DIAGNOSTICO MOLECULAR. DIAGNOSTICO ENFERMEDADES GENETICAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS

DIAGNOSTICO MOLECULAR

DIAGNOSTICO

• ENFERMEDADES GENETICAS

• ENFERMEDADES INFECCIOSAS

DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES GENETICAS

Detección del gen responsable:

• ausencia del gen

• defecto causado por deleción

• defecto causado por una mutación puntual

• defecto causado por translocación

• defecto causado por incremento de trinucleótidos repetitivos

DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS

I. Detección directa del agente etiológico

- detección visual por microscopio

- cultivo del agente patogénico

Problemas / Desventajas :

- Algunos parásitos son morfológicamente indistinguibles entre sí

- escondidos entre los tejidos

- baja sensibilidad

- patógenos dificiles de cultivar,

- contaminación de los cultivos con hongos

- toma mayor tiempo para que crezcan los patógenos en cultivo.

II. Detección indirecta por presencia de anticuerpos

Problemas / Desventaja

- no discrimina infección presente o pasada- reacciones cruzadas (por determinantes antigénicos compartidos por diferentes

microorganismos)

- Detección de algún componente o molécula del patógeno: DNA, RNA o Proteína.

- Se considera como diagnóstico directo.

- Actualmente son los sistemas de diagnóstico con mayor especificidad, mayor sensibilidad, y mayor rapidez.

DIAGNOSTICO MOLECULAR

SISTEMA DE DIAGNOSTICO TRADICIONAL

Conventional diagnosis methods

Diagnóstico Molecular

• Ribotyping• Restriction fragment length polymorphism

(RFLP)• DNA hybridization• PCR, RT-PCR, RAPD• Secuenciamiento de ácidos nucleicos

1. Prenatal

2. Pre-sintomático

3. En tiempo real (monitoreo)

DIAGNOSTICO MOLECULAR : Tres niveles

DIAGNOSTICO MOLECULAR : Tres niveles

I. Prenatal :

• enfermedades hereditarias

• Predisposición genética – sospecha clínica

II. Pre-sintomático: (Dx. temprano)

• Enfermedad infecciosa (fase temprana)

• Predisposición a Enfermedades como el cancer, autoinmunes, degenerativa, transtornos afectivos (historia clinica familiar)

III. En tiempo real (monitoreo):

• Características del patógeno (identificación, virulencia, resistencia a drogas)

• Estado inmunológico (carga antigénica, o cantidad de anticuerpos)

• Estado de la enfermedad (detección de marcadores)

• Monitoreo al tratamiento: marcadores, respuesta al tratamiento, resistencia, etc…

Gel Electrophoresis

Southern Blot Analysis

Sonda marcada

Acido nucleico inmovilizado

RFLP

GGATCCCCTAGG

Diagnóstico molecular de Anemia Falciforme:

Hb A Pro - Glu - Glu

CCT-GAG-GAG

Hb S Pro - Val - Glu

CCT GTG GAG

La enzima de restricción MstII reconoce la secuencia CCTNAGG

RFLP + DNA hybridization

Hibridación In situ

PCR

Fundamentos, Variantes & Aplicaciones

DIAGNOSTICO MOLECULAR EN EL FUTURO