INTRODUCCION
La cromatografa es esencialmente un mtodo fsico de separacin en
el que los componentes a separar se distribuyen entre dos fases
dispuestas de tal manera que mientras una permanece estacionaria
dentro del sistema (fase estacionaria), la otra se desplaza a lo
largo de l (fase mvil).La clave de la separacin en cromatografa es
que la velocidad con la que se mueve cada sustancia depende de su
afinidad relativa por ambas fases (equilibrio de distribucin En
general, los componentes ms afines a la fase estacionaria avanzan
lentamente (ms retenidos) mientras que los ms afines a la fase mvil
(menos retenidos) se mueven con mayor rapidez. Por consecuencia, el
medio cromatogrfico (columna, placa o papel) funciona como un
controlador de la velocidad de cada sustancia que constituye la
mezcla, logrando as su separacin y mediante el uso de un detector,
su caracterizacin qumica.Existen diversos tipos de cromatografa,
los cuales se clasifican segn el soporte, la fase mvil o el
mecanismo de separacin.A la distribucin final de los componentes en
funcin de su posicin sobre la fase estacionaria, o del tiempo en
que eluyen se le denomina cromatograma.Prcticamente no existen
restricciones sobre la naturaleza de las fases a utilizar, siempre
que la fase estacionaria se solida o liquida y la fase mvil liquida
o gaseosa, por lo que es posible en principio realizar por medio de
la cromatografa la separacin de los componentes de cualquier
mezcla. Las tcnicas cromatogrficas no estn exentas de ciertas
dificultades, debido a la gran cantidad de parmetros que pueden
influir en el proceso de separacin, lo que puede llegar a
dificultar la eleccin de las condiciones ptimas de separacin lo que
puede implicar la irreproducibilidad de los resultados.
OBJETIVOS El alumno ser capaz de separar e identificar los
compuestos presentes en una mezcla. Conocer y realizar la tcnica de
cromatografa en capa fina. Determinar los valores de Rf de
diferentes sustancias y correlacionar estos valores con la relacin
que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y
la de la fase mvil utilizada.
FUNDAMENTO Se acostumbra clasificar los mtodos cromatogrficos
segn el estado fsico de la fase mvil en: CROMATOGRAFA LQUIDA. La
fase mvil es un disolvente o mezcla de disolventes y la fase
estacionaria un slido que interacta con las sustancias que se desea
separar (cromatografa lquido-slido), o bien un lquido inmiscible
con la fase mvil, depositado en la superficie de un slido
(cromatografa lquido-lquido). Esta forma de cromatografa puede
realizarse con diferentes arreglos experimentales: en columna, en
capa delgada o en papel. En el primer caso, la fase estacionaria se
encuentra rellenando un tubo; en el segundo, se dispersa sobre una
lmina de vidrio o aluminio formando un lecho de espesor uniforme;
en la cromatografa en papel, la fase estacionaria es la solucin
acuosa contenida en el interior de las celdas formadas por las
fibras de la celulosa, y es por tanto una forma de cromatografa
lquido-lquido.CROMATOGRAFA DE GASES. En este caso la fase mvil es
un gas inerte (helio o nitrgeno) y la fase estacionaria es un slido
(cromatografa gas-slido) o un lquido sostenido por un slido inerte
(cromatografa gas-lquido). Este tipo de cromatografa siempre es en
columna, ya que es la nica manera de que la fase mvil gaseosa se
mantenga fluyendo, confinada dentro del sistema. La columna puede
estar rellena con la fase estacionaria, en forma semejante a la
cromatografa lquida, o bien la fase estacionaria puede depositarse
sobre las paredes de un tubo muy delgado (0.25mm de dimetro) y
largo (hasta 100m).
De acuerdo con el mecanismo de retencin, la cromatografa se
puede clasificar en los siguientes tipos: Adsorcin (normal, de fase
reversa) particin lquido-lquido intercambio inico permeacin sobre
gel de afinidad
Se emplea en: El anlisis de drogas y frmacos, en fluidos
biolgicos como la saliva, la sangre, la orina; Seguir la
transformacin de las sustancias responsables de la transmisin
neurolgica; Determinar la presencia de contaminantes en el medio
ambiente; Descifrar la composicin de los combustibles fsiles;
Realizar el control de calidad de los productos qumicos y
farmacuticos manufacturados, entre otros.
CROMATOGRAFIA EN CAPA FINALa cromatografa en capa fina se basa
en la preparacin de una capa, uniforme, de un adsorbente mantenido
sobre una placa de vidrio u otro soporte. Los requisitos esenciales
son, un adsorbente, placas de vidrio, un dispositivo que mantenga
las placas durante la extensin, otro para aplicar la capa de
adsorbente, y una cmara en la que se desarrollen las placas
cubiertas. Es preciso tambin poder guardar con facilidad las placas
preparadas y una estufa para activarlas. La fase mvil es lquida y
la fase estacionaria consiste en un slido. La fase estacionaria ser
un componente polar y el eluyente ser por lo general menos polar
que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se
desplacen con mayor velocidad sern los menos polares. .Al realizar
la eleccin del adsorbente se debe tener en cuenta el tamao de las
partculas del adsorbente, cuanto ms finamente dividido est mayor
ser su adhesin al soporte, aunque tambin se le puede aadir un
adherente. En la eleccin del eluyente influyen varios factores:
Pureza. No utilizar mezclas de eluyentes (reproducibilidad). No
utilizar compuestos muy voltiles. Evitar que contengan trazas de
metales (catalizadores). Generalmente se utiliza como reactivo
revelador yodo, el cual forma complejos coloreados con los
componentes orgnicos (con tonos amarillo-marrn), pero las manchas
desaparecen con el tiempo con lo que es conveniente sealar las
manchas aparecidas. Otro reactivo revelador bastante utilizado es
el cido sulfrico, que reacciona con los componentes orgnicos
produciendo manchas negras. Sin embargo debe tenerse en cuenta que
el tamao de las manchas no est relacionado con la cantidad de
componente separado.
.
BIBLIOGRAFIA
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/principios_de_cromatografia.pdf
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf
