Universidad de San Carlos de Guatemala

Facultad de Ingeniería

Escuela de Ingeniería Química

Ing. Carlos Wong

PRÁCTICA NO. 1: USO DEL MICROSCOPIO

Luis Emilio Garcia Laj

2012 13048

Sección Q

Guatemala, 6 de agosto del 2015

Índice

Introducción 3

Cuerpo de investigación

Partes del microscopio 4

Historia del Microscopio 6

Uso del aceite de inmersión 9

Instrumentos de laboratorio 9

Conclusiones 17

Recomendaciones 18

Bibliografía 19

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Introducción

Dado que la Microbiología es una ciencia muy amplia, es necesario establecer los

principios que la rigen para un mejor entendimiento de la misma. Se empieza entonces

con aspectos preliminares para introducirse al estudio de la microbiología. Por ejemplo, se

da un detalle de cada una de las partes del microscopio, instrumento esencial en esta

ciencia, ya que permite observar todos aquellos microorganismos que a simple vista no es

posible ver, así como una breve reseña histórica de los orígenes del mismo. Se incluyen

también los instrumentos comúnmente encontrados dentro del laboratorio y su función,

para llevar a cabo de forma exitosa todas las prácticas.

Todo esto es de suma importancia debido a que antes de empezar con cada una de las

prácticas, es necesario conocer el equipo con el cuál se estará trabajando y sus funciones.

Se hace especial énfasis en el microscopio, ya que este instrumento requiere aprender a

manipular algunas de sus partes para analizar el microorganismo o cuerpo de la mejor

manera posible. Resulta también interesante conocer la historia del microscopio ya que a

lo largo del tiempo, es posible observar cómo este instrumento ha ido evolucionando para

dar cada vez imágenes de mejor resolución.

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Cuerpo de la investigación

Partes de un microscopio

Ocular: es el lente situado cerca del ojo del observador (por aquí mira). Su objetivo es

ampliar la imagen del objetivo. Suele tener dos oculares, por eso se llama binoculares, si

solo posee uno, se denomina monocular.

Tubo: se puede acercar o alejar de la preparación (lo que se desea ver) por medio de un

tornillo macrométrico o de grandes movimientos cuya función es realizar un primer

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enfoque. El tornillo macrométrico permite hacer un movimiento rápido hacia arriba o

hacia abajo del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la imagen a observar.

Revólver: posee los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos.

La esfera suele denominarse cabezal y contiene los sistemas de lentes oculares

(monoculares o binoculares, según corresponda).

Brazo: es una pieza metálica de forma curvada que puede girar; sostiene por su extremo

superior al tubo óptico y en el inferior lleva varias piezas importantes.

Platina: es el lugar donde se deposita la preparación que se desea observar. Tiene en su

centro una abertura circular por la que pasará la luz del sistema de iluminación.

Objetivo: es la lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta

determinando las cantidades de aumentos con la que queremos observar.

Pinzas de sujeción: es una parte mecánica que sirve para sujetar la preparación. La

mayoría de los microscopios modernos poseen las pinzas adosadas a un carro con dos

tornillos, que permiten un avance longitudinal y transversal de la preparación.

Condensador: es una lente que concentra los rayos luminosos que inciden sobre la

preparación. El condensador de la parte de abajo también se denomina foco y es el que

dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

Tornillos de enfoque: macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico que

consigue el enfoque correcto.

Base: es básicamente la sujeción de todo el microscopio.

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Historia del Microscopio

Desde tiempos remotos, los antiguos sabían que los espejos curvos y las esferas de

cristal llenas de agua aumentaban el tamaño de las imágenes. En las primeras décadas del

siglo XVII se iniciaron experiencias con lentes (así llamadas por tener forma de lentejas) a

fin de lograr el mayor aumento posible. Para ello se basaron en otro instrumento con

lentes que obtuvo gran éxito, el telescopio, usado por primera vez con fines astronómicos

por Galileo, en 1609. Antes de esta fecha, los seres vivientes más pequeños conocidos

eran insectos diminutos. Naturalmente, se daba por sentado que no existía organismo

alguno más pequeño.

Los instrumentos para aumentar la visión de los objetos, o microscopios (la palabra

griega significa “para ver lo pequeño”) comenzaron a usarse progresivamente. Por

primera vez la biología se ampliaba y extendía gracias a un mecanismo que llevaba el

sentido de la vista humana más allá de sus límites naturales. Así, los naturalistas podían

describir en detalle los pequeños organismos, cosa de otro modo imposible, y los

anatomistas podían descubrir estructuras hasta entonces invisibles. Existían dos tipos de

microscopios: el sencillo y el compuesto; el sencillo no era más que una lente montada, el

compuesto estaba formado por una combinación de lentes.

Fue así entonces como el microscopio se inventó, alrededor de los años 1610, por

Galileo, según los italianos, o por Jansen, en opinión de los holandeses. La palabra

“microscopio” fue utilizada por primera vez por los componentes de la Accademia dei

Lincei, una sociedad científica a la que pertenecía Galileo y que publicaron un trabajo

sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja. A pesar de todo, las primeras

publicaciones importantes en el campo de la microscopía aparecen en los años 1660 y

1665, cuando Malpighi prueba la teoría de Harvey sobre la circulación sanguínea al

observar al microscopio los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia.

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Fue así entonces como a mitad del siglo XVII un comerciante holandés, Leeuwenhoek,

utilizando microscopios simples de fabricación propia describió por primera vez

protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos, atribuyéndosele de esta manera

los primeros grandes avances en la ciencia, y en particular en las ciencias biológicas.

Afortunadamente, años más tarde, gracias a la invención del microscopio óptico, el

hombre pudo tener evidencia del gran mundo que existía más allá de las lentes y

descubrir así un universo inorgánico, como los cristales de la sal de mesa o las sales de

oxalato que se encuentran en la orina y cuya acumulación es la causa de los cálculos

renales. Asimismo, pudo observar los lentos desplazamientos de un parásito intestinal, la

ameba, lo que también ayudó a que se quitara la venda del oscurantismo y dar así los

primeros pasos en la ciencia moderna. Un hecho más, de entre tantos destacables, fue

que gracias al microscopio óptico algunos químicos y médicos, como Louis Pasteur y

Robert Koch, pudieran estudiar las enfermedades que asediaban a la humanidad. Aunque

el microscopio de Leeuwenhoek es simple, logra aumentos de hasta 480 veces el tamaño

de los objetos usando una sola lente, como las lupas, a pesar de su poca complejidad.

El microscopio óptico consta de tres sistemas: mecánico, de iluminación y óptico. El

sistema mecánico se encarga de dar estabilidad y fuerza a este aparato, así como facilitar

su manejo. Su función más importante consiste en sostener el sistema óptico y variar la

distancia entre las lentes y lo que deseamos observar. La iluminación se encarga, como su

nombre lo indica, de iluminar lo que se quiere ver. Finalmente, el sistema óptico aumenta

(ópticamente) el tamaño de las imágenes y está integrado por lentes de cristal que

desvían la luz al pasar a través de ellas, concentrándola o dispersándola.

Durante el siglo XVIII el microscopio sufrió diversos adelantos mecánicos que

aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso aunque no se desarrollaron mejoras

ópticas. Las mejoras más importantes de la óptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica

su teoría del microscopio y por encargo de Carl Zeiss mejora la microscopía de inmersión

sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener aumentos de 2000A

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principios de los años 30 se había alcanzado el limite teórico para los microscopios ópticos

no consiguiendo estos, aumentos superiores a 500X o 1000X sin embargo existía un deseo

científico de observar los detalles de estructuras celulares (núcleo, mitocondria... etc.).

Así entonces, desde 1660 hasta la actualidad el microscopio óptico ha sido el pilar

fundamental en el conocimiento de lo invisible. Aunque su poder de resolución aumentó a

través del tiempo (con la mejora en la calidad de las lentes) al igual que el poder de

magnificación, su factor limitante fue la longitud de onda de la luz. En 1930 el mundo sub

microscópico se amplió con la aparición del microscopio electrónico cuya ventaja principal

con respecto al microscopio óptico es un aumento de 1000 veces en la magnificación del

material observado acompañado de una mayor capacidad de resolución generando una

mejor definición y una ampliación del mundo microscópico. ADN, virus y pequeñas

organelas fueron observadas por primera vez con este microscopio. La mayoría de los

pioneros en la microscopía electrónica en biología siguen vivos y los más importantes son:

Albert Claude, Don Fawcett, Earnest Fullam, Charles Leblond, John Luft, George Palade,

Daniel Pease y Keith Porter. Claude y Palade recibieron el Premio Nobel de Medicina en

1974 por sus logros en biología celular utilizando el microscopio electrónico.

Existen dos tipos básicos de microscopios electrónicos los cuales fueron inventados al

mismo tiempo pero tienen diferentes usos. El microscopio electrónico de transmisión

(MET) proyecta electrones a través de una fina capa de tejido o material a observar

produciendo una imagen en dos dimensiones sobre una pantalla fosforescente. El brillo en

un área particular de la imagen es proporcional al número de electrones que son

transmitidos a través del material. El microscopio electrónico de barrido (MEB) produce

una imagen que da la impresión de ser en tres dimensiones. Este microscopio utiliza dos o

tres puntos de la muestra donde llegan los electrones que escanean la superficie del

espécimen a observar y salen del espécimen como electrones secundarios siendo

detectados por un sensor. La imagen se produce como el espécimen entero, a diferencia

del MET donde la imagen corresponde sólo a los electrones transmitidos.

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¿Para qué se emplea el aceite de inmersión?

El aceite de inmersión para microscopía posee aproximadamente el mismo índice de

refracción que el vidrio. Mediante el aceite de inmersión se elimina casi por completo la

desviación de los rayos de luz y se aumenta de manera considerable la eficacia de los

objetivos de los microscopios. El reactivo debe almacenarse entre 15°C y 30°C. Después de

abierto, el contenido es estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Los

frascos deben mantenerse siempre bien cerrados. Para el procedimiento, en la

observación al microscopio debe inicialmente enfocarse la correspondiente parte en el

preparado de la lámina. Entonces se gira un poco la torre del objetivo. Se agrega una gota

de aceite de inmersión sobre el área a observar y se gira a su posición original el objetivo

de inmersión. Cuando se ha acabado el proceso de observación al microscopio, se limpian

la lente frontal y el preparado para eliminar el aceite de inmersión. El microscopio usado

debe cumplir los requisitos de un laboratorio de diagnóstico medio. Los preparados deben

estar secos antes de la observación al microscopio con aceite de inmersión, es decir,

deben dejarse secar bien los preparados o, si es necesario, montar un cubreobjetos, ya

que de lo contrario la imagen se enturbia.

Instrumentos utilizados dentro del laboratorio

Bandeja: sirve para manipular productos peligrosos dentro del laboratorio.

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Lupa: es un instrumento utilizado para observar insectos, células y sus estructuras.

Pinzas: son utensilios, generalmente de metal, que permiten sujetar algunos objetos del

laboratorio.

Pinzas de crisol: es una herramienta de acero inoxidable y su función es sostener y

manipular capsulas de evaporación, crisoles y otros objetos. Se utiliza principalmente

como medida de seguridad cuando estos son calentados o poseen algún grado de

peligrosidad al manipularlos directamente.

Balanza: es un instrumento de laboratorio que mide la masa de un cuerpo o sustancia

química, utilizando como medio de comparación la fuerza de la gravedad que actúa sobre

el cuerpo.

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Mechero: se utiliza para calentar, fundir o evaporar sustancias. La llama del mechero que

arde correctamente es transparente y tiene un matiz azulado.

Gradilla: es un utensilio utilizado para dar soporte a los tubos de ensayos o tubos de

muestras.

Gafas protectoras: es un equipo que debe utilizarse en todo momento, ya que protege a

los ojos de salpicaduras de reactivos químicos.

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Probeta: tubo de cristal alargado y graduado, cerrado por un extremo, usado como

recipiente de líquidos o gases, el cual tiene como finalidad medir el volumen de los

mismos.

Tubo de ensayo: este instrumento permite la preparación de soluciones.

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Beaker: también se le conoce como vaso de precipitados. Su objetivo principal es

contener líquidos o sustancias químicas diversas de distinto tipo.

Gotero: se usa para trasvasar pequeñas cantidades de líquido vertiéndolo gota a gota.

Pipeta: permiten la transferencia de un volumen generalmente no mayor a 20 ml de un

recipiente a otro de forma exacta. Este permite medir alícuotas de líquido con bastante

precisión. Suelen ser de vidrio. Está formado por un tubo transparente que termina en

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una de sus puntas de forma cónica, y tiene una graduación (una serie de marcas grabadas)

indicando distintos volúmenes.

Embudo: es una pieza cónica de vidrio o plástico que se utiliza para el trasvasijado de

productos químicos desde un recipiente a otro. También es utilizado para realizar

filtraciones.

Portaobjetos: Lámina de vidrio rectangular de color transparente utilizada para almacenar

muestras y objetos con el fin de observarlas bajo el microscopio. Para mantener la

muestra segura, se utiliza un cubreobjetos que es colocado sobre la muestra bajo el

portaobjeto.

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Caja de Petri: Recipiente redondo, hecho de vidrio o de plástico, posee diferentes

diámetros, es de fondo bajo, con una cubierta de la misma forma que la placa, pero un

poco más grande de diámetro, ya que se puede colocar encima y cerrar el recipiente,

como una tapa.

Bisturí: cuchillo usado en cirugía y disecciones para cortar tejidos, órganos y abrir.

Microscopio: es un instrumento que permite observar objetos no perceptibles a al ojo

humano. Esto se logra mediante un sistema óptico compuesto por lentes, que forman y

amplifican la imagen del objeto que se está observando.

Cubreobjetos: es una fina hoja de material transparente de planta cuadrada o rectangular.

Se coloca sobre un objeto que va a ser observado bajo microscopio, el cual se suele

encontrar sobre un portaobjetos.

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Termómetro: es un instrumento utilizado para medir la temperatura con un alto nivel de

exactitud. Puede ser parcial o totalmente inmerso en la sustancia que se está midiendo.

Esta herramienta está conformada por un tubo largo de vidrio con un bulbo en uno de sus

extremos.

Espátula: es una lámina plana angosta que se encuentra adherida a un mango hecho de

madera, plástico o metal. Es utilizada principalmente para tomar pequeñas cantidades de

compuestos o sustancias sólidas, especialmente las granulares.

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Regla: es un instrumento de medición con forma de plancha delgada y rectangular que

incluye una escala graduada dividida en unidades de longitud, por ejemplo centímetros o

pulgadas; es un instrumento útil para trazar segmentos rectilíneos con la ayuda de un

bolígrafo o lápiz, y puede ser rígido, semirrígido o muy flexible, construido de madera,

metal, material plástico, etc.

Conclusiones

1. Es de suma importancia conocer las partes del microscopio para llevar a cabo una

buena ejecución de este instrumento.

2. El microscopio ha sufrido distintos cambios a lo largo de la historia, los cuales han

ido mejorando la estructura del mismo.

3. El microscopio permitió a la humanidad observar partículas y cuerpos diminutos

que antes no era posible.

4. La invención del microscopio se atribuye a los griegos, ya que ellos desde ese

entonces buscaban la manera de ampliar algunos objetos a la vista.

5. Dentro del laboratorio existen diversos instrumentos, por lo que es necesario

conocer la función de cada uno para llevar a cabo de forma exitosa los

experimentos.

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Recomendaciones

1. Aprender a utilizar de forma adecuada los tornillos micro y macro métricos del

microscopio, para tener un mejor enfoque en el objeto que se está analizando.

2. Portar en todo momento dentro del laboratorio el equipo respectivo de seguridad

para evitar cualquier accidente debido a salpicaduras, quemaduras, derrames,

entre otros.

3. Utilizar de manera cuidadosa los instrumentos dentro del laboratorio, ya que la

mayoría están fabricados de vidrio.

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Bibliografía

1. Ciencias Naturales: partes de un microscopio. Consultado el 04/08/2015.

Disponible vía web en: http://www.areaciencias.com/partes-microscopio.htm

2. Especialidades Diagnósticas IHR, Ltda. Aceite de inmersión. Consultado el

04/08/2015. Disponible en:

http://www.ihrdiagnostica.com/tecnicas/pdf/AceiteDeInmersionv2.pdf

3. Lanfranconi, Mariana. Historia de la Microscopia. Universidad Nacional de Mar de

Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Introducción a la Biología.

Consultado el 04/08/2015. Disponible en:

http://vet.unicen.edu.ar/html/Departamentos/Samp/Microbiologia/Historia%20de

%20la%20Microscopia.pdf

4. Pelczar, Michael J. Microbiología. México: McGraw-Hill, 1982.

5. Revista de divulgación científica y tecnológica de la universidad Veracruzana.

Historia del Microscopio. Volumen XXV, Número 1. Disponible en:

http://www.uv.mx/cienciahombre/revistae/vol25num1/articulos/historia/

6. TP – Laboratorio Químico: materiales e instrumentos de un laboratorio químico.

Consultado el 05/08/2015. Disponible en:

http://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-

instrumentos-de-un-laboratorio-quimico/

7. Volk, Wesley A. Microbiología básica. México: Harla, 1996. Séptima edición.

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