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MICROSCOPIO CONFOCAL
El microscopio confocal es un microscopio que emplea una técnica óptica de imagen
para incrementar el contraste y/o reconstruir imágenes tridimensionales utilizando un
"pinhole" espacial (colimador de orificio delimitante) para eliminar la luz desenfocada
o destellos de la lente en especímenes que son más gruesos que el plano focal.
CONCEPTO BÁSICO
El concepto de imagen confocal fue patentado por Marvin Minsky en 1957.[2] En un
microscopio de fluorescencia convencional (p.ej., de campo amplio), el espécimen
entero está sobresaturado de luz a partir de la fuente de iluminación. Debido a la
conservación de la intensidad de la luz en su recorrido, todas las partes del
espécimen a lo largo de su ruta óptica serán excitadas y la fluorescencia detectada
por un fotodetector o una cámara.
Tipos
Existen tres tipos de microscopios confocales disponibles comercialmente: El
Microscopio confocal láser de barrido, el microscopio confocal de disco giratorio
(disco de Nipkow) y microscopios de matriz programable,(Programmable Array
Microscope, PAM). La microscopía confocal de barrido por láser produce un mayor
rendimiento en la calidad de la imagen que los de disco o PAM, pero la tasa de
frames era muy lenta (menos de tres frames/segundo) hasta hace poco. Los
microscopios de disco pueden lograr velocidades compatibles con la creación de
videos.
MICROSCOPIO DE FUERZA ATÓMICA
El Microscopio de fuerza atómica (AFM, de sus siglas en inglés Atomic Force
Microscope) es un instrumento mecano-óptico capaz de detectar fuerzas del orden
de los nanonewtons. Al rastrear una muestra, es capaz de registrar continuamente su
topografía mediante una sonda o punta afilada de forma piramidal o cónica.
Historia
Gerd Binnig y Heinrich Rohrer fueron galardonados con el Premio Nobel de Física en
1986 por su trabajo en microscopía de barrido de túnel. Binnig y Rohrer fueron
reconocidos por el desarrollo de la técnica de microscopía poderosa, que puede
formar una imagen de cada uno de los átomos sobre una superficie de metal o de
semiconductores mediante el escaneo de la punta de una aguja sobre la superficie a
una altitud de sólo unos pocos diámetros atómicos.
El microscopio de efecto túnel (STM) es un instrumento que permite visualizar
regiones de alta o baja densidad electrónica superficial, y de ahí inferir la posición de
átomos individuales o moléculas en la superficie de una red. La "observación"
atómica se ha vuelto una tarea común en muchos laboratorios debido al bajo costo
de este tipo de microscopía en comparación con la microscopía electrónica.
MICROSCOPÍA VIRTUAL
El estudio a distancia de las imágenes se puede denominar telehistología,
telecitología o telepatología dinámica virtual dependiendo del tipo de información
biológica. Mediante un microscopio virtual, una persona localizada en cualquier lugar
del mundo controlará el área de estudio del preparado microscópico.
Descripción
Un microscopio virtual puede ser estático o dinámico y estático es cuando una
imagen se encuentra previamente digitalizada a un aumento determinado (20x, 50x,
100x). Un microscopio virtual dinámico (también denominado interactivo) permite
hacer zoom a la imagen en tiempo real, y en algunos casos, permitir el control del
campo visualizado mediante la manipulación remota de las muestras un microscopio
robotizado.
Microscopios virtuales en educación
Con la llegada de las imágenes digitales y redes informáticas como Internet, es fácil
compartir fotografías macro y microscópicas. El continuo progreso de las tecnologías
permitió la aparición de una forma específica de telepatología dinámica ("láminas
virtuales) y junto con herramientas de navegación, logran hacer de cualquier
computadora personal un microscopio digital. El uso de estas herramientas en la
educación continua, conlleva un desarrollo óptimo del conocimiento en futuros
médicos u otros trabajadores del área de la salud.
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO
Un microscopio electrónico es aquél que utiliza electrones en lugar de fotones o luz
visible para formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos
permiten alcanzar ampliaciones hasta 5100 veces más potentes que los mejores
microscopios ópticos, debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho
menor que la de los fotones "visibles".
El primer microscopio electrónico fue diseñado por Ernst Ruska y Max Knoll entre
1925 y 1930, quienes se basaron en los estudios de Louis-Victor de Broglie acerca
de las propiedades ondulatorias de los electrones.
Un microscopio electrónico, como el de la imagen, funciona con un haz de electrones
generados por un cañón electrónico, acelerados por un alto voltaje y focalizados por
medio de lentes magnéticas (todo ello al alto vacío ya que los electrones son
absorbidos por el aire).
Limitaciones del microscopio electrónico
El limitado diámetro de la apertura no permite que la información detallada
alcance la imagen, limitando de este modo la resolución.
El contraste de amplitud (que radica en la naturaleza corpuscular de los
electrones) se debe al contraste de difracción, provocado por la pérdida de
electrones del rayo. Es un contraste dominante en especímenes gruesos.
El contraste de fase (que radica en la naturaleza ondulatoria de los electrones)
se debe al contraste de interferencia provocado por los desplazamientos en
las fases relativas de las porciones del rayo. Es un contraste dominante en
especímenes finos.
Existen también distintas aberraciones producidas por las lentes: astigmática,
esférica y cromática
El problema de la función de transferencia de contraste (CTF): la CTF
describe la respuesta de un sistema óptico a una imagen descompuesta en
ondas cuadráticas.
El material biológico presenta dos problemas fundamentales: el entorno de vacío y la
transferencia de energía. Para resolverlos, se utilizan distintas técnicas dependiendo
del tamaño de la muestra:
MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO
Diagrama que ilustra la trayectoria de la luz a través de un microscopio de campo
oscuro.
El microscopio de campo oscuro (en inglés: Dark field microscope or dark ground
microscope) es un microscopio que utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en
forma de un cono hueco concentrado sobre el espécimen. El objeto iluminado
dispersa la luz y se hace así visible contra el fondo oscuro que tiene detrás, como las
partículas de polvo iluminadas por un rayo de sol que se cuela en una habitación
cerrada.
El objetivo recibe la luz dispersa o refractada por las estructuras del espécimen. Para
lograrlo, el microscopio de campo oscuro está equipado con un condensador
especial que ilumina la muestra con luz fuerte indirecta. En consecuencia el campo
visual se observa detrás de la muestra como un fondo oscuro sobre el cual aparecen
pequeñas partículas brillantes de la muestra que reflejan parte de la luz hacia el
objetivo. Los condensadores que se emplean en microscopía de campo oscuro son
de dos tipos: del tipo paraboloide (tiene una superficie espejada), y los del tipo
cardioide, con dos superficies espejadas. El empleo de uno u otro es indistinto,
mediante cualquiera de ambos, la luz no incide directamente en el objetivo (este es el
objetivo de estos condensadores), sino que incide con una apertura numérica mayor
al del objetivo.
MICROSCOPIO DE LUZ POLARIZADA
El microscopio petrográfico, microscopio polarizador o de luz polarizada es un
microscopio óptico al que se le han añadido dos polarizadores (uno entre el
condensador y la muestra y el otro entre la muestra y el observador). El material que
se usa para los polarizadores son prismas de Nicol o prismas de Glan-Thompson
(ambos de calcita), que dejan pasar únicamente la luz que vibra en un único plano
(luz polarizada). Microscopio petrográfico usado para el estudio de secciones
delgadas de roca en petrografía.
Microfotografía de un gabro con nícoles cruzados.
Algunos compuestos inorgánicos responden al efecto de la luz, éstos tienen un alto
grado de orientación molecular (sustancias anisótropas), que hace que la luz que los
atraviesa pueda hacerlo en determinados planos vibratorios atómicos.
El prisma de Nicol permite el paso de luz en un solo plano, así la calcita gira la
posición de polarización, facilitando la identificación de sustancias que extinguen la
luz. Al fenómeno de extinción de luz causado por estos planos atómicos y
orientaciones moleculares se llama birrefringencia.
Este tipo de microscopio se usa para poder identificar sustancias cristalinas
(minerales) o fibrosas (como el citoesqueleto), sustancia amiloide, asbesto, colágeno,
cristales de uratos, queratina, sílice, polen, etc.
Algunos tejidos vivos pueden ser observados bajo microscopía óptica de luz
polarizada debido a la birrefrigencia provocada por la orientación de sus fibroinas,[1]
tales como la actina o miosina. Algunos animales tales como los Anisakis pueden
observarse mediante esta técnica.
MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA
El microscopio de fluorescencia Olympus BX61, acoplado con una cámara digital.
El microscopio de fluorescencia... es una variación del microscopio de luz ultravioleta
en el que los objetos son iluminados por rayos de una determinada longitud de onda.
La imagen observada es el resultado de la radiación electromagnética emitida por las
moléculas que han absorbido la excitación primaria y reemitido una luz con mayor
longitud de onda. Para dejar pasar sólo la emisión secundaria deseada, se deben
colocar filtros apropiados debajo del condensador y encima del objetivo.
Fluorescencia y microscopio
Estructura de un microscopio de fluorescencia
El fenómeno de la fluorescencia se produce cuando un electrón de un átomo absorbe
toda la energía de una determinada longitud de onda de la luz, saltando a otros
orbitales. Es una situación inestable durante la cual se emite la mayor parte de la
energía que se ha absorbido (con mayor longitud de onda) y vuelve a desplazarse a
su orbital.
MICROSCOPIO COMPUESTO
Objetivos de un microscopio moderno.
Un microscopio compuesto tiene más de una lente objetiva. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en láminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio óptico común está conformado por tres sistemas:
El sistema mecánico está constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y detener los instrumentos a observar.
El sistema de iluminación comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal manera que producen las ranuras de luz.
El sistema óptico comprende las partes del microscopio que permiten un
aumento de los objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados
"de antigel subsecuente".
Parte mecánica del microscopio
Esquema de un micoscopio óptico.
El pie y soporte: contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y
tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular.
La columna o brazo: Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo
inferior se adapta al pie.
El tubo: tiene forma cilíndrica. El tubo se encuentra en la parte superior de la
columna mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo
se mueva mediante los tornillos.
El tornillo macrométrico o macroscopico: girando este tornillo, asciende o
desciende el tubo del microscopio, deslizándose en sentido vertical gracias a
un mecanismo de cremallera.
El tornillo micrométrico o microscopico: mediante el ajuste fino con
movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se
logra el enfoque exacto y nítido de la preparación.
La platina: es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u
objeto que se va a observar. Presenta un orificio, en el eje óptico del tubo, que
permite el paso de los rayos luminosos a la preparación.
Las pinzas: son dos piezas metálicas que sirven para sujetar la preparación.
Se encuentran en la platina.
El revólver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan
los objetivos.
Sistema óptico
Es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes mediante el conjunto de
lentes que lo componen.
El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se
debe a la cercanía de la pieza con el ojo del observador. Tiene como función
aumentar la imagen formada por el objetivo. .
Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revólver y
producen el aumento de las imágenes de los objetos y organismos.
Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna
entre ellos y la preparación. El número de objetivos varía con el tipo de
microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos
más frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.
El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de
lentes.
Sistema de iluminación
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que
ilumine la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera
adecuada. Comprende los siguientes elementos:
Fuente de iluminación: se trata clásicamente de una lámpara incandescente
de tungsteno sobrevoltada; en versiones más modernas con leds.
El espejo: necesario si la fuente de iluminación no está construida dentro del
microscopio y ya alineada con el sistema óptico, como suele ocurrir en los
microscopios modernos.
Condensador: está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es
concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación, formando un
cono de luz con el mismo ángulo que el del campo del objetivo.
Diafragma: el condensador está provisto de un diafragma-iris, que regula su
abertura para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera
irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace cerrándolo más de lo que
conviene si se quiere aprovechar la resolución del sistema óptico.
MICROSCOPIO SIMPLE
Microscopio simple de Leeuwenhoek. La muestra se colocaba en la punta del tornillo,
en frente de la única lente, de la que destaca la pequeñez de su diámetro.
Un microscopio simple es aquel que utiliza una sola lente para ampliar las imágenes
de los objetos observados. Es el microscopio más básico. El ejemplo más clásico es
la lupa. El microscopio óptico estándar utiliza dos sistemas de lentes alineados.
Hace más de quinientos años, se desarrollaron las lupas de cristal simples. Estas
eran lentes convexas (más gruesas en el centro que en la periferia). La muestra u
objeto podrían entonces ser enfocados por el uso de la lupa colocada entre el objeto
y el ojo.
Diagrama óptico de un microscopio simple. Se observa que la
imagen virtual creada por la lente, es mayor que el objeto de estudio
El aumento obtenido con estos microscopios es reducido, debido a
que la longitud de onda de la luz visible le impone limitaciones.
Se le atribuye a el holandés Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723)
haber introducido el microscopio a la atención de los biólogos, a pesar de que ya se
estaban produciendo lupas simples en el siglo XVI. Leeuwenhoek construyó
microscopios muy eficaces basados en una sola lente.
MICROSCOPIO ÓPTICO
Un microscopio óptico es un microscopio basado en lentes ópticos. También se le
conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de
campo claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton
van Leeuwenhoek.
1 * Ocular: lente situado cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen
formada en los objetivos.
2 * Objetivo: lente situado en el revólver. Amplía la imagen, es un elemento vital que
permite ver a través de los oculares.
3 * Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
4 * Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador.
5 * Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
6 * Tubo: es la cámara oscura que porta el ocular y los objetivos. Puede estar unida
al brazo mediante una cremallera para permitir el enfoque.
7 * Revólver: Es el sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos, y que rota
para poder utilizar uno u otro, alineándolos con el ocular.
8 * Tornillos macro y micrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina o el
tubo hacia arriba y hacia abajo.
9 *Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca
la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de
iluminación situada por debajo.
10 *Brazo: Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y los tornillos de enfoque
asociados al tubo o a la platina. La unión con la base puede ser articulada o fija.
11 * Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que permite que éste se
mantenga de pie.
Sistema de iluminación
La fuente de luz, con la ayuda de una lente (o sistema), llamada colector, se
representa en el plano del diafragma iris de abertura del condensador. Este
diafragma se instala en el plano focal anterior del condensador y puede variar su
abertura numérica.
MICROSCOPIO DE LUZ ULTRAVIOLETA
Microscopio de luz fluorescencia - Las lentes del objetivo, que habitualmente se
componen de vidrio se sustituyen por lentes de cuarzo, y la iluminación se produce
por lámparas de mercurio. No usa filtros y se observa en placas fotográficas. La
variedad de fluorescencia, si usa filtros, y la observación es directa.
Microscopio de luz ultravioleta – depende de la absorción de esa luz por las
moléculas de la muestra. La fuente de luz ultravioleta tiene una longitud de onda de
200 nm, por lo tanto puede alcanzar una resolución de 100 nm. La microscopia
ultravioleta no es muy diferente del funcionamiento de un espectrofotómetro pero sus
resultados son registrados en fotografías. La muestra no se puede observar
directamente a través del ocular porque la luz ultravioleta puede dañar la retina. El
método sirve para detectar ácidos nucleicos, proteínas que contienen determinados
aminoácidos. Mediante longitudes de ondas específicas para la iluminación se puede
obtener mediciones espectrofotométricas para cuantificar el ADN y el ARN de cada
célula.
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN
Comparación de la formación de la imagen en un microscopio de transmisión óptica,
un microscopio electrónico de transmisión (TEM), un microscopio electrónico de
barrido (SEM) y un tubo de rayos catódicos (CRT) de pantalla de TV.
Un microscopio electrónico de transmisión (TEM, por sus siglas en inglés, o MET, en
español) es un microscopio que utiliza un haz de electrones para visualizar un objeto,
debido a que la potencia amplificadora de un microscopio óptico está limitada por la
longitud de onda de la luz visible. Lo característico de este microscopio es el uso de
una muestra ultrafina y que la imagen se obtenga de los electrones que atraviesan la
muestra.
Historia
El primer microscopio electrónico de transmisión fue desarrollado entre 1931 y 1933
por Ernst Ruska y sus colaboradores. La óptica básica de ese primer microscopio
electrónico se mantiene hasta nuestros días; los cambios en los microscopios
modernos consisten en adicionar más lentes para incrementar el ámbito de
aumentos y darle mayor versatilidad. El primer microscopio electrónico de
transmisión comercial lo construyó Siemens en 1939.
Estructura
Debido a que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la de la
luz visible, pueden mostrar estructuras mucho más pequeñas.
Las partes principales de un microscopio electrónico de transmisión son:
Cañón de electrones, que emite los electrones que chocan o atraviesan el
espécimen (dependiendo que tipo de microscopio electrónico es), creando una
imagen aumentada.
Lentes magnéticas para crear campos que dirigen y enfocan el haz de
electrones, ya que las lentes convencionales utilizadas en los microscopios
ópticos no funcionan con los electrones.
Sistema de vacío es una parte muy importante del microscopio electrónico.
Debido a que los electrones pueden ser desviados por las moléculas del aire,
se debe hacer un vacío casi total en el interior de un microscopio de estas
características.
Placa fotográfica o pantalla fluorescente que se coloca detrás del objeto a
visualizar para registrar la imagen aumentada.
Sistema de registro que muestra la imagen que producen los electrones, que
suele ser un ordenador.
El microscopio electrónico de transmisión emite un haz de electrones dirigido hacia el
objeto que se desea aumentar. Una parte de los electrones rebotan o son absorbidos
por el objeto y otros lo atraviesan formando una imagen aumentada de la muestra.
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO
El microscopio electrónico de barrido
(SEM) es un instrumento capaz de ofrecer un variado rango de informaciones
procedentes de la superficie de la muestra. Su funcionamiento se basa en barrer un
haz de electrones sobre un área del tamaño que deseemos (aumentos) mientras en
un monitor se visualiza la información que hayamos seleccionado en función de los
detectores que hayan disponibles.
Los primeros instrumentos desarrollados para este propósito fueron los microscopios
ópticos. Estos instrumentos consistieron, a lo largo de los años, entre una simple
lupa hasta un microscopio compuesto. Sin embargo, aún en el mejor instrumento
óptico, la resolución está limitada a la longitud de onda de la luz que se utilice, que
en este caso es la luz violeta, cuya longitud de onda es de aproximadamente 400
nanómetros, separación máxima entre detalles que puede observarse de esta
manera. En términos de amplificación, esto quiere decir que no podemos amplificar
más de 1000 veces.
Una salida inmediata a éste límite de resolución, fue utilizar alguna radiación de
longitud de onda más corta que la de la luz violeta. Los candidatos inmediatos son
los rayos X, que se caracterizan por una longitud de onda del orden de 0,15
nanómetros; desafortunadamente éstos tienen la gran desventaja de ser absorbidos
rápidamente por las lentes de vidrio, y de no poder ser desviados por las lentes
magnéticas (además de las precauciones que debería tener el operador).
MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES
El microscopio de contraste de fases permite observar células sin colorear y resulta
especialmente útil para células vivas. Este aprovecha las pequeñas diferencias de
los índices de refracción en las distintas partes de una célula y en distintas partes de
una muestra de tejido. La luz que pasa por regiones de mayor índice de refracción
experimenta una deflexión y queda fuera de fase con respecto al haz principal de
ondas de luz que pasaron la muestra. Aparea otras longitudes de onda fuera de fase
por medio de una serie de anillos ópticos del objetivo y del condensador, anula la
amplitud de la porción fuera de fase inicial del haz de luz y produce un contraste útil
sobre la imagen. Las partes oscuras de la imagen corresponden a las porciones
densas del espécimen; las partes claras de la imagen corresponden a porciones
menos densas. Por lo tanto estos microscopios se utilizan para observar células
vivas, tejidos vivos y cortes semifinos no coloreados.
Dos modificaciones del microscopio de fase son el microscopio de interferencia y el
microscopio de interferencia diferencial.
Su inventor fue en 1932 el físico neerlandés Frits Zernike, lo que junto al método de
contraste de fases le valió para ganar el Premio Nobel de Física en 1953.[]
MICROSCOPIO DE IONES EN CAMPO
Imágenes obtenidas al microscopio deiones con un cátodo de tungsteno. El sistema
muestra la localización de manchasen el borde de átomos individuales. La
disposición anular los puntos es una foto de una red cúbica en una superficie esférica
Diagrama de microscopía deiones
La microscopía de iones en campo (FIM) es una técnica analítica empleada en
ciencia de materiales. El microscopio de iones en campo es una variedad de
microscopio que puede ser usado para visualizar la ordenación de los átomos que
forman la superficie de la punta afilada de una aguja de metal. Fue la primera técnica
con la que se consiguió resolver espacialmente átomos individuales. La técnica fue
desarrollada por Erwin Müller. En 1951 se publicaron por primera vez imágenes de
estructuras atómicas de tungsteno en la revista Zeitschrift für Physik.
MICROSCOPIO DE SONDA DE BARRIDO
Un microscopio de sonda de barrido (también llamado SPM por sus siglas en inglés
Scanning Probe Microscopy) es aquel que tiene el transmisor en la parte exequimal
del lente (Objetivo 4x). Este microscopio electrónico utiliza una sonda que recorre la
superficie del objeto a estudiar. La rama de microscopios SPM se fundó con la
invención del microscopio de efecto túnel en 1981.
Su uso en investigaciones científicas es el de regular la imagen mediante un barrido
de electrones haciendo que la imagen aumente (10.000.000 nm).
MICROSCOPIO DE EFECTO TÚNEL
Imagen de reconstrucción sobre una superficie limpia de oro (100).
Una imagen STM de un nanotubo de carbono de pared simple.
Un microscopio de efecto túnel (en inglés: Scanning tunneling microscope o STM) es
un instrumento para tomar imágenes de superficies a nivel atómico. Su desarrollo en
1981 hizo ganar a sus inventores, Gerd Binnig y Heinrich Rohrer (de IBM Zürich), el
Premio Nobel de Física en 1986. Para un STM, se considera que una buena
resolución es 0.1 nm de resolución lateral y 0.01 nm de resolución de profundidad.
Con esta resolución, los átomos individuales dentro de los materiales son
rutinariamente visualizados y manipulados. El STM puede ser usado no solo en ultra
alto vacío, sino que también en aire, agua, y varios otros líquidos o gases del
ambiente, y a temperaturas que abarcan un rango desde casi cero Kelvin hasta unos
pocos cientos de grados Celsius.
El STM está basado en el concepto de efecto túnel. Cuando una punta conductora es
colocada muy cerca de la superficie a ser examinada, una corriente de polarización
(diferencia de voltaje) aplicada entre las dos puede permitir a los electrones pasar al
otro lado mediante efecto túnel a través del vacío entre ellas. La resultante corriente
de tunelización es una función de la posición de la punta, el voltaje aplicado y la
densidad local de estados (LDOS por sus siglas en inglés) de la muestra. La
información es adquirida monitoreando la corriente conforme la posición de la punta
escanea a través de la superficie, y es usualmente desplegada en forma de imagen.
La microscopía de efecto túnel puede ser una técnica desafiante, ya que requiere
superficies extremadamente limpias y estables, puntas afiladas, excelente control de
vibraciones, y electrónica sofisticada.
