriano residual
Facilidad de obtener en el mercado
Sencilla aplicación y preservación
Período de duración apropiada Precio módico
Acción rápida y resistida.
2.5.4 Soluciones para irrigación del conducto radicular
2.5.4.1 Hipoclorito de sodio al 5,25%
El hipoclorito de sodio (NaOCl) no se presenta en polvo debido a que es una
solución acuosa, resultando ser una sal disociada, la cual es una solución producto de
una combinación de: ácido hipocloroso (HOCl) e hidróxido de sodio (NaOH) (Miliani,
Lobo, & Morales, 2012).
HClO + NaOH = NaOCl
2.5.4.1.1 Reseña Histórica del NaOCl
El NaOCl fue descubierto en 1787 por Berthollet, la cual uso para el
blanqueamiento de textiles. Luis Pasteur en el siglo XIX verificó su efecto de limpieza
cuando empleó contra microorganismos (Balandrano Pinal, 2007).
A partir de 1792 formó parte del grupo de compuestos halogenados tomando elnombre Agua de Javele producto de una mezcla de hipoclorito de sodio y potasio; en
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1820 un químico francés Labarraque formuló esta sustancia al 2,5% de cloro activo,
siendo empleado como desinfectante de heridas (Estrela, 2005).
Dakin en 1915 renovó la formula al 0,5% de cloro activo y ácido bórico siendo
conocida como solución de Dakin, evidenció que la solución al 2,5% empleada en
heridas desinfectaba pero su cicatrización era tardía sin importar en que concentración
se encontrara el hipoclorito, debido a la gran parte de hidróxido de sodio presente en la
solución. Reformuló la solución al 0,5% con un pH 11, añadiendo ácido bórico,
solución con la cual no se obtuvo la cicatrización tardía gracias a que no existió
liberación de hidroxilos y por ende no irritó los tejidos. (Estrela, 2005).
2.5.4.1.2 Mecanismo de acción
El hipoclorito de sodio al entrar en contacto con tejidos orgánicos presenta
reacciones químicas las cuales se resumen en 3 (Estrela, 2005):
Reacción de saponificación: al entrar en contacto el NaOCl con el
tejido orgánico y grasas estos se convierten en sales de ácidos
grasos y glicerol; mismos que van a colaborar con la reducción de
la tensión superficial del resto de solución.
Reacción de neutralización de aminoácidos: el hidróxido de sodio
del NaOCl va a actuar neutralizando aminoácidos, destruyendo
ácidos grasos, produciendo agua y sal.
Reacción de cloraminación: al existir liberación de iones
hidroxilos el pH del resto de solución se reduce; el ácido
hipocloroso (HCl-) que en contacto con restos orgánicos se
comporta como disolvente de los tejidos y libera cloro el cual se
une a proteínas del grupo amina formando cloraminas que van a
actuar como inhibidor bacteriano irreversible y antibacteriano . El
HCl- e iones hipoclorito hidrolizan y destruyen aminoácidos.
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2.5.4.1.3 Ventajas
(Canalda Shali & Brau Aguadé, 2006) describe ciertas propiedades del NaOCl:
Tensión superficial baja
Actúa como antimicrobiano y neutraliza sustancias tóxicos
Colabora con la instrumentación actuando como lubricante del
conducto y blanqueador
pH 11,5 - 12
Deseca y disuelve tejido orgánico
Ejerce acción como detergente
2.5.4.1.4 Desventajas
(Cohen & Hargreaves, 2011) menciona algunas desventajas del empleo del NaOCl:
Irrita tejidos periapicales y blandos
Corroe el instrumental
Incapaz de remover barrillo dentinario
Actúa ante tejido vital o necrótico
Efecto antibacteriano limitado ante ciertos microorganismos
Sabor desagradable
No posee efecto de sustantividad
2.5.4.1.5 Complicaciones del uso de NaOCl
(Leonardo, 2005) aclara que pueden existir ciertas complicaciones durante el
empleo del NaOCl:
Quemaduras o daños en ojos y piel
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Necrosis tisular por extravasación de NaOCl en la región
periapical
Hipersensibilidad a NaOCl
Inyección de NaOCl en zona gingival o tejidos blandos en lugarde anestésico en la cavidad oral
Enfisema por excesiva presión en el émbolo de la jeringa durante
la irrigación
2.5.4.1.6 Factores que afectan las propiedades del NaOCl
(Miliani, Lobo, & Morales, 2012) y (Lahoud Salem & Galvéz Calla, 2006) refieren
que existen varias causas que influyen en disminución o aumento de efectividad del
NaOCl entre las cuales se encuentran:
Temperatura: su aumento contribuye con el incremento de la
capacidad de disolver los tejidos necróticos y vitales presentes,
con un aumento de 60 °C facilitando de esta manera la acción
antibacteriana pero con el trascurso del tiempo tiende a
degradarse por lo que no es recomendable su calentamiento.
Dilución: esto hace que se disminuya su efecto antimicrobiano
de manera significativa y por ende el poder de degradación de
tejidos orgánicos y desbridamiento de los túbulos dentinarios.
Pureza: conforme a la pureza química el NaOCl se divide en
menos puro entre el 1% - 96% y puro de 96% - 100% siendo este
último el que menos impurezas presenta por lo que es
recomendable el empleo de NaOCl domésticos para el
tratamiento de conducto.
2.5.4.1.7 Presentación
Las diferentes concentraciones empleadas en Endodoncia se presentan desde 0,5%
hasta 5,25%; dichas concentraciones dependen si se desea aumentar o disminuir las
diversas propiedades que ofrece esta solución (Miliani, Lobo, & Morales, 2012).
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Varios investigadores optan por la disolución en dos partes del NaOCl 5,25%
buscando reducir los daños periapicales que se pueden producir por la sobre
instrumentación y excesiva presión efectuada en la irrigación en el momento del
tratamiento de conducto, afectando así la acción antimicrobiana, destrucción de toxinas
y disolución de tejidos (Lahoud & Galvéz, 2006).
Sin embargo en el trabajo realizado por (Clegg, Vertucci, Walker, Belanger, &
Britto, 2006) en el cual evaluaron la eficacia del NaOCl 6%, 3% y 1%; en bacterias
obtenidas a partir de periodontitis apical crónica, indicaron que el único irrigante capaz
de erradicar la microbiota presente era el NaOCl 6%.
A su vez (Siqueira, Rocas, Favieri, & Lima, 2000) determinan en su estudio sobre
la reducción bacteriana del E. faecalis presente en el conducto radicular luego de la
instrumentación e irrigación con NaOCl 1%, 2,5% y 5,25% que no existe diferencia
específica entre las diferentes concentraciones para conseguir una erradicación
bacteriana ya que se podría obtener el efecto antimicrobiano de esta solución realizando
un cambio frecuente y manejando cuantiosas cantidades de solución irrigante para
compensar los efectos reducidos de las diversas concentraciones.
2.5.4.2 Caesalpinia spinosa
2.5.4.2.1 Identificación botánica de la especie
Nombre científico: Caesalpinia spinosa, Molina o
Kuntze.
Nombres comunes: tara, taya, divi divi de tierra fría o
dividi de los andes, guarango, vinillo, serrano, cuica.
Familia: Leguminosae Caesalpinieae
Géneros: consta de 48 dentro de los cuales se encuentra
el género Caesalpinia.
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Especies: se han registrado 51 especies dentro de las
cuales consta la Caesalpinia spinosa.
Su nombre se debe a su descubridora Andrea Caesalpini,
botánica y filosofa italiana; el término spinosa provienedel latín “spinosus-a-um” que significa con espinas
(Cabello Liu, 2009) (De la Cruz, 2004).
2.5.4.2.2 Descripción botánica
(De la Cruz, 2004) refiere a que es un árbol pequeño cilíndrico propio de la zona
andina, mide entre 3 a 5 metros de longitud, posee una corteza gris espinosa, provista deramas pobladas las cuales muchas veces nacen desde la base confundiéndose con varios
tallos; su copa es escasa e irregular. Presenta unas hojas simples color verde oscuro,
ovoideas a manera de plumas brillantes de 1,5 cm. Presenta flores amarillas rojizas
reunidas a manera de racimos midiendo entre 8cm a 15 cm; los frutos en forma de
legumbre aplanadas de color naranja miden entre 8 y 12 cm de longitud y 2 cm de
ancho, posee de 4 a 7 semillas de color pardo negruzco en estado maduro; por lo general
de un árbol de tara se puede obtener 20 kg a 40 kg de vainas recolectando al año siendo
de esta manera que el árbol produce frutos cada 3 a 4 años y su media de vida es de 100
años (Bruneau, Forest, Herendeen, Klitgaard, & Lewis, 2001).
2.5.4.2.3 Habitat
La tara se la localiza comúnmente en zonas costeras, serranías y bosques secos;
siendo propia del Perú y se la puede encontrar en diversas zonas áridas, pedregosas o
arenosas de países como Venezuela, Ecuador, Colombia, Bolivia y Chile en su parte
norte.
Se lo ubica en suelos semiáridos y como linderos, árbol de sombra para cultivos y
animales y también como árbol ornamental (De la Cruz, 2004).
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De igual manera este árbol no es exigente en cuanto a suelo corresponde debido a
que posee la capacidad de soportar suelos secos, con pH 6-7,5, sin embargo no tolera
suelos alcalinos ni temperaturas extremadamente bajas (Huarino Acho & Ramos
Perfecto, 2012).
2.5.4.2.4 Composición química
Según investigaciones realizadas por (De la Cruz, 2004) , (Huarino Acho & Ramos
Perfecto, 2012), (Cabello Liu, 2009) y (Sampaio, Pereira, Dias, Costa, Conde, &
Buzalaf, 2009) al encontrarse la tara en estado silvestre posee un gran potencial médico,
alimenticio e industrial. Por lo cual hoy en día son usadas las vainas y semillas de tara,
las cuales ofrecen ciertas propiedades que pueden ser aprovechadas debido a su
composición química:
Hojas: está compuesta de aminoácidos, taninos,
flavonoides, triterpenos y antroquinonas.
Semillas: están conformadas por goma o hidrocoloide
galactománico el cual gracias a esta goma se forma una
solución acuosa semejante al pseudoplástico.
Vainas: contiene taninos los cuales son hidrolizables la
cual conlleva a la separación de ácido gálico, galato de
etilo y cuatro galatos del ácido quinico que corresponden a
esteres metílicos de 4,5 - di - Ogaloilquínico y de 3, 4, 5 –
tri - O - galoilquínico, y a los ácidos 3, 4 – di – O -
galoilquínico y 3, 4, 5 – tri – O - galoilquínico.
Los taninos están presentes en diversas plantas entre las cuales se encuentran las
siguientes familias botánicas: Leguminosae, Rosaceae, Polygonaceae,Fagaceae,
Rhyzophoraceae y Myrtaceae (Cabello Liu, 2009).
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2.5.4.2.5 Usos tradicionales
Los frutos de la tara brindan diversos productos de interés, teniendo así que la vaina
madura de tara representa un 65% de peso de los frutos teniendo una concentraciónmayor de taninos entre 40% y 60% (Cabello Liu, 2009):
Los taninos son polímeros polifenólicos que contienen las
plantas produciéndolos como compuestos secundarios los
cuales forman complejos con proteínas, ácidos nucleicos,
esteroides, polisacáridos, alcaloides; brindando así a la
planta una propiedad de defensa ante los insectos.
Estos taninos son empleados en la industria textil para la
elaboración de productos plásticos, adhesivos o el curtido
de cueros; como bactericida y fungicida, aclarador de
vinos, sustituyente de la malta para dar cuerpo a la cerveza
y dentro de la industria farmacéutica al tener diversos usos
terapéuticos (De la Cruz, 2004).
Gracias a los taninos se obtiene el ácido gálico el cual es
empleado como antioxidante en la industria cervecera y de
aceite al tener efecto decolorante y blanqueador. También
se emplea en la fotografía como tintes, agentes
curtiembres, productos farmacéuticos (Huarino Acho &
Ramos Perfecto, 2012).
A partir de las semillas se obtienen gomas, aceite, harina
proteica que sirve para conseguir una consistencia en los
helados, jabones, pinturas, barnices de uñas, tintes,
mantecas y mantequillas comestibles debido a que
contiende ácidos libres en 1,4% lo cual es aceptable para
la comercialización gracias a su acidez baja (De la Cruz,
2004).
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La madera obtenida de este árbol se emplea en la industria
maderera y en construcción, además de usarla como leña y
carbón (De la Cruz, 2004).
2.5.4.2.6 Actividad terapéutica
Debido a las propiedades y usos que los taninos ofrecen, investigadores han
realizado diversos estudios para determinar las acciones farmacológicas que pueda
brindar esta planta, entre las cuales son:
En la industria médica se emplea en los medicamentos
gastroenterológicos para el alivio de úlceras debido a su propiedad
cicatrizante, antiinflamatorio, antibacteriano, antimicótico,
odontálgico y antidisentérico (Bruneau, Forest, Herendeen,
Klitgaard, & Lewis, 2001) (Escobar Bobadilla & Chávez Castillo,
2008).
Aporta con una acción astringente gracias a la capacidad de
precipitar las proteínas de la piel y de la saliva (Cabello Liu,
2009).
En la medicina tradicional es empleada para el alivio de
afecciones de garganta, infecciones vaginales, sinusitis,
infecciones micóticas, limpieza de heridas, dolor de estómago,
resfriado y depurativo del colesterol (De la Cruz, 2004) (Huarino
Acho & Ramos Perfecto, 2012).
Al ser empleado en la industria textil para el curtido de cuero,
investigadores como (Araujo Díaz & Salas Asencios, 2009)
(Bornaz Acosta, Bornaz Arenas, & Bornaz Arenas, 2013) (De la
Cruz, 2004) (Keramat, Moaddabi, & Ranjbari, 2014) (Huarino
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Acho & Ramos Perfecto, 2012)y (Escobar Bobadilla & Chávez
Castillo, 2008) vieron una posible acción terapéutica al emplear
extracto de las vainas de tara en medicina, siendo así como
identificaron propiedades antibacterianas, astringentes y anti
fúngicas frente a diversos microorganismos como C. diphtheriae,
S. aureus, E. faecalis, flora salival mixta y patógenos comunes
orales.
Se emplea en excoriaciones, quemaduras de piel, hemorragias
pequeñas localizadas, afecciones intestinales, vesiculares,
diarreas, intoxicaciones, etc, (Cabello Liu, 2009).
De las vainas maduras de esta planta se obtiene un polvo de color
amarillento y consistencia poco densa y grasienta; este polvo es
soluble en alcohol y agua, e insoluble en soluciones como éter,
benceno y cloroformo debido que al calentarse se pierden sus
propiedades como se evidencia en el estudio realizado por
(Pulipati, Pallavi, Sujan, Anil Babu, & Srinivasa Babu, 2012) en
los que determinaron que extractos con cloroformo, acetona y
hexano de flores de tara demostraron acción antibacteriana nula o
mínima; por lo cual recomiendan el uso de extractos alcohólicos
o acuosos.
En resumen, (Huarino Acho & Ramos Perfecto, 2012) determinan la actividad
farmacológica brindada por los taninos en:
Antiséptica
Bactericida
Bacteriostática
Antifúngica
Astringente
Protectora
Hipocolesterolémica
Antídoto
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CAPÍTULO III
3. METODOLOGÍA
3.1 Diseño de la investigación
El tipo de investigación es experimental, ya que será un proceso de control en el
cual se manipularan de manera intencional, una variable independiente y de esta manera
se observará y medirá el efecto provocado sobre la variable dependiente.
Este estudio se realizará in vitro en el laboratorio clínico Cabrera, en la ciudad de
Macas y se evaluará la susceptibilidad de cepas de Enterococcus faecalis ATCC 29212(variable dependiente) ante la solución natural el extracto alcohólico de Caesalpinia
spinosa “tara” al 100% e hipoclorito de sodio al 5,25% (variable independiente).
Descriptivo ya que se medirá y evaluará diversos aspectos y dimensiones del
fenómeno a investigar; y longitudinal que consistirá en realizar mediciones repetidas de
un mismo hecho por un lapso de tiempo con el objetivo de mostrar el comportamiento
de la variable a estudiar (Hernández Sampieri, Fernández-Collado, & Baptista Lucio,2006).
El estudio se establecerá en grupos experimentales de forma aleatoria de la
siguiente manera (tabla#1):
NUMERODE
MUESTRA
SOLUCIONES
TARA 100% HIPOCLORITO DE SODIO
5,25 %
AGUA
DESTILADA
TIEMPO DE INCUBACION EN HORAS
24 48 72 24 48 72 24 48 72
1
2
3
4
Tabla 1: Recolección de datos
Fuente: Adriana Haro
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3.2 Muestra
La población es considerada como desconocida por ello se calcula la muestra en
función de la fórmula:
n= Z2*p*q
e2
Dónde:
Z= valor de 1,96 (95% de confiabilidad)
p: proporción de individuos que poseen en la población la característica de estudio.
Este dato es generalmente desconocido y se suele suponer que p=q=0.5 que es la
opción más segura.
q: proporción de individuos que no poseen esa característica, es decir, es 1-p.
p=q= 0,5 * 0,5 = 0,25 probabilidad de que suceda el evento
e = es el margen de error de la muestra (5% al 15%)
n = 61 al 12,5% del margen de error
La muestra estará constituida por 30 cajas Petri con cultivos bacterianos
correspondientes a Enterococcus faecalis ATCC 29212, en medio de crecimientoMueller Hinton, las cuales contaran con las mismas propiedades y características, en las
que se colocarán 3 sensidiscos con 50 uL de cada grupo de sustancia a analizar
respectivamente, obteniendo 90 muestras en total; de las cuales 60 son muestras con las
soluciones a analizar y 30 muestras que corresponden al control negativo.
3.3 Criterios de inclusión
Cultivos bacterianos Mueller Hinton en óptimas condiciones
Especie Enterococcus faecalis ATCC 29212
Soluciones irrigantes en condiciones adecuadas de conservación y
concentración
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3.4 Criterios de exclusión
Cultivos bacterianos Mueller Hinton que presenten alteraciones no propias
de un cultivo puro y no recomendable para crecimiento
Soluciones irrigantes que presenten alteraciones en su consistencia, color,
esterilidad, caducidad y conservación.
3.5 Definición de variables e indicadores (Tabla#2)
VARIABLES DEFINICION CONCEPTUAL DETERMINANTES INDICADORES
D E
P E N D I E N T E
Enteroccocus
faecalis
ATCC 29212
E. faecalis es un coco Gram positivo,anaerobio facultativo, inmóvil y noesporulado. El tamaño de cada célulaoscila entre 0,5 y 0,8 micrómetros y eshabitante normal del tractogastrointestinal humano. Esta bacteria haatraído recientemente la atención dediversos investigadores porque ha sidoidentificada como una causa frecuente deinfecciones periapicales persistentes.(Pardi, Guilarte , Cardozo, & Briceño,2009)
Susceptibilidad yresistencia del E.faecalis
Mayor halo deinhibición
Tiempo indicado parala eliminación total o
parcial de colonias
I N D E P E N D I E N T E
SUSTANCIASIRRIGANTES
Soluciones de irrigación empleadas en lalimpieza y desinfección de las paredes delos conductos y todos los conductoslaterales y accesorios, especialmentefrecuentes en la zona apical. (CanaldaShali & Brau Aguadé, 2006)
NaOCl 5,25%Solución dehipoclorito de sodio al5,25%
Extracto deCaesalpinia spinosa100%
Solución de extractoalcohólico deCaesalpinia spinosa“tara” al 100 %
Agua destilada Agua destilada
Tiempo
Período que transcurre entre el estado delsistema, cuando éste presentaba un estadoX y el instante en el que X registra unavariación perceptible para el observador
24 hrs48hrs72hrs
Eficacia de lasvariable independienteen relación al tiempo
Tabla 2: Variables e indicadores
Fuente: Adriana Haro
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3.6 Procedimiento
3.6.1 Soluciones de estudio:
Extracto alcohólico de Caesalpinia spinosa (tara) 100%, hipoclorito de sodio
(NaOCl) 100% y agua destilada. (Imagen#1)
Imagen 1: Soluciones de estudio
Fuente: Adriana Haro
Extracto alcohólico de Caesalpinia spinosa (tara) 100%
Las vainas de Caesalpinia spinosa (tara) fueron adquiridas en un centro
naturista; las mismas que fueron entregadas a la fundación CHANKUANP en la
ciudad de Macas para la correcta manipulación y obtención del extracto
alcohólico de Caesalpinia spinosa (tara) al 100 %. (Imagen#2)
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Imagen 2: Vainas maduras de C. spinosa
Fuente: Adriana Haro
Las vainas de Caesalpinia spinosa (tara) fue sometidas a una limpieza y secado
previo a la remoción de la semilla y posterior a esto las vainas de C. spinosa
fueron trituradas, pasando por un proceso de maceración y purificación para
obtener de esta manera el extracto alcohólico de Caesalpinia spinosa (tara) al
100 % el cual fue envasado y listo para la manipulación en la investigación.
(Imagen#2)
Imagen 3 Extracto alcohólico de tara 100%Fuente: Adriana Haro
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Hipoclorito de sodio (NaOCl) 100%
La solución irrigante estéril de NaOCl 100% fue adquirida en la FarmaciaAlemana en la ciudad de Quito. (Imagen#3)
Imagen 4: NaOCl 100%
Fuente: Adriana Haro
Agua estéril (control negativo)
Solución estéril (Ropsohn Therapeutics Ltda) sin propiedades antibacterianas
fue adquirida en la Farmacia “Esmeralda Oriental” de la ciudad de Macas.
(Imagen#4)
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Imagen 5: Solución estéril (control negativo)
Fuente: Adriana Haro
3.6.2 Obtención de la muestra:
Se obtuvo la cepa Enteroccocus faecalis ATCC 29212, a través de la empresa
MEDIBAC. (Imagen#5)
Imagen 5: E. faecalis ATCC 29212
Fuente: Adriana Haro
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3.6.3 Preparación del inoculo estandarizado y siembra de las muestras:
La bacteria E. faecalis fue incubada para su enriquecimiento y desarrollo en el
medio de crecimiento agar Sangre de cordero durante 48 horas a 37°C, posteriormente
con un hisopo estéril se procedió a tomar colonias bacterianas a partir del cultivo puro
de E. faecalis para preparar suspensiones en tubos de ensayo con soluciones de 10 ml de
agua destilada estéril hasta obtener una turbidez semejante a la escala de McFarland
N°0,5, la cual sirve para controlar la cantidad de microorganismos que serán inoculados
a través de otro hisopo estéril en el medio de cultivo Mueller Hinton.(Imagen#6a, 6b,
6c, 6d,6e)
(a) (b)
(c) (d)
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(e)
Imagen 6: Incubación a 37°C por 48hrs(a) Toma de colonias puras de E. faecalis (b)Hisopo con suspensión de E. faecalis (c) Concentración de bacterias ajustada a escalaMc Farland N°0,5 mediante densidad óptica de la solución (d) Inoculación de la cepa
estandarizada en agar Mueller Hinton (e)
Fuente: Adriana Haro
3.6.2 Evaluación de la susceptibilidad del Enterococcus faecali s frente al extracto
alcohólico de C. spinosa (Tara) al 100% mediante halos de inhibición.
Preparación y aplicación de los discos de papel filtro a las placas
inoculadas: se procedió a colocar los sensidiscos de papel filtro estériles
previamente impregnados con 25uL de cada solución a comparar en este
estudio, en una caja Petri con medio de crecimiento Mueller Hinton en el
cual fue anteriormente acondicionado con el Enterococcus faecalis; estas
muestras se incubaron a 37°C durante 24 hrs. (Imagen #7a,7b, 7c, 7d,, 7e)
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(a) (b)
(c) (d)
(e)
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Imagen 7: Discos de papel filtro (a) Soluciones de estudio y micropipeta con 25 µl demedida (b) Disco de papel filtro empapado en 25 µl de extracto de tara 100% (c)
Colocación de los discos en las placas inoculadas con E. faecalis (d) Placas con discos
impregnados en las diferentes sustancias de estudio listas para incubación(e)Fuente: Adriana Haro
Lectura de los halos de inhibición: se realizó la medición de los halos de
inhibición a las primeras 24 hrs con una regla milimétrica; los cuales se
obtuvieron en cada caja Petri con agar Mueller Hinton, posteriormente se
recolecto las medidas obtenidas en una tabla previamente elaborada dadas
por cada solución empleada en el estudio. (Imagen #8a, 8b)
(a) (b)
Imagen 8: Halos de inhibición de cada sustancia a las 24 hrs (a) Medición del halo deinhibición obtenido por el extracto alcohólico de C. spinosa 100% con regla milimétrica
(b)Fuente: Adriana Haro
3.6.3 Evaluación del efecto de sustantividad del extracto alcohólico de C. spinosa
(Tara) al 100% sobre el Enterococcus faecali s en determinado tiempo: 48hrs y 72
hrs.
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Preparación y aplicación de los discos de papel filtro a las placas
inoculadas: se procedió a colocar los discos de papel filtro estériles e
impregnados con 25uL de cada solución a estudiar en una caja Petri con
medio de crecimiento Mueller Hinton en el cual fue previamente inoculado
el Enterococcus faecalis; esto se incubó para su evaluación durante 48 y
72 hrs respectivamente. (Imagen #9a, 9b, 9c)
(a) (b)
(c)
Imagen 9: Discos de papel filtro con 25 µl de extracto alcohólico de C. spinosa 100%(a) Discos colocados con cada sustancia en la caja Petri con medio de crecimiento agar
Mueller Hinton (b) Cajas Petri listas con sus discos y sustancias de estudio paraincubarse (c)
Fuente: Adriana Haro
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Lectura de los Halos de inhibición: para la medición de halos inhibitorios
después de transcurridas 24 y 48 hrs respectivamente se procedió a medir
con una regla milimétrica la susceptibilidad de la bacteria producida por
cada sustancia empleada en este estudio utilizando el medio de agar
Mueller Hinton. (Imagen #10a, 10b)
(a)
(b)
Imagen 10: Halos de inhibición obtenidos transcurrido 48 hrs (a) Medición de haloscon regla milimétrica (b)
Fuente: Adriana Haro
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3.6.4 Recolección de datos
Los datos obtenidos fueron recolectados en tablas pre elaboradas sobre una base de
30 repeticiones (n:30) por sustancia y analizados a través de procesos estadísticos
específicos mediante pruebas de ANOVA y T Student, con el propósito de establecer en
promedio una media obtenida por variable independiente, comparar la igualdad de
medias obtenidas de las dos variables independientes y determinar una variable
independiente mayor según la hipótesis y objetivos planteados.
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49
CAPÍTULO IV
RESULTADOS
4.1
Compilación de resultados
Los datos tras las mediciones de halos de inhibición fueron recolectados analizados
y descritos en tablas y gráficos, empleando el programa estadístico SPSS 21 y las
pruebas de Hipótesis que se realizan mediante la prueba T student considerando
muestras relacionadas y la prueba T student con muestras independientes. (Tabla #3)
N U M E R O D E
M U E S T R A
SOLUCIONES
TARA 100%HIPOCLORITO DE SODIO
5,25 %AGUA ESTERIL
TIEMPO DE INCUBACION EN HORAS
24 h 48h 72h 24h 48h 72 h 24h 48 h 72 h
1 12,5 12,0 12,0 13,0 12,0 12,0 0,0 0,0 0,0
2 12,0 12,0 12,0 12,0 12,0 12,0 0,0 0,0 0,0
3 14,0 13,5 13,0 12,5 11,5 11,5 0,0 0,0 0,0
4 11,5 12,0 11,5 14,0 14,0 13,5 0,0 0,0 0,0
5 13,5 13,0 13,0 11,0 10,5 10,5 0,0 0,0 0,0
6 13,5 14,5 13,5 12,5 12,0 11,0 0,0 0,0 0,0
7 13,0 13,0 13,0 15,0 14,0 13,5 0,0 0,0 0,0
8 14,0 13,0 13,5 13,0 12,0 12,0 0,0 0,0 0,0
9 13,5 13,5 13,0 12,0 12,0 11,0 0,0 0,0 0,0
10 12,5 12,5 12,0 12,0 12,0 10,0 0,0 0,0 0,0
11 13,0 14,0 14,0 14,0 14,0 13,0 0,0 0,0 0,0
12 13,5 13,5 13,0 13,0 13,0 11,5 0,0 0,0 0,0
13 13,0 13,5 13,0 15,5 13,5 13,5 0,0 0,0 0,0
14 12,0 12,0 11,5 12,5 11,5 11,0 0,0 0,0 0,015 11,0 11,5 10,5 12,0 12,0 11,0 0,0 0,0 0,0
16 11,5 12,0 11,5 13,0 12,0 11,5 0,0 0,0 0,0
17 13,0 13,5 13,5 11,5 10,5 10,0 0,0 0,0 0,0
18 12,0 12,0 12,5 12,5 13,0 12,0 0,0 0,0 0,0
19 13,0 13,0 12,5 13,0 12,0 10,5 0,0 0,0 0,0
20 12,5 13,0 12,0 12,5 12,0 11,5 0,0 0,0 0,0
21 13,5 13,5 13,5 14,0 13,0 12,0 0,0 0,0 0,0
22 12,5 12,0 12,0 13,0 12,0 12,0 0,0 0,0 0,0
23 12,0 12,0 12,0 13,0 11,0 11,5 0,0 0,0 0,0
24 14,0 13,5 13,5 12,5 12,0 11,5 0,0 0,0 0,0
25 15,0 15,0 15,0 15,5 14,0 13,5 0,0 0,0 0,0
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Tabla 3: Datos recopilados de los halos de inhibición obtenidos con cada sustanciaestudiada
Fuente: Adriana Haro
4.2 Análisis estadísticos descriptivos ANOVA
El análisis estadístico de cada variable en los distintos tiempos estudiados,
demostró que el hipoclorito de sodio 5,25% a las 24 horas mostró una media mayor de
13,083mm y el extracto alcohólico de caesalpinia spinosa (Tara) 100% presentó una
media mayor a las 48 horas de 12,9000mm; siendo evidente que el efecto antibacteriano
del hipoclorito de sodio 5,25% es más eficaz en relación a corto plazo y decrece en el
lapso de horas, mientras que el efecto de la solución Tara 100% incrementa y se
mantiene su efectividad con el transcurso del tiempo. (Tabla#4)
26 13,0 12,5 13,0 12,5 11,5 12,0 0,0 0,0 0,0
27 13,0 13,0 13,0 13,5 12,0 12,5 0,0 0,0 0,0
28 12,5 13,5 14,0 14,0 13,5 13,0 0,0 0,0 0,0
29 13,0 13,0 13,5 15,0 13,5 14,0 0,0 0,0 0,0
30 11,5 12,0 12,0 13,0 12,0 12,0 0,0 0,0 0,0
ANOVA Descriptivos
Hora Sustancia N° MediaDesviación
típicaErrortípico
Intervalo deconfianza para la
media al 95%Mínimo Máximo
Límiteinferior
Límitesuperior
24Hrs
TARA100%
30 12,8167 ,89523 ,16345 12,4824 13,1510 11,00 15,00
NaOCl5,25%
30 13,0833 1,12252 ,20494 12,6642 13,5025 11,00 15,50
AGUAESTERIL
30 ,0000 ,00000 ,00000 ,0000 ,0000 ,00 ,00
Total 90 8,6333 6,19433 ,65294 7,3360 9,9307 ,00 15,50
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Tabla 4: Estadísticos descriptivos ANOVA
Fuente: Ing. Jaime Molina
4.3 Prueba T Student: comparación de medias por solución en cada tiempo de
incubación.
Planteamiento de hipótesis: se establece una hipótesis inicial (Ho) y una hipótesis
alternativa (Ha):
Ho: La media de la solución 1 es similar a la media de la solución 2 en cada
tiempo
48Hrs
TARA100%
30 12,9000 ,84486 ,15425 12,5845 13,2155 11,50 15,00
NaOCl5,25% 30 12,3333 ,99424 ,18152 11,9621 12,7046 10,50 14,00
AGUAESTERIL
30 ,0000 ,00000 ,00000 ,0000 ,0000 ,00 ,00
Total 90 8,4111 6,03155 ,63578 7,1478 9,6744 ,00 15,00
72Hrs
TARA100%
30 12,7333 ,94443 ,17243 12,3807 13,0860 10,50 15,00
NaOCl5,25%
30 11,8833 1,06418 ,19429 11,4860 12,2807 10,00 14,00
AGUAESTERIL
30 ,0000 ,00000 ,00000 ,0000 ,0000 ,00 ,00
Total 90 8,2056 5,90129 ,62205 6,9696 9,4416 ,00 15,00
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Ha: La media de la solución 1 NO es similar a la media de la solución 2 en cada
tiempo
Comparando de esta manera las medias obtenidas por solución en diferentes
tiempos de incubación, en las cuales se acepta la Ha; determinando que la media del
NaOCl 5,25% no es similar a la media conseguida con el extracto de tara 100%. (Tabla
#5)
T Student: Estadísticos de grupo por tiempo
TIEMPO SOLUCIONES N° Media Desviación típica Error típ. de la media
24 HrsTARA 100% 30 12,8167 ,89523 0,16345
NaOCl 5,25% 30 13,0833 1,12252 0,20494
48 Hrs
TARA 100% 30 12,9000 ,84486 0,15425
NaOCl 5,25% 30 12,3333 ,99424 0,18152
72 HrsTARA 100% 30 12,7333 ,94443 0,17243
NaOCl 5,25% 30 11,8833 1,06418 0,19429
Tabla 5: Comparación de medias obtenidas por cada solución en los diferentes tiemposde incubación
Fuente: Ing. Jaime Molina
En la prueba T Student para la igualdad de medias se manifiesta la aceptación de la
Ho en las primeras 24 hrs y posterior a esto en las siguientes 48 y 72 hrs la Ho se
rechaza en los diferentes tiempos, establecido en la Tabla #6:
24 HORAS: 0,313 > 0,05 aceptamos Ho: La media de la solución TARA al
100% es similar a la media de la solución de hipoclorito de Sodio al 5,25% a las
24 horas de incubación.
48 HORAS: 0,021 < 0,05 rechazamos Ho: La media de la solución TARA al
100% no es similar a la media de la solución de hipoclorito de Sodio al 5,25% a
las 48 horas de incubación.
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53
72 HORAS: 0,002 < 0,05 luego rechazamos Ho: La media de la solución TARA
al 100% NO es similar a la media de la solución de hipoclorito de Sodio al
5,25% a las 72 horas de incubación.
Prueba T Student para la igualdad de medias
Horas TGrados de
libertadSignificancia
(bilateral)Diferencia de
mediasError típico de
la diferencia
24 HORAS
-1,017 58 0,313 -,26667 ,26214
-1,017 55,265 0,313 -,26667 ,26214
48 HORAS
2,379 58 0,021 ,56667 ,23821
2,379 56,528 0,021 ,56667 ,23821
72 HORAS
3,272 58 0,002 ,85000 ,25977
3,272 57,193 0,002 ,85000 ,25977
Tabla 6 T Student para igualdad de medias por solución
Fuente: Ing. Jaime Molina
4.4 Prueba T Student: comparación de medias por tiempo de incubación en cada
solución
Teniendo en cuenta el planteamiento de hipótesis Ho y Ha mencionadosanteriormente, se procede a comparar las medias obtenidas en relación al tiempo de
incubación por cada solución, evidenciando los siguientes resultados de este análisis:
(tabla #7)
SOLUCIÓN TARA 100%
PAR 1: se compara el efecto inhibitorio del extracto de tara 100% obtenido a las 24 y48 hrs; determinando una significancia bilateral = 0,362 > 0,05, con lo cual se acepta la
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Ho: en la cual la media de la solución Tara 100% a las 24 horas es similar a la media de
la solución TARA100% a las 48 horas.
PAR 2: analizando el efecto inhibitorio del extracto de tara 100% obtenido a las 48 y
72 hrs; obteniendo una significancia bilateral = 0,048 < 0,05 por lo que rechazamos la
Ho. En este caso la media a las 48 Horas es mayor a la media a las 72 horas.
PAR 3: estudiando el efecto inhibitorio del extracto de tara 100% obtenido a las 24 y
72 hrs teniendo una significancia bilateral = 0,393 > 0,05 se acepta la Ho. La media de
la solución TARA 100% a las 24 horas es similar a la media de la solución TARA
100% a las 72 horas.
SOLUCIÓN HIPOCLORITO DE SODIO (NaOCl) 5,25%
PAR 4: al comparar las medias obtenidas del NaOCl 5,25% entre las 24 y 48 hrs se
demostró una significancia bilateral = 0,000 < 0,05 con lo que rechazamos Ho;
finalizando que la media de la solución a las 24 horas es mayor que la media de la
solución a las 48 horas.
PAR 5: se comparó las medias dadas por el NaOCl 5,25% obteniendo una significancia
bilateral = 0,001 < 0,05, por lo que rechazamos la Ho determinando así que la media de
la solución a las 48 horas es mayor a la media de la solución dada a las 72 horas.
PAR 6: analizando la solución NaOCl 5, 25% con su medias obtenidas a las 24 y 72 hrs
se estableció una significancia bilateral = 0,000 < 0,05 rechazando la Ho: por lo tanto, la
media de la solución a las 24 horas es mayor que la media de la solución a las 72 horas.
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Imagen 11 Medias de las soluciones en 24, 48 y 72 horas
Fuente: Ing. Jaime Molina
12,816712,9000
12,7333
11,0000
11,5000
12,0000
12,5000
13,0000
13,5000
14,0000
24 HORAS 48 HORAS 72 HORAS
PROMEDIO DE DIAMETROSOLUCION TARA 100%
13,0833
12,3333
11,8833
11,0000
12,0000
13,0000
14,0000
24 HORAS 48 HORAS 72 HORAS
PROMEDIO DE DIAMETROSOLUCION HIPOCLORITO DE SODIO 5,25%
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concentración de 5000g/mL a diferencia de esta investigación en la que se empleó 25
uL de extracto alcohólico de Caesalpinia (tara) 100%.
De igual manera (Pulipati, Pallavi, Sujan, Anil Babu, & Srinivasa Babu, 2012) en
su evaluación de la actividad antibacteriana de varios extractos de Caesalpinia sobre el
E. faecalis; indico que el extracto con cloroformo de caesalpinia tiene un mínimo efecto
antibacteriano sobre el E. faecalis a diferencia de los extractos con hexano, agua, etílico,
metanol y acetona usados en ese análisis, los cuales no presentaron acción inhibitoria
alguna. A diferencia con el trabajo aquí realizado en el cual el extracto alcohólico de
tara 100% sobre dicha bacteria demostró eficacia antibacteriana. Esta diferencia de
resultados podría ser a que el estudio realizado por Pulipati, empleo flores de
Caesalpinia las cuales poseen una capacidad antimicrobiana nula en comparación con
las vainas maduras de Caesalpinia, las cuales fueron utilizadas en este trabajo de
investigación.
(Huarino Acho & Ramos Perfecto, 2012) analizaron el efecto antibacteriano de
Tara en diferentes concentraciones sobre la flora salival mixta, determinando que la
actividad antimicrobiana es directamente proporcional a la concentración del extracto;
evidenciando así, que el extracto de tara en 75 mg/mL de concentración presentó mayor
capacidad inhibitoria durante las 24 h sobre la microbiota salival mixta. En contraste
con esta investigación; en la cual, la acción antibacteriana del extracto de tara 100%
frente al E. faecalis fue ligeramente menor durante las primeras 24 h (12,8167mm), pero
a partir de las 48h su efecto inhibitorio aumentó (12,9000mm) y perduro hasta las 72h
(12,7333mm). Dichos resultados se pueden deber a que en ambos estudios los
microorganismos y concentraciones variaron; probablemente pese a estas diferencias
esta planta indicó poseer influencia antibacteriana en diferente tipo de microbiota yefecto de sustantividad hasta las 72h a diferencia del NaOCl 5,25%, efecto inhibitorio el
cual fue decreciendo conforme transcurría el tiempo.
De igual manera, (Escobar Bobadilla & Chávez Castillo, 2008) investigaron
diferentes concentraciones de extracto de Tara (25%, 50%, 75% y 100%) sobre
Corynebacterium diphtheriae, bacteria altamente patógena, Gram positiva, la cual se
encuentra presente en aerosoles en procedimientos clínicos con el empleo de la pieza demano de alta velocidad y establecieron que a medida que se incrementa la concentración
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de tara el efecto inhibitorio sobre la bacteria aumenta. Sin embargo en este estudio
desarrollado, el extracto de tara 100% demostró tener capacidad antibacteriana frente al
E. faecalis pero sin superar el efecto obtenido por el NaOCl 5,25% durante las 24 h. La
discordancia de estos resultados podría corresponder a la sistemática empleada entre
ambos estudios, coincidiendo únicamente en la concentración de la solución aplicada.
Por otro lado cabe recalcar que a pesar de la diferencia de las horas de incubación y las
bacterias empleadas en ambos estudios; siendo que el C. diphtheriae fue incubado por
18 h y el E. faecalis por 24 h; el extracto de tara se comportó de forma antibacteriana
frente a C. diphtheriae.
A su vez, (Araujo Díaz & Salas Asencios, 2009) analizó la actividad antimicrobiana
del extracto crudo de tara frente a Staphylococcus aureus demostrando que la vida
media del extracto fue latente durante 3 días, coincidiendo así con esta investigación;
donde el extracto de tara 100% demostró inhibir al E. faecalis por 72h sobresaliendo
con mayor acción inhibitoria a las 48h. Cabe recalcar que tanto la metodología de
investigación y efecto antimicrobiano son análogos en ambos estudios; sin embargo en
estas investigaciones se analizó la susceptibilidad de dos bacterias Gram positivas
anaerobias facultativas. Siendo el S. aureus una bacteria habitual en el conducto
radicular pero en menor porcentaje a diferencia del E. faecalis que se encuentra en
mayor porcentaje debido a su resistencia a sustancias antisépticas y desinfectantes
usadas en el tratamiento de conducto.
(Espinel Pinzón, García Romero, Olarte Collazos, Barajas Villamizar, & Barrientos
Sánchez, 2009) revelaron en su estudio para la remoción de E. faecalis luego de la
preparación rotatoria e irrigación con NaOCl 5% y clorhexidina (CHX) 2% con o sin
EDTA 1,7%, que estas soluciones al combinarse con el quelante disminuye suefectividad antimicrobiana, tanto el NaOCl 5% y CHX 2% fueron relativamente
efectivos frente al E. faecalis. Esto indica semejanza con el estudio realizado en el cual
el NaOCl 5,25% fue favorable para la inhibición de E. faecalis en 24 h. Estos resultados
pudieron deberse a que en la primera investigación procedieron con una preparación
biomecánica rotatoria en piezas dentarias empleando las soluciones antes expuestas
frente a la bacteria, consecutivamente sembraron tomando muestras de cada diente en
agar BHI para el conteo de UFC a las 48 h; a diferencia de la actual investigación donde
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la metodología fue cultivo en agar Mueller Hinton con discos de papel filtro
impregnados en las soluciones y lectura de los halos de inhibición en 24 h.
En la investigación efectuada por (Rico Romano, Córdoba del Moral, Mena
Alvarez, Vera Morós, Garrido Lapeña, & Rodríguez Arrevola, 2012) acerca de la
eficacia antibacteriana entre el NaOCl 2,5%-5,25% y CHX 2%, solas o combinadas en
diferentes tiempos contra el E. faecalis. Obtuvieron, una mayor eficacia en la
erradicación bacteriana con: CHX 2% en 15” de exposición a diferencia del NaOCl
5,25% el cual presentó inhibición a 1 hora de contacto. Comparando con la presente
investigación realizada, en la cual el efecto dado por el NaOCl 5,25% sobre E. faecalis
fue eficaz, obteniendo a las 24h mayor inhibición microbiana y las siguientes 48 y 72 h
su efecto disminuyó considerablemente determinando de esta forma que no posee efecto
de sustantividad. Estos resultados al ser variados probablemente se deben a que se
emplearon métodos diferentes para el análisis bacteriano: prueba de difusión en agar e
identificación bioquímica (API20 Strep) para la primera investigación y análisis in vitro
en el presente trabajo.
En vista de los diversos estudios realizados y la gran necesidad que existe hoy en
día de erradicar de manera completa la carga microbiana presente en el interior del
conducto radicular, es de suma importancia encontrar una solución irrigante la cual
cuente con las diversas propiedades que un irrigante ideal requiere. Por lo cual
investigaciones atribuyen potenciales efectos tanto antibacterianos como antifúngicos e
innumerables beneficios en el campo microbiológico a la planta Caesalpinia spinosa
(Tara), por lo tanto resultaría de mucho interés adentrarse al estudio de esta planta y
aprovechar los diferentes principios activos que posee.
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CAPÍTULO V
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1 Conclusiones
Entre las soluciones analizadas el extracto alcohólico de C. Spinosa (Tara) al
100% demostró un considerable efecto antibacteriano al igual que el Hipoclorito
de sodio al 5,25% sobre el E. faecalis.
De las soluciones estudiadas el extracto de tara al 100% evidenció menor efecto
antibacteriano durante las 24 horas sobre el E. faecalis teniendo una media
estadísticamente menor de 12,8167 mm en comparación con el Hipoclorito de
sodio al 5,25% con una media de 13,0833mm.
El extracto de tara al 100% manifestó una sustantividad mayor a las 48 y 72
horas en comparación al hipoclorito de sodio al 5,25% que fue decreciendo su
efecto antibacteriano con el transcurso del tiempo.
5.2 Recomendaciones
Efectuar más análisis de plantas medicinales para tener una opción terapéutica
natural en el campo odontológico.
Realizar estudios específicos del extracto alcohólico de C. spinosa al 100% que
demuestren sus concentraciones mínima inhibitoria y mínima letal para aplicar
en la terapéutica clínica odontológica.
Desarrollar investigaciones del extracto alcohólico de C. spinosa al 100% sobre
el efecto en cepas causantes de diversas patologías en los diversos campos
médicos y odontológicos.
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