IMPORTANCIA DE LA ETAPA

PREANALITICA EN LOS TEJIDOS

Dra. Gabriela Acosta Haab Hospital Maria Curie – San Isidro Patologia

Medicina de Precisión

• Patologia Convencional

• Patologia Personalizada

• Patologia Moderna

DIAGNOSTICO MORFOMOLECULAR

• Diagnostico Morfológico• Diagnostico Molecular

PATOLOGIA MORFOMOLECULAR

DIAGNOSTICO MORFOMOLECULAR

• Optimizar el manejo de los tejidos• Preservar la Morfologia• Preservar la Genomica• Preservar la Proteomica

PATOLOGIA MAMARIA

• Diagnostico Morfológico

• Tipo tumoral

• Grado Histológico

• Embolias

• Compromiso ganglionar

• Perfil Hormonal

• Perfil Molecular

Tejido es la fuente de información:

• Morfología

• Proteinas

• ADN

• ARN

Pautas para preservar la información del tejido

ETAPAS : Preanalitica Analitica Interpretacion

• Estamos todos involucrados• Comienza antes de la recolección de la muestra

• Conociendo los pasos criticos

• Cuidando el tejido cuidamos el paciente

Ciclo de las muestras en el laboratorio

Etapa preanalitica

Antes de 1 hs fijacion en

formol buffer

Fijacion entre 8 a

72 hs

Laboratorio paciente =

numero = tacos = informe

Estudio macroscopico Procesador del formol a

la parafina

Realizar el tacoCortar el tacoColorear el preparadoDiagnosticoInforme = numero de

protocolo= numero de taco

Etapa postanalitica - analitica

Guias Internacionales:

http://www.msal.gob.ar/images/stories/bes/graficos/000000

1339cnt-20180921-guia-inmunohistoquimica-para-tecnicos.pdf

http://www.msal.gob.ar/images/stories/bes/graficos/0000001339cnt-20180921-guia-inmunohistoquimica-para-tecnicos.pdf

• Etapa Preanalitica:

• Isquemia Caliente

• Isquemia Fría

• Fijador

• Tiempo de Fijación

• Incorporar datos al informe AP

Isquemia Caliente

• Tiempo entre la ligadura de las arterias y extraccionde la muestra

• Tipo de operación

• Modalidad de la intervencion

• Habilidad del cirujano

• De 30´ a 1 hr es una hipoxia a 37 ° comienza

la arteracion del ARN

Isquemia Fría

• Tiempo que tarda la muestra en ser colocada en el

formol

• Todas las guías recomiendan que sea un tiempo

menor a 1 hora

• Si se prolonga comienza la acidosis y degradación

enzimática

• Se altera por igual el ARN, ADN y las Proteínas

Fijador: Formol 10%

• Universalmente aceptado

• Para tejidos y coagulos citologicos

• Desnaturaliza las proteinas

• Rompe los puentes de Hidrogeno ( cross linking )

• Forma grupos hidroximetilenos

• Inactiva enzimas que degradan en tejido

Fijador: Formol 10%

• El formol comercial contiene 7-15 % de metanol

para estabilizarlo

• Por lo tanto la fijacion es doble formol metanol

• La cantidad de aldheido varia con la temperatura

• El tipo de agua que utilizamos y el pH varian la

estabilidad del formol

Fijador: pH

• El pH es importante porque casi todos los procesos

biológicos son pH dependientes y mínimos cambios

pueden alterarlos

• El pH 7 evita la acidificación a acido fórmico y

disminuye la cinética de fijación

Tiempo optimo de fijacion

• Entre 6 a 72 hs

• El formol penetra 1 mm por hora

• Llega a un plateau a las 24 hs

• La relacion muestra folmol es de 1/10

Fijador

Formol buffer

• Se puede comprar ya preparado

• ( duración de 6 a 12 meses )

• Se puede preparar

• ( duración 3 meses )

Preparación:

• Formaldehido 40% 100 ml

• Agua Destilada 900 ml

• Fosfato de Sodio monobásico 4 grs

• Fosfato de Sodio dibasico 6.5 grs

• Envase de 10 litros

• Única uso

• Cierre hermético

• Dosificaciones precisa

• Evita derrames

• No ingresa oxigeno

• Sistema sellado

• Disminuye la exposición

Fijador Formol 10% pH7

La mayoría de los kits comerciales para IHQ, ISH, técnicas moleculares y

test genéticos estas optimizados para tejidos fijados en formol e incluidos

en parafina

• Encuesta desde la Sociedad Argentina de Patología

• Charlas en Hospitales y Sanatorios

• Charlas en Escuelas de Instrumentadoras

• Charlas en Jornadas y Congresos

Que necesitamos los patólogos

• Saber el tiempo de isquemia fría :

• Horario de extracción de la muestra

• Horario en que la muestra fue puesta en el fijador

•

• Tipo de fijador

• Con esto el patologo va a saber el tiempo de fijacion

• TODOS ESTOS DATOS DEBERIAMOS INCLUIRLOS EN LOS INFORME DE ANATOMIA PATOLOGICA

• Hoy para un diagnostico integrado desde la morfología a lo molecular el primer paso es cuidar la etapa preanalítica de los tejidos

• Tenemos que educar a todos los que están involucrados en el proceso

• Trasmitir la importancia que tiene preservar el tejido