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UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA DE ACUACULTURA

TESIS DE GRADO PARA OPTAR EL TÍTULO DE INGENIERO ACUACULTOR

CONTROL DE LA SAPROLEGNIOSIS EN OVAS DE

TRUCHA ARCO IRIS (Oncorhynchmus mykis) APLICANDO UN DESINFECTANTE QUÍMICO

ALEJANDRO PASQUEL BAQUERO

2011

ii

iii

CERTIFICADO Esta tesis ha sido aceptada en la forma presente por el tribunal de grado nominado por el Honorable Consejo Directivo de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Técnica de Machala, como requisito parcial para optar al grado de:

INGENIERO ACUACULTOR

_______________________________

Ing. Acu. Cesar Valarezo Macías Mg Sc, Director

_______________________________

Dr. David Masache Narváez, Profesor Miembro.

_______________________________

Ing. Acuac. Dino Mauricio Yánez Morocho MBA, Profesor Miembro.

iv

v

La responsabilidad de esta investigación resultados y conclusiones del presente trabajo, pertenecen exclusivamente a su autor

________________________

Alejandro Pasquel Baquero

vi

vii

DEDICATORIA

Al Sumo Creador

A Fernando y Alicia, gestores y pilares de mi paso por el mundo

A Nando, Fercho y Gabo

A mi familia entera

A mis amigos de aquí y de allá

A todos…

viii

ix

AGRADECIMIENTO

A las Autoridades de la Universidad Técnica de Machala y de la Facultad de

Ciencias Agropecuarias, de manera especial a mi amiga Bióloga Norma Cecilia

Serrano Campaín, Vicerrectora Académica de la Universidad.

A Cesar, Mauricio, Leonor, Julio, José, Leonardo, David, otra vez Cesar, Juan,

Patricio y otros muchos maestros que supieron dar su paciencia, sapiencia y

afecto.

A mi Director de Tesis, Ing. Ac. Cesar Valarezo; a los profesores miembros Dr.

David Masache y al Ing. Ac. Mauricio Yanes; al blog. Leonardo Guevara; al

personal administrativo, de limpieza y todos los amigos que hice en esta alma

mater.

A mis amigos y compañeros de aula, en los que encontré siempre un abrazo, un

hombro y una familia.

A Magdalena, Paul, Jorge, Cristóbal, Ligia, Isabel, Xavier y muchos amigos

orenses que hicieron de mi vida en esta hermosa provincia de lo más

emocionante.

A Germania, Jorge, Patricia, Tatiana, Andrés, Pepucho, Tita y toda mi familia

en estas tierras por abrirme su casa, su corazón y su vida.

A todos mis más sinceros agradecimientos.

x

xi

ÍNDICE DE CONTENIDO

Tema Páginas

1. Introducción

1

2. Revisión Literatura

3

2.1. Saprolegniosis

3

2.1.1. Descripción

3

2.1.2. Forma de infección

4

2.1.3 Patogenia

4

2.1.4. Clínica

5

2.2. Trucha arco iris (Oncorhynchus mykis)

6

2.2.1. Descripción de la especie

6

2.2.2. Nombre común

8

2.3. Generalidades en la producción de ovas

8

2.3.1. Descripción del proceso de ovas

8

2.3.2. Profilaxis, higiene y desinfección

11

2.3.3. Descripción de la desinfección de ovas

12

2.4. Particularidades del compuesto

16

2.4.1. Desinfectantes

16

2.4.1.1. Definición

16

2.4.1.2. Tipos de desinfectantes

17

2.4.2. Composición química del compuesto

17

2.4.2.1. Peróxido de hidrógeno

18

2.4.2.2. Acetanilida

19

2.4.2.3. Ácido acético

20

2.4.2.4. Alcohol

21

3. Materiales y métodos

25

3.1. Materiales

25

3.1.1. Localización y ubicación geográfica

25

3.1.2. Equipos y materiales

25

3.1.3. Variables en estudio

26

3.1.4. Medición de la variable

26

3.2. Métodos

26

3.2.1. Análisis bibliográfico

26

3.2.2. Método de análisis estadístico

27

3.2.3. Análisis de fortalezas y desventajas

27

3.2.4. Procedimiento

27

3.2.4.1. Desove y siembra

27

xii

4. Resultados y discusión

31

4.1. Sobrevivencia de ovas

31

4.2. Análisis del tratamientos

32

4.3. Fortalezas y desventajas

32

4.4. Experiencias

33

5. Conclusiones

35

6. Resumen

37

7. Summary

39

8. Bibliografía

41

Anexos

43

Anexo 1 Análisis de varianza 43 Anexo 2 Análisis del tratamiento 43 Anexo 3 Análisis ortogonal 44 Anexo 4 Diario de mortalidades 44 Anexo 5 Piscinas de engorde y reproductores

45

Anexo 6 Canastillas de eclosión

45 Anexo 7 Recolección de huevos muertos

46

Anexo 8 Desinfección de ovas en diferentes soluciones

46 Anexo 9 Ovas en canastillas

47

Anexo 10 Ovas en canastas para desinfección

47 Anexo 11 Observación de ovas al microscopio

48

Anexo 12 Muestra de ovas infectadas

48 Anexo 13 Fotografía microscópica de ovas

49

Anexo 14 Alevines de trucha arco iris

49

xiii

ÍNDICE DE CUADROS

Tema Páginas

Cuadro 1 Distribución de las canastillas

28 Cuadro 2 Sobrevivencia

31

xiv

xv

ÍNDICE DE FIGURAS

Tema Páginas

Figura 1 Foto microscópica de la saprolegnia

3

Figura 2 Ciclo de vida de saprolegnia

6 Figura 3 Ejemplar de trucha arco iris (Oncorhynchus mykis)

7

Figura 4 Huevo embrionario y alevín de trucha en su nacimiento

9

Figura 5 Alevines de truchas en tres estados diferentes

10 Figura 6 Ovas de trucha

13

Figura 7 Ovas de trucha infectadas con saprolegnia

15 Figura 8 Enlace químico del peróxido de hidrógeno

19

Figura 9 Composición química de la acetanilida

20 Figura 10 Acido acético

20

Figura 11 Alcohol en su enlace químico

22 Figura 12 Estación CENIAC

25

Figura 13 Reproductores de trucha arco iris

27 Figura 14 Canastillas de eclosión

29

Figura 15 Proceso de desinfección

30 Figura 16 Piscinas de engorde y reproductores

45

Figura 17 Canastillas de eclosión

45 Figura 18 Recolección de huevos muertos

46

Figura 19 Desinfección de ovas en diferentes soluciones

46 Figura 20 Ovas en canastillas

47

Figura 21 Ovas en canastas para desinfección

47 Figura 22 Observación de ovas al microscopio

48

Figura 23 Muestra de ovas infectadas

48 Figura 24 Fotografía microscópica de ovas

49

Figura 25 Alevines de trucha arco iris

49

xvi

xvii

ÍNDICE DE TABLAS

Tema Páginas

Tabla 1 Extracto del cuadro "Taxonomía de las especies de salmónidos"

8 Tabla 2 Análisis de varianza

43

Tabla 3 Análisis del tratamiento

43 Tabla 4 Análisis ortogonal

44

Tabla 5 Diario de mortalidades

44

xviii

1. INTRODUCCIÓN

La producción de camarón es la principal actividad acuícola en el Ecuador, siendo uno de los

productos de exportación más importantes. Los problemas existentes en el cultivo y

comercialización, obligan a buscar nuevas alternativas de producción y mirar a otras fuentes

de trabajo.

La piscicultura es la rama que se ha fijado el sector acuícola para su desarrollo, tanto para

monocultivos como para cultivos mixtos de tilapia, róbalo, corvina, chame y cachama, para la

Costa; cachama y guanchince para la Amazonía; tilapia y truchas para la Sierra.

Según un censo y estudio realizado en el 2007 por el departamento técnico del Centro

Nacional de Investigaciones Acuícola (CENIAC), adjunto al Ministerio de Agricultura,

Ganadería y Pesca (MAGAP), en el Ecuador se producen 983,3 toneladas de truchas al año,

de las cuales 332,7 T provienen de las piscinas que se ubican en la provincia de Pichincha

(33,8 %) y 190 T en el Azuay (19,3 %).

Sin embargo, la producción contrasta con el número de criaderos que se encuentran

actualmente en las provincias de Azuay que posee 47 plantas productoras y Pichincha, que es

la de mayor producción y tiene 26. La diferencia en la producción, se debe a que en Pichincha

se realiza un trabajo más técnico y sofisticado que en Azuay, “donde la mayoría de los

criaderos son artesanales y se ubican en sitios donde el agua es escasa, lo cual dificulta la

actividad”; señalan los responsable del censo, funcionario del CENIAC.

En los criaderos que poseen plantas para la obtención de alevines (crías de trucha), desarrollo

y comercialización, lo ideal es que se utilice, por lo menos, un técnico por cada etapa del

proceso productivo. Esto, a fin de que vayan corrigiendo los problemas que se presenten

durante el proceso. Un técnico puede dar apoyo a tres o cuatro criaderos, pero lo ideal sería

que se cuente con uno de forma permanente.

En la actualidad más el 80 por ciento de los criaderos son construidos y manejados de forma

artesanal. En la mayoría de criaderos del país se trabaja con huevos importados, ya que

pocos tienen animales reproductores y se autoabastecen. El único abastecedor nacional de

huevos a gran escala es el CENIAC.

La meta básica de un criadero comercial de truchas, es obtener un producto de alta calidad,

con el menor costo posible, para venderlo a un valor que ofrezca la mayor rentabilidad,

independientemente de las habilidades comerciales que se posean. Esta meta se consigue

xix

aplicando normas productivas, así por ejemplo; extremas condiciones sanitarias en el

criadero; procedimientos de manejo de la producción eficientes; alimentos de alta

convertibilidad; utilizar ovas de buen rendimiento, resistentes al hacinamiento, manipuleo y a

las enfermedades.

Un problema latente en la producción, es la limpieza de estanques y organismos,

principalmente por el costo de los desinfectantes y el uso indebido de sustancias químicas

perjudiciales para la salud humana y el ecosistema; tales como verde de malaquita, azul de

metileno, otros menos perjudiciales son el yodo, sal común, en grano y otros.

Por la falta de conocimientos científicos de la gran mayoría de productores, existe mal uso de

las sustancias químicas, se suma la falta de productos especializados en el mercado, lo que

incide en la fisiología de los peces. De manera especial el verde de malaquita que como

algunos autores lo indican al referirse a su composición y uso, tiene potencial cancerígeno. Su

uso es restringido, lo que nos obliga a buscar alternativas sustentables en la desinfección de

los organismos.

Se propone conocer la reacción de las ovas al uso de desinfectantes a base de peróxidos, en

sustitución del yodo, para establecer el posible uso de este compuesto como desinfectante de

medios de producción.

El objetivo propuesto para esta investigación es:

1. Analizar la eficacia del compuesto de Peróxido de hidrógeno en el control de la

saprolegniosis en ovas de Trucha Arco Iris (Oncorhynchus mykis).

xx

2. REVISIÓN DE LITERATURA

2.1. SAPROLEGNIOSIS

2.1.1. DESCRIPCIÓN

Enfermedad infecciosa producida por varios hongos, principalmente oomicetos representantes

del grupo de los saprolegniales. Utilizar como sinónimo: “saprolegniasis” a este tipo de

micosis, no es del todo adecuado, porque si bien, el género saprolegnia es el más

frecuentemente implicado en este tipo de lesiones, no debemos descartar al resto de hongos

que pueden producir un cuadro similar. Los hongos productores de micosis superficiales

pertenecen al filo “oomycota” (es decir, oomycetos), del reino “chormista”, estos hongos

evolucionaron a partir de las algas que perdieron su clorofila, y por esto son más parecidos a

los vegetales que a los animales.

Dentro de este grupo hay que destacar tres órdenes Saprolegniales, Peronosporales y

Leptomitales, capaces de producir enfermedad en los peces de agua dulce. Las especies más

frecuentemente halladas en los peces son: saprolegnia (S. Parasítica, S. diclina y S. Ferax,

principalmente), Achlya y Aphanomyces.

Figura 1. Foto Microscópica de la Saprolegnia sp.

xxi

Todas las especies de agua dulce son susceptibles de sufrir esta patología. Debemos

mencionar también que los saprolegniales son los patógenos más frecuentes de los huevos

de cría en agua dulce. Este hecho puede hacer que se pierdan camadas completas, ya que los

huevos poseen poca (o ninguna) protección frente a este tipo de patología. La gran excepción

a este hecho está representada por las especies que “cuidan la prole”, ya que los progenitores

les brindan una excelente protección. Esto no descarta que puedan infectarse, pero

generalmente no ocurre y sólo se afectan unos pocos huevos. Las especies marinas no suelen

padecer esta infección, ya que el agua salada resulta letal para estos hongos. Si bien se ha

obtenido desarrollo de Saprolegnia parasítica con concentraciones de sal del 1,75 %; no se

observó desarrollo a 3,5 % de NaCl.1

2.1.2. FORMA DE INFECCIÓN

Estos organismos son oportunistas, que viven en abundancia en el medio ambiente, y se

alimentan de restos orgánicos en descomposición.

De este modo, rara vez producirán lesiones en peces que se encuentren en perfectas

condiciones de salud, y en un medio adecuado. Por grande que sea la cantidad de esporas en

el agua, los peces “sanos” no sufrirán micosis superficiales.

Entonces, ¿qué es lo que hace que nuestros peces puedan padecer esta patología? Todos los

factores que disminuyan la resistencia del animal y de sus tejidos, toda depresión del sistema

de defensa (inmune) sea de causa intrínseca o extrínseca producirá un medio adecuado en el

animal para que las esporas del hongo se desarrollen produciendo lo que conocemos como

saprolegniasis. La puerta de entrada para estos microorganismos es cutáneo-mucosa, e

ingresan por lesiones macro o microscópicas relata Stevenson (1986).

2.1.3. PATOGENIA

La infección comienza cuándo las esporas del hongo alcanzan tejidos necróticos (muertos) en

un individuo incapaz de hacer frente a estos hongos. De este modo se produce la colonización

de los tejidos superficiales, principalmente la epidermis. Entonces la espora comienza a

desarrollarse, formando el micelio compuesto por hifas que darán lugar a la formación de

1 http://www.fao.org.com.

xxii

nuevas esporas, perpetuando el ciclo biológico del hongo (reproducción asexuada). En

algunas especies de hongos también existe una reproducción de tipo “sexual” en la que se

conjugan hifas femeninas y masculinas, es decir que existen “hongos macho” y “hongos

hembra” (dioicos). Algunos hongos poseen también la fase de reproducción sexual en ellos

mismos, produciendo un mismo organismo, tanto hifas macho como hifas hembras

(monoicos). Cuándo el micelio se desarrolla, se puede ver macroscópicamente la típica masa

"algodonosa" que nos facilitará el diagnóstico de ésta afección (Stevenson 1986).

En los tejidos del pez puede observarse ulceración y necrosis, a causa de las enzimas que los

hongos secretan para digerir el alimento antes de consumirlo. Esto produce una leve reacción

inflamatoria de tipo mononuclear, en la que participan linfocitos, monocitos y macrófagos. La

muerte puede sobrevenir a consecuencia de las micosis superficiales, esto no es frecuente,

pero en individuos intensamente afectados, y con algunas cepas particulares de hongos puede

ocurrir. Esto sucede porque los hongos destruyen la barrera osmótica que constituye la piel de

los peces, alterando así la osmorregulación, y produciendo una alteración hidroelectrolítica

letal. La invasión de los tejidos profundos no suele ocurrir en este tipo de micosis, por lo que

las micosis profundas no se consideran un grado avanzado de saprolegniasis.2

2.1.4. CLÍNICA

Astudillo (1990) Una vez que el hongo coloniza los tejidos del huésped y comienza a

desarrollarse, se pueden observar una o más “masas algodonosas” en la superficie del pez

afectado. Estas masas son los micelios del hongo, y su coloración que suele ser blanca, puede

aparecer de color gris, marrón, rojo o verde, dependiendo de si tienen o no sedimentos

atrapados, y de qué tipo de sedimentos sean.

Las zonas más afectadas del pez suelen ser la cabeza y el dorso, siguiendo en frecuencia la

afección de boca, aletas y branquias. En las ovas, esas masas algodonosas se forman alrededor

cubriendo su contexto y empiezan a colonizar los huevos circundantes (Astudillo, 1990).

A esto se suma el antecedente frecuente de otras afecciones previas, como enfermedades,

heridas o situaciones de estrés. Por esto, las micosis superficiales suelen afectar a uno o dos

individuos, y no suele propagarse al resto de habitantes del acuario. Lo que sí puede ocurrir en 2 http://www.irabia.org.com.

xxiii

este sentido, es que tengamos micosis sucesivas, es decir, se afecta un individuo, muere o

cura, y al tiempo se afecta otro. En estos casos debemos buscar el origen en las condiciones de

mantenimiento y en los parámetros del agua. “Los oomycetos son también los principales

patógenos de los huevos reproductivos; en este caso, la infección suele propagarse

rápidamente y determinar la pérdida de la carnada completa si no se aplica un tratamiento

efectivo y oportuno” (Astudillo, 1990).

Figura 2. Ciclo de vida de Saprolegnia sp.

Fuente: Romero (2001)

2.2. TRUCHA ARCO IRIS (Oncorhynchus mykis) 2.2.1. DESCRIPCIÓN DE LA ESPECIE

Blanco (1995) Los Salmónidos son peces fáciles de conocer por poseer un grueso pliegue

cutáneo, desprovisto de radios (aleta adiposa) situado sobre el dorso, entre la aleta dorsal y la

caudal. Cuerpo rollizo, cubierto de pequeñas escamas. Boca grande, el maxilar sobrepasa el

borde posterior del ojo. Presencia de dientes cónicos en ambas quijadas. Vómer dentado. Dos

aletas dorsales, la segunda adiposa. Aletas pectorales bajas y las ventrales de posición

xxiv

posterior al origen de la primera dorsal. Aleta caudal de borde posterior recto o ligeramente

cóncavo. Coloración: color de fondo dorado, con el dorso más oscuro. Cuerpo con manchas

negras y anaranjadas distribuidas irregularmente. Vientre amarillento. Aleta dorsal y en

algunos casos la aleta caudal manchas oscuras. Los ejemplares que habitan los lagos

presentan una coloración plateada y con manchas escasas o ausentes.

Dimensiones: superan los 100 cm. y llegan a pesar 16 kg. (Espinoza, 2003).

Figura 3. Ejemplar de trucha arco iris (Oncorhynchus mykis).

Fuente Romero (2001)

Su importancia reside fundamentalmente en sus cualidades naturales, que permiten su

explotación industrial. Con respecto a otras especies de salmónidos, la trucha arco iris muestra

una gran docilidad a la cautividad, tolerancia y adaptación social a la alta densidad

poblacional, con comportamientos menos agresivos que la trucha común. Tiene un amplio

margen de adaptación a la temperatura de las aguas y a las diversas condiciones ambientales

de los recintos artificiales donde se encuentra confinada, acudiendo con gran avidez a la

distribución de alimento3

.

Especie migratoria originaria de la vertiente del Pacífico de Norteamérica, que fue introducida

a Europa. En el Ecuador, ingresa a la sierra a mediados de los 40 del siglo pasado, esta

especie es importada por personas particulares con lagunas dentro de sus haciendas. La

encontramos en las aguas frías que bañan las cordilleras ecuatorianas y tiene predilección por

las aguas de los ríos y torrentes de montaña que no llegan a helarse completamente y de los

lagos formados por torrentes de altitud inferior a los 2.500 metros sobre el nivel del mar, o

3 http://www.ceniap.gov.ec

xxv

sea, aguas frías y batidas cuya temperatura oscila entre los 6 y los 17 ° C, limpias y muy

oxigenadas. Las encontramos en las 12 provincias de la Sierra y Amazonia de nuestro País,

los cultivos significativos están en las provincias de Pichincha y Azuay, donde se encuentra la

mayor superficie de producción. Nono, Mindo, Papallacta, en Pichincha y El Cajas en el

Azuay; son los sectores más representativos en la producción (García, 2001).

2.2.2. NOMBRE COMÚN

Blanco (1995) gráfica muy amenamente el origen y el nombre común en tres idiomas

distintos de las especies de truchas; aquí un extracto del cuadro con las especies más

representativas en el Ecuador.

Tabla 1. Extracto del cuadro "Denominación taxonómica y vernácula de las principales especies

de salmónidos", con los últimos manifiestos de la American Fisheries Society's.

Especie Origen N. Francés N. Ingles N. Español

Salmo trutta Linnaeus (1758) Truite bruñe Brown trout Trucha común

Oncorhynchus

mykis

Kendall R. L.

(1988) Trutie arcenciel Rainbow trout Trucha arco iris

Oncorhynchus

Clarki

Kendall R. L.

(1988) Trutie fardée Cuttthroat trout

T. garganta

cortada

Fuente: Blanco (1995).

2.3. GENERALIDADES EN LA PRODUCCIÓN DE OVAS

2.3.1. DESCRIPCIÓN DEL PROCESO DE OVAS

Blanco (1995) opina de la incubación “Los huevos permanecen en absoluto reposo en las

incubadoras, sin ningún tipo de movilidad o manipulación, hasta que se observe en ellos, a

simple vista, dos pequeños puntos móviles.” Más adelante prosigue “A nivel industrial, se

utilizan incubadoras de tipo vertical, llamadas así por el sentido ascendente o descendente que

xxvi

en ellas sigue el flujo de la corriente de agua. El agua de incubación fluye de forma continua a

través de los huevos, condición fundamental para ser oxigenados, pero sin provocar

movimientos o desplazamientos de los mismos.”

Se distinguen tres fases en el período que se extiende desde el principio de la incubación hasta

que finaliza la reabsorción de la vesícula

• Fase 1: Desde la fecundación hasta la aparición de los ojos.

• Fase 2: Desde la aparición de los ojos a la eclosión.

• Fase 3: Desde la eclosión hasta que finaliza la reabsorción de la vesícula.

Huet (1983) profundiza al decir; Durante los primeros días “diez a quince días para la trucha

común y cinco a ocho para la arco iris”, que siguen a la fecundación los huevos pueden

manipularse sin temor. A continuación, se vuelven muy sensibles a los choques y es preciso

dejarlos inmóviles, por lo menos hasta que aparecen los ojos claramente, en forma de dos

grandes puntos negros. Se dice entonces que los huevos están «embrionarios». Este instante

se localiza aproximadamente a mitad de la duración total de la incubación.

Figura 4. Huevo embrionario y alevín de trucha en su nacimiento.

Huet (1983) concluye su explicación acotando “Antes de ver los ojos ya puede saberse si los

huevos están fecundados o no. Para esto, desde el segundo día, se pueden colocar en la mezcla

siguiente: (tres partes de ácido crómico al 0,5 %, cuatro partes de ácido sulfúrico al 10 % y

treinta partes de alcohol de 96 %. Después de algunos minutos, en los huevos fecundados

xxvii

aparece una segmentación en dos o cuatro partes, se observa también un embrión si la

experiencia se hace más tarde. Después de ocho días el embrión aparece si se le coloca en una

solución de ácido acético o incluso de vinagre.”

La rapidez del desarrollo de las distintas fases de la incubación depende de varios factores,

que a su vez dependen sobre lodo de la temperatura. El desarrollo varía naturalmente según la

especie. Es más corto para la trucha arco iris que para la común. Para una misma especie, es

tanto más rápida cuanta más alta es la temperatura. La duración del desarrollo se expresa en

grados día, dato que indica el número de días que exigiría la incubación de los huevos de una

especie de pez a la temperatura de 1 grado centígrado (Blanco 1995).

Figura 5. Alevines de truchas en tres estados diferentes a) inmediatamente después de la

eclosión b) con la vesícula vitelina reabsorbida a medias c) con la vesícula vitelina

reabsorbida.

Blanco (1995) destaca la aparición de dos pequeños puntos móviles visibles a través de la

membrana externa, que es el nivel de desarrollo embrionario equivalente a 210-220 grados

Co/día, esta fase 1 denominada de fecundación y en la fase 2 denominada de “ojos visibles”.

En este lapso de tiempo entre la post-inseminación y la fase embrionaria de ojos visibles, es el

momento para la desinfección de las ovas.

xxviii

2.3.2. PROFILAXIS, HIGIENE Y DESINFECCION

Existen eficaces medios de lucha contra algunas enfermedades. Sin embargo, los mejores

medios de acción de que dispone la piscicultura son las medidas profilácticas e higiénicas; en

todos los casos los estanques naturales y artificiales de cultivo deben ser desinfectados. En la

lucha contra las enfermedades de los peces, lo mejor es procurar prevenirlas, pues sólo se

pueden curar unas pocas (Blanco 1995)

Huet (1983) define “En primer lugar, es necesario que el agua de alimentación de los

estanques sea suficientemente abundante y de buena calidad, con el fin de evitar los peligros

debidos a carencias de oxígeno y a las poluciones.

Los estanques se cuidarán de forma conveniente, luchando contra los hongos y la invasión de

fauna circundante. El fondo y los canales estarán bien instalados, para permitir la evacuación

completa del agua en el momento del vaciado. Los estanques se vaciarán regularmente y de

vez en cuando se desinfectarán con cal viva. Se impedirá la entrada de los peces salvajes por

medio de rejillas adecuadas.

Los peces han de estar en el mejor estado físico, manejando una densidad adecuada y

manipulaciones o traslados inútiles. En carpicultura es muy importante que los peces se sitúen

en verano en estanques sanos y ricos en alimentos naturales. En salmonicultura, la

alimentación artificial debe cuidarse especialmente, evitándose toda sobrealimentación.

En un cultivo siempre es interesante no depender de otras piscifactorías para proveerse de

huevos o peces de repoblación; si es necesario, se deberá recurrir a piscifactorías que estén

sanas. También es importante no tomar el agua de un curso en que se encuentra ya uno o más

establecimientos piscícolas.

En caso de enfermedad, los peces muertos y enfermos de gravedad se extraerán de los

estanques, enterrándose en cal viva. Los estanques infectados, así como el material utilizado,

han de ser desinfectados.”

xxix

2.3.3. DESCRIPCIÓN DE LA DESINFECCIÓN EN OVAS

Gracia (2001) Durante la incubación y alevinaje hay que desinfectar a los huevos, a intervalos

regulares, en principio cada dos días, se sacan los huevos y después los alevines muertos. La

saprolegniosis es provocada por ciertos hongos de los géneros Saproíegma y Achlya que se

desarrollan sobre los huevos muertos en los aparatos de incubación, pudiendo contaminar por

contacto los huevos próximos sanos. Estos hongos están presentes en todas las aguas dulces,

sobre todo en las ricas en materias orgánicas, donde encuentran un medio propicio para

desarrollarse. Los gérmenes del hongo parásito viven siempre en forma saprofita sobre restos

de alimentos y cadáveres de peces.

En realidad, no se puede considerar a la saprolegniosis como una enfermedad, pues se trata

más bien de un parásito de la debilidad, inofensivo para los peces que gozan de buena salud y

viven en un medio sano. Los huevos atacados están completamente envueltos por los hongos,

que cubren a los huevos muertos y a los sanos que están próximos, frecuentemente

aglomerados (Blanco 1995)

Ante todo, es necesario evitar o combatir las causas primarias: heridas, enfermedades,

debilitamientos y medios de infección ocasionados por la mala calidad del agua o por una

carga inicial demasiado grande. Los posibles tratamientos curativos de la saprolesniosis son

los baños, que se dan a los huevos en incubación. Se distinguen fácilmente los huevos

muertos de los sanos por el hecho de que se vuelven blancos y opacos. Los huevos muertos, si

no se extraen rápidamente, son atacados por las saprolegnias y contaminan a los huevos

próximos todavía sanos. Se los extrae con una pinza (de madera o latón) o con una pipeta, que

comprende una pera de goma y un tubo de vidrio de 5 a 7 mm. de diámetro interior, con

extremos tratados al fuego para no dañar a los huevos sanos. Manifiesta García (2001).

Huet (1983) define “Se vigila cuidadosamente la higiene general y, sobre todo, se busca

descubrir los primeros signos de aparición de enfermedades, particularmente la costiasis. Si

ésta aparece, se la combate con el baño de formol de Leger. Este baño contiene 40

centímetros cúbicos de formol comercial por 100 litros de agua; los alevines permanecen en él

un cuarto de hora. Durante el tratamiento se corta toda renovación de agua. El tratamiento lo

soportan bien los sujetos sanos y los enfermos curables, pero precipita la muerte de los sujetos

muy atacados, que de todas formas estaban condenados.”

(Newman, 2000) concluye “El desarrollo de la saprolegnia sobre los huevos de trucha en

incubación puede impedirse dándoles diariamente un baño de formol durante 15 minutos. Al

xxx

agua de incubación de las pilas se añade de 1 a 2 cm3 de formol al 30 por 100, por medio de

un recipiente provisto de un grifo.” Para evitar estos crecimientos, es ampliamente utilizado

un producto de acción fungicida, el llamado verde de malaquita, muy conocido por todos los

piscicultores. Es una sal de cobre, que en piscicultura debe utilizarse en estado puro, pues la

presentación comercial para tintorería tiene cloruro de zinc, tóxico para los peces. Se presenta

en el mercado en forma de polvo muy fino, de gran capacidad tintórea y, al parecer, con

potencial cancerígeno, que debe ser manejado con precaución, con guantes de goma y en

lugar abrigado del viento, procurando no respirar cerca.

Figura 6. Ovas de trucha.

Sobre la desinfección, Blanco (1995) explica que “durante el proceso de incubación, un

determinado porcentaje de huevos se deteriora, detiene su desarrollo embrionario y muere,

adquiriendo color blanquecino, rompiéndose en muchos casos la membrana externa y

saliendo su contenido al exterior, mezclándose con el agua de incubación. La concentración

masiva de material viviente en estas incubadoras industriales hace que sea habitual el

desarrollo de un hongo de rápido crecimiento y colonización que puede producir gran

mortalidad de huevos e incluso su extinción si no se toman las medidas adecuadas. Estos

hongos, de crecimiento habitual, son de la clase ficomicetos, Saprolegnia sp, que desarrolla

hifas y ramificaciones visibles a simple vista, que se alimenta de materia orgánica en des-

composición.”

Iañez, (1998) indica “El verde de malaquita debe ser utilizado ajustándose a las dosis

establecidas, pues diluciones muy concentradas o tiempos prolongados de exposición tienen

xxxi

efectos tóxicos para los huevos, alterando el crecimiento embrionario y ser motivo de abortos

y malformaciones. Generalmente, se utiliza diluido en agua en concentraciones de 4-5

mg/litro durante un tiempo de exposición de 20-30 minutos. Los tratamientos con verde de

malaquita pueden ser diarios o dos o tres veces por semana, durante el período embrionario, y

también, si se necesita, en la fase larvaria e incluso en alevines jóvenes.”

En otros apuntes Iañez, (1998) manifiesta que “el verde malaquita (generalmente un oxalato

de cobre) se utiliza corrientemente para combatir la aparición y proliferación de los hongos

sobre los huevos en incubación, la concentración que hay que conseguir en las garrafas o en

los depósitos de incubación es de 5 mg/l., o sea, 1 gr. de verde malaquita en 200 litros de agua

durante media o una hora. Previamente, se prepara una solución concentrada, por ejemplo, de

10 gr. de verde malaquita en un litro de agua. Se mide el volumen de agua en los depósitos de

incubación y se corta el agua de alimentación. Se extrae previamente la cantidad necesaria de

la solución concentrada para conseguir una concentración de 5 mg/1., o sea, 5 gr. por metro

cúbico en las pilas. Esta solución, a la que eventualmente se añade agua, se reparte

uniformemente en las pilas con ayuda de una regadera. Se deja correr un pequeño chorrito de

agua para repartir bien el producto.

Cuando la incubación se realiza en garrafas, la solución de verde malaquita se vierte en el

depósito de alimentación. El tratamiento se aplica dos veces por semana por término medio,

desde el día siguiente a la puesta hasta el momento en que se producen las primeras

eclosiones.”

Huet (1983) aconseja “Una concentración de 5 gr/m3 durante 45 minutos, repitiendo el

tratamiento cada 5 ó 6 días, hasta suspenderse al menos 5 días antes de la eclosión. El

tratamiento en las pilas de incubación se realiza de la forma siguiente. En la parte superior de

la pila se sitúa un recipiente que va provisto en su base de un pequeño agujero, por el que cae

la solución de verde malaquita al agua de alimentación. El recipiente que contiene una pe-

queña cantidad de solución se vacía en 45 minutos. La concentración de la solución se calcula

de forma que en las pilas se obtenga una de 5 gr. de verde malaquita por metro cúbico de

agua. Para tratar los huevos incubados en garrafas Zoug, se detiene temporalmente la

alimentación de agua para extraer a continuación casi la mitad de su contenido líquido, que se

reemplaza entonces por una solución que contenga 5 gr. de verde malaquita por metro cúbico

de agua. Después de haber mezclado bien el agua con ayuda de una pluma, se abre de nuevo

el grifo de alimentación.”

xxxii

Stevenson (1986) aconseja “una concentración de 10 gr. de verde malaquita por litro durante

15 minutos cada dos días. Hay que cortar el agua de alimentación durante el tratamiento.

También pueden tratarse los huevos manteniendo el caudal habitual.

“Se ha preconizado el procedimiento siguiente para los depósitos de incubación. Se mide

previamente el volumen de agua de los depósitos a tratar, así como el caudal de agua de

alimentación. La solución concentrada empleada contiene 10 gr. de verde malaquita por litro

de agua; se echa a las pilas 1/20 de su volumen. (Ejemplo: para una pila de 2 x 0,50 x 0.20 m.,

o sea de 400 litros, son necesarios 20 litros de solución de 10 gr. por litro, o sea, 200 gr.) Si el

caudal de agua es de 20 litros por minuto, la solución se vierte a la entrada de las pilas de tal

forma que caiga 1 litro por minuto (en el ejemplo anterior los 20 litros se verterán en 20

minutos); si el caudal es de 10 litros por minuto, se verterá 1 litro de solución cada dos

minutos, y así sucesivamente.” (Deufuel, 1957)

Figura 7. Ovas de trucha infectadas con saprolegnia.

Newman (2000) describe un método para el tratamiento de los huevos en las garrafas que

también puede aplicarse a las pilas de incubación. “Sobre la tubería de alimentación y más

allá del grifo regulador del caudal, se instala un tubo vertical de pequeño diámetro provisto de

una llave de paso. La solución de verde malaquita se introduce en este tubo por un sifón de

caudal constante y conocido. Si el caudal en las garrafas o en las pilas está regulado a razón

de 10 litros/min., el sifón deberá verter 10 cm³ por minuto de una solución que contenga 0,5

xxxiii

gr. de verde malaquita por litro, y esto durante 45 minutos. Este tratamiento se aplica dos

veces por semana.”

Enrique (1990) llama la atención sobre el hecho de que tratando los huevos de trucha arco iris

con verde malaquita se pueden provocar alteraciones cromosómicas. Por este motivo, miran

con ciertas reservas todo aquello que se refiera al empleo de la verde malaquita en

piscicultura.

No hay que olvidar que bajo el nombre de verde malaquita se encuentran en el comercio

varias sales básicas, cuya toxicidad para una misma concentración puede variar; “una sal

básica, un clorosilicato, debe rechazarse en usos piscícolas. Antes de utilizar el verde

malaquita en piscicultura se impone efectuar un ensayo previo” (Blanco, 1995).

2.4. PARTICULARIDADES DEL COMPUESTO

2.4.1. DESINFECTANTES

2.4.1.1 Definición

Iañez (1998) los define “Agentes Desinfectantes (o Germicidas): Son antimicrobianos capaces

de matar los microorganismos patógenos (infecciosos) de un material. Pueden (y en muchos

casos suelen) presentar efectos tóxicos sobre tejidos vivos, por lo que se suelen emplear sólo

sobre materiales inertes.”

Deben su acción a los ingredientes activos que contienen. Entre los principales tenemos: El

fenol, cresol, aceite de pino, alcohol isopropilico, etc., que son complementos emulsificantes

y otros ingredientes inertes como el agua, colorantes, fijadores, etc.

Sus características básicas son.

• Tener una buena concentración garantizará su efectividad y poder residual.

• Al aplicarse el producto que este no contamine o que su fecha de vencimiento no esté

expedida.4

4 http://www.princast.es.

xxxiv

2.4.1.2. Tipos de Desinfectantes

Según Blanco (1995) manifiesta que los desinfectantes se lo puede clasificar de acuerdo por

su mecanismo de acción, es decir, como ataca a los agentes infectantes:

• Agentes que dañan la membrana

Detergentes

Cresoles

Alcoholes

Etanol

Isopropanol

• Agentes desnaturalizantes de proteínas

Ácidos orgánicos no disociables

Agentes modificadores de grupos funcionales

Metales pesados

Compuestos de plata

Compuestos de cobre

Agentes oxidantes

Halógenos

Agua oxigenada

Permanganato potásico

Ácido peracético

Colorantes

Derivados de la anilina

Derivados de la acridina (flavinas)

• Agentes alquilantes.

Formaldehido

Glutaraldehido

Óxido de Etileno

ß-propionil-lactona

2.4.2. COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL COMPUESTO

Como se indica anteriormente, los desinfectantes más utilizados en la desinfección

embrionaria de la trucha arco iris han sido él verde malaquita o disoluciones de cloruro de

sodio (sal común) y formol. Sobre todo por su la fácil comercialización y costo.

xxxv

El compuesto en estudio tiene una composición química de Agua oxigenada, acetanilida,

ácido acético y alcohol. Esta composición en medidas establecidas de 1 litro, 20 gramos, 2

litros y 100 mililitros, respectivamente; Aforados a 20 litros de agua tratada; da como

resultado, un desinfectante con espectros mínimos de residuos en el agua y gran eficacia. A su

vez, un litro del concentrado es diluido en 20 litros de agua natural pura; de esta dilución, se

obtendrá las tres concentraciones para su estudio:

• Agua Oxigenada 1 000 mililitros

• Acido Acético 2 000 mililitros

• Alcohol 100 mililitros

• Acetanilida 20 gramos

Es también por su composición, un agente desnaturalizante de proteínas, degradante de

membranas y un buen agente oxidante, lo que asegura su eficacia.

2.4.2.1. Peróxido de hidrogeno

Compuesto químico de hidrógeno y oxígeno, de fórmula H2O2. El peróxido de hidrógeno

anhidro en estado puro es un líquido incoloro en forma de jarabe con una densidad relativa

igual a 1,44. Tiene sabor metálico y puede causar ampollas en la piel. El líquido se solidifica a

-0,41 °C. Es inestable en disoluciones concentradas y el líquido en estado puro puede explotar

si se calienta por encima de 100 °C. Es soluble en agua en cualquier proporción y para usos

comerciales se emplea en disoluciones acuosas del 3% y el 30%. Para ralentizar la

descomposición del peróxido en agua y oxígeno, se le añaden sustancias orgánicas como la

acetanilida y se almacena en botellas oscuras a baja temperatura.

El peróxido de hidrógeno se fabrica en grandes cantidades por electrólisis de disoluciones

acuosas de ácido sulfúrico, de bisulfato ácido de potasio o de sulfato ácido de amonio.

También se prepara por la acción de los ácidos sobre otros peróxidos, como los de sodio y

bario.

xxxvi

Figura 8. Enlace químico del Peróxido de hidrógeno.

Actúa como agente reductor y oxidante. Sus propiedades oxidantes se aprovechan para

blanquear sustancias, como el pelo, marfil, plumas y materiales delicados que podrían dañarse

empleando otros agentes. En medicina se utiliza en disoluciones acuosas al 3% como

antiséptico y colutorio. También se usa en la restauración de los colores originales de cuadros

oscurecidos al transformarse el plomo blanco de las pinturas en sulfuro de plomo negro. El

peróxido de hidrógeno oxida el sulfuro de plomo y lo transforma en sulfato de plomo blanco.

También es una fuente de oxígeno en la mezcla combustible de cohetes y torpedos. Como

agente reductor sólo reacciona con productos químicos fácilmente reducibles como el óxido

de plata y el permanganato de potasio.5

2.4.2.2. Acetanilida

Acetanilida, amida derivada del ácido acético y de la anilina, de fórmula CH3-CO-NH-C6H5.

es la N-fenilacetamida.

Se prepara fácilmente, con buen rendimiento, hirviendo fenilamina o anilina a reflujo con una

disolución de ácido acético durante cuatro horas. Es el producto de la acetilación de la anilina.

También se obtiene calentando este compuesto con cloruro de acetilo o con anhídrido acético.

La acetanilida es un sólido blanco cristalino, casi insoluble en agua fría, pero muy soluble en

agua caliente. Es un compuesto neutro. Si se trata con ácidos o bases fuertes sufre una

reacción de hidrólisis en la que se obtiene anilina. Se utiliza en medicina como antitérmico,

con el nombre de antifebrina (Astudillo, 1990).

5 http://www.fc.udg.es.

xxxvii

Figura 9. Composición Química de la Acetanilida.

2.4.2.3. Ácido acético

Ácido etanoico o Ácido acético, líquido incoloro, sabor amargo de fórmula CH3 COOH y de

olor irritante. En una solución acuosa actúa como ácido débil. Este compuesto puro recibe el

nombre de ácido etanoico glacial, debido a que se congela a temperaturas ligeramente más

bajas que la ambiente. En mezclas con agua solidifica a temperaturas mucho más bajas. El

ácido etanoico es miscible (mezclable) con agua y con numerosos disolventes orgánicos.

Puede obtenerse por la acción del aire sobre soluciones de alcohol, en presencia de cierta

clase de bacterias como la bacterium aceti. Las soluciones diluidas (de 4 a 8%) preparadas de

este modo a partir del vino, sidra o malta constituyen lo que conocemos como vinagre. El

ácido etanoico concentrado se prepara industrialmente mediante distintos procesos, como la

reacción de metanol (alcohol metílico) y de monóxido de carbono (CO) en presencia de un

catalizador, o por la oxidación del etanal (acetaldehído).

Figura 10. Acido Acético.

xxxviii

El ácido acético se utiliza en la producción de acetato de rayón, plásticos, películas

fotográficas, disolventes para pinturas y medicamentos como la aspirina. Tiene un punto de

ebullición de 118 °C y un punto de fusión de 17 °C (Astudillo, 1990).

2.4.2.4. Alcohol

Garcia (2001) Término aplicado a los miembros de un grupo de compuestos químicos del

carbono que contienen el grupo OH. Dicha denominación se utiliza comúnmente para

designar un compuesto específico: el alcohol etílico o etanol. Proviene de la palabra árabe

alkuhl, o kohl, un polvo fino de antimonio que se utiliza para el maquillaje de ojos. En un

principio, el término alcohol se empleaba para referirse a cualquier tipo de polvo fino, aunque

más tarde los alquimistas de la Europa medieval lo utilizaron para las esencias obtenidas por

destilación, estableciendo así su acepción actual.

Los alcoholes tienen uno, dos o tres grupos hidróxilo (-OH) enlazados a sus moléculas, por lo

que se clasifican en monohidroxilicos, dihidroxilicos y trihidroxilicos respectivamente. El

metanol y el etanol son alcoholes monohidroxilicos. Los alcoholes también se pueden

clasificar en primarios, secundarios y terciarios, dependiendo de que tengan uno, dos o tres

átomos de carbono enlazados con el átomo de carbono al que se encuentra unido el grupo

hidróxilo. Los alcoholes se caracterizan por la gran variedad de reacciones en las que

intervienen; una de las más importantes es la reacción con los ácidos, en la que se forman

sustancias llamadas ésteres, semejantes a las sales inorgánicas. Los alcoholes son

subproductos normales de la digestión y de los procesos químicos en el interior de las células,

y se encuentran en los tejidos y fluidos de animales y plantas (García, 2001).

El alcohol de madera, alcohol metílico o metanol, de fórmula CH3OH, es el más simple de los

alcoholes. Antes se preparaba por destilación destructiva de la madera, pero hoy en día casi

todo el metanol producido es de origen sintético, elaborado a partir de hidrógeno y monóxido

de carbono. El metanol se utiliza para desnaturalizar alcohol etílico, como anticongelante,

disolvente para gomas y lacas, así como en la síntesis de compuestos orgánicos como el

formaldehido. Al ser ingerido en forma líquida o inhalada en vapor, puede resultar peligroso.

Tiene un punto de fusión de -97,8 °C y un punto de ebullición de 64,7 °C. Su densidad

relativa es de 0,7915 a 20 °C.

xxxix

Figura 11. Alcohol en su enlace Químico.

El alcohol de vino, alcohol etílico o etanol, de fórmula C2H5OH, es un líquido transparente e

incoloro, con sabor a quemado y un olor agradable característico. Es el alcohol que se

encuentra en bebidas como la cerveza, el vino, el brandy. Debido a su bajo punto de

congelación, ha sido empleado como fluido en termómetros para medir temperaturas

inferiores al punto de congelación del mercurio, -40 °C, y como anticongelante en radiadores

de automóviles.

Normalmente el etanol se concentra por destilación de disoluciones diluidas. El de uso

comercial contiene un 95% en volumen de etanol y un 5% de agua. Ciertos agentes

deshidratantes extraen el agua residual y producen etanol absoluto. El etanol tiene un punto de

fusión de -114,1 °C, un punto de ebullición de 78,5 °C y una densidad relativa de 0,789 a 20

°C.

Desde la antigüedad, el etanol se ha obtenido por fermentación de azúcares. Todas las bebidas

con etanol y casi la mitad del etanol industrial aún se fabrican mediante este proceso. El

almidón de la patata (papa), del maíz y de otros cereales constituye una excelente materia

prima. La enzima de la levadura, la cimasa, transforma el azúcar simple en dióxido de

carbono. La reacción de la fermentación, representada por la ecuación

C6H12O6 → 2C2 H5OH + 2CO2.

xl

Es realmente compleja, ya que los cultivos impuros de levaduras producen una amplia gama

de otras sustancias, como el aceite de fusel, la glicerina y diversos ácidos orgánicos. El

líquido fermentado, que contiene de un 7 al 12% de etanol, se concentra hasta llegar a un 95%

mediante una serie de destilaciones. En la elaboración de ciertas bebidas como el whisky y el

brandy, algunas de sus impurezas son las encargadas de darle su característico sabor final. La

mayoría del etanol no destinado al consumo humano se prepara sintéticamente, tanto a partir

del etanal (acetaldehído) procedente del etino (acetileno), como del eteno del petróleo.

También se elabora en pequeñas cantidades a partir de la pulpa de madera.

La oxidación del etanol produce etanal que a su vez se oxida a ácido etanoico. Al

deshidratarse, el etanol forma dietiléter. El butadieno, utilizado en la fabricación de caucho

sintético, y el cloroetano, un anestésico local, son otros de los numerosos productos químicos

que se obtienen del etanol. Este alcohol es miscible (mezclable) con agua y con la mayor parte

de los disolventes orgánicos. Es un disolvente eficaz de un gran número de sustancias, y se

utiliza en la elaboración de perfumes, lacas, celuloides y explosivos. Las disoluciones

alcohólicas de sustancias no volátiles se denominan tinturas. Si la disolución es volátil recibe

el nombre de espíritu.

Los alcoholes superiores, de mayor masa molecular que el etanol, tienen diversas aplicaciones

tanto específicas como generales: el propanol se usa como alcohol para frotar y el butanol

como base para perfumes y fijadores. Otros constituyen importantes condimentos y

perfumes.6

6 http://www.aquagen.com.

xli

xlii

3. MATERIALES Y MÉTODOS

3.1. MATERIALES

3.1.1. LOCALIZACIÓN Y UBICACIÓN GEOGRÁFICA

Esta investigación se realizó en la Estación Piscícola del Centro Nacional de Investigaciones

Acuícola (CENIAC), propiedad del Ministerio de Agricultura, Ganadería y Pesca (MAGAP).

Sitio Papallacta, ubicada en el Km. 65 vía Quito Baeza, Provincia del Napo, cantón Quijos;

con una altitud 3300 metros sobre el nivel del mar y una temperatura promedio de 10 ºC en

invierno y de 8 ºC en verano.

Figura 12. Estación piscícola del CENIAC.

3.1.2. EQUIPOS Y MATERIALES

• Termómetro.

• Cintas de medición de pH.

• Oxigenómetro.

• Recipientes.

• Baldes.

xliii

• Cinta métrica o plexo metro.

• Estacas o hitos.

• Cuerdas.

• Cámara de fotos.

• Armarios de incubación.

• Yodo.

• Tubos de pvc.

• Mangueras de plásticos.

• Botellas de oxigeno.

• Transporte.

• Alevines de trucha arco iris.

• Alimento balanceado.

• Alcohol.

• Ácido acético.

• Peróxido de hidrógeno (45 volúmenes)

• Acetanilida.

3.1.3. VARIABLES EN ESTUDIO

• Sobrevivencia de las ovas

3.1.4. MEDICIÓN DE LA VARIEBLE

Sobrevivencia de las ovas. Variable cuantitativa expresada como el porcentaje de ovas que

sobreviven en el proceso de eclosión o fase embrionaria.

3.2. MÉTODOS 3.2.1. ANÁLISIS BIBLIOGRÁFICO

La investigación bibliográfica es una recopilación de información, organización y realización

de un análisis crítico, para clasificar y ordenar las investigaciones, opiniones y sugerencias de

diferentes autores. Para esto se necesitó la ayuda de libros, revistas, boletines informativos,

periódicos, publicaciones, folletos e internet.

xliv

3.2.2. MÉTODO DE ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Este método fue considerado para realizar comparaciones de las variables que se analizaron;

se utilizan el análisis de sobrevivencia y ortogonal para valorar los resultados. Estos datos

sirvieron para obtener debidas conclusiones y poder realizar evaluaciones del desempeño de

las variables.

3.2.3. ANÁLISIS DE FORTALEZAS Y DESVENTAJAS

El Análisis FODA es una herramienta que permitió conformar un cuadro de las características

positivas y negativas del desinfectante, obteniendo de esta manera un diagnóstico para

examinar su eficacia, particularidades y potenciar su uso. El término FODA es una sigla

conformada por las primeras letras de las palabras Fortalezas, Oportunidades, Debilidades y

Amenazas.

3.2.4. PROCEDIMIENTO

3.2.4.1. Desove y Siembra

Para comenzar el proceso de reproducción de la trucha arco iris, preparamos los reproductores

para el desove; En este caso, estos pertenecen al lote 6, de aproximadamente 4 años de edad;

los mismos que son anestesiados por 5 minutos en aceite de clavo (concentrado de clavo de

olor).

Figura 13. Reproductores de Trucha arco iris.

xlv

Por otra parte se desinfectan los tanques de eclosión; para ello se utilizó el desinfectante en

estudio, en una concentración alta (70 %), una vez limpiado rigurosamente el área, abrimos el

paso de agua y desinfectamos. Tomamos parámetros (Temperatura, Oxigeno disuelto, pH y

otros)

Temperatura 6,5 grados centígrados

Oxígeno disuelto 8,25 miligramos por litro

pH 7 Neutro

Cuando los reproductores están listos para la fecundación extraemos en un recipiente los

huevos y colocamos el esperma sobre ellos; mezclamos lenta y pausadamente hasta tener una

mezcla homogénea. Para finalizar el desove y comenzar la fase embrionaria, depositamos 100

gr de huevos fecundados en las canastillas de eclosión y tomamos una pequeña muestra para

conocer el peso promedio de cada ova.

Peso promedio 0,080 gramos por ova

Peso de siembra 100 gramos por canastilla

Promedio 1250 ovas por canastilla.

Las canastillas estarán colocadas como se expresa en el cuadro 1.

Cuadro 1. Distribución de las canastillas.

Canastilla A1 Canastilla B1 Canastilla C1 Canastilla T

Solución al 0.90 % Solución al 0.60 % Solución al 0.30 % Testigo Sol. Yodo

Al terminar este proceso las ovas se encuentran fecundadas y listas para empezar el proceso

embrionario, el cual se dará en su totalidad en las canastillas de eclosión.

xlvi

Figura 14. Canastillas de eclosión.

Fase embrionaria: El proceso de post- inseminación (fase de fecundación), tardara entre 210

a 220 grados Co día, hasta el periodo embrionario de ojos visibles.

En la estación epicentro de nuestra investigación, esta fase de 210 a 220 grados Co días se

logra en un tiempo aproximado de 40 a 50 días; En este periodo de tiempo se procede a

realizar las diferentes profilaxis y/o higiene de las ovas. Con 3 diferentes diluciones del

compuesto peróxido de hidrógeno (0.30 %, 0.60 % y 0.90 %) y un testigo; en todo el periodo

de incubación.

Las ovas se colocan en armarios de incubación, con una capacidad de 10 000 huevos cada

uno, donde se incuban por alrededor de 22 a 25 días (210-220 grados Co/día de fase

embrionaria), luego se las llevó hacia las piletas de eclosión, donde permanecerán alrededor

de 15 días, de ahí son considerados juveniles y su ciclo de vida se hace en las piscinas de

engorde.

Desinfección: La desinfección se realiza retirando las ovas de las canastillas de eclosión y

colocándolas en cernideros, los mismos que se introducen en un recipiente con agua y las

diferentes diluciones; utilizando el yodo (yodofort) como testigo; Ahí se mantiene a las ovas

xlvii

por un periodo de diez (10) minutos; Después de este tiempo las ovas regresan a sus

respectivas canastillas.

Este proceso se repite cada ocho (8) días, durante toda la investigación. En cada realización se

cuentan y retiran los organismos muertos de cada canastilla; Se toman parámetros

(temperatura, oxigeno disuelto y pH) y se realiza una limpieza (sifoneo) de las canastillas,

para retirar los residuos de materia orgánica y suciedad (lodo y otros) que ingresan con el

agua.

Figura 15. Proceso de desinfección.

Transferencia: Una vez que las ovas han alcanzado los 210 a 220 grados Co día, los alevines

de trucha revientan su saco vitelino y empiezan a digerirlo, en este momento las

desinfecciones son paralizadas y se espera la absorción (alimentación del propio alevín de su

saco vitelino) para dar por terminado el estado de ovas y pasan a tanques de mayor tamaño

donde siguen su proceso normal, ya como alevines de trucha arco iris.

El promedio normal de transferencia de alevines en la estación piscícola del CENIAC es de

alrededor del 10 al 20 % dependiendo la estación del año; con la utilización de yodo como

elemento de higiene.

xlviii

4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

4.1. SOBREVIVENCIA DE OVAS Se inicio el experimento con una población inicial promedio de 1250 ovas de trucha por

canastilla, el descenso en la población fue gradual en los tres tratamientos y testigo, aunque se

observo en dos muestreos un mayor número de mortalidad, en comparación a las otras

semanas; eso se debió a factores climáticos inapropiados (Anexo 4), ya que en esas semanas

hubo una gran cantidad de materia orgánica y sedimentos en el agua, producto de climas

lluviosos en el entorno.

Cuadro 2. Sobrevivencia.

No se detecto diferencia estadística significativa entre los datos de sobrevivencia de los

tratamientos (Anexo 1), teniendo un promedio porcentual de 16,55 % para el primer

tratamiento (A); 13,03 % para el segundo (B); 12,72 % para el tercero (C) y 15,05 % para el

testigo (T).

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1 2 3 4 5 6 7 8

SEMANAS

A1

B1

C1

T1

xlix

4.2. ANÁLISIS DE TRATAMIENTOS

Los tratamientos y el testigo tuvieron una sobrevivencia similar en las tres repeticiones; El

tratamiento A tiene una sobrevivencia ligeramente mayor con el 17,29 %, pero no

estadísticamente significativa con relación a los otros dos tratamientos y el testigo (Anexo 2).

Con el análisis de tratamiento establecimos que ningún tratamiento fue significativo al testigo;

en cambio, gracias al análisis ortogonal observamos que el tratamiento A es el efectivo en

relación a los tratamientos B y C; Con lo que concluimos que el tratamiento A es más eficaz

que los tratamientos B y C (Anexo 3).

4.3 FORTALEZAS Y DESVENTAJAS Fortalezas

• Fácil manipulación

• Concentraciones bajas

• Costo de producción bajo

Oportunidades

• Mercado con pocas iniciativas comerciales

• Introducción en otras especies en producción (nauplios – larvas - alevines)

Debilidades

• Fácil preparación

• Riegos en manipulación no adecuada

• Toxico en concentraciones altas

Amenazas

• Productos competidores de fácil acceso

• Poca experiencia en su utilización

• Falta de criterios técnicos en producción

l

4.4. EXPERIENCIAS El uso del peróxido como desinfectante fue efectivo a simple vista, como agente de limpieza

de agua y huevos fue eficaz; permitiendo obtener después de la exposición de los huevos al

producto, una asepsia total en todos los aspectos.

Factores externos (temperatura, turbidez, oxigeno disuelto, entre otros) afectan el proceso de

desinfección más que el mismo hongo o paracito. Esto se puede comprobar en los muestreos

de los días IV y V (Ver anexo 4), en el primer caso, lo antecedieron días de clima muy

lluvioso y cargas altas de sedimentación en el agua, al contrario del siguiente muestreo, que

tubo días anteriores favorables con un clima soleado. Factor que incidió en los conteos de

sobrevivencia, siendo los muestreos de mayor y menor mortalidad respectivamente.

El desinféctate utilizado en los tratamientos tuvo una característica especial al momento de ser

colocado, ya que indirectamente ayudo al reconocimiento de los huevos fecundados; Lo que

no se logra con el Yodo. Por lo que se establece un uso.

La sobrevivencia fue baja en todos los tratamientos incluyendo el testigo, siendo el mayor

porcentaje de 16,55 % y 12,72 % el menor, Diferencia que no es suficiente para comprobar

eficacia. La eficiencia en la desinfección no fue mejorada con ninguno de los tratamientos.

li

lii

5. CONCLUSIONES

1. El tratamiento A (peróxido al 0, 90 %), fue el de mayor eficacia en la desinfección de

ovas. Llegando a tener el 17, 29 % de sobrevivencia en una repetición y el 16,55 % en

promedio.

2. Se consiguió una limpieza absoluta de las ovas y canastillas al aplicar el tratamiento.

3. Ayudo al reconocimiento de los huevos fecundados.

4. Se recomienda una investigación más detallada de la utilización del peróxido como

desinfectante y en otras aplicaciones. A demás cambios relevantes como concentración,

forma de distribución, protocolo de desinfección, entre otras actividades posibles de

realizar en nuevas investigaciones.

liii

liv

6. RESUMEN

Con el presente trabajo de investigación se trato de establecer la eficacia en el control de la

saprolegniosis y la desinfección de ovas de trucha arco iris (Oncorhynchus mykis) utilizando

un compuesto químico a base de peróxido de hidrogeno (H₂O₂). El estudio se hizo en las

instalaciones del departamento de producción de ovas y alevines del CENIAC, en el sector de

Papallacta. Al compuesto se lo comparo con un desinfectante a base de Yodo que es el de

mayor uso en el control de saprolegnia sp.

La investigación tuvo tres repeticiones; con una cantidad promedio de ovas de 1250 unidades

por canastilla; Se expuso a las ovas a baños sumergidos en el compuesto durante 10 minutos

con tres diferentes soluciones 0, 30 %, 0, 60 %, 0, 90 % y un testigo a base de Yodo al 10 %.

Realizando muestreos semanales para controlar parámetros: físicos, químicos y retirar los

huevos no eclosionados, infértiles y muertos.

La sobrevivencia fue la variable en estudio y los resultados obtenidos muestran como

sobrevivencia mayor el 17 % y la menor 12 % en los diferentes tratamientos y testigo.

También se pudo observar que los factores externos tienen más injerencia en la mortalidad

que el mismo hongo. Concluimos que el tratamiento A es el más eficaz en la desinfección de

ovas.

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lvi

7. SUMMARY

In this investigation we want to demonstrated the efficiency of a chemical compound based

on peroxide of hydrogen (H₂O₂), in the control of the saprolegniosis and the disinfection of

eggs of trout rainbow (Oncorhynchus mykis). The study was done in the installations of the

department of production of eggs and fries of the CENIAC, in Papallacta's sector. The potion

was compare with disinfect based on Iodine, usually use in the control of saprolegnia sp.

The investigation had three repetitions; with 1250 eggs in each box; there was exposed to the

eggs to baths immersed in the potion during 10 minutes with three different solutions at 0, 30

%, 0, 60 %, 0, 90 % and a witness based on Iodine at 10 %. Realizing weekly samplings to

control parameters: physicists, chemists and to withdraw the eggs not found, unfertile and

dead.

The survival was the variable in study the obtained results are 17 % to the best survival and

12 % to the worse, in the different treatments and witness. Also it was possible to observe that

the external factors have more interference in the mortality that the same mushroom. All that

leads us to concluding, that the potion A was the best in the disinfection and control of

saprolegniosis.

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lviii

8. BIBLIOGRAFÍA

ASTUDILLO N. 1990. Respuestas de Alevines de Salmo Gairdneri Bajo Crianza en Piletas

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STEVENSON J. P. 1986. Manual de Cría de la Trucha. Editorial Acribia. España. Primera.

45p.

lix

lx

ANEXOS Anexo 1 Tabla 2. Análisis de varianza.

F tabular

Fuente de Análisis G.L. SC CM Fc 0.05 0.01

Tratamiento 3 7339,00 2446,33 3,76 n.s. 4,07 7,59

Error 8 5206,67 650,83

Total 11 12545,67

Anexo 2

Tabla 3. Análisis de Tratamiento.

TRATAMIENTO REPETICIONES (%) PROMEDIO I II III

A 17,29 15,96 16,40 16,55 B 17,45 11,90 9,73 13,03 C 12,68 12,03 13,44 12,72 T 15,28 15,63 14,26 15,06

PROMEDIO 15,68 13,88 13,46 FC= 3837776,33

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Anexo 3 Tabla 4. Análisis ortogonal.

TRATAMIENTOS

A B C Testigo

636,00 465,00 465,00 580,00

1 abc vs

test.

1 1 1 -3 12

2 a vs bc 2 -1 -1 0 6

3 b vs c 0 1 -1 0 2

Anexo 4 Tabla 5. Diario de mortalidades

Taq. Siembra I II III IV V VI VII VIII TOTAL SOBREV. SUMA Sim.-Morta. Diferencia % De Sobrev.

A1 1250 113 118 148 284 85 147 141 7 1043 218 1261 207 11 17,29B1 1250 111 117 126 185 86 220 132 7 984 208 1192 266 -58 17,45C1 1250 96 196 138 360 61 158 70 2 1081 157 1238 169 -12 12,68T1 1250 118 204 126 189 51 134 192 89 1103 199 1302 147 52 15,28

A2 1250 104 154 136 278 102 164 161 7 1106 210 1316 144 66 15,96B2 1250 118 165 130 302 77 108 172 9 1081 146 1227 169 -23 11,90C2 1250 111 227 111 314 67 171 87 2 1090 149 1239 160 -11 12,03T2 1250 112 215 117 207 57 176 189 12 1085 201 1286 165 36 15,63

A3 1250 111 256 131 155 89 188 127 3 1060 208 1268 190 18 16,40B3 1250 114 227 130 168 80 138 160 13 1030 111 1141 220 -109 9,73C3 1250 105 260 125 158 75 174 125 2 1024 159 1183 226 -67 13,44T3 1250 116 34 125 308 116 141 236 6 1082 180 1262 168 12 14,26

CONTEO DE MORTALIDAD

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Anexo 5

Figura 16. Piscinas de engorde y reproductores.

Anexo 6

Figura 17. Canastillas de eclosión.

lxiii

Anexo 7

Figura 18. Recolección de huevos muertos. Anexo 8

Figura 19. Desinfección de ovas en diferentes soluciones.

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Anexo 9

Figura 20. Ovas en canastillas. Anexo 10

Figura 21. Ovas en canastas para desinfección.

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Anexo 11

Figura 22. Observación de ovas al microscopio.

Anexo 12

Figura 23. Muestra de ovas infectadas.

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Anexo 13

Figura 24. Fotografía microscópica de Ovas. Anexo 14

Figura 25. Alevines de trucha arco iris.