T4V- BACTERIÓFAGOS (3)

8/16/2019 T4V- BACTERIÓFAGOS (3)

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BACTERIÓFAGOS

Universidad Nacional de Trujillo

Dr. Raúl Anhuamán Azabache


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FrederickTwort!"!#$

Feli% D&'(relle

!"!)$

HISTORI

- Mezcló extractos de aguas fecalescon bacilos entéricos en placas conagar.- Observó placas líticas-“Bacteriophage”

gentes filtrables!colonias de"icrococos“#ransfor"aciónvidriosa”


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CARACTERÌSTICAS

- $os "%s abundantes! & "illónpartíc.'gota de "ar ( &)) "illones' g. detierra- *iclo de cultivo! &+-,) "inutos &)-,))partículas'ciclo- /esisten a la acción del t0( desecación1"ueren 2)3*'+) "in. fago de 4. lactis25*'+) "in.-4on antigénicos-

4on específicos de hospedador! puedenelegir ( distinguir cepas bacterianasdentro de una "is"a especie 6cepas de 4.tiph( con g 7i8.


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TAMAÑO

$a "a(oría "iden de ,-)) n" de longitud.

-#, fagos "as grandes1 "iden )) n" de largo (:)-&)) n" de ancho.


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1. CABEZA:;cosaédricaCápside:- 4ubunidades proteícas 6una o variasclases8-4intetizadas ba? o /?

ESTRUCTURA


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2. COLA-Organo de fi


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lgunos fagos!+. Me"brana lipoproteica

- fago @M 6@seudoaltero"onas8


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4i"etria binaria*ola contr%ctil>?-=agos #

TIPOS MORFOLÓGICOS DEFAGOS

4i"etria binaria*ola larga no contr%ctil>?-=ago D. coli

4i"etria binaria*ola corta no contr%ctil>?-


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;coaedrico4in cola*apsó"eros grandes

>?-&=ago @hi x&E,

4in cola*apsó"ero peCueFo/?-&=ago = D. coli 1 M4

4in cabeza=ila"entoso 6flexible8>?-&=ago fd de D. coli M&+


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A. ACIDO NCLEICO&. $a "a(oría tienen >? 6#> ( #G8. Gn grupo de fagos /? 6#G8

+. /epresenta el A)H del peso seco,. Modificación Cuí"ica! glicosilación ( "etilación

!. El "a#o P$2 tiene ADN %.D.- enzi"as! endonucleasa ( una poli"erasa de /?dependiente del >?

COMPOSICIÓN QUÍMICA


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$E%ILACI&N

I glicosilado de la A-JM*

JO*J-

O*J-

A-J;>/OK;MD#;$*;#O4;?

'LICO(ILACI&N*;#O4;?


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Base )odi"icada Baseree)pla*ada

+a#o ,ospedador

A- Jidroxi"etilcitosina *itocina #1#,1#2 D. coli

A-"etilcitosina *itocina K@& Kanto"onasor(zae

A- hidroxi"etiluracilo #i"ina L e B. subtilis

I-@utrescenilti"ina #i"ina L N&, @s. acidovorans

A- hidroxipentiluracilo #i"ina 4@&A B. subtilis

I -gluta"iladenina denina 4@&) B.subtilis

- "inoadenina denina 4$ 4(nerococcuselongus

BA(E( $ODI+ICADA( DE AL'NO( +A'O(


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B. P-O%ENA(

&. Dn la cabeza1 tallo central1 vaina ( fibras caudales. =recuente b%sicos en proteínas de la c%pside+. 4ubunidades proteicas repetidas,. lgunos fagos con polia"inas! esper"ina (

esper"idina 6facilita el e"paCueta"iento del %cidonucleico8

A. @rotege de las nucleasas1 participa en la adsorción (penetración


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$arta C/ase 0Al"red ,ers/e0

EXPERIMENTOS CON FAGOS

RADIACTIVOS: HERSHEY Y CHASE

(1952).

>e"ostraron Cue!-Dl @ for"a parte sola"ente del >?( el 4 de las proteínas- Gsaron fagos #, "arcando su >? con @+ ( otros "arcando su proteína

con 4+A

REPLIC CION DE LOS

F GOS


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Co)probacin del )arcae correcto delos "a#os %3 sola)ente en el ADN

- ;nfectaron D. coli cultivado en un "ediocon @+- $os descendientes tenían "arcados su>? con @+


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prote4na

Co)probacin del )arcae correcto delos "a#os %3 sola)ente en las prote4nas


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In"eccin de bacterias con "a#os %3)arcados en su ADN con P52


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In"eccin de bacterias con "a#os %3)arcados en sus prote4nas con ( 5!


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=ago reventado por choCue os"ótico

La )ol6cula portadorade la in"or)acin en los"a#os T4 es el ADN 0 no

las prote4nas.

entra en las bacterias ADNdel "a#o


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R*+,-A-/N0-,/ ,-T-/


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FASES :

- Adso!"#- P$#$%&'!"#- P&d!d' d$ ' $#*o%+&'- ,!os#%$s!s d$ &o%$#'s / 0!do #+$!o- E#s''3$- M'd+&'!"#- 4!$&'!"#


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1. AD(O-CI&N-. $a superficie del fagos es "odificada por cationes

68-. Dn algunos casos "odificada por triptófano-. 4e adsorben a receptores-. 4e adsorben +)) partículas de fago'bacteria

bacteriófago #, adherido através de sus fibras a un flagelobacteriano.


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-eceptor +a#o ,ospedador

=lagelo @B4& B. subtilis=i"bria = M&+1/&E1fd D. coli

$ipopolisac%rido #+1#,1#E D. coli

@roteínasexternas de las

"e"branas para#ransporte defierro

#& D. coli

#ransporte denucleósidos

#2 D. coli

#ransporte de"altosa

$a"da D. coli

cido teicoico L P B. subtilis

-ECEP%O-E( PA-A LA AD(O-CION DE +A'O(


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2. PENE%-ACI&N- $os fagos # pares con colas contractilesse"e


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5. PE-DIDA DE LA EN7OL%-A8 En los 9irus en9ueltos


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CICLO LI(O'ENICO DEL+A'O

&

+

,

A

2


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CONDICIONE( PA-A >E OC--A LA LI(I( BAC%E-IO+?'ICA

&. *iclo lítico! "a#o sea 9irulento o l4tico. Dxistencia de receptores en los pili1 pared

bacteriana1flagelo+. Rue la bacteria se encuentre en fase de

"ultiplicación


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AISLAMIENTO DE FAGOS

1. Toma de muestra y transporte

2. Tratamiento de la muestra

3. Fase de enriquecimiento

4. Prueba de la mancha o de la placa


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TITULACION DE FAGOS

adecuada


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&. Biología "olecular. =agoterapia! disenteria1 control biológico de D. coli O&AE+. Dnzibióticos6 enzi"as liticas fagicas 8 o endolisinas! destruir pared

celular 6lisozi"as81 endo-B-?-acetilglucosa"inidasas1endopeptidasas,. >iagnóstico bacteriano! tipificación de bacterias patógenasA. =agotipia

2. >etectar portadoresE. ;ndice de conta"inación fecal de agua ( ali"entos:. 7ehículos de propagación de genes de resistencia a antibióticos

APLICACIONES


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Dn biología "olecular


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Co)pa@ia No)breco)ercial

A#ente

;ntralt(tix 6DDGG8 $M@-&)Dcoshield.

4@$K-&1@$47-&.;?#S,)&

$isteria.Dscherichia.

4al"onella.*lostridiu"

Biophage @har"a;nc. 6*anad%8

># ,). 4al"onellat(phi"uriu"6cerdos8

DK@O?D?#;$Biotherapies6DDGG8

$istex $isteria 6=>8

Productos con "a#os ue /an sidoco)erciali*dos en pa4ses no europeos

FAGOTIPIA


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+i#. 28. =agotipia. 8 Orden decolocación de los fagos seleccionados.

B8 fagotipo o lisotipo A'A':) 6Qrupo ;8

FAGOTIPIA: -*apacidad Cue tienen virus concretos para infectar bacteriasespecíficas-$a especificidad de adsorción puede usarse para identificar cepasbacterianas

Dn algunos casos1 las diferentes cepas de 4. aureus son lisadas pordiversos fagos aunCue1 en otras ocasiones1 sola"ente lo hace unnico fago


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Toshua $ederberg6&PA8

?orton Uinder

6&PA8

+ENO$ENO( DE %-AN(+E-ENCIA 'EN;%ICA

1. %-AN(DCCI&N! $os fagos "oderados pueden transportar"aterial genético de una bacteria a otra

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